= 500 ml x 0,03 x 40. (dilebihkan 10 %) = (10 % x 600 mg) = 660 mg NaOH ditambah etanol 70 % sampai 500 ml

Transkripsi

1 Lampiran 1. Perhitungan Pembuatan Pereaksi ml NaOH 0,03 M dalam etanol 70 % NaOH 0,03 M V x N X BE 500 ml x 0,03 x mg (dilebihkan 10 %) (10 % x 600 mg) 660 mg NaOH ditambah etanol 70 % sampai 500 ml ml NaOH 0,2 M NaOH 0,2 M V x N X BE 500 ml x 0,2 x mg (dilebihkan 10 %) (10 % x 4000 mg) 4400 mg NaOH ditambah aquadest sampai 500 ml ml Asam Klorida 2 N Diencerkan dari Asam Klorida 37% ~ 12 N V1.NI V2.N2 V1.12 N 50.2 N V1 8,33 ml ml Natrium Fosfat 28 mm M 0,028 gram Mr x 1000 V(ml) gram 1000 x Jumlah natrium fosfat unuk 28 mm adalah sebanyak 2,296 gram 42

2 ml Ammonium Molibdat 4 mm M 0,004 gram Mr x 1000 V(ml) gram 1000 x 1235, Jumlah ammonium molibdat unuk 4 mm adalah sebanyak 2,472 gram ml Asam Sulfat 0,6 M N M x valensi N 0,6 M X 2 N 1,2 N Diencerkan dari Asam Sulfat 98% ~ 36,8 N V1.NI V2.N2 V1.36,8 N 500.1,2 N V1 16,3 ml 43

3 Lampiran 2. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total % Kadar Abu Total Berat Abu Berat Sampel x 100 % Berat Sampel ( g) Berat Abu (g) 2,0016 0,0859 2,0012 0,0883 2,0015 0, % Kadar 0,0859 2,0016 X 100% 4,29% 2. % Kadar 0,0883 2,0012 X 100% 4,41% 3. % Kadar 0,0906 X 100% 4,53% 2,0015 % Kadar Abu Total Rata- rata 4,29% + 4,41% + 4,53% 3 4,41% 44

4 Lampiran 3. Perhitungan Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam % Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam Berat Abu Berat Sampel x 100 % Berat Sampel ( g) Berat Abu (g) 2,0016 0,0181 2,0012 0,0146 2,0015 0, % Kadar 0,0181 2,0016 X 100% 0,91% 2. % Kadar 0,0146 2,0012 X 100% 0,73% 3. % Kadar 0,0175 2,0015 X 100% 0,87% 4,29% + 4,41% + 4,53% % Kadar Abu yang Tidak Larut Asam Rata-rata 3 0,84% 45

5 Lampiran 4. Perhitungan Susut Pengeringan % Susut Pengeringan Berat Kering Berat Sampel x 100 % Berat Sampel ( g) Berat Kering (g) 2,0013 0,1669 2,0018 0,1552 2,0015 0, % Susut Pengeringan 2. % Susut Pengeringan 0,1669 2,0013 0,1552 2,0018 X 100% 8,34% X 100% 7,75% 3. % Susut Pengeringan 0,1663 2,0015 X 100% 8,31% % Susut pengeringan Rata- rata 8,34% + 7,75% + 8,31% 3 8,13% 46

6 Lampiran 5. Perhitungan Persen (%) Rendemen Hemiselulosa Sekam Padi (HSP) Berat sampel 50 gram Berat rendemen 1,5210 gram % Rendemen Berat Rendemen X 100% Berat Sampel 1,5210 X 100% 50 3,042% 47

7 Lampiran 6. Hasil Pengujian Karakeristik dengan Spektofotometri Inframerah 48

8 Lampiran 7. Hasil Pengujian Karakeristik dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) 49

9 Lampiran 8. Data Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Keterangan : Pengukuran kompleks fosfomolibdenum yang berasal dari larutan Vitamin C konsentrasi 120 µg/ml yang dipipet 0,5 ml dan dicampur dengan 5 ml larutan pereaksi kemudian diinkubasi selama 90 menit pada suhu 95 C C diukur pada rentang panjang gelombang nm didapatkan pengukuran Mo (V) dengan larutan peraksi dilakukan pada panjang gelombang 710 nm. 50

10 Lampiran 9. Data Hasil Penentuan Waktu Kerja Menit Abs 16 0, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,447 Keterangan : Kestabilan warna kompleks fosdomolibdenum diperoleh pada menit ke-26 sampai menit ke-36, sehingga stabil selama 11 menit. 51

