Sintasan ikan mas turunan ketiga pembawa marka Cyca-DAB1*05 ditantang dengan Aeromonas hydrophila

Transkripsi

1 Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) Artikel Orisinl Sintsn ikn ms turunn ketig pemw mrk Cyc-DAB1*5 ditntng dengn Aeromons hydrophil Survivl of common crp crrying Cyc-DAB1*5 post-chllenged with Aeromons hydrophil Lode uhmmd Arsl, unti Yuhn*, Sri uryti, Alimuddin Deprtemen Budidy Perirn, Fkults Periknn dn Ilmu Kelutn, Institut Pertnin Bogor Kmpus IPB Drmg Bogor, Jw Brt 1668 *Surel: ABSTRACT Blood prmeters re considered s importnt indictors to dignose fish helth sttus. This study ws performed to oserve lood profiles including totl erythrocytes, hemogloin concentrtion, hemtocrite, totl leukocytes nd differentil leukocytes, nd survivl of common crp Cyprinus crpio infected y Aeromons hydrophil. Fish were divided into two groups: the 3 rd genertion of common crp crrying fish crrying Cyc-DAB1*5 of mjor histocomptiility complex II moleculr mrker, nd fish without the mrker s control tretment. histocomptiility complex II moleculr mrker, nd fish without the mrker s control tretment. Common crp 3rd genertion ws produced y crossing mong second genertion of fish crrying the Cyc-DAB1*5 mrker. Ech fish ws injected intrmusculrly y.1 ml of 1 8 cfu/ml A. hydrophil. Chllenge test ws conducted for 14 dys nd lood ws collected t dy-, three, seven, nd 14. The results of this study showed tht erythrocytes, hemogloin nd hemtocrite concentrtions of common crp crrying the moleculr mrker t post chllenge with A. hydrophil were higher (P<.5) compred to control fish. The lood profiles were highly correlted to survivl of fish. Survivl of fish tht crrying the molekuler mrker ws out two point six fold higher thn those of control fish. Keywords: Cyprinus crpio, Aeromons hydrophil, Cyc-DAB1*5, moleculr mrker ABSTRAK Gmrn drh merupkn indiktor penting untuk mendignos penykit ikn. Penelitin ini dilkukn untuk meguji gmrn drh ikn ms Cyprinus crpio setelh diinfeksi dengn kteri Aeromons hydrophil yng meliputi totl sel drh merh, konsentrsi hemogloin, hemtokrit, totl sel drh putih, dn diferensil leukosit, sert sintsnny. Ikn ms yng digunkn terdiri ts ikn ms genersi ketig yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 dri kelompok mjor histocomptiility complex II dn ikn ms tnp mrk segi kontrol. Ikn ms genersi ketig merupkn keturunn persilngn ntrikn ms genersi kedu yng mempunyi mrk Cyc-DAB1*5. sing-msing ikn diinfeksikn A. hydrophil secr intrmuskuler pd dosis,1 ml, kepdtn 1 8 cfu/ml. Uji tntng dilkukn selm 14 hri, dn smpel drh ikn dimil pd hri ke-, tig, tujuh dn 14. Hsil uji tntng menunjukkn hw totl sel drh merh, konsentrsi hemogloin dn hemtokrit pd ikn ms yng memw mrk molekuler leih tinggi dindingkn ikn ms tnp mrk (P<,5). Hsil uji gmrn drh erkorelsi tinggi dengn tingkt kelngsungn hidup ikn ms. Tingkt kelngsungn hidup ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 leih tinggi hingg du kom enm kli dripd ikn ms kontrol. Kt kunci: Cyprinus crpio, Aeromons hydrophil, Cyc-DAB1*5, mrk molekuler PEDAHULUA Ikn ms (Cyprinus crpio) merupkn slh stu komodits udidy utm di Indonesi. Keutuhn psr yng tinggi diimngi dengn produksi ikn ms dlm jumlh esr mellui sistem udidy intensif dengn tingkt kepdtn tinggi. mun demikin, di lik keerhsiln terseut, msih terdpt fktor pemts dlm pelksnn udidy ikn ms erup serngn penykit, ik kteril mupun virl, yng jug merupkn slh stu permslhn utm. Angk kemtin kumultif yng terkit dengn wh penykit memerikn dmpk negtif yng esr

2 168 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) Persipn ikn uji Ikn yng digunkn dlm penelitin ini dlh ikn ms strin jly keturunn ketig (F3) yng memw mrk molekuler Cycpd kegitn industri udidy erup kerugin ekonomi (Gild et l., 23). Slh stu kteri yng sering menyerng ikn ms dlh Aeromons hydrophil. Gejl infeksi A. hydrophil meliputi pemengkkn jringn, perdrhn yng melus pd permukn kulit (hemorrhgic septicemi), nekrosis, luk pd kulit hingg luk teruk (ulcer) pd permukn tuuh tu hingg ke dlm jringn (u et l., 211; Pridgeon & Klesius, 211). Pd eerp jenis ikn lin sering ditemukn tnd klinis seperti kerontokn sirip punggung dn sirip ekor, sert pemengkkn pd gin perut dn erisi cirn (dropsy) yng diikuti dengn kemtin (Popm & sser, 1999). eskipun sering dinggp segi ptogen sekunder yng terkit dengn wh penykit, A. hydrophil jug is menjdi ptogen utm penye wh dengn ngk kemtin yng tinggi (Pridgeon et l., 211). Adny infeksi kn ditnggpi oleh sistem imun dengn mengktifkn kekeln tuuh wn (nonspesifik) segi perthnn dsr pertm pd infeksi. Respons imun wn pd ikn memiliki pernn yng sngt penting dlm hl perthnn menghdpi infeksi ptogen (Urie et l., 211). Sistem perthnn tuuh nonspesifik seperti sel-sel fgosit termsuk monosit dn neutrofil kn