Lampiran 1. Daftar Spesifikasi Sediaan tablet Celestamin, Ocuson, dan Polacel : DKL A1. Expire Date : September 2015

Transkripsi

1 Lampiran 1. Daftar Spesifikasi Sediaan tablet Celestamin, Ocuson, dan Polacel 1. Celestamin (Schering-plough) No. Reg : DKL A1 Expire Date : September 2015 Komposisi : Betametason... 0,25 mg Dexchlorpheniramin maleate... 2 mg 2. Ocuson (Sanbe) No. Reg : DKL A1 Expire Date : September 2016 Komposisi : Betametason... 0,25 mg Dexchlorpheniramin maleate... 2 mg 2. Polacel (Medikon) No. Reg : DKL A1 Expire Date : Desember 2016 Komposisi : Betametason... 0,25 mg Dexchlorpheniramin maleate... 2 mg 53

2 Lampiran 2. Gambar Sediaan Tablet Gambar 1. Tablet Celestamin Gambar 2. Tablet Ocuson Gambar 3. Tablet Polacel. 54

3 Lampiran 3. Gambar Alat Gambar 4. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800) dan Seperangkat PC dengan Software UV Probe Gambar 5. Neraca analitik (Mettler Toledo) Gambar 6. Sonikator (Branson 1510). 55

4 Lampiran 4. Bagan Alir Prosedur Penelitian 1. Pembuatan Larutan Induk Baku Betametason Baku Betametason ditimbang sebanyak 50 mg dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol LIB I Betametason 1000 μg/ml LIB II Betametason 500 μg/ml Betametason 11 μg/ml dipipet 12,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol dipipet 1,1 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol diukur serapan maksimum pada λ nm λ Betametason = 239 nm 56

5 Lampiran 4. (Lanjutan) 2. Pembuatan Larutan Induk Baku Deksklorfeniramin maleat Baku Deksklorfeniramin maleat ditimbang sebanyak 50 mg LIB I Deksklorfeniramin maleat dipipet ,5 μg/ml dipipet 12,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol LIB II Deksklorfeniramin maleat 500 μg/ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol dipipet 1,2 ml Deksklorfeniramin maleat 12 μg/ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol λ Deksklorfeniramin maleat = 282 nm diukur serapan maksimum pada λ nm 57

6 Lampiran 4. (Lanjutan) 3. Pembuatan Larutan Standar Betametason dan Deksklorfeniramin maleat LIB II Betametason 500 μg/ml Standar 1 6 μg/ml dipipet 0,6 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 3 12 μg/ml dipipet 1,2 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 5 18 μg/ml dipipet 1,8 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 2 9 μg/ml dipipet 0,9 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 4 15 μg/ml dipipet 1,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol LIB II Deksklorfeniramin maleat 500 μg/ml Standar 1 7 μg/ml dipipet 0,7 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 3 13 μg/ml dipipet 1,3 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 5 19μg/mL dipipet 1,9 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25mL dicukupkan dengan metanol Standar 2 10 μg/ml dipipet 1,0 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol Standar 4 16 μg/ml dipipet 1,6 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dicukupkan dengan metanol 58

7 Lampiran 4. (Lanjutan) 4. Pembuatan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi Betametason dan Deksklorfeniramin maleat Larutan Standar Betametason (6; 9; 12; 15; 18 μg/ml) λ Betametason = 219,4 nm Persamaan Regresi diukur serapan maksimum pada λ nm ditransformasikan ke serapan derivat kedua ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis dibuat kurva kalibrasi Larutan Standar Deksklorfeniramin maleat (7; 10; 13; 16; 19 μg/ml) diukur serapan maksimum pada λ nm ditransformasikan ke serapan derivat kedua ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis λ Deksklorfeniramin maleat = 249,6 nm Persamaan Regresi dibuat kurva kalibrasi 59

8 Lampiran 4. (Lanjutan) 5. Penentuan Kadar Sediaan Tablet 20 tablet ditimbang digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen Serbuk Analit ditimbang setara 4,5 mg deksklorfeniramin maleat dihitung kesetaraan betametason yang terkandung didalamnya (penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan) dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml ditambahkan dengan methanol sampai garis tanda sambil dikocok dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit disaring dibuang ± 10 ml filtrat pertama dan filtrat selanjutnya ditampung dipipet 1,35 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda diukur pada λ 249,6 nm dan 219,4 nm Nilai Absorbansi dihitung Kadar 60

9 Lampiran 5. Kurva Serapan Betametason pada Berbagai Konsentrasi Gambar 7. Kurva serapan betametason 6 μg/ml Gambar 8. Kurva serapan betametason 9 μg/ml Gambar 9. Kurva serapan betametason 12 μg/ml 61