11 Lampiran 10. Perhitungan kurva kalibrasi Vitamin C LIB I 50 mg 50 ml µg 50 ml 1000 µg/ml. Untuk kurva kalibrasi Dari LIB I dipipet 0,8 ml >V1.NI V2.N2 0, N2 N2 80 µg/ml Dari 80 µg/ ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi V1.NI V2.N2 0,5.80 5,5.N2 N2 7,2727 µg/ml 1,0 ml >V1.NI V2.N N2 N2 100 µg/ml Dari 100 µg/ ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi V1.NI V2.N2 0, ,5.N2 N2 9,0909 µg/ml 1,2 ml >V1.NI V2.N2 1, N2 N2 100 µg/ml Dari 120 µg/ ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi 52

12 V1.NI V2.N2 0, ,5.N2 N2 10,909 µg/ml 1,4 ml >V1.NI V2.N2 1, N2 N2 140 µg/ml Dari 140 µg/ ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi V1.NI V2.N2 0, ,5.N2 N2 12,7272 µg/ml 1,6 ml >V1.NI V2.N2 1, N2 N2 160 µg/ml Dari 160 µg/ ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi V1.NI V2.N2 0, ,5.N2 N2 14,5454 µg/ml 53

13 Lampiran 11. Data kurva kalibrasi Vitamin C pada panjang gelombang 710 nm 54

14 Lampiran 12. Perhitungan Persamaan Regresi No Konsentrasi Absorbansi. (X) (Y) XY X 2 Y , ,2727 0,312 2, , , ,0909 0,384 3, , , ,909 0,469 5, , , ,7272 0,523 6, , , ,5454 0,609 8, , , X54,5452 Y2,297 XY26,39 X 2 628,093 X9,0909 Y0, Y 2 1,1092 a XY ( X. 2 2 X ( x) Y ) / n / n 26,3908 (54,5452.2,297) / 6 628,0932 (54,5452)2 / 6 0,0423 b Y- ax 0, (0,0423.9,0909) r XY ( X. Y ) / n ( X ( X ) / n)( Y ( Y ) 2 / n) r 26,3908 (54,5452.2,297) / 6 2 (628,0932 (54,5452) / 6)(1,1092 (2,297) 2 / 6) 0,9994 Persamaan garis regresi: Y 0,0423x - 0,

15 Lampiran 13. Hasil dan Data Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Hemiselulosa Sekam Padi (HSP) NO. Berat sampel (gram) Absorbansi Konsentrasi (µg/ml) Kapasitas antioksidan ( mg vit C/g sampel ) 1 0,0750 0,558 13,23 9,70 2 0,0751 0,561 13,37 9,74 3 0,0752 0,559 13,26 9,70 4 0,0751 0,559 13,26 9,71 5 0,0752 0,564 13,37 9,78 6 0,0749 0,552 13,09 9,61 56

16 Lampiran 14. Contoh Perhitungan Kapasitas Antioksidan dalam Sampel Berat sampel yang ditimbang 0,0750 gram Absobansi (Y) 0,558 Persamaan regresi : y 0,0423x - 0,0017 y 0,0423x - 0,0017 Konsentrasi (x) (absorbansi b) a ( y + 0,0017) 0,0423 ( 0, ,0017) 0, ,23 µg/ml Kapasitas Antioksidan (mg vit c/g sampel) x x sampel (µg/ml) Fp X Fp Kapasitas Antioksidan (mg vit c/g sampel) kesetaraan jumlah kapasitas antioksidan sampel dalam berat vitamin c Kadar Antioksidan x x sampel (µg/ml) Fp X Fp 13,39 µg/ml X 5,5 ml 0,5 ml X 5 ml 0,075 gram X 1mg 1000 µg 9,70 mg/gram Kapasitas antioksidan pada sampel yang lain dapat dihitung dengan cara yang sama seperti contoh di atas. 57

17 Lampiran 15. Data perhitungan Analisis Data Statistik 1. Uji Q 2. Uji t Q Nilai yang dicurigai - Nilai yang terdekat Nilai tertinggi - Nilai terendah 9,61-9,70 Q 9,78-9,61 Q 0,5294 Q kritis pada taraf kepercayaan 95% untuk 6 data adalah 0,621 maka Q<Q kritis, sehingga data diterima. X Xi X Ʃ( Xi - X) 2 9,70 0,01 0,0001 9,74 0,03 0,0009 9,70 0,01 0,0001 9, ,78 0,007 0,0049 9,61 0,1 0,0100 X 9,71 Ʃ( Xi - X) 2 0,0160 SD ( Xi X ) n 1 2 0,0160 0, Pada tingkat kepercayaan 95% dengan nilai α 0,05 dan dk 5, diperoleh t tabel 2,0150. Data diterima jika t hitung < t tabel t hitumg Xi X SD n t hitung data 1 0,0721 t hitung data 2 0,

