IV HASIL DAN PEMBAHASAN. Pendahuluan dan (4.2) Hasil dan Pembahasan Penelitian Utama Hasil dan Pembahasan Penelitian Pendahuluan

Transkripsi

1 IV HASIL DAN PEMBAHASAN Bb ini mengurikn mengeni : (4.1) Hsil dn Pembhsn Penelitin Pendhulun dn (4.2) Hsil dn Pembhsn Penelitin Utm Hsil dn Pembhsn Penelitin Pendhulun Penelitin pendhulun yng dilkukn yitu menentukn wktu pertumbuhn optimum Scchromyces cerevisie dengn metode counting chmber setip tig jm selm 72 jm dlm medi cir YPG untuk penmbhn ke dlm rgi tpe dn menentukn konsentrsi sumber nitrogen yng terbik dlm pertumbuhn Scchromyces cerevie, sumber nitrogen yng digunkn dlh ure dengn konsentrsi 2.5%, 5%, dn 7.5% menggunkn inkubtor dengn suhu 30 0 C sehingg wktu pertumbuhn optimum Scchromyces cerevie yng ditmbhkn dn konsentrsi ure terbik yng digunkn untuk penelitin utm Penentun pertumbuhn optimum Penelitin pendhulun yng pertm yitu menentukn wktu pertumbuhn optimum Scchromyces cerevisie dengn metode counting chmber setip tig jm selm 72 jm dlm medi cir YPG untuk penmbhn ke dlm rgi tpe. Pertumbuhn optimum mikroorgnisme merupkn bgin penting dlm menghsilkn sutu produk pngn, kren dpt mempengruhi hsil produk tersebut. Metode yng digunkn untuk mengethui pertumbuhn optimum pd Scchromyces cerevisie yitu metode perhitungn sel hidup dengn lt counting chmber. Perhitungn sel tersebut bertujun untuk 52

2 53 mengethui pertumbuhn Scchromyces cerevisie. Hsil perhitungn sel dpt diliht pd Tbel 8. Tbel 8. Hsil Pengmtn Perhitungn Jumlh Scchromyces cerevisie pd Medi Cir YPG No. Wktu (Jm) ph Suhu ( 0 C) Jumlh (sel/ml) ,8 x ,45 x ,55 x ,65 x ,6 x ,05 x ,9 x ,2 x ,6 x ,45 x ,35 x ,8 x ,8 x ,4 x ,3 x ,25 x ,8 x ,55 x x Berdsrkn perhitungn sel dengn metode counting chmber yng dpt diliht pd Tbel 8 yitu pertumbuhn Scchromyces cerevisie pd st pembikkn wl (strter) jumlh selny sebnyk 1,8 x 10 6 sel/ml. Setelh tig jm ms inkubsi dengn suhu 30 0 C menglmi penurunn hingg jumlhny sebnyk 1,45 x 10 6 sel/ml. Selnjutny enm jm ms inkubsi dengn suhu 30 0 C menglmi kenikn sehingg jumlhny sebnyk 3,55 x 10 6 sel/ml. Tetpi setelh sembiln jm ms inkubsi dengn suhu

3 C menglmi penurunn lgi hingg jumlhny sebnyk 1,65 x 10 6 sel/ml. Selnjutny setelh 12 jm ms inkubsi dengn suhu 27 0 C menglmi penurunn lgi hingg jumlhny sebnyk 2,6 x 10 6 sel/ml dn menglmi kenikn hingg 42 jm ms inkubsi pd suhu 27 0 C jumlhny sebnyk 12,3 x 10 6 sel/ml. Scchromyces cerevisie menglmi penurunn pertumbuhn setelh 45 jm ms inkubsi dengn suhu 27 0 C menglmi penurunn lgi hingg jumlhny sebnyk 6,25 x 10 6 sel/ml. penurunn tersebut berlnjut smpi jm ke-57 ms inkubsi dengn suhu 27 0 C. Pd penelitin dits ms inkubsi yng telh dilkukn pd khmir jenis Scchromyces cerevisie hny berthn selm 54 jm ms inkubsi dengn medi YPG dengn suhu dimuli dri 30 0 C smpi suhu 26 0 C. Menurut hsil penelitin pd Tbel 8 pertumbuhn optimum pd khmir jenis Scchromyces cerevisie tidk d kren suhu yng digunkn berbed-bed yitu 30 0 C - suhu 26 0 C. Sehingg tidk dpt diktkn sebgi pertumbuhn optimum. Nmun pd jm ke jm ms inkubsi merupkn pertumbuhn mksiml dri penelitin pd Tbel 8 ini. Hl tersebut dpt berubh pbil suhu yng digunkn dinikkn tu diturunkn sehingg suhu merupkn fktor yng penting dlm pertumbuhn sutu mikroorgnisme. Beberp keslhn dlm penelitin ini yitu suhu yng digunkn. Penggunn suhu sebikny hrus konstn tu tidk berubh-ubh sehingg dpt dikethui dengn psti jumlh khmir Scchromyces cerevisie. Selin itu tidk digunkn inkubtor yng berstndr jug menjdikn suhu pd penelitin pd Tbel 8 tidk konstn tu sellu berubh-berubh.