10 Lampiran 6. (Lanjutan) Gambar 10. Kurva serapan betametason 15 μg/ml Gambar 11. Kurva serapan betametason 18 μg/ml 62

11 Lampiran 6. Kurva Serapan Deksklorfeniramin maleat pada Berbagai Konsentrasi Gambar 12. Kurva serapan deksklorfeniramin maleat 7 μg/ml Gambar 13. Kurva serapan deksklorfeniramin maleat 10 μg /ml Gambar 14. Kurva serapan deksklorfeniramin maleat 13 μg/ml 63

12 Lampiran 6.(Lanjutan) Gambar 15. Kurva serapan deksklorfeniramin maleat 16 μg/ml Gambar 16. Kurva serapan deksklorfeniramin maleat 19 μg/ml 64

13 Lampiran 7. Kurva Serapan Derivat Pertama Betametason pada Berbagai Konsentrasi Gambar 17. Kurva serapan derivat pertama betametason 6 μg/ml Gambar 18. Kurva serapan derivat pertama betametason 9 μg/ml Gambar 19. Kurva serapan derivat pertama betametason 12 μg/ml 65

14 Lampiran 7. (Lanjutan) Gambar 20. Kurva serapan derivat pertama betametason 15 μg/ml Gambar 21. Kurva serapan derivat pertama betametason 18 μg/ml 66

15 Lampiran 8. Kurva Serapan Derivat Pertama Deksklorfeniramin maleat pada Berbagai Konsentrasi Gambar 22. Kurva serapan derivat pertama deksklorfeniramin maleat 7 μg/ml Gambar 23. Kurva serapan derivat pertama deksklorfeniramin maleat 10 μg/ml Gambar 24. Kurva serapan derivat pertama deksklorfeniramin maleat 13 μg/ml 67

16 Lampiran 8. (Lanjutan) Gambar 25. Kurva serapan derivat pertama deksklorfeniramin maleat 16 μg/ml Gambar 26. Kurva serapan derivat pertama deksklorfeniramin maleat 19 μg/ml 68

17 Lampiran 9. Kurva Serapan Derivat Kedua betametason pada Berbagai Konsentrasi Gambar 27. Kurva serapan derivat kedua betametason 6 μg/ml Gambar 28. Kurva serapan derivat kedua betametason 9 μg/ml Gambar 29. Kurva serapan derivat kedua betametason 12 μg/ml 69

18 Lampiran 9. (Lanjutan) Gambar 30. Kurva serapan derivat kedua betametason 15 μg/ml Gambar 31. Kurva serapan derivat kedua betametason 18 μg/ml 70

19 Lampiran 10. Kurva Serapan Derivat Kedua deksklorfeniramin maleat pada Berbagai Konsentrasi Gambar 32. Kurva serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat 7 μg/ml Gambar 33. Kurva serapan derivat kedua desklorfeniramin maleat 10 μg/ml Gambar 34. Kurva serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat 13 μg/ml 71

20 Lampiran 10. (Lanjutan) Gambar 35. Kurva serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat 16 μg/ml Gambar 36. Kurva serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat 19 μg/ml 72

21 Lampiran 11. Kurva Serapan Panjang Gelombang Analisis Gambar 37. Kurva serapan derivat kedua betametason 6 μg/ml Gambar 38. Kurva serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat 12,1 μg/ml Gambar 39. Kurva serapan derivat kedua campuran betametason 6 μg/ml dan deksklofeniramin maleat 12,1 μg/ml 73

22 Lampiran 12. Data Kalibrasi Baku Betametason, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi No. Konsentrasi (μg/ml) (X) Absorbansi (Y) , , , , , ,00123 No X Y (10-4 ) XY (10-3 ) X 2 Y 2 (10-7 ) ,4 2, , ,3 5, , ,4 10, , ,4 15, , ,3 22, ,1 Σn=6 ΣX =60 X=10 ΣX= 4, Y= 6, ΣXY=56, ΣX 2 =810 ΣY 2 = ( XY) ( X)( Y)/n (0,05613) (60)(0,00418)/6 a = = = 6, ( X 2 ( 5 X)2 (810) (60)²/6 ) n Y = ax + b b = Y ax = (16, ) (6, )(10) = 1, Maka, persamaan garis regresinya adalah Y = (6,82X + 1,43)

23 Lampiran 12. (Lanjutan) Perhitungan Koefisien Korelasi ( ) = ( XY) ( X)( Y)/n ( X 2 ) ( X) 2 /n ( Y 2 ) ( Y) 2 /n = (0,05613) (60)(0,00418) /6 [(810) (60) 2 /6][(38, ) (0,00418) 2 /6] = 0, , = 0,9996 Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan derivat kedua betametason pada panjang gelombang 219,4 nm adalah 0,