diktifkn ketik terjdi infeksi. Slh stu indiktor yng dpt diliht dri dny infeksi yitu peruhn terhdp profil gmrn drh. Drh ertindk segi gen trnsportsi internl dn meminkn pern penting dlm regulsi ktivits kehidupn. Drh ertnggung jw mengngkut oksigen, kron dioksid, nutrisi, mknn, hormon, dn jug terlit dlm produksi ntiodi. Gmrn drh merupkn fktor dignostik penting pd kedn ptologis (uryti et l., 26). Gmrn drh jug dpt dijdikn segi indiktor perthnn imun nonspesifik. Pengethun mengeni kondisi hemtologi, dlm hl ini pemeriksn komponen drh dpt digunkn untuk mengethui kondisi kesehtn ikn, mengevlusi perthnn nonspesifik pd spesies ikn yng ered, sert mengethui pengruh peruhn fisiologis terhdp kesehtn ikn (Stheeshkumr et l., 211). Oleh kren itu, penting untuk melkukn pengujin terhdp sistem perthnn nonspesifik pd ikn ms mellui pengmtn gmrn drh. St ini mjor histocomptiility complex (HC) merupkn mrk yng umum digunkn dlm studi mengeni huungn dy thn ikn terhdp sutu penykit. Hl ini didsrkn kren HC erpern penting dlm sistem imun. HC dikodekn oleh du sufmili utm, ykni HC kels I dn kels II yng erfungsi untuk mengikt dn menyjikn ntigen ke limfosit T mellui molekul CD8+ dn CD4+ (Rkus, 28). HC kels I dn kels II erpern dlm pengenln ergm ptogen, ntigen peptid sing dn erpern penting dlm respons imun, ik wn mupun dptif (Kles, 26). Ikn ms yng thn terhdp infeksi ptogen, yng termsuk HC kels II, dpt diidentifiksi mellui metode polymerse chin rection dengn primer yng didesin dri sekuen Cyc-DAB1*5 (Alimuddin et l., 211). St ini telh diproduksi ikn ms strin jly genersi ketig (F3) di Bli Besr Periknn Budidy Air Twr Sukumi, yng memw mrk molekuler HC II. Ikn ms F3 terseut merupkn hsil pemijhn ikn F2 jntn dn F2 etin yng thn penykit dn jug memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5. Dy thn terhdp ptogen dn korelsiny dengn gmrn drh perlu diuji seelum ikn terseut dpt dirilis ke pemudidy. Penelitin ini ertujun untuk menguji pengruh infeksi kteri A. hydrophil pd ikn ms F3 yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 terhdp gmrn drh segi respresentsi tnggp kel ikn ms sert pengruhny terhdp tingkt kelngsungn hidup ikn ms pscinfeksi. BAHA DA ETODE Preprsi kteri Bkteri uji A. hydrophil yng digunkn ersl dri Lortorium Kesehtn Ikn (LKI) Deprtemen BDP, FPIK-IPB. Bkteri A. hydrophil ditumuhkn pd medi tripticse soy gr (TSA), kemudin diinkusi selm jm pd suhu C pd medi TSA miring di dlm tung reksi. Bikn A. hydrophil dimil menggunkn jrum Ose smpi memenuhi lingkrn jrum, kemudin dilrutkn dlm medi tripticse soy roth (TSB) dn diinkusi selm jm dlm wterth. Bkteri hsil inkusi selnjutny digunkn dlm uji tntng.

3 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) 169 DAB1*5 dri Bli Besr Periknn Budidy Air Twr (BBPBAT) Sukumi, dn ikn ms strin jly yng tidk memw mrk dri pemudidy di wilyh Bogor. Ikn ms F3 terseut diklimtissi selm du minggu dlm wdh kurium erukurn 1x1x6 cm 3 senyk enm uh, dn setip kurium diisi senyk 3 ekor ikn ms dengn oot 1 15 g. Ikn ms terseut digunkn dlm uji tntng dengn A. hydrophil untuk mengevlusi gmrn drh dn tingkt kelngsungn hidup ikn uji pscinfeksi. Penentun LD-5 Penentun LD-5 ini ertujun untuk mendptkn konsentrsi kteri yng dpt menyekn kemtin senyk 5% pd ikn uji setelh proses infeksi mellui metode penyuntikn. Ikn disuntik secr intrmuskuler menggunkn kteri A. hydrophil senyk,1 ml dengn konsentrsi 1 8 cfu/ml, 1 7 cfu/ ml, 1 6 cfu/ml, 1 5 cfu/ml, 1 4 cfu/ml, dn 1 3 cfu/ml, senyk sepuluh ekor untuk setip perlkun. Hsil dri uji LD-5 menunjukkn hw dosis yng dpt memunuh ikn ms sekitr 5% dlh konsentrsi 1 8 cfu/ml. Hsil uji LD-5 selnjutny digunkn untuk penyuntikn ikn pd st uji tntng. Uji tntng Uji tntng dilkukn dengn menginjeksi kteri A. hydrophil dengn dosis,1 ml senyk 1 8 cfu/ml per ekor ikn. Perlkun yng digunkn yitu uji tntng kteri A. hydrophil pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5, dn uji tntng kteri A. hydrophil pd ikn ms yng tidk mempunyi mrk (kontrol positif), sert ikn ms yng tidk mempunyi mrk yng disuntik dengn PBS (kontrol negtif). sing-msing perlkun terdiri ts tig ulngn. Pengmiln smpel drh Smpling dilkukn pd hri ke-, tig, tujuh, dn 14 pscinfeksi untuk pengmtn gmrn drh. Setip kli smpling, tig ekor ikn dimil dri setip perlkun. Ikn yng telh dimil drhny dipishkn pd kurium yng ered untuk mencegh kemungkinn termil kemli st pengmtn pd hri erikutny. Seelum pengmiln drh dilkukn, ikn terleih dhulu diius menggunkn Arown stilizer dengn cr mencmpurkn 1 ml Arown stilizer ke dlm 1 L ir, kemudin ikn ms dimsukkn ke dlm wdh terseut. Setelh itu, dilkukn pengmiln smpel drh. Pengmiln drh dilkukn pd pemuluh ven kudlis (ven ekor) menggunkn syringe. Drh dihisp smpi ts yng diinginkn. Drh yng termil dieri ntikoguln dengn perndingn 1:4 dengn jumlh drh yng dimil. Selnjutny, dilkukn