4 55 Ketidksesuin pertumbuhn Scchromyces cerevisie menurut hsil penelitin pd Tbel 8 memiliki beberp penyebb tu fktor yng mempengruhi. Fktor utm yitu suhu, pd wktu di inkubsi suhu yng digunkn untuk memfermentsi rgi tpe berkisr 30 0 C. Ketidkstbiln suhu tersebut dpt mempengruhi hsil penelitin sehingg hsil yng didpt tidk sesui dengn litertur dlm buku Frdiz (1992). Beberp fktor lingkungn pngn seperti suhu penyimpnn, kemsmn (ph), ktivits ir ( w ), oksidsi reduksi (O-R), dn nutrisi berpengruh terhdp lju pertumbuhn (Ry, 2004). Jik slh stu fktor mislny suhu bervrisi dn semu fktor lin tetp selm pertumbuhn strin mikroorgnisme, lju pertumbuhn dpt diukur. Hl tersebut dpt mencerminkn lju pertumbuhn tinggi tu wktu genersi pendek mikroorgnisme pd suhu tertentu. Suhu tersebut mengcu pd suhu optimum pertumbuhn bkteri pd kondisi yng diberikn (Sopndi, dkk, 2014). Sebelum dn sesudh lju pertumbuhn optimum, lju pertumbuhn lmbt smpi lju pertumbuhn berhenti. Derh kiri dn knn dri titik pertumbuhn optimum dlh pertumbuhn minimum dri kisrn pertumbuhn bkteri (Sopndi, dkk, 2014). Sel mikrob dpt terppr oleh berbgi fktor, mislny suhu di bwh kisrn pertumbuhn, sel mikrob tidk hny berhenti untuk tumbuh, tetpi dpt jug terluk tu kehilngn vibilits bergntung pd kondisi sel tersebut. Kisrn pertumbuhn optimum mikroorgnisme dpt digunkn untuk

5 56 mempeljri inhibisi, reduksi, tu stimulsi prtumbuhn mikrob dlm pngn (Sopndi dkk., 2014). Penemptn dlm sutu grfik mempunyi beberp fitur yng merepresentsikn kondisi sel pd wktu yng berbed. Populsi tidk menglmi perubhn (fse lg) pd kondisi wl. Selm kondis wl, sel myerp nutrisi dn meningktkn ukurn sel. Wlupun populsi tidk berubh kren hny terjdi perubhn ukurn sel, mss sel, dn kerptn optis menunjukkn peningktn. Setelh fse lg, jumlh sel muli meningkt, pd wlny perlhn kemudin meningkt sngt cept. Sel-sel dlm populsi berbed dlm wl lju metbolisme dn hny beberp yng berkembng bik, selnjutny hmpir semu sel berkembng bik. Fse ini disebut fse eksponensil tu fse logritmik. Lju pertumbuhn pd fse eksponensil mengikuti urutn pertm kinetik reksi dn dpt digunkn untuk menentukn wktu genersi. Setelh fse eksponensil, lju pertumbuhn melmbt dn khirny populsi memsuki fse sttioner. Pd fse ini, kren kekurngn nutrisi dn kumulsi produk ikutn tu limbh metbolisme, sebgin sel dri populsi mti dn sebgin msih melkukn pembelhn, sehingg stbilits kehidupn diperthnkn. Jik dilkukn perhitungn jumlh sel dengn mikroskop tu pengukurn sel, jumlh dn mss sel menunjukkn peningktn kren sel mti tetp d tu utuh dn msih terhitung tu terukur. Setelh fse sttioner, populsi memsuki fse kemtin, lju sel yng mti lebih tinggi dibndingkn lju sel yng melkukn pembelhn. Dlm wktu yng lm (dpt beberp