18 t hitung data 3 0,0721 t hitung data 4 0 t hitung data 5 0,0505 t hitung data 3 0,7215 Semua data diterima,maka Kadar sebenarnya: μ X ± (t (α/2, dk) x α SD n ) 9,71 ± 2,5706.0,1386 9,71 ± 2,7092 * *Artinya dalam 1 gram sampel mempunyai kapasitas antioksidan yang setara dengan (9,71 ± 2,7902) mg vitamin C 59

19 Lampiran 16. Perhitungan Hasil Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi X Y Yi y yi (y - yi) ,2727 0,314 0,306 0,008 0, ,0909 0,384 0,383 0,001 0, ,909 0,469 0,460 0,009 0, ,7272 0,523 0,537 0,014 0, ,5454 0,609 0,614 0,005 0, Ʃ(y - yi) 0, Simpangan Baku (Y Yi) n 1 0, ,0086 3xSB LOD slope LOQ 3x 0,0086 0,0423 0,6099 µg/ml 10xSB slope 10 x0,0086 0,0423 2,033 µg/ml 60

20 Lampiran 17. Perhitungan Hasil Nilai Standar Deviasi (SD) dan Relative Standar Deviasi (RSD) X Xi X Ʃ( Xi - X) 2 9,70 0,01 0,0001 9,74 0,03 0,0009 9,70 0,01 0,0001 9, ,78 0,007 0,0049 9,61 0,1 0,0100 X 9,71 Ʃ( Xi - X) 2 0,0160 SD SD ( Xi - X) n -1 0, SD 0,0566 SD RSD x100% X 0,0566 RSD x100% 9,71 RSD 0,58% 61

21 Lampiran 18. Data dan Contoh Perhitungan Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (% Recovery) No. Abs CF CF CA C*A % recovery Abs CA (µg/ml) (µg/ml) (µg/ml) (%) 1 0,591 14,01 0,558 13,23 0,909 85,81 2 0,595 14,12 0,561 13,30 0,909 90,21 3 0,595 14,12 0,559 13,26 0,909 94,61 4 0,594 14,08 0,559 13,26 0,909 90,21 5 0,596 14,13 0,564 13,37 0,909 83,61 6 0,586 13,89 0,552 13,09 0,909 88,01 rata-rata 88,74 % Contoh Perhitungan Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan larutan baku (C F ) Absobansi (Y) 0,591 Persamaan regresi : y 0,0423x - 0,0017 y 0,0423x - 0,0017 (absorbans i b) Konsentrasi C F a ( y + 0,0017) 0,0423 ( 0,591+ 0,0017) 0, ,01 µg/ml Komsentrasi konsentrasi sampel awal (C A ) Absobansi (Y) 0,558 Persamaan regresi : y 0,0423x - 0,0017 y 0,0423x - 0,

22 Konsentrasi C A (absorbans i b) a ( y + 0,0017) 0,0423 ( 0, ,0017) 0, ,23 µg/ml Konsentrasi larutan baku yang ditambahkan (C* A ) LIB I 50 mg 50 ml µg 50 ml 1000 µg/ml. Dari LIB I dipipet 1,0 ml >V1.NI V2.N2 1, N2 N2 100 µg/ml Dari 100 µg/ml dipipet 0,5 ml dan dimasukkan ke labu tentukur 5 ml yang telah diisi sampel V1.NI V2.N2 0, N2 N2 10 µg/ml Dari labu tentukur 5 ml yang berisi larutan baku 10 µg/ml dipipet 0,5 ml dan ditambah 5 ml larutan pereaksi V1.NI V2.N2 0,5.10 5,5.N2 N2 0,909 µg/ml* 63

23 Keterangan : * maka konsentrasi larutan baku yang ditambahkan adalah sebesar 0,909 µg/m % Recovery CF CA C * A x 100% % Recovery 14,01-13,23 0,909 85,81% x 100% Perhitungan peroleham kembali (%) kapasitas antioksidan pada sampel lain dapat dihitung dengan cara yang sama seperti contoh diatas. 64

24 Lampiran 19. Tabel Distribusi t 65