pengmtn terhdp prmeter gmrn drh ikn uji. Prmeter uji Prmeter uji yng dimti dlm penelitin ini meliputi jumlh totl sel drh merh, totl sel drh putih, hemogloin, hemtokrit, diferensil leukosit, dn tingkt kelngsungn hidup ikn uji pscinfeksi A. hydrophil. Totl sel drh merh Drh dihisp dengn pipet yng erisi ulir pengduk wrn merh smpi skl,5. Llu ditmhkn lrutn Hyem s (erfungsi untuk melisis sel-sel drh putih) smpi skl 11, pengdukn drh di dlm pipet dilkukn dengn mengyunkn tngn yng memegng pipet seperti mementuk ngk delpn selm tig hingg lim menit sehingg drh tercmpur rt. Setelh itu tetesn pertm lrutn drh dlm pipet diung, selnjutny tetesn erikutny diteteskn pd hemositometer tipe euuer kemudin ditutup dengn gels penutup. Jumlh sel drh merh dihitung dengn ntun mikroskop dengn peresrn 4 kli. Jumlh totl sel drh dihitung pd lim kotk kecil hemositometer, dn jumlhny dihitung dengn rumus (Blxhll & Disley, 1973): SD = (A/) x (1/V) x Fp Keterngn: SD = jumlh sel drh merh A = jumlh sel drh merh terhitung = jumlh kotk hemositometer yng dimti V = volume kotk hemositometer yng dimti Fp = fktor pengencern Kdr hemogloin Kdr hemogloin (H) diukur menurut metode Shli yitu dengn mengisi tung Shlinometer dengn lrutn HCl,1 smpi gris skl pling wh (skl 1), kemudin ditemptkn di ntr du tung dengn wrn stndr. Drh ikn dri tung Eppendorf dimil dengn pipet Shli senyk

4 17 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214),2 ml dn dimsukkn ke tung Shli dn didimkn selm tig menit, seelumny ujung pipet diersihkn terleih dhulu. Kemudin ditmhkn kudes dengn pipet tetes sedikit demi sedikit dn diduk smpi eruh wrn tept sm dengn wrn stndr yng d dlm H meter terseut. Skl dic dengn meliht permukn cirn dn dicocokkn dengn skl tung Shli yng diliht pd skl jlur g% (kuning) yng errti nykny hemogloin dlm grm per 1 ml drh. Kdr hemtokrit Kdr hemtokrit (Ht) diukur dengn memsukkn smpel drh ke dlm tung mikrohemtokrit smpi 2/3 gin tung, ujung tung disumt dengn cretocel dn disentrifugsi selm tig menit dengn keceptn 8. rpm. Drh dihisp dengn tung mikrohemtokrit smpi mencpi ¾ gin tung. Kemudin ujung tung ditutup dengn cretocel sedlm 1 mm. Llu tung mikrohemtokrit disentrifius pd keceptn 5. rpm selm lim menit dengn posisi tung yng ervolume sm erhdpn gr putrn sentrifugsi seimng. ili kdr hemtokrit ditentukn dengn persentse pnjng gin drh yng mengendp () sert pnjng totl volume drh yng terdpt di dlm tung (): (/) x 1. Kdr hemtokrit dinytkn segi % volume pdtn sel drh. Kdr hemtokrit mencerminkn nykny sel drh (digmrkn dengn endpn/pdtn) dlm cirn drh. Totl sel drh putih Penghitungn totl sel drh putih dilkukn dengn cr mengencerkn drh terleih dhulu dengn menggunkn lrutn Turk s. Penmhn lrutn Turk s yng ersift sm kn menyekn sel drh merh menglmi lisis sehingg yng tertinggl hny sel drh putih sj. Pencmpurn dilkukn di dlm pipet pencmpur erskl mksimum 11. Pipet ini erisi ulir putih erfungsi segi pengduk. Sel drh putih dihitung dengn cr drh dihisp dengn pipet pencmpur smpi skl,5 dn selnjutny ditmhkn dengn lrutn Turk s. Pipet digoyng mementuk ngk delpn selm tig hingg lim menit gr drh tercmpur rt. Seelum dilkukn penghitungn, du tetes pertm dri cmpurn terseut diung dn tetesn selnjutny diteteskn pd hemositometer tipe euuer dn ditutup dengn gels penutup. Jumlh sel drh putih dihitung dengn ntun mikroskop pd pemesrn 4 kli. Penghitungn dilkukn pd kotk esr hemositometer dengn rumus segi erikut (Blxhll & Disley, 1973). SDP = (A/) x (1/V) x Fp Keterngn: SDP = jumlh sel drh putih A = jumlh sel drh putih terhitung = jumlh kotk hemositometer yng dimti V = volume kotk hemositometer yng dimti Fp = fktor pengencern Diferensil leukosit Drh diteteskn pd gels ojek. Selnjutny gels ojek yng lin diletkkn di ts tetesn drh smpi mementuk sudut sekitr 3 o, llu ditrik smpi drh menyer sepnjng tepi gels ojek pertm. Setelh itu ulsn drh dikeringudrkn, llu direndm dlm lrutn Giems (1:2) selm 15 2 menit. Selnjutny smpel diils kudes dn dimti menggunkn mikroskop (Blxhll & Disley, 1973). Kelngsungn hidup Kemtin ikn dictt setip hri setelh diinfeksi. Tingkt kelngsungn hidup (KH) dihitung msing-msing perlkun. Perhitungn dilkukn erdsrkn persmn: kelngsungn hidup (KH) = (jumlh totl ikn khir / jumlh totl ikn wl) x 1. Gejl klinis Pengmtn terhdp gejl klinis dilkukn secr deskriptif selm 14 hri pscinfeksi A. hydrophil, meliputi hiperemi, rdng, hemorgi, nekrosis, dn tukk. Ikn yng menunjukkn gejl klinis infeksi A. hydrophil dipishkn untuk mempermudh pengmtn proses recovery. Anlisis dt Dt gmrn drh dn tingkt kelngsungn hidup yng diperoleh dinlisis menggunkn softwre SPSS 13 dn ditmpilkn dlm entuk tel tu gmr. Dt terseut dinlisis dengn cr memndingkn setip prmeter yng sm, pd wktu pengmtn yng sm, ntr ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc- DAB1*5 dengn ikn ms tnp mrk.