6 57 thun) beberp sel tetp msih hidup, tetpi bergntung pd strin tu jenis bekteri dn kondisi lingkungn (Sopndi dkk., 2014). Jenis mikroorgnisme yng digunkn dlh Scchromyces cerevisie yng termsuk jenis mikroorgnisme dlm pngn yng bergenus khmir. Stu sel khmir kn menghsilkn kuncup yng berukurn wl lebih kecil dn msih menenpel pd permukn sel tetuny. Setelh tumbuh membesr, sel bru yng bersl dri kuncup kn menghsilkn kuncup bru, sehingg membentuk sutu rngkin seperti rnti kuncup yng menempel pd permukn sel khmir tetuny (Ry, 2004). Menurut Sopndi, T., dn Wrdh (2014), khmir Scchromyces cerevisie merupkn khmir yng telh digunkn secr lus dlm produksi roti, bir, dn minumn nggur, produksi enzim invertse, dn flvor beberp pngn. Sel khmir berbentuk bult, ovl, tu bult pnjng, berkembng bik dengn kuncup, berkonjugsi dn membentuk skospor. Strin khmir secr umum dikelompokkn menjdi du kelompok, yitu khmir bwh dn khmir ts. Khmir ts tumbuh sngt cept pd suhu 20 0 C sert memproduksi lkohol dn CO 2. Khmir ts jug membentuk rumpun tu gumpln kren produksi CO 2 yng cept dn mengpung pd permukn medi. Seblikny, khmir bwh tumbuh lebih bik pd suhu C tidk membentuk rumpun dn berd di bgin bwh medi. Khmir ts dn bwh digunkn sesui proses fermentsi yng diperlukn. Kesmn tu ph medium merupkn slh stu fktor penting yng mempengruhi pertumbuhn mikroorgnisme dn pembentukn produk dlm

7 58 proses fermentsi kren setip mikroorgnisme mempunyi kisrn ph optiml. Dlm penelitin ini kesmn tu ph wl medi tidk ditur menjdi 4,5 tetpi ph ny sebesr 6. Menurut Frdiz (1992) ph optiml khmir dlh 4,0-4,5. Hl tersebut dpt menjdi fktor hsil yng kurng mksiml. Nmun dlm proses fermentsi terjdi penurunn ph kren di dlm proses fermentsi Scchromyces cerevisie selin menghsilkn etnol jug menghsilkn CO2 dn sm-sm orgnik. Amerine dlm Sugirto (1991) menytkn bhw perubhn ph dlm fermentsi disebbkn kren dlm ktivitsny sel khmir selin menghsilkn etnol sebgi metbolit primer jug menghsilkn sm-sm orgnik seperti sm mlt, sm trtrt, sm sitrt, sm lktt, sm sett, sm butirt dn sm propionte sebgi hsil smpingn. Asm-sm ini menurunkn ph medium. Setelh dibndingkn dengn hsil penelitin pendhulun di ts bhw suhu yng digunkn pd penelitin tersebut terllu mksiml sehingg pertumbuhn pd jenis khmir Scchromyces cerevisie tidk terllu optiml tu cept. Hl tersebut diperkut dengn dt pengmtn perhitungn jumlh scchromyces cerevie menggunkn metode counting chmber pd medi cir YPG. Tetpi jik dibndingkn dengn rgi yng d di psr, proses fermentsi berlngsung lebih cept. Jik menggunkn rgi psr proses inkubsi gr menghsilkn tpe membutuhkn wktu 2-3 hri. Sedngkn dengn menggunkn rgi tpe pd penelitin ini hny membutuhkn wktu 24 jm sj, kren st percobn 48 jm tpe sudh berubh menjdi sm tu kelebihn wktu fermentsi. Nmun

8 59 jik dibndingkn rs dn rom tentu rgi psr lebih bik dibndingkn rgi pd penelitin ini, kren jenis mikroorgnisme yng digunkn hny jenis khmir Scchromyces cerevisie sj sedngkn di dlm rgi psr terdpt Chlmydomucor oryze, Rhizopus oryze, Mucor sp, Cndid sp, Scchromyces cerevisie, Scchromyces verdomnii, dn lin-lin (Tim Ristek, 2007). Sehingg hsil penelitin pendhulun ini mengeni wktu optimum pertumbuhn khmir Scchromyces cerevisie yitu 39 jm dengn jumlh sel hidup sekitr 17,4 x 10 6 sel/ml dn ph Penentun Penmbhn Konsentrsi Sumber Nitrogen Jenis Ure Penelitin pendhulun yng kedu yitu dilkukn pembutn rgi tpe dengn penmbhn ure dengn tig konsentrsi berbed yitu 2.5% (u 1 ), 5% (u 2 ), dn 7.5% (u 3 ) menggunkn suhu inkubsi 30 0 C selm 33 jm wktu fermentsi. Kemudin dilkukn perhitungn jumlh sel khmir dengn metode counting chmber dpt diliht pd Tbel 9. Tbel 9. Hsil Pengmtn Perhitungn Jumlh Scchromyces cerevisie menggunkn Metode Counting Chmber pd Rgi Tpe No. Konsentrsi ure Suhu ( 0 C) ph Jumlh (sel/ml) 1 2,5 % ,75 x ,0 % ,55 x ,5 % ,40 x 10 8 Berdsrkn hsil perhitungn pd jumlh scchromyces cerevisie menggunkn metode perhitungn jumlh sel hidup dengn lt counting chmber pd rgi tpe yng dpt diliht pd Tbel 9 bhw rgi tpe dengn penmbhn konsentrsi ure 2.5 % sebesr 6,75 x 10 8 sel/ml, konsentrsi ure 5 % sebesr 3,55x10 8 sel/ml dn konsentrsi ure 7.5 % sebesr 3,40 x 10 8 sel/ml.