24 Lampiran 13. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Betametason Persamaangaris regresinyaadalah Y = (6,82X + 1,43) No. X Y(10-4 ) Yi (10-5 ) Y-Yi (10-5 ) (Y-Yi) 2 ( ) ,43-1,43 2, ,4 42,35 1,65 2, ,3 62,81 0,19 0, ,4 83,27 0,73 0, ,4 103,73 0,27 0, ,3 124,19-1,19 1,4161 Σ = 6, SB = (Y Yi)2 n 2 = 6, = 1, LOD = 3 SB slope LOQ = 10 SB slope = 3 1, , = 0,5745 μg/ml = 10 1, , =1,9152 μg/ml 76

25 Lampiran 14. Data Kalibrasi Baku Deksklorfeniramin maleat, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi No. Konsentrasi (μg/ml) (X) Absorbansi (Y) , , , , , ,00387 No. X Y(10-3 ) XY (10-2 ) X 2 Y ,46 1, , ,09 2, , ,62 3, , ,26 5, , ,87 7, Σn=6 ΣX= 65 X = 10,833 ΣY= 1, ΣY 2 =0,19087 ΣX 2 = 935 ΣY 2 = Y =2, ( XY) ( X)( Y)/n (0,19087) (65)(0,0133)/6 a = = = 2, ( X 2 ( 4 X)2 (935) (65)²/6 ) n Y = ax + b b = Y ax = (0,002217) (2, )(10,833) = 2, Maka, persamaan garis regresinya adalah Y = (20,3X + 2,09)

26 Lampiran 14. (Lanjutan) Perhitungan Koefisien Korelasi ( ) = ( XY) ( X)( Y)/n ( X 2 ) ( X) 2 /n ( Y 2 ) ( Y) 2 /n = (0,19087) (65)(0,0133) /6 [(935) (65) 2 /6][( ) (0,0133) 2 /6] = 0, ,04687 = 0,9997 Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan derivat kedua deksklorfeniramin maleat pada panjang gelombang 249,6 nm adalah 0,

27 Lampiran 15. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Deksklorfeniramin maleat Persamaan garis regresi nya adalah Y = (20,3X + 2,09) No. X Y(10-3 ) Yi (10-5 ) Y-Yi (10-5 ) (Y-Yi) 2 ( ) ,09-2,09 4, ,46 144,19 1,81 3, ,09 205,09 3,91 15, ,62 265,99-3,99 15, ,26 326,89-0,89 0, ,87 387,791-0,79 0,6241 Σ = 40, SB = (Y Yi)2 n 2 = 40, = 3, LOD = 3 SB slope = 3 3, , = 0,4688 μg/ml LOQ = 10 SB slope = 10 3, , = 1,5629 μg/ml 79

28 Lampiran 16. Kurva Serapan Derivat Kedua Penetapan Sampel Gambar 40. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-1 Gambar 41. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-2 Gambar 42. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-3 80

29 Lampiran 16. (Lanjutan) Gambar 43. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-4 Gambar 44. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-5 Gambar 45. Kurva Serapan Tablet Celestamin ke-6 81

30 Lampiran16.(Lanjutan) Gambar 46. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-1 Gambar 47. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-2 Gambar 48. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-3 82

31 Lampiran16. (Lanjutan) Gambar 49. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-4 Gambar 50. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-5 Gambar 51. Kurva Serapan Tablet Ocuson ke-6 83

32 Lampiran 16. (Lanjutan) Gambar 52. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-1 Gambar 53. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-2 Gambar 54. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-3 84

33 Lampiran 16. (Lanjutan) Gambar 55. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-4 Gambar 56. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-5 Gambar 57. Kurva Serapan Tablet Polacel ke-6 85

34 Lampiran 17. Hasil Analisis Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin maleat dalam Sampel 1. Kadar Betametason dalam Sediaan tablet Nama Sediaan Penimban gan(g) Setara (mg) Absorbans i pada λ = 219,4 nm Konsentra si teoritis (μg/ml) Konsent rasi praktek (μg/ml) Kadar % 0,4452 0,5623 0, ,0166 5, ,71 0,4453 0,5625 0, ,0187 5, ,53 Celestamin (scheringplough) 0,4452 0,5023 0, ,0166 5, ,71 0,4453 0,5626 0, ,0198 5, ,66 0,4456 0,5628 0, ,0219 5, ,05 0,4455 0,5627 0, ,0208 5, ,07 0,4251 0,5624 0, ,0176 5, ,12 Ocuson (Sanbe) 0,4250 0,5622 0, ,0155 5, ,88 0,4253 0,5626 0, ,0198 5, ,09 0,4249 0,5621 0, ,0144 5, ,74 0,4247 0,5618 0, ,0112 5, ,79 0,4248 0,5620 0, ,9973 5, ,01 0,4463 0,5624 0, ,0176 5, ,13 0,4465 0,5625 0, ,0187 5, ,25 Polacel (Medikon) 0,4465 0,5625 0, ,0187 5, ,68 0,4467 0,5629 0, ,0219 5, ,63 0,4468 0,5630 0, ,0241 5, ,17 0,4464 0,5625 0, ,0187 5, ,25 86