5 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) 171 HASIL DA PEBAHSA Hsil Gmrn drh Pengmtn terhdp totl sel drh merh (Gmr 1) menunjukkn hw ntr ikn yng memw mrk molekuler dn ikn ms tnp mrk secr sttistik tidk ered nyt (P>,5). Sel drh merh totl ikn ms yng memw mrk molekuler pd hri ke- erd pd nili 1,56±,2 x1 6 sel/mm 3, sedngkn ikn ms tnp mrk seesr 1,16±,47 x1 6 sel/mm 3. Pd hri ketig sel drh merh totl menurun, ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn tnp mrk. Sel drh merh totl ikn ms yng memw mrk molekuler 1,38±,21 x1 6 sel/mm 3, dn ikn ms tnp mrk seesr,85±,3 x1 6 sel/mm 3. Hri ketujuh, jumlh sel drh merh totl menurun, pd ikn yng memw mrk molekuler 1,14±,26 x1 6 sel/mm 3, dn pd ikn ms tnp mrk,76±,22 x1 6 sel/mm 3. Pd pengmtn hri ke-14 menunjukkn peningktn sel drh merh totl, ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk. Sel drh merh totl ikn ms yng memw mrk molekuler seesr 1,17±,6 x1 6 sel/mm 3, sedngkn pd ikn ms tnp mrk seesr,9±,19 x1 6 sel/mm 3. Hemogloin pd ikn ms (Gmr 2) yng memw mrk molekuler pd hri ke- (7,77±,15 g%) dn hri ketig (7,2±,53 g%) dlh sm, dn kedu-duny leih tinggi (P<,5) dinding ikn ms tnp mrk (hri ke-: 5,7±,6 g%; hri ketig: 5,6±,2 g%;). Hsil uji sttistik menunjukkn hw nili hemogloin pd hri ketig pscinfeksi, ered nyt ntr ikn ms yng memw mrk molekuler dn ikn ms tnp mrk. Hri ketujuh kemli terjdi penurunn nili hemogloin, 6,±1,44 g% (ikn ms yng memw mrk molekuler), 3,93±1,3 g% (ikn ms tnp mrk). Pengmtn hri ke-14 menunjukkn terjdiny peningktn kdr hemogloin pd ikn ms yng memw mrk molekuler seesr 7,13±1,1 g%. Demikin hlny pd ikn ms tnp mrk, terjdi peningktn kdr hemogloin seesr 4,93±,64 g%. Hsil uji sttistik pd nili hemtokrit (Gmr 3) tidk ered nyt ntr ikn ms yng memw mrk molekuler dengn ikn tnp mrk. ili hemtokrit hri ke- pd ikn ms yng memw mrk molekuler seesr 3,4±2,86%, sedngkn pd ikn ms tnp mrk seesr 38,4±6,41%. Pd hri ketig terjdi penurunn nili hemtokrit, ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun pd ikn ms tnp mrk. Pd ikn ms yng memw mrk molekuler seesr 27,55±4,57%, sedngkn ikn ms tnp mrk seesr 24,11±5,48%. Pengmtn hri ketujuh msih menunjukkn penurunn nili hemtokrit pd ikn ms yng memw mrk molekuler, dengn nili seesr 19,69±8,3%. Penurunn nili hemtokrit jug terjdi pd ikn ms tnp mrk, 16,36±4,28%. Hri ke- 14, terjdi peningktn kdr hemtokrit pd ikn ms yng memw mrk molekuler dengn nili 23,52±5,2%. Akn tetpi, pd ikn ms yng tidk memiliki mrk, penurunn kdr hemtokrit msih terjdi dengn nili 14,32±3,99%. Totl sel drh putih ikn ms (Gmr 4) yng memw mrk molekuler pd hri ke- seesr 5,75±,66 x1 4 sel/mm 3 leih tinggi (P<,5) dripd ikn ms tnp mrk seesr 4,5±,25 x1 4 sel/mm 3. Selnjutny, totl sel drh putih ikn ms memw mrk cenderung meningkt hingg hri ketujuh, kemudin menurun pd hri ke-14. Hsil uji sttistik menunjukkn pd hri ketujuh pscinfeksi, totl sel drh putih pd ikn ms yng memw mrk molekuler ered nyt terhdp ikn ms tnp mrk. Pd pengmtn hri ke-14 totl sel drh putih menurun, ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk. Pengmtn terhdp prmeter diferensil leukosit meliputi persentse limfosit, monosit dn neutrofil menunjukkn hsil yng ered nyt pd limfosit (Gmr 5) dn monosit (Gmr 6) pd hri ketig pscinfeksi, sedngkn pd neutrofil tidk menunjukkn hsil yng ered nyt selm ms infeksi. Pd hri ke- persentse limfosit, monosit dn neutrofil pd ikn uji yng memw mrk molekuler secr erurutn 97,67±1,15%; 1,33±1,53%; 1±1% sedngkn pd ikn ms tnp mrk dlh 95,67%±,58; 1,67±,58%; 2,67±1,15% (Gmr 5, 6, dn 7). Pd hri ketig pscinfeksi, peningktn persentse monosit ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk terjdi, dn ered nyt secr sttistik (P<,5). Persentse neutrofil jug menglmi peningktn ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk, nmun tidk ered nyt (P>,5). Pd ikn ms yng memw mrk