9 60 Sehingg konsentrsi ure yng terpilih dlh konsentrsi ure 2.5 % kren memiliki jumlh Scchromyces cerevisie terbnyk dibndingkn dengn konsentrsi 5 % dn 7.5%. Hl ini terjdi kren jumlh enzim yng terdpt pd suspensi pti telh menglmi kejenuhn sehingg penmbhn konsentrsi ure ke dlm suspensi pti tidk kn meningktkn ktivits enzim lf-milse dlm menghidrolisis pti. Menurut Whitker (1996), penmbhn konsentrsi ure kn meningktkn keceptn reksi bil substrt tersedi secr berlebih. Nmun peningktn keceptn reksi kn semkin menurun untuk setip penmbhn konsentrsi ure. Olsen (1995) menmbhkn bhw peningktn nili glukos kn mencpi titik bts, setelh titik itu terlpui mk tidk kn terjdi perubhn nili glukos yng lebih tinggi lgi meskipun konsentrsi enzim ditmbhkn dn wktu likuifiksi diperpnjng. Hl ini terjdi kren sisi ktif enzim telh jenuh oleh substrt sehingg tidk d lgi substrt yng dpt melekt pd sisi ktif. Menurut Lehninger (1997), bts tersebut disebut sebgi keceptn mksimum yitu keceptn ketik enzim telh jenuh dengn substrt. Pd st itu tercpi keceptn mksimum semu enzim terdpt dlm kompleks enzim substrt. Nitrogen merupkn sumber nutrisi yng sngt penting. Nitrogen berfungsi sebgi penyedi sm nuklet dn sm mino tunggl sert vitmin yng dibutuhkn yest untuk hidup. Sumber nitrogen yng digunkn dlm penelitin ini dlh Ure. Jumlh Scchromyces cerevisie yng dihsilkn dengn vrisi konsentrsi sumber nitrogen pd nutrisi ditmpilkn pd Gmbr 6 dpt diliht dengn menggunkn konsentrsi ure sebgi sumber nitrogen diperoleh

10 61 konsentrsi 2.5 % jumlh Scchromyces cerevisie tertinggi 6,75x10 8. Ure memiliki unsur nitrogen lebih tinggi dibndingkn yest extrct yng mengkibtkn yest menyerp nitrogen dri ure lebih bik sehingg konsentrsi bioetnol yng dihsilkn jug lebih tinggi. Pertumbuhn mikrob dicpi mellui sintesis komponen seluler dn energi. Nutrisi yng diperlukn untuk proses ini bersl dri lingkungn sel mikrob. Jik sel mikrob tumbuh dlm pngn, nutrisi tersebut dipsok dri pngn. Komponen yng dpt digunkn sebgi nutrisi mikrob termsuk krbohidrt, protein, lipid, minerl dn vitmin. Beberp mikrob dlm pngn dpt memnftkn gul, lkohol, dn sm mino sebgi sumber energi (Jy, 2000). Air tidk dinggp sebgi nutrisi, tetpi sngt penting sebgi medi reksi biokimi yng diperlukn untuk sintes mss sel dn energi (Ry, 2004). Komponen protein utm dlm pngn dlh protein sederhn, protein konjugsi, peptide, komponen nitrogen nonprotein (NPN) seperti sm mino, ure, moni (NH 3 ), kertin, dn trimetilmin. Protein dn peptide dlh polimer dri berbgi sm mino tnp tu dengn komponen orgnik lin, seperti krbohidrt tu inorgnic seperti besi dn mengndung nitrogen sekitr 15-18%. Protein sederhn dlh polimer sm mino seperti lbumin dlm telur, globulin dlm susu, glutelin dlm biji-bijin, prolmin dlm biji-bijin, dn lbuminoid dlm kolgen otot (Sopndi dkk., 2014). Slughter (1998) melporkn bhw, semu mikroorgnisme yng telh diteliti tmpkny dpt menggunkn moni sebgi sumber nitrogen norgnik. Amoni terdpt sebgi bentuk grm moni, sebgi contoh