35 Lampiran 17. (Lanjutan) 2. Kadar Deksklorfeniramin maleat dalam Sediaan tablet Nama Sediaan Penimban gan(g) Setara (mg) Absorba nsi pada λ=249,6 nm Konsentr asi teoritis (μg/ml) Konsentra si praktek (μg/ml) Kadar % 0,4452 4,4990 0, , , ,76 0,4453 4,5000 0, , , ,74 Celestamin (Scheringplough) 0,4452 4,4990 0, , , ,76 0,4453 4,5010 0, , , ,66 0,4456 4,5030 0, , , ,48 0,4455 4,5020 0, , , ,07 0,4251 4,4992 0, , , ,78 0,4250 4,4981 0, , , ,80 Ocuson (Sanbe) 0,4253 4,5013 0, , , ,73 0,4249 4,4971 0, , , ,23 0,4247 4,4950 0, , , ,46 0,4248 4,4960 0, , , ,10 0,4463 4,4997 0, , , ,56 0,4465 4,5012 0, , , ,49 Polacel (Medikon) 0,4465 4,5012 0, , , ,49 0,4467 4,5036 0, , , ,68 0,4468 4,5045 0, , , ,06 0,4464 4,5007 0, , , ,14 87

36 Lampiran 18. Contoh Perhitungan Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin maleat dalam Sampel Berat 20 tablet = 3,9582 g Ditimbang serbuk setara dengan 4,5 mg deksklorfeniramin maleat, maka jumlah serbuk yang ditimbang adalah : x 1 = 4,5 mg (20 x 2 mg) x 3,9582 g = 0,4453 g Selanjutnya dari desklorfeniramin maleat dihitung kesetaraan betametason yang terkandung dalam 0,4453 g adalah: x 2 = 0,4453 g x (20 x 0,25 mg) (3,9582 g) = 0,5625 mg Jadi secara teoritis kadarnya betametason dalam analit adalah 0,5625 mg. Dilarutkan dengan metanol dengan kuantitatif dalam labu tentukur 50 ml sampai garis tanda. Larutan kemudian dihomogenkan dengan pengaduk ultrasonik selama 15 menit. Larutan tersebut kemudian disaring, lebih kurang 10 ml filtrat pertama dibuang. Filtrat selanjutnya ditampung. Konsentrasi desklorfeniramin maleat = 4,5 mg x 1000 μg = 90 μg/ml (50 ml) 0,5625 mg Konsentrasi betametason = x 1000 μg = 11,25 μg/ml (50 ml) Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 1,35 ml dan dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml dan diencerkan dengan metanol hingga garis tanda. 88

37 ampiran 18. (Lanjutan) Konsentrasi deksklorfeniramin maleat sampel = 90 µg/ml x 1,35 ml (10 ml) = 12,1 μg/ml Konsentrasi betametason sampel = 11,25 x 1,35 ml (10 ml) = 1,51 μg/ml Dari konsentrasi diatas deksklorfeniramin maleat 12,1 μg/ml dan betametason 1,51 μg/ml (8:1) untuk menjadikan perbandingan (2:1) maka, di tambahkan baku betametason yang diambil dari LIB III (11,25 μg/ml) yaitu : Konsentrasi betametason dari LIB III = 500 µg/ml x 2,25 ml (100 ml) = 11,25 μg/ml Dari LIB III (11,25 μg/ml), dipipet 4 ml di masukkkan dalam labu tentukur 10 ml. Maka volume analisis betametason adalah = ( betametason awal + betametason yang ditambahkan) = 1,35 ml+ 4 ml = 5,35 ml Jadi = 11,25 µg/ml x 5,35 ml (10 ml) = 6 μg/ml 89