6 172 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) Sel Drh erh (x1 6 sel/mm 3 ) 2. 2, 1.6 1, ,2.8,8.4,4 Hemogloin (g%) , H H3 H7 H14 H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) Wktu (hri ke-) Gmr 1. Totl sel drh merh ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). Gmr 2. Kdr hemogloin ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). Hemtokrit (%) Sel Drh Putih (x1 4 sel /mm 3 ) H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) Gmr 3. ili hemtokrit ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). molekuler persentse monosit dn neutrofil seesr 6,33±,58%; 12±3%; dn pd ikn ms tnp mrk 1,67±1,15%; 17,67±2,52%. Selikny, persentse limfosit menurun di hri ketig pscinfeksi, dn ered nyt secr sttistik (P<,5). Pd ikn ms yng memw mrk molekuler 81,67±3,6%, dn pd ikn ms tnp mrk 71,67±2,52%. Pd hri ketujuh pscinfeksi, persentse monosit dn neutrofil kemli meningkt. Pd ikn ms yng memw mrk molekuler persentse sel monosit dn neutrofil seesr 23,33±,58%; 27,67±1,15%; dn pd ikn ms tnp mrk 21,33±3,6%; 22,33±4,16% (secr sttistik tidk ered nyt). Persentse limfosit kemli menurun (tidk ered nyt secr sttistik), pd ikn ms yng memw mrk molekuler persentse limfosit seesr 49±1%, Gmr 4. Totl sel drh putih ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*6 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). dn pd ikn ms tnp mrk 56,33±6,11%. Pd hri ke-14 pscinfeksi, terjdi penurunn persentse monosit dn neutrofil. eskipun menglmi penurunn, nmun secr sttistik persentse monosit dn neutrofil ntr ikn yng mempunyi mrk dengn yng tnp mrk pd hri pengmtn yng sm tidk ered nyt (P>,5). Pd ikn ms yng memw mrk molekuler persentse monosit dn neutrofil secr erurutn yitu 19±1% dn 2,±1,73%. Pd ikn ms tnp mrk 19±2% dn 19,33±1,53%. Selikny, persentse limfosit meningkt ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk, nmun tidk ered nyt secr sttistik. Pd ikn ms yng memw mrk molekuler persentse limfosit seesr 61,±2,%, dn pd ikn ms tnp mrk 61,67±1,53%.

7 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) 173 Kelngsungn hidup Persentse kelngsungn hidup ikn ms (Gmr 8) yng memw mrk molekuler mencpi 37,78±5,9%, sedngkn pd ikn ms tnp mrk seesr 14,45±3,85% pd khir percon (hri ke-14). Hsil uji sttistik menunjukkn tingkt kelngsungn hidup ikn ms yng memw mrk molekuler ered nyt (P<,5) terhdp ikn ms tnp mrk (Gmr 9). Pemhsn Berdsrkn hsil pengmtn terhdp seluruh spek gmrn drh pd hri ke-, tidk d peredn nyt secr sttistik ntr ikn ms yng memw mrk molekuler dengn ikn ms tnp mrk, keculi pd hemogloin dn totl sel drh putih. Pd ikn seht jumlh sel drh putih umumny leih rendh dindingkn sel drh merh. Tingginy jumlh sel drh merh diikuti oleh tingginy persentse hemtokrit dn hemogloin. Adny peredn pd hri ke- terseut didug kren mrk Cyc-DAB1*5 yng diw oleh ikn ms, sehingg ikn ms yng memw mrk memiliki kesipn imunits yng leih ik dripd ikn ms tnp mrk. Hsil pemeriksn gmrn drh hri ketig menunjukkn dny penurunn jumlh sel drh merh, hemogloin dn hemtokrit ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk. Penurunn jumlh sel drh merh, hemogloin dn hemtokrit terseut terjdi kit dny infeksi oleh A. hydrophil. enurut Bilone et l., (21), terjdiny penurunn jumlh sel drh Limfosit (%) onosit (%) H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) Gmr 5. Persentse limfosit pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). Gmr 6. Persentse monosit pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). eutrofil (%) Kelngsungn Hidup (%) H H3 H7 H14 Wktu (hri ke-) Wktu (hri ke-) Gmr 7. Persentse neutrofil pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pscinfeksi Aeromons hydrophil. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). Gmr 8. Kurv kelngsungn hidup ikn ms selm percon yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk ().