11 Log. Jumlh Sel (sel/ml) 62 mmonium sulft dn ure. Pd fermentsi fungi, trnsfor ion monium mellui sistem trnsfor ktif, mislny pd A. nidulns, P. chrysogenum, dn Scchromyces cerevisie. Asimilsi nitrt pd khmir dn kpng menggunkn proses yng sm, yitu nitrt setelh ditrnsfor ke dlm sel, kemudin diubh menjdi monium oleh enzim nitrt reduktse dn nitrit reduktse (Sivero, 2002). Enzim nitrt reduktse merupkn protein yng memerlukn kofktor molibdopterin, hem-fe, dn FAD. Sebgin besr fungi dpt menggunkn nitrt sebgi sumber nitrogen (Slughter, 1988). Sehingg pd penelitin pendhulun mengeni konsentrsi ure yng terbik pd konsentrsi 2,5%, 5%, dn 7,5% dpt disimpulkn bhw konsentrsi ure 2,5 % memiliki jumlh sel hidup lebih bnyk yitu sebesr 6,75x10 8 sel/ml dibndingkn dengn konsentrsi ure 5% dn 7,5%. Hl tersebut dpt dimti pd gmbr ,75x10 8 3,55x10 8 3,40x10 8 u1 (ure 2,5%) u2 (ure 5%) u3 (ure 7,5%) Gmbr 6. Grfik Jumlh Scchromyces cerevisie dengn konsentrsi ure berbed pd rgi tpe

12 Hsil dn Pembhsn Penelitin Utm Penelitin utm merupkn lnjutn dri penelitin pendhulun, penelitin utm ini dilkukn untuk mengethui pengruh perbndingn konsentrsi penmbhn ure dn Scchromyces cerevisie terhdp pertumbuhn Scchromyces cerevisie pd produk rgi tpe. Rgi tpe yng dihsilkn itu selnjutny dilkukn nlisis yng terdiri dri respon yng dilkukn pd penelitin utm meliputi nlisis kimi, dn nlisis mikrobiologi. Anlisis kimi meliputi nlisis kdr gul reduksi dengn metode luff schoorl pd produk rgi tpe. Sedngkn nlisis mikrobiologi meliputi perhitungn jumlh mikrob dengn metode counting chmber pd produk rgi tpe Anlisis Kimi Glukos dlh sutu ldoheksos dn mempunyi sift dpt memutr chy terpolrissi ke rh knn. Drh mnusi norml mengndung glukos dlm jumlh tu konsentrsi yng tetp, yitu ntr mg tip 100 ml drh. Glukos drh ini dpt bertmbh setelh kit mkn mknn yng mengndung krbohidrt, nmun kir-kir 2 jm setelh itu jumlh glukos drh kn kembli pd kedn semul. Pd orng yng menderit dibetes melitus tu kencing mnis, jumlh glukos drh lebih dri 130 mg per 100 ml drh (Poedjidi, 2005). Berdsrkn nlisis sttistik terhdp kdr gul pereduksi metode luff schoorl pd rgi tpe yng dpt diliht pd Lmpirn 6, menunjukkn bhw

13 64 perbndingn konsentrsi ure dn Scchromycces cerevisie berpengruh terhdp kdr gul reduksi rgi tpe. Pengruh Interksi Perbndingn Konsentrsi Ure dn Scchromycces Cerevisie Terhdp Kdr Gul Reduksi Pd Rgi Tpe (Konsentrsi Ure) b (Konsentrsi Scchromyces cerevisie) b 1 (0,5 ml) b 2 (0,75 ml) b 3 (1,0 ml) 7,423 A 7,491 A 7,367 A 7,621 A 7,633 A 7,848 A 8,489 B 8,727 A 8,862 A b b b Keterngn : 1 = konsentrsi ure 2,5% 2 = konsentrsi ure 2% 3 = konsentrsi ure 1% HB = Huruf Besr dibc horizontl Hk = Huruf Kecil dibc vertikl (Huruf yng sm pd gris dn kolom menytkn tidk berbed nyt) Sehingg dpt disimpulkn bhw semkin sedikit jumlh ure dn semkin bnyk jumlh Scchromyces cerevisie mk kdr gul reduksi pd rgi tpe semkin besr dn seblikny semkin bnyk jumlh ure dn semkin bnyk jumlh Scchromyces cerevisie mk semkin rendh. Kdr gul reduksi terendh pd rgi tpe ini terdpt pd kode smpel 1 b 1, dimn konsentrsi ure 2,5 % dn Scchromyces cerevisie 0,5 ml memiliki kdr gul reduksi dengn nili rt-rt 7,423%. Seblikny pd kode smpel 3 b 3, dimn konsentrsi ure 1 % dn Scchromyces cerevisie 1 ml memiliki kdr gul reduksi yng sngt tinggi dengn nili rt-rt 8,862 %. Hl ini didug kren pengruh sumber nitrogen untuk nutrisi mikrob yng digunkn berbed-bed dn jumlh Scchromyces cerevisie yng digunkn jug berbed-bed sehingg terliht perbedn yng signifikn.