38 Lampiran 18. (Lanjutan) Misalnya berat yang ditimbang adalah 0,4452 g, maka terlebih dahulu dihitung kesetaraan dengan deksklorfeniramin maleat dan betametason. 0,4452 mg Kesetaraan dengan desklorfeniramin maleat = 3,9582 x (20 x 2mg) = 4,4990 g Konsentrasi = 4,4990 g 50 ml x 1000 μg = 89,99 μg/ml Konsentrasi akhir teoritis deksklorfeniramin maleat = 89,99 µg/ml 10 ml x 1,35 ml = 12,1473 μg/ml Kesetaraan dengan betametason = 0,4990 g 3,9582 g x (20 x 0,25 mg) = 0,5623 mg 0,5623 mg Konsentrasi = 50 ml x 1000 μg = 11,2460 μg/ml 11,2460 µg/ml Konsentrasi akhir teoritis betametason = x 5,35 ml = 6,0166 μg/ml 10 ml Absorbansi deksklorfeniramin maleat pada derivat kedua pada panjang gelombang 249,6 nm adalah 0, Kadar dihitung dari persamaan regresi pada panjang gelombang analisis deksklorfeniramin maleat Y= (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) Konsentrasi praktik : Y = (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) 0,00234 = (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) 0, , = (20,3 x 10-5 )X X = 231,91x ,3 x 10 5 X = 11,4241 μg/ml 90

39 Lampiran 18. (Lanjutan) Kadar deksklorfeniramin maleat = 11,4241µg/mL 12,1473 µg/ml x 99,7 % = 93,76% Absorbansi betametason pada derivat kedua pada panjang gelombang 219,4 nm adalah 0, Kadar dihitung dari persamaan regresi pada panjang gelombang analisis betametason Y = (6,82 x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) Konsentrasi praktik: Y = (6,82 x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) 0,00234 = (6,82 x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) 0, , = (6,82 x 10-5 )X X = 38,57x ,82 x 10 5 X = 5,6554 μg/ml Kadar betametason = 5,6554 µg/ml 6,0166 µg/ml x 99,7 % = 93,71% 91

40 Lampiran 19. Perhitungan Statistik Betametason pada Tablet Celestamin No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,71-1,57 2, ,53 3,25 10, ,71-1,57 2, ,66-1,62 2, ,05 0,77 0, ,07 0,79 0,6241 X = 95,28 Σ(X X) 2 = 19,3337 SD = X X 2 n 1 = 19, = 19, = 1,9664 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 1,57 = - 1,9558 1, ,25 = 4,0480 (ditolak) 1, ,57 = - 1,9558 1,

41 Lampiran 19. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 t hitung 6 1,62 = -2,0181 1, ,77 = 0,9592 1, ,79 = 0,9841 1,

42 Lampiran 19. (Lanjutan) Karena data ke-2 ditolak maka dilakukan perhitungan tanpa menyertakan data ke-2 No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,71-0,93 0, , 71-0,93 0, ,66-0,98 0, ,05 1,41 1, ,07 1,43 2,0449 X = 94,64 Σ(X X) 2 = 7,6836 SD = X X 2 n 1 = 7, = 7, = 1,3859 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 0,93 = -1,5007 1, ,93 = -1,5007 1, ,98 = -1,5814 1,

43 Lampiran 19. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 1,41 = 2,2752 1, ,43 = 2,3075 1, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima. Kadar Betametason dalam Tablet Celestamin : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 94,84 ± (4,0321 x 1,9696/ 5) = 94,84 ± (4,0321 x 0,8040) = (94,84 ± 2,4980)% 95

44 Lampiran 20. Perhitungan Statistik Deksklorfeniramin maleat pada Tablet Celestamin No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,76-0,30 0, ,74 0,32 0, ,76-0,30 0, ,12 0,06 0, ,48 0,42 0, ,50 0,44 0,1936 X = 94,06 Σ(X X) 2 = 0,6560 SD = X X 2 n 1 = 0, = 0, = 0,3622 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 0,30 =- 2,0297 0, ,32 = -2,1650 0, ,30 = -2,0297 0,

45 Lampiran 20. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 t hitung 6 0,06 = 0,4059 0, ,42 = 2,8416 0, ,44 = 2,9769 0, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima Kadar Deksklorfeniramin maleat dalam Tablet Celestamin : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 94,06 ± (4,0321 x 0,3622/ 6) = 94,06 ± (4,0321 x 0,1478) = (94,06 ± 0,5959) % 97

46 Lampiran 21. Perhitungan Statistik Betametason pada Tablet Ocuson No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,12 0,69 0, ,88 3,45 11, ,09 0,66 0, ,74-1,69 2, ,79 1,64 2, ,01-1,42 2,0164 X = 95,43 Σ(X X) 2 = 20,3764 SD = X X 2 n 1 = 20, = 20, = 2,0187 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 t hitung 4 0,69 = 0,8372 2, ,45 = 4,1863 (ditolak) 2, ,66 = 0,8008 2, ,69 = -2,0507 2,

47 Lampiran 21. (Lanjutan) t hitung 5 t hitung 6 1,69 = -1,9900 2, ,58 = -1,7230 2,

48 Lampiran 21. (Lanjutan) Karena data ke-2 ditolak maka dilakukan perhitungan tanpa menyertakan data ke-2 No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,12 1,37 1, ,09 1,37 1, ,74-1,01 1, ,79-0,96 0, ,01-0,74 0,5476 X = 94,75 Σ(X X) 2 = 6,1618 SD = X X 2 n 1 = 6, = 6, = 1,2411 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 1,37 = 2,468 1, ,34 = 2,4144 1, ,01 = -1,8198 1,

49 Lampiran 21. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 0,96 = -1,7297 1, ,74 = -1,3333 1, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima. Kadar Betametason dalam tablet Ocuson : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 94,75 ± (4,0321 x 1,2411/ 5) = 94,75 ± (4,0321 x 0,5550) = (94,75 ± 2,2378)% 101

50 Lampiran 22. Perhitungan Statistik Deksklorfeniramin maleat pada Tablet Ocuson No. X Kadar (%) (X X) X X ,78 0,04 0, ,80 0,06 0, ,73 0,01 0, ,23 0,49 0, ,46-0,28 0, ,43-0,31 0,0961 X = 95,43 Σ X X 2 = 0,4199 SD = X X 2 n 1 = 0, = 0, = 0,2897 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 0,04 = 0,3384 0, ,06 = 0,0036 0, ,01 = - 0,0846 0,

51 Lampiran 22. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 t hitung 6 0,49 = 4,1455 (ditolak) 0, ,28 = 2,3688 0, ,31 = 2,6226 0,

52 Lampiran 22. (Lanjutan) Karena data ke-4 ditolak maka dilakukan perhitungan tanpa menyertakan data ke-4 No. X Kadar (%) (X X) (X X) ,78 0,14 0, ,80 0,16 0, ,73 0,09 0, ,46-0,18 0, ,43-0,21 0,0441 X = 95,64 Σ(X X) 2 = 0,1298 SD = X X 2 n 1 = 0, = 0, = 0,1801 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 = X X 0,14 = 1,7391 0, ,16 = 1,9875 0, ,09 = 1,1180 0,

53 Lampiran 22. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 0,18 = -2,2360 0, ,21 = -2,6080 0, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima. Kadar Desklorfeniramin maleat dalam Tablet Ocuson : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 95,64 ± (4,0321 x 0,1801/ 5) = 95,64 ± (4,0321 x 0,0805) = (95,64 ± 0,3245)% 105

54 Lampiran 23. Perhitungan Statistik Betametason pada Tablet Polacel No. X Kadar (%) X X X X ,13 0,05 0, ,25-0,93 0, ,68 1,50 2, ,63 1,45 2, ,17-1,01 1, ,25-0,93 0,8649 X = 92,18 Σ X X 2 = 7,1049 SD = X X 2 n 1 = 7, = 7, = 1,1920 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 0,05 = - 0,1027 1, ,93 = -1,9112 1, ,50 = 3,0826 1,

55 Lampiran 23. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 t hitung 6 = X X 1,45 = 2,9708 1, ,01 = -2,0756 1, ,93 = -1,9112 1, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima. Kadar Betametason dalam Tablet Polacel : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 92,18± (4,0321 x 1,1920/ 6) = 92,18 ± (4,0321 x 0,4866) = (92,18 ± 1,9620)% 107

56 Lampiran 24. Perhitungan Statistik Deksklorfeniramin maleat pada Tablet Polacel No. X Kadar (%) X X X X ,56 0,32 0, ,49 0,25 0, ,53 0,29 0, ,68-0,56 0, ,06-0,18 0, ,14 0,10 0,0100 X = 94,24 Σ X X 2 = 0,6050 SD = X X 2 n 1 = 0, = 0, = 0,3470 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t (α/2,dk) = 4,0321 Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 t hitung 2 t hitung 3 0,32 = 2,1680 0, ,25 = 1,7655 0, ,29 = 2,0480 0,

57 Lampiran 24. (Lanjutan) t hitung 4 t hitung 5 t hitung 6 0,56 = -3,9548 0, ,18 = -1,2711 0, ,10 = -0,7062 0, Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima. Kadar Deksklorfeniramin maleat dalam Tablet Polacel : μ = X ± (t α/2, dk) x SD/) = 94,24± (4,0321 x 0,3047/ 6) = 94,24 ± (4,0321 x 0,1416) = (94,24 ± 0,5709) % 109

58 Lampiran 25. Kurva Serapan Ocuson pada Uji Perolehan Kembali Gambar 58. Kurva serapan perolehan kembali 80% pada tablet Ocuson ke-1 Gambar 59. Kurva serapan perolehan kembali 80% pada tablet Ocuson ke-2 Gambar 60. Kurva serapan perolehan kembali 80% pada tablet Ocuson ke-3 110

59 Lampiran 25. (Lanjutan) Gambar 61. Kurva serapan perolehan kembali 100% pada tablet Ocuson ke-1 Gambar 62. Kurva serapan perolehan kembali100% pada tablet Ocuson ke-2 Gambar 63. Kurva serapan perolehan kembali 100% pada tablet Ocuson ke-3 111

60 Lampiran 25. (Lanjutan) Gambar 64. Kurva serapan perolehan kembali 120% pada tablet Ocuson ke-1 Gambar 65. Kurva serapan perolehan kembali 120% pada tablet Ocuson ke-2 Gambar 66. Kurva serapan perolehan kembali 120% pada tablet Ocuson ke-3 112

61 Lampiran 26. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Betametason pada Tablet Ocuson dengan Metode Penambahan Baku (Standard Addition Method) No Konsen trasi (%) Absorban si pada λ = 239,60 nm Setelah penambahan baku (mg) Konsentrasi Sebelum penambahan baku (mg) Baku yang ditambah kan (mg) Persen perolehan kembali (%) 1 0, ,4326 0,2990 0, , , ,4326 0,2990 0, ,33 3 0, ,4326 0,2990 0, ,33 4 0, ,5422 0,3730 0, , , ,5422 0,3730 0, ,65 6 0, ,5422 0,3730 0, ,65 7 0, ,6518 0,4475 0, , , ,6518 0,4475 0, ,23 9 0, ,6518 0,4475 0, ,23 Rata-rata (% recovery) Standard Deviation (SD) Relative Standard Deviation (RSD) (%) 100,24 0,3465 0,

62 Lampiran 27. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Deksklorfeniramin malreat pada Tablet Ocuson dengan Metode Penambahan Baku (Standard AdditionMethod) No Konsen trasi (%) Absorban si pada λ = 239,60 nm Setelah penambahan baku (mg) Konsentrasi Sebelum penambahan baku (mg) Baku yang ditambah kan (mg) Persen perolehan kembali (%) 1 0, ,4831 2,4101 1, , , ,4831 2,4101 1, ,65 3 0, ,4831 2,4101 1, ,65 4 0, ,3407 3,0126 1, , , ,3588 3,0126 1, ,02 6 0, ,3588 3,0126 1, ,02 7 0, ,2528 3,6151 1, , , ,2528 3,6151 1, ,39 9 0, ,2345 3,6151 1, ,26 Rata-rata (% recovery) Standard Deviation (SD) Relative Standard Deviation (RSD) (%) ,8671 0,

63 Lampiran 28.Contoh Perhitungan Persentase Perolehan Kembali (% recovery) Sampel yang digunakan adalah tablet Ocuson Berat 20 tablet Ocuson = 3,9582g Berat kesetaraan penimbangan sampel pada penetapan kadar = 4,5 mg Perolehan 80% Deksklorfeniramin maleat 80% = 80 x 4,5 mg = 3,6 mg 100 Analit deksklorfeniramin maleat 70% = 70 x 3,6 mg = 2,52 mg 100 Penimbangan serbuk setara 2,52 mg deksklorfeniramin maleat Sampel yang ditimbang = 2,52 x 3,9582 = 0,2493 g 20x2 mg Baku deksklorfeniramin maleat 30% = 30 x 3,6 = 1,08 mg 100 Jumlah betametason dalam serbuk yang ditimbang : = 0,2493 g x (20 x 0,25 mg) = 0,3149 mg 3,9582 g Baku betametason yang ditambahkan : 30 3, 6mg = 0,25mgx = 0,135 mg mg Perolehan100% Deksklorfeniramin maleat 100% = 100 x 4,5 mg = 4,5 mg 100 Analit deksklorfeniramin maleat 70% = 70 x 4,5 = 3,15 mg 100 Penimbangan serbuk setara 2,52 mg deksklorfeniramin maleat 3,15 Sampel yang ditimbang = x 3,9582 = 0,3117 g 20 x 2 mg 115

64 Lampiran 28. (Lanjutan) Baku deksklorfeniramin maleat 30% = 30 x 4,5 = 1,35 mg 100 Jumlah betametason dalam serbuk yang ditimbang : = 0,3117 g x (20 x 0,25 mg) = 0,3937 mg 3,9582 g Baku betametason yang ditambahkan : = ,25 3, 6mg mgx 2 mg = 0,1350 mg Perolehan 120% Deksklorfeniramin maleat 120% = 120 x 4,5 mg = 5,4 mg 100 Analit deksklorfeniramin maleat 70% = 70 x 5,4 mg = 3,78 mg 100 Penimbangan serbuk setara 3,78 mg deksklorfeniramin maleat Sampel yang ditimbang = 3,78mg x 3,9582 = 0,3740 g 20 x 2mg Baku deksklorfeniramin maleat 30% = 30 x 5,4 = 1,62 mg 100 Jumlah betametason dalam serbuk yang ditimbang : = 0,3740 g x (20 x 0,25 mg) = 0,4724 mg 3,9582 g Baku betametason yang ditambahkan : = ,25 5, 4mg mgx 2 mg = 0,2025 mg 116