8 174 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) Kelngsungn Hidup (%) Perlkun Gmr 9. Kelngsungn hidup ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 () dn tnp mrk () pd khir uji tntng. Huruf yng ered pd gin ts gris simpngn ku menunjukkn hsil yng ered nyt (P<,5). merh dn kdr hemogloin dpt disekn oleh infeksi gen kteri. Cook et l. (211) menytkn hw nili hemtokrit di wh 3 % menunjukkn defisiensi sel drh merh. Selin itu, kemmpun kteri A. hydrophil dlm menghsilkn eksotoksin yng dpt melisis sel drh merh menjdi slh stu fktor penye menurunny sel drh totl. Rey et l. (29), menytkn hw kteri A. hydrophil menghsilkn eksotoksin erup hemolisin yitu enzim yng mmpu melisiskn sel-sel drh merh dn memeskn hemogloinny. Selikny, jumlh sel drh putih ikn menglmi peningktn pd hri ketig pscinfeksi. eningktny jumlh sel drh putih segi respons perthnn tuuh ikn untuk melwn infeksi yng disekn oleh A. hydrophil. Sel drh putih merupkn slh stu komponen drh yng ktif di dlm sistem perthnn tuuh dn erfungsi segi perthnn nonspesifik yng dpt menghncurkn ptogen mellui proses fgositosis. enurut Priytn et l. (211), peningktn jumlh sel drh putih (leukosit) dpt dijdikn petunjuk dny fse pertm infeksi mupun stres. Peningktn jumlh sel drh putih disekn oleh peningktn ktivits pemelhn sel drh putih, kren sel drh putih erpern dlm mengeliminsi ptogen yng msuk ke tuuh mellui proses fgositosis. Sel drh putih meminkn pernn penting pd ikn dn terlit dlm sistem perthnn tuuh orgnisme di wh eerp kondisi seperti stres, perdngn, dn serngn prsit (Silveir- Coffigni et l., 24; Azevedo et l., 26 rtins et l., 26; Dneshvr et l., 212). Pd hri ketujuh pscinfeksi, elum ditemukn peningktn pd sel drh merh totl, hemogloin dn hemtokrit. Selikny, jumlh sel drh putih, monosit dn neutrofil mencpi nili yng tertinggi (Gmr 6 dn 7). Peningktn ini didug kren meningktny respons imun nonspesifik dlm melwn infeksi yng disekn oleh A. hydrophil. Lorenzen dn L Ptr (25), menytkn hw proteksi dri sistem imun nonspesifik ekerj pd stdi wl infeksi ntr hri keempt smpi hri ke-8. Peningktn jumlh monosit dn neutrofil terseut didug segi respons sistem imun nonspesifik dlm melwn sert mengeliminsi ptogen. onosit dn neutrofil erpern segi sel fgosit (APC) yng dpt menghncurkn ptogen. enurut Ardó (21), sel fgosit merupkn komponen seluler yng pling penting dri sistem kekeln tuuh wn ikn. Aktivits fgositosis merupkn meknisme perthnn primordil dn krkteristik penting dri sistem kekeln tuuh nonspesifik. Antigen yng telh diproses oleh sel-sel fgosit kemudin dipresentsikn oleh molekul HC II kepd sel T, untuk diproses (dikenli) hingg terentuk ntiodi (imunits spesifik). Pd hri ke-14, jumlh sel drh putih menurun seiring dengn menurunny persentse monosit dn neutrofil. Penurunn terseut didug disekn muli menurunny ktivits imun nonspesifik psc hri ketujuh, dn pernny digntikn oleh imunits spesifik (ntiodi). Antiodi terentuk pscpresentsi ntigen sing mellui molekul yng terdpt pd sel-sel ntigen presenting cells (APC) yitu mkrofg, selnjutny kn memeri sinyl kepd limfosit B untuk melkukn prolifersi dn menghsilkn ntiodi. enurut Kollner et l. (22), ntiodi diproduksi oleh limfosit B setelh distimulsi oleh peptid ntigen yng dipresentsikn mellui molekul HC II yng terdpt pd sel-sel APC. Antiodi yng terentuk kn merngsng sel-sel fgosit untuk menghncurkn ptogen sing yng menginfeksi. olekul HC kels II menyjikn peptid ptogen dn menstimulus limfosit B untuk memproduksi ntiodi, yng mengktivsi sel fgositik, dn ktivsi sift imunologi yng terlit dlm eliminsi prsit dn kteri sert netrlissi virus (Wegner, 28; ouln et l., 28; Rkus et l., 29). Eliminsi ptogen yng dilkukn oleh sistem imun selnjutny erpengruh terhdp peningktn lju penutupn luk (recovery). Proses pemulihn muli terliht ntr hri ketujuh dn kedelpn, yng ditndi

9 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) 175 dengn erkurngny gejl klinis pscinfeksi sert terentukny jringn ru pd gin luk, muli terjdi peningktn jumlh eritrosit, hemogloin dn hemtokrit pd ikn ms yng memw mrk molekuler. Akn tetpi, pd ikn ms tnp mrk hny jumlh eritrosit dn hemogloin sj yng meningkt. Hemtokrit pd ikn ms tnp mrk msih leih rendh dindingkn hri ketujuh. Hl ini didug kit ukurn ikn yng dimti pd hri ke- 14 leih kecil dindingkn pd hri ketujuh. Peningktn jumlh eritrosit, hemogloin dn hemtokrit terseut mengindiksikn hw sistem perthnn spesifik ikn muli ekerj. Secr umum gejl klinis yng terliht pd ikn ms yng terinfeksi A. hydrophil dimuli dengn timulny hiperemi (wrn kemerhn) di sekitr loksi penyuntikn. Gejl klinis terliht ik pd ikn ms memw mrk mupun tnp mrk. Hiperemi ini diwli dengn pemengkkn pd hri pertm pscinfeksi yng kemudin diikuti dengn perdngn dn hemorgi, llu erkemng menjdi nekrosis (keruskn jringn) dn khirny menjdi tukk/ ulcer (Gmr 1). Kemtin ikn terjdi stu hri pscinfeksi, st thp perdngn dn thp nekrosis hingg menjdi tukk. Hri pertm pscinfeksi terliht dny perdngn pd segin esr ikn ik ikn ms yng memw mrk molekuler mupun ikn ms tnp mrk di gin loksi penyuntikn, penurunn nfsu mkn, dny hemorgi pd derh