14 65 Metode Kimi untuk mengnlisis gul peredusi secr lengkp dn mendetil telh diterbitkn oleh Hodge nd Dvis (1952). Metode Cu, kemungkinnny belum d metode lin yng digunkn seperti pd penggunn metode nlisis terhdp gul reduksi yng bersl dri oksidsi oleh ion Cu. Pd semu metode Cu, reduksi Cu dn Oksidsi gul buknlh sutu stoikhiometri. Sebelumny, kondisi reksi bis digunkn untuk menghsilkn nlisis secr kuntittif, sehingg jumlh gul reduksi bis di nlisis berdsrkn Tbel klibrsi (Pomernz, 1994). Oksidsi dri gul pereduksi oleh Cu-lkli pertm kli ditemukn oleh Trommer pd thun Metode ini dikembngkn oleh Bresvil dengn menmbhkn Ntrium-Trtrt untuk mencegh pengendpn Cu(OH) 2. Metode secr mendetil dikerjkn oleh Fehling pd thun 1848 dn diperbiki lgi oleh Soxhlet pd thun Du lrutn disipkn untuk menentukn gul reduksi menggunkn metode Fehling-Soxhlet. Slh stu lrutn mengndung 34,64 g CuSO 4.5H 2 O per 500 ml, dn lrutn linny mengndung 173 g grm Rochelle (NKC 4 H 4 O 6.4H 2 O) dn 50 g NOH per 500 ml (Pomernz, 1994). Ketik gul reduksi menglmi pembsn pd suhu yng meningkt, gul tersebut terdegrdsi dn beberp dri produk degrdsi tersebut mereduksi ion Cu dlm lrutn menjdi endpn Cu 2 O. Anlis kuntittif menggunkn metode ini telh dikembngkn dengn memvrisikn komposisi dri lrutn kupri hidroksid (Pomernz, 1994). Titrsi lngsung oleh lrutn iodin dijelskn oleh Shffer dn Hrtmn berdsrkn pd keberdn kompleks okslt yng terbentuk bersm ion kupri

15 66 dn endpn kupri-oksid bis dititrsi oleh lrutn iodt-iodid dlm susn sm (Pomernz, 1994). Besrny sutu konsentrsi yng kn didptkn dri proses fermentsi tidk dpt ditentukn hny berdsrkn konsentrsi gul reduksi wl kren proses fermentsi dipengruhi oleh bnyk fktor. Menurut Sutiri dlm Sugihrto (1991) fktor-fktor yng mempengruhi fermentsi dlh kultur inokulum yng digunkn, lm fermentsi, suhu, ph medium, jumlh mkro dn mikro nutrien yng d dlm medi fermentsi, konsentrsi medi fermentsi, gul reduksi dn sebginy. Konsentrsi etnol yng didptkn pd penelitin ini cukup tinggi. Hl ini disebbkn kren dlm proses fermentsi terjdi proses pemechn diskrid dn hidrolis poliskrid menjdi monoskrid tu gul-gul reduksi yng dpt dimnftkn oleh sel Scchromyces cerevisie untuk ktivits kehidupnny. Selm fermentsi terjdi penurunn konsentrsi gul reduksi kren dipki oleh sel Scchromyces. cerevisie. Dlm rngk memperthnkn hidupny sel Scchromyces cerevisie menghsilkn enzim tertentu yitu kelompok enzim invertse yng berfungsi untuk memech diskrid menjdi glukos tu gul reduksi sehingg kdr gul reduksi di dlm medi fermentsi bertmbh. Peningktn kdr gul reduksi ini menyebbkn peningktn konsentrsi etnol. Penggunn jenis inokulum kering berpengruh terhdp kdr gul reduksi tertinggi kren didlm rgi psr mengndung berbgi jenis mikroorgnisme yng dpt menghsilkn bermcm-mcm enzim, dimn jenis enzim dn bnykny enzim yng dihsilkn kn mempengruhi lju fermentsi sehingg

16 67 dibndingkn dengn inokulum murni kering Scchromyces cerevisie yng hny mengndung khmir sj, enzim yng dihsilkn rgi psr reltif lebih bervrisi dibndingkn enzim yng dihsilkn inokulum murni Anlisis Mikrobiologi Anlisis mikrobiologi yng dilkukn yitu nlisis menghitung jumlh Scchromyces cerevisie dengn metode counting chmber. Jumlh sel dlm sutu populsi dpt diukur dengn menghitung dibwh mikroskop, metode ini dinmkn direct microscopic count. Metode ini dpt digunkn untuk smpel pdt tupun smpel berbentuk cir. Metode ini menggunkn lt yng dinmkn counting chmber. Alt ini berup lempeng gels (grid) yng pd permuknny dibut petk-petk yng sngt kecil berbentuk bujur sngkr dengn lus dn kedlmn tertentu. Jumlh sel per unit lusn pd grid dpt dihitung secr lngsung dibwh pengmtn dengn mikroskop sehingg menghsilkn ukurn jumlh sel per volume chmber. Untuk mengubh nili ini menjdi jumlh sel/ml dilkukn dengn mengkonversi fktor volume dri smpel yng d pd chmber. Berdsrkn nlisis sttistik terhdp jumlh Scchromyces cerevisie dengn metode counting chmber pd rgi tpe yng dpt diliht pd Lmpirn 7, menunjukkn bhw perbndingn konsentrsi ure dn Scchromycces cerevisie berpengruh terhdp jumlh mikroorgnisme rgi tpe.