65 Lampiran 28. (Lanjutan) Misalnya absorbansi analisis (Y) pada perolehan 80% Deksklorfeniramin maleat (249,6 nm) = 0,00193 Betametason (219,4 nm) = 0,00033 Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis deksklorfeniramin maleat (λ=249,6 nm): Y = (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) Konsentrasi deksklorfeniramin maleat: Y = (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) 0,00193 = (20,3 x 10-5 )X + (2,09 x 10-5 ) 0, , = (20,3 x 10-5 )X X = 190,91 x ,3 x 10 5 X = 9,4044 μg/ml Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku (C F ): = Konsentrasi desklorfeniramin maleat (µg/ml) 1000 x faktor pengenceran 9,4044 µg/ml = x 370, = 3,4831 mg Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku (C A ): = Baku deksklorfeniramin maleat 70% x kadar rata-rata sampel = 2,52 mg x 95,64% = 2,4101 mg 117

66 Lampiran 28. (Lanjutan) Jumlah Baku yang ditambahkan (C * A): = Baku deksklorfeniramin maleat 30% (yang ditambahkan) x % kadar baku deksklorfeniramin maleat = 1,08 x 99,7% = 1,0767 mg Maka % perolehan kembali deksklorfeniramin maleat: % perolehan kembali = C F C A C A x 100 % Keterangan: C F = Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku C A = Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku C * A = Konsentrasi baku yang ditambahkan % perolehan kembali = 3,4831 mg 2,4101 mg 1,0767 mg x 100% = 99,65% Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis betametason (λ= 219,4 nm): Y = (6,82x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) Konsentrasi betametason : Y = (6,82 x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) 0,00037 = (6,82 x 10-5 )X + (1,43 x 10-5 ) 0, , = (6,82 x 10-5 )X X = X = 31,57 x ,82 x ,6290 μg/ml 118

67 Lampiran 28. (Lanjutan) Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku (C F ): = Konsentrasi betametason (µg/ml) 1000 x faktor pengenceran 4,6290 µg/ml = x 93, = 0,4326 mg Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku(c A ): = Jumlah betametason dalam serbuk yang ditimbang x % kadar rata-rata sampel = 0,3149 mg x 94,98% = 0,2990 mg Jumlah Baku yang ditambahkan (C * A): = Baku betametason yang ditambahkan x % kadar baku betametason = 0,1350 mg x 99,7% = 0,1345 mg Maka % perolehan kembali betametason % perolehan kembali = C F C A C A x 100 % Dimana : C F = Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan baku C A = Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku C * A = Konsentrasi baku yang ditambahkan 0,4326mg 0,2990 mg % perolehan kembali = x 100% = 99,33% 0,1345mg 119

68 Lampiran 29. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar deviasi Kadar Perolehan Kembali Betametason pada Tablet Ocuson No Kadar Perolehan Kembali [X] (%) Xi-X (Xi X) ,33-0,74 0, ,33-0,74 0, ,33-0,74 0, ,65 0,58 0, ,65 0,58 0, ,65 0,58 0, ,23 0,16 0, ,23 0,16 0, ,23 0,16 0,0256 X=100,07 Ʃ = 1,9623 SD = (Xi X ) 2 n 1 = 1, = 0,4952 RSD = SD X x 100% = 0, ,07 x 100% = 0,4948% 120

69 Lampiran 30. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar deviasi Kadar Perolehan Kembali Deksklorfeniramin maleat pada Tablet Ocuson No Kadar Perolehan Kembali [X] (%) Xi-X (Xi X) ,65-0,45 0, ,65-0,45 4 0, ,65-0,45 40, ,67-1,40 4 1, ,02-0,05 0 0, ,02-0,05 5 0, ,39 1,32 51, ,39 1,32 4 1, ,26 0,19 4 0,036 X =100,07 Ʃ=6, SD = (Xi X ) 2 n 1 = 6, = 0,8671 RSD = SD X x 100% = 0, ,07 x 100% = 0,8664% 121

70 Lampiran 31. Daftar Nilai Distribusi t 122

71 Lampiran 32. Sertifikat Pengujian Betametason 123

72 Lampiran 33. Sertifikat Pengujian Deksklorfeniramin maleat 124