sekitr loksi penyuntikn, sert tingkt kemtin pd ikn ms tnp mrk mencpi 73% dn pd ikn ms dengn mrk molekuler seesr 62%. Pd hri kedu, pergerkn renng kurng ktif, nekrosis pd gin yng menglmi perdngn, ikn yng skit leih nyk erenng di dsr kurium, sert kemtin eerp ekor ikn. Enzim eksotoksin dri A. hydrophil seperti protese dn elstse didug menyekn keruskn pd permukn tuuh ikn ms yng terinfeksi, kren pd jringn otot dn slurn pemuluh drh terdpt nyk kndungn protein. Ketik terjdi keruskn pd pemuluh drh kit eksotoksin, mk drh kn kelur dri pemuluh drh dn menyekn hemorgi pd permukn tuuh. Efek dri eksotoksin yng erkelnjutn kn meningktkn kemtin sel pd jringn otot sehingg menyekn nekrosis pd permukn tuuh (Gmr 1). Pengmtn gejl klinis menunjukkn di hri ketig, terdpt luk teruk (tukk/ulcer) pd derh sekitr loksi penyuntikn yng diikuti dengn hemorgi. Hri kelim, kemtin eerp ekor ikn khususny ikn ms yng memw mrk molekuler, sedngkn pd ikn ms tnp mrk tidk ditemukn ikn yng mti. Pd hri kelim ikn ms yng memw mrk molekuler muli menunjukkn proses penutupn luk yng ditndi dengn hilngny gin nekrosis sert erkurngny hemorgi di sekitr luk. Pd ikn ms tnp mrk msih elum menunjukkn tnd-tnd penutupn luk seperti hlny pd ikn ms yng mempunyi mrk molekuler. Adny penutupn luk terseut disekn kren muli ekerjny sistem imun khususny imunits nonspesifik pd ikn. Lorenzen dn L Ptr (25), menytkn hw proteksi dri sistem imun nonspesifik ekerj pd stdi wl infeksi ntr hri keempt smpi hri kedelpn. Pd hri ketujuh dn kedelpn, luk pd ikn muli menglmi proses pemulihn, terutm pd ikn ms yng memw mrk molekuler, tetpi tidk dilkukn penghitungn jumlh individu dn keceptn pemulihn. Adny proses penyemuhn luk terseut ditndi dengn hilngny hemorgi yng terdpt disekitr luk, sert muli terentukny jringn ru pd luk. Sedngkn pd ikn ms tnp mrk molekuler proses penyemuhn luk ru terjdi pd hri kesemiln, dengn ciri-ciri yng sm pd ikn ms yng memw mrk molekuler. Peredn keceptn pemulihn luk terseut didug kren ikn ms yng mempunyi mrk molekuler terseut memiliki keceptn regenersi sel yng leih tinggi dindingkn ikn ms tnp mrk (Gmr 11). Keceptn regenersi sel sngt ditentukn oleh tingkt imunits ikn terhdp infeksi ptogen. Kemmpun sistem imun pd ikn ms yng memw mrk molekuler dlm mempresentsikn peptid sing juh leih ik sehingg erdmpk pd peningktn kemmpun tuuh untuk memproduksi ntiodi sehingg mmpu menetrlisir dn memunuh ntigen dn mempercept lju penutupn luk. enurut Kollner et l., (22), ntigen spesifik ntiodi disekresikn oleh limfosit B setelh presentsi peptid ntigen sing oleh mkrofg mellui molekul HC kels II. Tingkt kelngsungn hidup ikn ms pd khir pengmtn menunjukkn peredn yng sngt signifikn ntr ikn ms yng memw mrk molekuler dengn ikn ms tnp mrk (Gmr 9). Secr sttistik, tingkt kelngsungn hidup ikn ms yng memw mrk molekuler ered nyt dengn ikn ms

10 176 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) tnp mrk. Rendhny kelngsungn hidup ikn tnp mrk didug kren selm ms infeksi kemmpun ikn dlm memproduksi ntiodi sngt rendh, sehingg ikn leih nyk mengndlkn pd kemmpun imunits wn (imun nonspesifik) untuk melwn infeksi ptogen. Hl ered terjdi pd ikn ms yng memw mrk molekuler. Ikn dengn mrk molekuler memiliki tingkt kelngsungn hidup du kli leih ik. Hl ini didug kren mrk molekuler yng terdpt pd ikn ms terseut mmpu menstimulsi kekeln tuuh khususny untuk memproduksi ntiodi mellui limfosit B, sehingg erdmpk pd peningktn dy thn tuuh dlm mennggpi dny infeksi oleh ptogen. Limfosit dlh sel drh yng ertnggung jw untuk produksi ntiodi terhdp infeksi kteril mupun virl. Perer dn Pthirtne (28) menytkn fungsi utm dri limfosit ikn ertindk segi sel-sel sistem kekeln tuuh spesifik mellui produksi ntiodi. Antiodi yng dihsilkn terseut selnjutny kn merngsng sel-sel fgosit dlm proses fgositosis. Terentukny ntiodi spesifik dimuli dri msukny sutu ntigen ke dlm tuuh ikn, kemudin ntigen terseut difgosit oleh mkrofg. Selnjutny mkrofg mengirim pesn ke limfosit sehingg memerikn respons mellui polifersi dn memproduksi ntiodi yng spesifik sesui dengn ntigen yng memerikn rngsngn. Sistem perthnn terseut dismping menghncurkn ptogen jug kn mengktifkn sistem memori, sehingg pil d serngn kemli oleh ptogen yng sm kn direspons leih cept dri serngn pertm. Gmr 1. Gejl klinis pscinfeksi dengn Aeromons hydrophil ik pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 mupun tnp mrk (A dn B: rdng pd loksi suntik + hemorgi; C: nekrosis/keruskn jringn; D: tukk/ulcer). () (d) () (e) Gmr 11. Proses penutupn luk pd ikn ms yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 pscinfeksi dengn Aeromons hydrophil. () tukk/ulcer + hemorgi, () tukk tnp hemorgi, (c) terentukny jringn ru, (d) luk muli menutup, (e) luk hmpir menutup seluruhny. Tnd pnh menunjukkn gin yng menglmi proses recovery. KESIPULA (c) Berdsrkn hsil nlisis gmrn drh pscinfeksi A. hydrophil, ikn ms F3 yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 memiliki respons imun dn tingkt kelngsungn hidup yng leih ik dindingkn ikn ms tnp mrk. DAFTAR PUSTAKA Alimuddin, uinun, Sntik A, Crmn O, I. Fizl I, Sumntdint