17 68 Pengruh Interksi Perbndingn Konsentrsi Ure dn Scchromycces Cerevisie Terhdp Jumlh Sel Pd Rgi Tpe (Konsentrsi Ure) b (Konsentrsi Scchromyces cerevisie) b 1 (0,5 ml) b 2 (0,75 ml) b 3 (1,0 ml) 5,67 x 10 9 A 7,3 x 10 9 A 18 x 10 9 B c 10,6 x 10 9 A 6,2 x 10 9 A 6,3 x 10 9 A 8,5 x 10 9 A 6,83 x 10 9 A 14,5 x 10 9 B b Keterngn : 1 = konsentrsi ure 2,5% 2 = konsentrsi ure 2% 3 = konsentrsi ure 1% HB = Huruf Besr dibc horizontl Hk = Huruf Kecil dibc vertikl (Huruf yng sm pd gris dn kolom menytkn tidk berbed nyt) Sehingg dpt disimpulkn bhw semkin sedikit jumlh ure dn semkin bnyk jumlh Scchromyces cerevisie mk jumlh sel Scchromyces cerevisie pd rgi tpe semkin besr dn seblikny semkin bnyk jumlh ure dn semkin bnyk jumlh Scchromyces cerevisie mk semkin rendh. Jumlh sel Scchromyces cerevisie terendh pd rgi tpe ini terdpt pd kode smpel 1 b 1, dimn konsentrsi ure 2,5 % dn Scchromyces cerevisie 0,5 ml memiliki jumlh sel Scchromyces cerevisie dengn nili rt-rt 5,67x10 9 sel/ml. Seblikny pd kode smpel 1 b 3, dimn konsentrsi ure 2,5 % dn Scchromyces cerevisie 1 ml memiliki jumlh sel Scchromyces cerevisie yng sngt tinggi dengn nili rt-rt 18x10 9 sel/ml. Hl ini didug kren pengruh sumber nitrogen untuk nutrisi mikrob yng digunkn berbed-bed dn jumlh Scchromyces cerevisie yng digunkn jug berbed-bed sehingg terliht perbedn yng signifikn. Nmun terdpt beberp yng tidk sesui dengn kesimpuln dits seperti kode 2 b 2, 3 b 2, dn

18 69 1 b 2 jumlhny kecil kren terdpt kontminn lin yng terdpt pd rgi tpe kode tersebut. Hl tersebut didug kren rung fermentsi yng digunkn terllu sedikit sehingg penyimpnn nmpn rgi tpe ditumpuk suhu dinmpn pling ts pns sehingg muncul mikroorgnisme lin. Selin itu dpt disebbkn oleh rung fementsi yng kurng steril. Perbedn jumlh konsentrsi ure sebgi sumber nitrogen dn jumlh Scchromyces cerevisie menunjukkn bhw hl tersebut dpt dijdikn fktor sutu produk rgi tpe menjdi bik tu bhkn menjdi tidk bik. Seperti pd kode smpel 3b3 yng bik jumlh khmir mupun ure memiliki hsil jumlh sel yng bik yitu sebesr 14,5 x 10 9 sel/ml. dpun beberp smpel yng menunjukkn hsil yng tidk dihrpkn. Hsil yng tidk sesui dpt terjdi kibt dri proses fermentsi yng kurng sempurn seperti suhu inkubsi. Menurut Hidyt (2000), Tpe yng dihsilkn setelh 45 jm dengn suhu ntr C mempunyi rs yng lebihh mnis dibndingkn pd suhu C pd fermentsi lebih 144 jm kndungn lkohol menjdi tinggi. Optimsi konsentrsi rgi dn lm inkubsi pd fermentsi tpe menunjukkn bhw kdr gul reduksi tpe tertinggi (14,59) jik digunkn konsentrsi rgi kurng dri 0,5 % dengn fermentsi mksimum 4 hri. Sedngkn menurut Menurut Sopndi, T., dn Wrdh (2014), khmir ts tumbuh sngt cept pd suhu 20 0 C sert memproduksi lkohol dn CO 2. Seblikny, khmir bwh tumbuh lebih bik pd suhu C tidk membentuk rumpun dn berd di bgin bwh medi.

19 70 Kenytnny di lpngn suhu yng digunkn tidk lebih dri 30 0 C kren dikhwtirkn kn menyebbkn Scchromyces cerevisie mti tu terllu cept tumbuh. Nmun pbil dihubungkn dengn du sumber dits tidk sepenuhny dpt dijdikn cun kren pd rgi tpe ini hny menggunkn stu jenis khmir sj yitu Scchromyces cerevisie murni. Scchromyces cerevisie ditumbuhkn dlm medi yng mengndung sumber nitrogen ure dengn konsentrsi yng berbed-bed. Meskipun demikin, Scchromyces cerevisie memiliki pol pertumbuhn yng sm. Selm fse dptsi, Scchromyces cerevisie tumbuh pd lju pertumbuhn spesifik mksimum (Stndbury dn Whitker, 1995). Setelh 22 jm wktu fermentsi, pertumbuhn muli memsuki fse stsioner. Pd fse stsioner, populsi sel mencpi mksimum dn tidk bertmbh lgi, nmun populsi msih ktif secr metbolik untuk memproduksi metbolit sekunder (Stndbury dn Whitker, 1995). Pd fermentsi di ts jm ke-48, kurv pertumbuhn cenderung meningkt. Kedn ini dpt dijelskn kren pd khir fermentsi, kultur sudh bnyk berkurng dn sel-sel yng mti cenderung mengendp sehingg ersi sedikit tergnggu. Hl ini dpt menyebbkn tidk homogenny kultur pd st pengmbiln smpel yng sngt mempengruhi pengukurn turbiditsny. Pengukurn pertumbuhn berdsrkn kekeruhn tu turbidits medi reltif cept dn mudh dilkukn, sert dpt digunkn untuk memperkirkn jumlh dn mss sel, tetpi tidk dpt membedkn sel yng hidup dn sel yng mti. Dengn demikin, fse kemtin yng ditndi dengn penurunn kurv pertumbuhn tidk terliht.

20 71 Rgi menghsilkn enzim pitse yng dpt melepskn iktn fospor dlm phitin, sehingg dengn ditmbhkn rgi tpe dlm rnsum kn menmbh ketersedin minerl (Widodo, 2011). Penjelsn lebih lnjut bhw rgi bersift ktbolik tu memech komponen yng kompleks menjdi zt yng lebih sederhn sehingg lebih mudh dicern. Khmir merupkn slh stu kelompok mikroorgnisme yng bnyk diteliti berkitn dengn kemmpunny memfermentsi gul (Gdd, 1998). Kemmpun khmir memfermentsi gul dpt ditentukn oleh dny sutu sistem trnsfor untuk gul dn sistem enzim yng dpt menghidrolisis gul dengn kseptor elektron lterntif selin oksigen, pd kondisi nerob fkulttif (Mot dkk., 2002). Gul-gul tersebut disimilsi mellui jlur glikolisis untuk menghsilkn sm piruvt. Asm piruvt dlm kondisi nerob kn menglmmi penngurn oleh piruvt dekrboksilse menjdi etnol dn nitrogen dioksid (Mdign dkk., 2002).

21 72 V KESIMPULAN DAN SARAN Bb ini mengurikn mengeni (5.1) Kesimpuln dn (5.2) Srn Kesimpuln Berdsrkn hsil penelitin pembutn rgi tpe dengn konsentrsi ure dn Scchromyces cerevisie terhdp pertumbuhn Scchromyces cerevisie dpt dimbil kesimpuln sebgi berikut: 1. Hsil penelitin pendhulun didptkn wktu pertumbuhn optimum pd jm ke-39 sebesr 17,4 x 10 6 sel/ml dn penmbhn sumber nitrogen terbik yitu konsentrsi ure 2,5%. 2. Konsentrsi ure berpengruh terhdp pertumbuhn Scchromyces cerevisie dlm pembutn rgi tpe dimn semkin sedikit jumlh ure yng diberikn mk semkin besr jumlh sel rginy. 3. Konsentrsi Scchromyces cerevisie berpengruh terhdp pertumbuhn Scchromyces cerevisie dlm pembutn rgi tpe dimn semkin besr jumlh Scchromyces cerevisie yng diberikn mk semkin besr jumlh sel rginy. 4. Interksi konsentrsi Scchromyces cerevisie dn konsentrsi ure berpengruh terhdp pertumbuhn Scchromyces cerevisie dlm pembutn rgi tpe sehingg dipilih kode 1 b 3 dengn nili ph 5, kdr gul reduksi 7,367% dn jumlh sel 18x10 9 sel/ml sebgi rgi tpe yng terbik dlm penelitin ini.

22 Srn 1. Perlu dilkukn penelitin lebih lnjut mengeni suhu fermentsi yng bik bgi khmir Scchromyces cerevisie terhdp rgi tpe yng ditmbhkn inokulum murni. 2. Perlu disedikn rungn yng khusus untuk penelitin mikrobiologi besert fsilits yng memdi seperti mikroskop yng lebih bik. Selin itu lbortorium sbikny dpt digunkn selm 24 jm untuk memntu pertumbuhn mikrob secr bik suhuny mupun kontminnny.