K Identifiction of jly common crp strin resistnt to KHV infection using Cyc-DAB1*5 llele s the mrker. Indonesin Aquculture Journl 6: Ardó L, Jeney Z, Adms A, Jeney G. 21. Immune responses of resistnt nd sensitive common crp fmilies following experimentl chllenge with Aeromons hydrophil. Fish nd Shellfish Immunology 29: Azevedo TP, rtins L, Bozzo FR, ores FR. 26. Hemtologicl nd gill responses in prsitized tilpi from Vlley of Tijucs River, SC, Brzil. Scienti Agricol 63: Bilone RL, rtins L, ouriño JLP, Vieir F, Pedrotti FS, unes GC, Silv BC. 21. Hemtology nd gglutintion titer fter polyvlent immuniztion nd susequent chllenge with Aeromons hydrophil in ile tilpi Oreochromis niloticus. Archivos de edicin Veterinri 42: Blxhll PC, Disley KW Routine hemtologycl methods for use with fish

11 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) 177 lood. Journl of Fish Biology 5: Cook DG, Wells RG, Herert A Anemi djusts the eroic physiology of snpper Pgrus urtus nd modultes hypoxi voidnce ehviour during oxygen choice presenttions. The Journl of Experimentl Biology 214: Dneshvr E, Ardestni Y, Dorfshn S, rtins C Hemtologicl prmeters of Irnin cichlid Irnocichl hormuzensis Cod, 1982 (Perciformes) in ehrn River. Anis d Acdemi Brsileir de Ciêncis 84: Fridh, Sntik A, Sucipto A, Ynti DH, Ciptoroso, Alimuddin Dy thn ikn ms jly keturunn kedu yng memw mrk molekuler Cyc-DAB1*5 terhdp infeksi Aeromons hydrophil dn KHV. Seminr sionl Bioteknologi Akukultur, IICC IPB Bogor. 11 Septemer 214. Gild O, Yun S, Adkison A, Wy K, Willits H, Bercovier H, Hedrick RP. 23. oleculr comprison of isoltes of n emerging fish pthogen, koi herpesvirus, nd the effect of wter temperture on mortlity of experimentlly infected koi. Journl of Generl Virology 84: Kollner B, Wsserr B, Kotter G, Fischer U. 22. Evlution of immune functions of rinow trout Oncorhynchus mykiss: how cn environmentl influences e detected? Toxicology Letters 131: Lorenzen, L Ptr SE. 25. DA vccine for quculture fish. Revue scientifique et technique (Interntionl Office of Epizootics) 24: rtins L, Tvres-Dis, Fujimoto RY, Onk E, omur DT. 24. Hemtologicl ltertions of Leporinus mcrocephlus (Osteichtyes: Anostomide) nturlly infected y Goezi leporini (emtod: Aniskide) in fish pond. Arquivo Brsileiro de edicin Veterinári e Zootecni (Brzilin Journl of Veterinry nd Animl Science) 56: ouln, Evenhuis J, Alertino, Godwin U, Kountikov EI, Stuge TB, Wilson, Bengten E, iller W, c Connell TJ. 28. Chrcteriztion of nti-chnnel ctfish HC clss IIβ monoclonl ntiodies. Veterinry Immunology nd Immunopthology 44: u X, Pridgeon JW, Klesius PH Trnscriptionl profiles of multiple genes in the nterior kidney of Chnnel ctfish vccinted with n ttenuted Aeromons hydrophil. Fish nd Shellfish Immunology 31: uryti S, Kuswrdni Y, Hdiroseyni Y. 26. Pengruh pemerin resin leh terhdp gmrn drh ikn koki Crssius urtus yng terinfeksi kteri Aeromons hydrophil. Jurnl Akukultur Indonesi 5: Perer HACC, Pthirtne A. 28. Enhncement of Immune Responses in Indin Crp, Ctl ctl, Following Admistrtion of Levmisole y Immersion. In: Bondd-Rentso G, ohn CV, Crumlish, Susinghe RP (eds.). Diseses in Asin Aquculture VI. nil: Asin Fisheries Society. Hlm Popm T, sser Tilpi Live History nd Biology. Texs: SRAC Puliction, United Sttes Deprtment of Agriculture. Pridgeon JW, Aksoy, Klesius PH, Li Y, u X, Srivstv K, Reddy G Identifiction nd expression profiles of multiple genes in ile tilpi in response to cteril infections. Veterinry Immunology nd Immunopthology 144: Pridgeon JW dn Klesius PH Virulence of Aeromons hydrophil to Chnnel ctfish Ictlurs puncttus fingerlings in the presence nd sence of cteril extrcellulr products. Diseses of Aqutic Orgnisms 95: Priytn R, Indrjulinto S, Kurnisih Infeksi Aeromons slmonicid dri ergi wilyh di Indonesi pd ikn ms Cyprinus crpio. Biot 16: Rkus KŁ, Wiegertjes GF, Admk, Siwicki AK, Lep A, Irnzrow I. 29. Resistnce of common crp Cyprinus crpio L. to Cyprinid herpesvirus-3 is influenced y mjor histocomptiility (H) clss II B gene polymorphism. Fish nd Shellfish Immunology 26: Rkus KŁ. 28. jor histocomptiility (H) polymorphism of common crp. Link with disese resistnce [Disertsi]. Wgeningen, etherlnd: Wgeningen University. Rey A, Verján, Ferguson HW, Iregui C. 29. Pthogenesis of Aeromons hydrophil strin KJ99 infection nd its extrcellulr products in two species of fish. Veterinry Record 164: Stheeshkumr P, Annthn G, Kumr GS, Jgdeesn L Hemtology nd iochemicl prmeters of different feeding ehviour of teleost fishes from Vellr estury, Indi. Comprtive Clinicl Pthology 21:

12 178 Lode uhmmd Arsl et l. / Jurnl Akukultur Indonesi 13 (2), (214) Silveir CR, Prieto TA, Ascencio VF. 24. Effects of different stressors in hemtologicl vriles in cultured Oreochromis ureus S. Comprtive Biochemistry nd Physiology 139: Urie C, Folch H, Enriquez R, orn G Innte nd dptive immunity in teleost fish: review. Veterinri edicin 56: Wegner K. 28. Historicl nd contemporry selection of teleost HC genes: did we leve the pst ehind? Journl of Fish Biology 73: