ANALISIS GAMBARAN DARAH TERHADAP KELANGSUNGAN HIDUP RELATIF IKAN MAS YANG DIBERI VAKSIN DNA ANTI- KHV MELALUI PAKAN DENGAN FREKUENSI BERBEDA

Transkripsi

1 ANALISIS GAMBARAN DARAH TERHADAP KELANGSUNGAN HIDUP RELATIF IKAN MAS YANG DIBERI VAKSIN DNA ANTI- KHV MELALUI PAKAN DENGAN FREKUENSI BERBEDA NOVI ARIYANTI DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2014

2

3 PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA Dengn ini sy menytkn hw skripsi erjudul Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif Ikn Ms yng Dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn dengn Frekuensi Bered dlh enr merupkn hsil kry sy dengn rhn dosen pemiming dn elum dijukn dlm entuk ppun kepd pergurun tinggi mnpun. Semu sumer dt dn informsi yng ersl tu dikutip dri kry yng diteritkn dn tidk diteritkn dri penulis lin telh diseutkn dlm teks dn dicntumkn dlm Dftr Pustk di gin khir skripsi ini. Dengn ini sy melimphkn hk cipt dri kry tulis sy kepd Institut Pertnin Bogor. Bogor, Mret 2014 Novi Ariynti NIM C

4 ABSTRAK NOVI ARIYANTI. Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif Ikn Ms yng Dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn dengn Frekuensi Bered. Diiming oleh SRI NURYATI dn DINAMELLA WAHJUNINGRUM. Penelitin ini ertujun untuk mengnlisis gmrn drh terhdp kelngsungn hidup reltif ikn ms yng dieri vksin DNA nti-khv mellui pkn komersil dengn frekuensi ered. Thpn penelitin yng digunkn dlh kultur kteri pemw vksin (Escherichi coli DH5α) pd medi cir LB tripton + mpisilin, vksinsi dengn dosis 7,6 ng (setr dengn kepdtn kteri 10 8 cfu/ml) pd ikn ms dengn oot 10,22±1,88 grm, dn uji tntng dengn injeksi virus KHV senyk 0,1 ml/ekor ikn (pengencern 10-2 ) secr intrmuskulr. Penelitin menggunkn lim kelompok perlkun vksinsi ered, yitu pemerin pkn ervksin dengn frekuensi stu kli pemerin (perlkun A), du kli pemerin (perlkun B), tig kli pemerin (perlkun C), kontrol positif, dn kontrol negtif. Hsil penelitin menunjukkn hw seklipun terjdi peningktn jumlh totl leukosit, eritrosit, limfosit, sert penurunn jumlh monosit dn tromosit pd perlkun A, B, dn C, kn tetpi perlkun terik ditunjukkn oleh perlkun C yng menghsilkn kelngsungn hidup reltif seesr 84,6%. Kt kunci: ikn ms, koi herpesvirus, pkn komersil, uji tntng, vksinsi ABSTRACT NOVI ARIYANTI. Mesurement of Hemtologicl Chrcteristics to Reltive Percent Survivl in Orlly DNA-Vccinted Common Crp with Different Frequencies. Supervised y SRI NURYATI nd DINAMELLA WAHJUNINGRUM. The im of this reserch ws to nlyze hemtologicl chrcteristics to reltive percent survivl in nti-khv DNA-vccinted common crp y feed with different frequencies. The stge of study were cultivtion of DNA vccinecontining cteri (Escherichi coli DH5α) in liquid LB tripton + mphicylin medium, orl vccintion t doses 7.6 ng (equl to cteril density 10 8 cfu/ml) in common crp with verge ody weight 10.22±1.88 grm, nd chllenge test y intrmusculr-injecting KHV mount 0.1 ml/fish (10-2 dilution). There were five different tretments: nmely one time vccintion (tretment A), two times vccintion (tretment B), three times vccintion (tretment C), positive control, nd negtive control. The results showed tht lthough the numer of totl leukocyte count, totl erythrocyte count, nd lymphocyte ws incresed nd the numer of monocyte nd thromocyte ws decresed on tretment A, B, nd C, ut the est tretment ws showed y tretment C with the highest reltive percent survivl of 84,6%. Key words: crp, chllenge test, feed, koi herpesvirus, vccintion

5 ANALISIS GAMBARAN DARAH TERHADAP KELANGSUNGAN HIDUPRELATIF IKAN MAS YANG DIBERI VAKSIN DNA ANTI-./ KHV MELALUI PAKAN DENGAN FREKUENSI BERBEDA NOVI ARIYANTI Skripsi segi slh stu syrt untuk memperoleh gelr Srjn Periknn pd Deprtemen Budidy Perirn DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2014

6

7 Judul Skripsi: Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif iiikn Ms yyng Dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn i dengn ffrekuensi Bered Nm : Novi Ariynti NIM : C Disetujui oleh Dr Sri Nuryti, SPi MSi Pemiming I Dr Dinmell Whjuningrum, SSi MSi Pemiming II Dikethui oleh Dr Ir Sukend, MSc Ketu Deprtemen Tnggl Lulus:

8 Judul Skrip i: Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif lk n. ls yng Dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn dengn Frekuensi Bered Nm ~o';i Ariynti NIM C l-to70026 Disetujui oleh Dr Sri Nuryti. SPi _ lsi Pemiming I Dinm~~jCm, Dr SSi Pemiming II MSi Dikethui oleh ) Tnggl Lulus: L I - d l ~

9 PRAKATA Puji dn syukur penulis pnjtkn kepd Allh SWT ts segl kruni-ny sehingg kry ilmih ini erhsil diselesikn. Penelitin yng erjudul Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif Ikn Ms yng Dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn dengn Frekuensi Bered dilksnkn sejk uln Oktoer smpi Desemer 2011 di Lortorium Kesehtn Ikn, Deprtemen Budidy Perirn, Institut Pertnin Bogor. Terim ksih penulis ucpkn kepd Iu Dr Sri Nuryti dn Iu Dr Dinmell Whjuningrum selku pemiming yng telh nyk memeri rhn, sert Iu Dr Mi Setiwti selku dosen penguji tmu. Di smping itu, terim ksih penulis smpikn pul kepd Pk Rnt, Kk Rhmn, Pk Mrynt, Mk Yuli, temn-temn LKI, Vid, Retno, Khodijh, Anitt, sert temn-temn BDP Ungkpn terim ksih jug dismpikn kepd Ayh, Iu, sert seluruh kelurg, ts do dn ksih syngny. Semog kry ilmih ini ermnft gi penulis dn pemc. Bogor, Mret 2014 Novi Ariynti

10 DAFTAR ISI DAFTAR TABEL.... vii DAFTAR GAMBAR.... vii DAFTAR LAMPIRAN.... viii PENDAHULUAN Ltr Belkng Tujun Penelitin... 2 METODE Mteri Uji. 2 Rncngn Penelitin..2 Prosedur Penelitin... 3 Kultur Cir Bkteri Pemw Vksin... 3 Vksinsi dn Uji Tntng Prmeter Uji... 4 Anlisis Dt HASIL DAN PEMBAHASAN Hsil Pemhsn KESIMPULAN DAFTAR PUSTAKA 16 LAMPIRAN.. 18 DAFTAR TABEL 1 Nili reltive percent survivl (RPS) ikn ms yng dieri vksin DNA nti-khv Kisrn prmeter kulits ir selm pemelihrn DAFTAR GAMBAR 1 Pol kemtin ikn setelh uji tntng dengn KHV Jumlh totl leukosit ikn uji selm pemelihrn 7 3 Persentse limfosit ikn uji selm pemelihrn Persentse monosit ikn uji selm pemelihrn Persentse neutrofil ikn uji selm pemelihrn Persentse tromosit ikn uji selm pemelihrn 10 7 Jumlh totl eritrosit ikn uji selm pemelihrn Kdr hemogloin ikn uji selm pemelihrn 11 9 Kdr hemtokrit ikn uji selm pemelihrn... 12

11 DAFTAR LAMPIRAN 1 Anlisis sttistik jumlh totl leukosit ikn uji selm pemelihrn 18 2 Anlisis sttistik persentse limfosit ikn uji selm pemelihrn Anlisis sttistik persentse monosit ikn uji selm pemelihrn Anlisis sttistik persentse neutrofil ikn uji selm pemelihrn Anlisis sttistik persentse tromosit ikn uji selm pemelihrn 20 6 Anlisis sttistik jumlh totl eritrosit ikn uji selm pemelihrn Anlisis sttistik kdr hemogloin ikn uji selm pemelihrn 21 8 Anlisis sttistik kdr hemtokrit ikn uji selm pemelihrn... 22

12 PENDAHULUAN Ltr Belkng Slh stu penykit yng cukup serius pd ikn ms dn koi dlh infeksi kit koi herpesvirus (KHV). Penykit ini pertm kli muncul di Indonesi pd Mret 2002 di derh Blitr (Jw Timur) dn terus menyer di Pulu Jw, Bli, Sumter Seltn, Klimntn Timur, dn Sulwesi Tengh. Kemtin yng dikitkn oleh penykit ini is mencpi 80-95% sehingg menyekn kerugin ekonomi yng esr (Sunrto et l. 2005). Ikn yng terserng KHV memiliki ciri-ciri ntr lin produksi lendir (mukus) erleih segi respons fisiologis terhdp kehdirn ptogen, insng erwrn puct tu terdpt erck putih kit keruskn sel-sel insng, pendrhn (hemorgi) di sekitr pngkl dn ujung sirip sert gin tuuh lin, kulit melepuh, sert hti dn ginjl yng erwrn puct (Tukhid et l. 2004). Pengendlin penykit KHV dpt dilkukn mellui vksinsi. Beerp jenis vksin yng dikenl st ini ntr lin vksin yng dimtikn (inctivted vccine), vksin yng dilemhkn (ttenuted vccine), dn vksin DNA. Di ntr jenis terseut, vksin DNA dipercy menjdi lterntif vksin ms depn kren keunggulnny dindingkn vksin trdisionl lin. Lorenzen & LPtr (2005) menytkn hw vksin DNA memiliki keleihn yitu tingkt kemnn yng tinggi, mmpu mengktifkn respons kekeln humorl dn selulr, memiliki kemmpun proteksi yng thn lm, sert proses produksi yng reltif mudh dn iy produksi yng reltif murh. Metode vksinsi yng dikenl st ini ntr lin mellui pkn, perendmn, mupun injeksi. Msing-msing metode vksinsi terseut memiliki keleihn dn kekurngn. Berdsrkn penelitin Nuryti et l. (2010), pemerin vksin DNA mellui injeksi mmpu menghsilkn kelngsungn hidup seesr 96,67%. Akn tetpi metode injeksi kurng efektif untuk vksinsi secr mssl, kren diutuhkn wktu, teng kerj, dn ketermpiln yng leih. Pemerin vksin DNA mellui pkn dinili leih prktis kren dpt dipliksikn secr mssl, tidk menimulkn stress pd ikn, sert teng kerj yng diutuhkn leih sedikit (Miyzki et l. 2008). Drh ikn tersusun ts cirn plsm dn sel-sel drh yng terdiri dri sel drh merh (eritrosit), sel drh putih (leukosit), dn keping drh (tromosit). Fungsi utm drh dlh untuk trnsportsi oksigen, krondioksid, sri-sri mknn, dn hsil metolisme. Drh mengedrkn sustnsi terseut ke seluruh gin tuuh untuk menjg gr tuuh dpt menjlnkn fungsiny dengn ik (Fujy 2002). Penyimpngn fisiologis ikn kn menyekn terjdiny peruhn prmeter hemtologi, ik secr kulittif mupun kuntittif. Beerp prmeter yng dpt menunjukkn dny gnggun dlh jumlh eritrosit, jumlh leukosit, nili hemtokrit, dn konsentrsi hemogloin (Lgler et l.1977). Susunn drh ikn merupkn fktor dignostik penting, sehingg peruhn gmrn drh nyk digunkn untuk menili sttus kesehtn ikn (Amrullh 2004).

13 2 Pd penelitin ini dilkukn pemeriksn terhdp gmrn drh ikn ms yng dieri vksin DNA nti-khv dengn frekuensi ered untuk mengevlusi respons tnggp kel ikn ms yng diinfeksi KHV. Tujun Penelitin Penelitin ini ertujun untuk mengnlisis gmrn drh terhdp kelngsungn hidup reltif ikn ms yng dieri vksin DNA nti-khv mellui pkn dengn frekuensi ered. METODE Mteri Uji Ikn ms yng digunkn senyk 200 ekor dengn oot rt-rt 10,22±1,88 grm yng telh diuji sttus kesehtnny dengn menggunkn metode PCR. Bkteri pemw vksin DNA nti-khv dlh hsil temun Nuryti et l. (2010). Virus KHV ersl dri ikn ms yng terserng KHV yng diperoleh dri Sung. Selin itu jug digunkn regen-regen untuk uji gmrn drh dn uji kulits ir. Rncngn Penelitin Penelitin ini terdiri ts lim perlkun dengn frekuensi vksinsi yng ered. Uji tntng menggunkn virus KHV yng diinjeksikn secr intr muskulr. Adpun rncngn penelitin yng digunkn dpt diliht pd skem erikut: A B C K- K+ ms vksinsi 28 hri pengmtn (7 hri) (30 hri) dptsi 7 hri J UT dptsi 7 hri S J UT dptsi 7 hri S R J UT dptsi 7 hri tnp vksin PBS dptsi 7 hri tnp vksin UT

14 3 Keterngn: A : vksinsi stu kli dlm stu minggu dn diuji tntng B : vksinsi du kli dlm stu minggu dn diuji tntng C : vksinsi tig kli dlm stu minggu dn diuji tntng K- : tnp vksinsi dn diinjeksi dengn PBS K+ : tnp vksinsi dn diuji tntng S : Senin R : Ru J : Jumt UT : uji tntng PBS : injeksi dengn PBS Prosedur Penelitin Kultur Cir Bkteri Pemw Vksin Kultur kteri Escherichi coli DH5α pemw vksin GP25 (Nuryti et l. 2010) dilkukn dengn menginokulsi koloni tunggl kteri pd medi cir LB tripton + mpisilin. Bkteri diinkusi menggunkn thermoshker dengn keceptn 240 rpm pd suhu 37 C selm 16 jm, untuk selnjutny dilkukn pemnenn. Senyk 40 ml kteri ditungkn secr prsil ke dlm msingmsing microtue ervolume 1,5 ml, llu disentrifugsi dengn keceptn rpm pd suhu 4 C selm 30 detik. Pellet kteri yng terentuk dicuci senyk tig kli dengn 1 ml phosphte uffered sline (PBS). Bkteri diinktivsi dengn perlkun pns pd suhu 80 C selm 5 menit, llu disentrifugsi dn diresuspensi kemli dengn PBS senyk 1 ml. Vksinsi dn Uji Tntng Dosis vksin yng digunkn mengcu pd penelitin Yuliynti (2011) yitu 7,6 ng dengn kepdtn kteri 10 8 cfu/ml. Bkteri pemw vksin dicmpurkn terleih dhulu dengn kuning telur seelum dicmpurkn ke pkn. Cmpurn ditmhkn ke dlm pkn dn didimkn pd suhu rung smpi kering. Pencmpurn pkn dengn vksin DNA dilkukn sest seelum pemerin pkn perlkun. Ikn dieri pkn sesui perlkun senyk 5% dri iomss. Ikn dipelihr dlm 20 kurium erukurn 45x40x35 cm 3 senyk 10 ekor/kurium. Ikn didptsikn terleih dhulu selm stu minggu dengn dieri pkn komersil du kli sehri. Vksinsi dilkukn selm stu minggu sesui perlkun dengn pemerin pkn ervksin. Pemelihrn ikn setelh divksinsi selm 28 hri dengn pemerin pkn komersil, llu ikn diuji tntng untuk meliht respons kekelnny. Uji tntng dilkukn dengn menginjeksikn virus KHV senyk 0,1 ml/ekor dengn dosis pengencern 10-2 secr intrmuskulr ke semu ikn uji, keculi pd kontrol negtif.

15 4 Prmeter Uji Perhitungn Jumlh Totl Leukosit (Svoodov & Vyukusov 1991) Drh dihisp dengn pipet ersklyng erisi ulir pengduk wrn putih smpi skl 0,5 llu ditmhkn lrutn Turk s (erfungsi memtikn sel-sel drh merh) smpi skl 11. Pipet digoyngkn gr drh tercmpur dn tetesn pertm diung. Lrutn drh diteteskn pd hemsitometer kemudin ditutup dengn gels penutup. Pengmtn menggunkn mikroskop peresrn 400 kli. Perhitungn jumlh leukosit totl dilkukn pd 5 kotk esr hemsitometer dn jumlhny dihitung dengn rumus (Ni & Psriu 1989): Σleukosit =rtn Σ sel terhitung x volume 1 kotk esr x pengencer n Penghitungn Jenis dn Jumlh Sel Leukosit (Svoodov&Vyukusov 1991) Preprt uls drh diut untuk mengethui jenis dn jumlh sel-sel leukosit. Drh diteteskn pd gels oyek llu dirtkn dn dikering-udrkn. Preprt difikssi dengn methnol selm 5 menit llu diils dengn kudes dn dikering-udrkn kemli. Preprt diwrni dengn pewrn Giems selm 15 menit llu diils dengn kudes dn dikering-udrkn. Preprt yng telh keringdimti di wh mikroskop untuk dihitung persentse sel-sel leukosit (limfosit, monosit, neutrofil, dn tromosit). Sel-sel leukosit dihitung smpi 100 sel, llu dikelompokkn dn dipersentsekn sesui jenisny dengn rumus: L % limfosit = x 100% 100 N % neutrofil = x 100% 100 % monosit M = x 100% 100 % tromosit T = x 100% 100 Keterngn: L : jumlh sel limfosit M : jumlh sel monosit N : jumlh sel neutrofil T : jumlh sel tromosit Perhitungn Jumlh Totl Eritrosit (Svoodov & Vyukusov 1991) Drh dihisp dengn pipet erskl yng erisi ulir pengduk wrn merh smpi skl 0,5 llu ditmhkn lrutn Hyem s (erfungsi memtikn sel-sel drh putih) smpi skl 101. Pipet digoyngkn gr drh tercmpur dn tetesn pertm diung. Lrutn drh diteteskn pd hemsitometer kemudin ditutup dengn gels penutup. Pengmtn menggunkn mikroskop peresrn 400 kli.

16 Penghitungn jumlh eritrosit totl dilkukn pd 5 kotk esr hemsitometer dn jumlhny dihitung dengn rumus (Ni & Psriu 1989): 5 Σeritrosit =rtn Σ sel terhitung x volume 1 kotk esr x pengencer n Pengukurn Kdr Hemtokrit (Chinut et l. 1991) Kdr hemtokrit diukur dengn cr mencelupkn slh stu sisi tung mikrohemtokrit ke dlm ependorf yng erisi drh. Setelh drh mermt smpi sekitr 3 / 4 gin tung, kemudin ujung tung ditutup dengn crytosel sedlm ± 1 mm. Tung mikrohemtokrit disentrifuse dengn keceptn 5000 rpm selm 5 menit dengn posisi tung yng terdpt crytosel menghdp ke lur. Kdr hemtokrit diukur erdsrkn perndingn pnjng volume drh yng mengendp terhdp pnjng volume totl drh. Kdr hemtokrit = x 100% Keterngn : = volume drh yng mengendp = volume totl drh Pengukurn Kdr Hemogloin (Wedemeyer dn Ysutke 1977) Kdr hemogloin diukur dengn metode Shli. Drh dimil dengn pipet Shli smpi skl 0.02 ml kemudin dipindhkn ke dlm tung hemometer yng telh diisi HCl 0.1 N smpi skl 10. Cmpurn diduk selm ± 3 menit llu ditmhkn kudes dengn pipet tetes sedikit demi sedikit smil diduk dengn gels pengduk smpi wrn lrutn sm seperti wrn lrutn stndr hemometer. Kdr hemogloin diukur dengn meliht permukn lrutn drh pd skl Shli yng erwrn kuning (gr %). Kelngsungn Hidup Reltif (Reltive Percent Survivl/RPS) Penghitungn nili RPS dilkukn pd khir penelitin untuk mengethui efektivits dri vksin yng digunkn. RPS dihitung menggunkn rumus: RPS (%) = [1 ( )] x 100% Keterngn: RPS : reltive percent survivl (%) Mn : mortlits pd perlkun N (%) Mk : mortlits pd perlkun kontrol (%) Kulits Air Prmeter kulits ir yng pling erpengruh terhdp infeksi KHV dlh suhu, sehingg pengmtnny dilkukn setip hri. Selin itu jug diukur nili ph menggunkn ph-meter, dissolved oxygen (DO) menggunkn DO-meter, dn NH 3 menggunkn spektrofotometer.

17 6 Anlisis Dt Rncngn yng digunkn dlm penelitin ini dlh rncngn ck lengkp dengn tig ulngn. Dt yng diperoleh meliputi RPS, jumlh totl leukosit, diferensil leukosit, jumlh totl eritrosit, kdr hemogloin, dn kdr hemtokrit diolh menggunkn Ms. Excel dn SPSS versi 16.0 sert diuji lnjut dengn uji Duncn untuk mengethui peredn ntr perlkun. HASIL DAN PEMBAHASAN Hsil Reltive Percent Survivl (RPS) Pengmtn terhdp RPS dilkukn untuk mengethui efektifits vksin dlm melindungi ikn setelh diuji tntng. Dt pd Tel 1 menunjukkn nili yng ervrisi pd msing-msing perlkun. Nili RPS tertinggi terdpt pd perlkun C yitu 84,60±13,32% dn terendh pd perlkun A yitu 23,33±13,32%. Hsil nlisis sttistik rgm (ANOVA) pd selng kepercyn 95% menunjukkn hw nili RPS pd perlkun A ered nyt dengn perlkun C (p<0,05). Tel 1 Nili reltive percent survivl (RPS) ikn ms yng dieri vksin DNA nti-khv No Perlkun Mortlits (%) RPS (%) 1 A 33,33±5,77 23,07±13,32 2 B 20,00±10,00 53,84±23,07 3 C 6,67±5,77 84,60±13,32 4 K+ 43,33±5,77 - A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml Huruf superskrip di elkng stndr devisi yng ered pd kolom yng sm menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) Pol kelngsungn hidup ikn ms setelh uji tntng ditunjukkn oleh Gmr 1. Kemtin diwli pd perlkun A pd hri ke-5 setelh uji tntng KHV, dn diikuti oleh perlkun B, C, dn kontrol negtif pd hri ke-18 setelh uji tntng KHV. Pd kontrol negtif tidk terjdi kemtin hingg khir penelitin.

18 7 Kelngsungn hidup (%) Hri ke- A B C K+ K- A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml Totl Leukosit Gmr 1 Pol kemtin ikn setelh uji tntng dengn KHV Totl leukosit ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 1,19-6,99x10 5 sel/mm 3. Hsil perhitungn totl leukosit memperlihtkn hw totl leukosit ikn uji muli menglmi peningktn setelh vksinsi. Setelh uji tntng, jumlh leukosit menglmi peningktn drstis dengn jumlh leukosit tertinggi pd perlkun C yitu 6,99x10 5 sel/mm 3 pd minggu pertm setelh uji tntng. Peningktn terjdi pd semu perlkun, dn ered nyt dengn kontrol negtif (p<0,05). Selnjutny muli terjdi penurunn jumlh leukosit pd semu perlkun nmun tidk ered nyt (p>0,05). Penurunn terus terjdi hingg khir ms pemelihrn. Kontrol negtif memiliki jumlh leukosit yng cukup stil dri ms vksinsi, uji tntng, hingg khir penelitin. Berdsrkn nlisis sttistik, hsil yng diperoleh menunjukkn hw totl leukosit pd perlkun A, B, dn C ered nyt dengn kontrol negtif (Lmpirn 1). Totl leukosit (x 10 3 sel/mm 3 ) c UT c Minggu ke A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) Gmr 2 Jumlh totl leukosit ikn selm pemelihrn A B C K- K+

19 8 Diferensil Leukosit Persentse Limfosit Persentse limfosit ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 41-74%. Hsil perhitungn terhdp persentse limfosit drh ikn uji menunjukkn hw secr umum terjdi peningktn pd semu perlkun, ik setelh vksinsi mupun uji tntng (Gmr 3). Pd minggu kedu psc vksinsi, peningktn pd perlkun B dn kontrol positif ered nyt dengn perlkun linny (p<0,05). Peningktn tertinggi terdpt pd perlkun A yitu 74% pd minggu kedu setelh uji tntng, nmun tidk ered nyt dengn perlkun B dn C (p>0,05). Hsil yng diperoleh ervrisi hingg minggu keenm. Di khir penelitin, persentse limfosit pd perlkun A dn C ered nyt dengn kontrol negtif (p<0,05). Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw persentse limfosit perlkun A dn B ered nyt dengn kontrol negtif, tetpi tidk ered nyt dengn perlkun C dn kontrol positif (Lmpirn 2). Limfosit (%) UT Minggu ke- A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Gmr 3 Persentse limfosit ikn selm pemelihrn Persentse Monosit Persentse monosit ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 13-36%. Hsil perhitungn menunjukkn terjdiny peningktn pd semu perlkun sest setelh vksinsi, llu menurun hingg ms uji tntng (Gmr 4). Jumlh monosit perlkun A dn C tidk ered nyt dengn kontrol negtif hingg minggu kedu setelh vksinsi (p>0,05). Penurunn jumlh monosit terus terjdi hingg khir ms pemelihrn pd semu perlkun dn ered nyt dengn kontrol negtif (p<0,05). Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw persentse monosit perlkun A dn B ered nyt dengn kontrol negtif, tetpi tidk ered nyt dengn perlkun C dn kontrol positif (Lmpirn 3).

20 9 Monosit (%) 50 UT Minggu ke- A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Gmr 4 Persentse monosit ikn selm pemelihrn Persentse Neutrofil Pengmtn terhdp persentse neutrofil drh ikn uji menunjukkn dny peningktn hingg minggu kedu setelh vksinsi (Gmr 5). Nmun peningktn hny terjdi dlm wktu singkt, dn selnjutny terjdi penurunn hingg uji tntngdn khir ms pemelihrn. Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw tidk terdpt peredn yng nyt pd persentse neutrofil pd semu perlkun (Lmpirn 4). Neutrofil (%) UT Minggu ke A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Gmr 5 Persentse neutrofil ikn selm pemelihrn

21 10 Persentse Tromosit Hsil perhitungn terhdp persentse tromosit drh ikn uji menunjukkn dny kecenderungn penurunn setelh vksinsi hingg menjelng uji tntng (Gmr 6). Penurunn tromosit pd perlkun A, B, dn C tidk ered nyt stu sm lin hingg minggu kedu psc vksinsi. Pd minggu ketig, jumlh tromosit pd perlkun C ered nyt dengn perlkun linny (p<0,05). Setelh uji tntng, persentse tromosit menglmi peningktn. Nmun secr umum tidk terdpt peredn yng nyt ntr semu perlkun hingg khir ms pemelihrn. Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw persentse tromosit perlkun A dn B ered nyt dengn kontrol positif (p<0,05) (Lmpirn 5). Tromosit (%) UT Minggu ke A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Totl Eritrosit Gmr 6 Persentse tromosit ikn selm pemelihrn Jumlh eritrosit ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 0,43-3,14x10 6 sel/mm 3. Hsil perhitungn terhdp totl eritrosit drh ikn ms menunjukkn nili yng erfluktusi pd msing-msing perlkun (Gmr 7). Jumlh totl eritrosit menglmi peningktn setelh vksinsi dn menglmi penurunn setelh uji tntng. Penurunn drstis terjdi pd semu perlkun nmun tidk ered nyt hingg minggu kedu psc uji tntng. Pd minggu keenm jumlh eritrosit kemli menglmi peningktn hingg khir ms pemelihrn. Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw totl eritrosit pd perlkun A dn B ered nyt dengn kontrol negtif (Lmpirn 6).

22 11 Totl eritrosit (x 10 6 sel/mm 3 ) d c c c c UT Minggu ke A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Kdr Hemogloin Gmr 7 Jumlh totl eritrosit ikn selm pemelihrn Kdr hemogloin ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 2,2-10,8. Hsil perhitungn terhdp kdr hemogloin drh ikn ms menunjukkn dny peningktn hingg minggu kedu setelh vksinsi, nmun menurun menjelng uji tntng (Gmr 8). Sest setelh uji tntng terjdi peningktn, nmun kemli menurun hingg khir ms pemelihrn. Hsil nlisis menunjukkn hw tidk terdpt peredn yng nyt pd kdr hemogloin untuk semu perlkun ik selm ms vksinsi mupun uji tntng (Lmpirn 7). Kdr hemogloin UT Minggu ke A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Gmr 8 Kdr hemogloin ikn selm pemelihrn

23 12 Kdr Hemtokrit Kdr hemtokrit ikn uji pd penelitin ini erkisr ntr 11-43%. Hsil perhitungn terhdp kdr hemtokrit drh ikn uji menunjukkn nili yng cenderung stil setelh vksinsi (Gmr 9). Sest setelh uji tntng, kdrhemtokrit pd perlkun A, B, dn C menglmi peningktn llu muli menurun hingg khir ms pemelihrn. Hsil nlisis sttistik menunjukkn hw tidk terdpt peredn yng nyt pd kdr hemtokrit untuk semu perlkun ik selm ms vksinsi mupun uji tntng (Lmpirn 8). Kdr hemtokrit (%) UT Minggu ke- A : pemerin pkn ervksin stu kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml B : pemerin pkn ervksin du kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml C : pemerin pkn ervksin tig kli pemerin dn diinfeksi KHV 0,1 ml K- : pemerin pkn komersil dn diinjeksi PBS 0,1 ml K+ : pemerin pkn komersil dn diinfeksi KHV 0,1 ml UT : uji tntng KHV Huruf yng ered di ts r menunjukkn hsil yng ered nyt (p<0,05) A B C K- K+ Gmr 9 Kdr hemtokrit ikn selm pemelihrn Kulits Air Prmeter kulits ir yng pling erpengruh terhdp serngn KHV dlh suhu, sehingg pengmtn suhu dilkukn setip hri. Sementr prmeter lin diukur pd wl dn khir penelitin.dt kisrn prmeter kulits ir selm penelitin disjikn dlm Tel 2. Tel 2 Kisrn prmeter kulits ir selm pemelihrn Prmeter kulits ir Kisrn Penelitin Kisrn Tolernsi Suhu ( C) 17-23, (Vonti 2008) ph 7,9-8,3 6-9 (Vonti2008) DO (mg/l) 6,6-7,2 > 4 (Vonti 2008) NH 3 (mg/l) 0,04-0,06 < 0,2 (Vonti 2008)

24 13 Pemhsn Vksin merupkn ntigen utn yng ersl dri jsd ptogen yng tidk ersift ptogen lgi (kren sudh dilemhkn tu dimtikn), yng dpt merngsng sistem imun dengn cr meningktkn kekeln ikn dri infeksi ptogen selnjutny (Ellis dlm Fitri 2009). Vksin yng digunkn hrus memenuhi eerp syrt ntr lin hrus mn, dpt memerikn proteksi, mudh dipliksikn, dn dpt digunkn untuk spesies lin (Grisez dn Tn 2005). Vksinsi pd ikn dpt dilkukn dengn eerp metode ntr lin suntikn (injection), perendmn (immersion), dn pkn (orl). Pd penelitin ini, vksinsi dierikn mellui pkn komersil dengn dosis mengcu pd penelitin Yuliynti (2011) yitu 7,6 ng dengn kepdtn kteri 10 8 cfu/ml. Keleihn metode vksinsi mellui pkn dlh tidk memerlukn teng kerj yng nyk sert tidk menyekn stress pd ikn (Miyzki et l. 2008). Vksinsi dilkukn selm stu minggu dengn frekuensi stu kli (perlkun A), du kli (perlkun B), dn tig kli (perlkun C). Ikn ms yng telh divksinsi dipelihr selm 28 hri gr sistem imunny terentuk. Setelh itu dilkukn uji tntng KHV untuk meliht respons tnggp kel pd ikn yng telh divksinsi. Hsil pengmtn kelngsungn hidup ikn ms menunjukkn tidk dny kemtin pd semu perlkun selm ms vksinsi hingg hri ke-28 psc vksinsi. Hl ini memuktikn hw vksin DNA yng dierikn mellui pkn ersift mn gi ikn. Kemtin ikn diwli pd perlkun A yitu pd hri ke-5 psc uji tntng dn diikuti perlkun B, C, dn kontrol positif pd hri ke-18 psc uji tntng (Gmr 1). Kemtin ternyk terjdi pd hri ke-18 setelh uji tntng. Hl ini didug kren seelum hri ke-17 suhu ir pd kurium yng terletk tept di wh AC (ir conditioner) mencpi 16,5 C sehingg mengurngi virulensi KHV. Menurut Pokorov et l. (2005) KHV ersift inktif pd suhu di wh 18 C dn di ts 24 C. Kelngsungn hidup reltif (RPS) di khir penelitin menunjukkn nili tertinggi pd perlkun C (84,60%) diikuti oleh perlkun B (53,84%) dn perlkun A (23,07%) (Tel 1). Hl ini menggmrkn hw vksinsi tig kli seminggu mmpu mengktifkn respons imun ikn dn memerikn proteksi leih ik terhdp KHV dindingkn perlkun vksinsi stu kli dn du kli seminggu. Hsil yng diperoleh dlm penelitin ini sesui dengn hsil penelitin Yuliynti (2011) hw pd pemerin pkn ervksin du kli seminggu menunjukkn persistensi yng leih tinggi dindingkn pemerin pkn ervksin stu kli seminggu. Penelitin Miyzki et l. (2008) tentng pemerin vksin liposom mellui pkn jug mmpu meningktkn kelngsungn hidup ikn ms yng diinfeksi KHV seesr 74%. Nmun msih perlu dilkukn penelitin lnjutn untuk mengevlusi seerp lm kemmpun vksin dlm memproteksi ikn ms dri serngn KHV. Anlisis gmrn drh dpt menjdi petunjuk sttus kesehtn ikn. Dlm penelitin ini dilkukn perhitungn terhdp jumlh totl leukosit, diferensil leukosit, jumlh totl eritrosit, kdr hemogloin, dn kdr hemtokrit. Dt gmrn drh terseut erkitn ert dengn nili kelngsungn hidup reltif ikn pd penelitin ini. Jumlh totl leukosit muli menglmi

25 14 peningktn setelh vksinsi (Gmr 2). Peningktn drstis pd jumlh totl leukosit muli terjdi pd minggu pertm setelh uji tntng. Peningktn terseut menunjukkn hw meknisme perthnn tuuh ikn muli ekerj melwn infeksi KHV. Mrtins et l. (2008) menytkn hw jumlh leukosit pd ikn yng terinfeksi ptogen kn meningkt segi upy perthnn tuuh. Peningktn totl leukosit tertinggi terdpt pd perlkun C yitu 6,99x10 5 sel/mm 3 pd minggu pertm psc uji tntng. Didug pemerin pkn ervksin tig kli seminggu leih mmpu memngkitkn kekeln selulr dn humorl segi upy perthnn tuuh. Hl ini dikutkn dengn nili RPS pd khir penelitin yng menunjukkn nili tertinggi pd perlkun C seesr 84,60%. Penurunn totl leukosit pd khir ms pemelihrn didug kren infeksi KHV yng menyerng ikn semkin gns. Hl ini sejln dengn kelngsungn hidupny yng terus menglmi penurunn hingg minggu ketig psc uji tntng. Nuryti et l. (2010) yng menytkn hw penurunn jumlh leukosit setelh uji tntng menunjukkn hw leukosit terseut didug ktif dn kelur dri pemuluh drh menuju jringn yng terinfeksi. Diferensil leukosit meliputi limfosit, monosit, neutrofil, dn tromosit. Pengmtn terhdp persentse limfosit menunjukkn dny kecenderungn peningktn pd semu perlkun, ik setelh vksinsi mupun uji tntng (Gmr 3). Peningktn jumlh limfosit setelh vksinsi mengindiksikn hw ikn memerikn respons terhdp dny ntigen yng msuk ke dlm tuuh. Setelh uji tntng jumlh limfosit msih terus menglmi peningktn. Peningktn ini dikrenkn infeksi KHV yng terjdi pd tuuh ikn mendorong produksi sel limfosit. Hl ini erkitn dengn pern limfosit segi sel perthnn tuuh. Menurut Kresno (2001), limfosit terdiri dri sel B dn sel T yng erpern segi sel perthnn tuuh. Sel B mmpu ertrnsformsi menjdi sel plsm yng memproduksi ntiodi, sedngkn sel T erfungsi dlm kekeln erperntr sel (sel T sitotoksik) dn mengontrol respon imun (sel T supresor). Persentse limfosit pd penelitin ini ditemukn leih tinggi dripd persentse monosit, neutrophil, dn tromosit dri wl hingg khir pengmtn. Hsil pengmtn menunjukkn terjdiny peningktn persentse monosit sest setelh vksinsi (Gmr 4). Hl ini mengindiksikn hw pemerin vksin mengktifkn pern monosit dlm menginduksi sistem imun. Setelh uji tntng terjdi penurunn jumlh monosit pd semu perlkun keculi pd kontrol negtif. Penurunn jumlh monosit terus terjdi hingg khir ms pemelihrn yng didug merupkn respon terhdp infeksi KHV. Rendhny jumlh monosit didug kren monosit sudh muli kelur dri pemuluh drh menuju jringn yng terinfeksi dn erdiferensisi menjdi mkrofg (sel fgosit utm). Hl ini sejln dengn pendpt Cluss et l. (2008) yng menytkn hw rendhny jumlh monosit merupkn respon yng menunjukkn terjdiny inflmsi pd ikn teleostei. Sementr pd kontrol negtif jumlh monosit cenderung tetp setelh uji tntng didug kren monosit tetp erd di pemuluh drh kren tidk terjdi infeksi pd tuuh ikn. Hl ini dikutkn dengn tidk terjdiny kemtin pd ikn kontrol negtif hingg khir penelitin. Persentse neutrofil drh ikn uji menglmi peningktn setelh vksinsi (Gmr 5). Peningktn terseut menunjukkn dny respons terhdp ntigen yng msuk, dlm hl ini vksin. Nmun peningktn hny terjdi dlm wktu singkt, dn selnjutny menurun hingg ms uji tntng dn khir ms

26 pemelihrn. Penurunn jumlh neutrofil terseut didug kren jumlh limfosit yng erpern dlm pementukn ntiodi menglmi peningktn. Thkur dn Pndey (1990) menytkn hw penurunn jumlh neutrofil dn peningktn jumlh limfosit menunjukkn respon kekeln dlm menghsilkn ntiodi. Jumlh neutrofil yng termti pling sedikit dindingkn sel leukosit yng lin. Hl ini kren pern utm neutrofil dlh menhn serngn kit infeksi kteri, sehingg tidk terllu erpern dlm merespons serngn kit infeksi virus (Purwnto 2006). Tromosit memiliki pern penting dlm penggumpln drh (Hoole 2001). Pengmtn terhdp persentse tromosit menunjukkn kecenderungn penurunn setelh vksinsi hingg menjelng uji tntng (Gmr 6). Setelh uji tntng, jumlh tromosit muli menglmi kenikn. Hl ini didug kren setelh uji tntng ikn menglmi luk kit infeksi KHV, sehingg tromosit memerikn respons dlm proses penggumpln drh dn penyemuhn luk. Jumlh tromosit yng menurun pd khir pengmtn didug kren muli terjdi penyemuhn luk kit infeksi KHV. Pengmtn terhdp jumlh totl eritrosit menunjukkn kecenderungn peningktn setelh vksinsi hingg menjelng uji tntng pd semu perlkun (Gmr 7). Nmun peningktn terseut msih erd pd ts norml. Menurut Ghitino dlm Rdu (2009), sel eritrosit norml ikn ms erkisr 1,1-2,2 (x 10 6 sel/ml). Setelh uji tntng jumlh eritrosit menurun drstis yng didug kren infeksi KHV menyekn pendrhn pd gin tuuh ikn dn tuuh leih nyk memproduksi leukosit segi entuk perthnn tuuh. Pd minggu ketig setelh uji tntng, jumlh eritrosit kemli menglmi peningktn yng didug merupkn upy pemulihn (recovery) pd tuuh ikn psc uji tntng. Tniyskur (2011) menytkn hw tuuh ikn kn memproduksi eritrosit leih nyk untuk menggntikn eritrosit yng menurun kit infeksi ptogen. Hemogloin erfungsi mengikt oksigen dlm drh. Tripthi et l.(2004) menytkn hw hemogloin pd ikn ms erkisr 6,94. Hsil pengmtn memperlihtkn hw kdr hemogloin ikn uji menglmi peningktn setelh vksinsi. Nmun setelh uji tntng, jumlhny menurun hingg khir ms pemelihrn (Gmr 8). Penurunn kdr hemogloin ini didug kren infeksi KHV menyerng orgn insng sehingg proses pengiktn oksigen terhmt. Selin itu jug didug kit proses pemulihn yng mengkitkn tuuh ikn memproduksi eritrosit segi penggnti eritrosit yng mti kit infeksi ptogen. Eritrosit mud memiliki kemmpun mengikt oksigen yng leih sedikit dindingkn eritrosit mtng. Kdr hemtokrit merupkn persentse perndingn ntr pdtn sel drh merh dlm drh (Affndi dn Tng 2002). Dlm kondisi norml, kdr hemtokrit drh ikn ms erkisr 32-43,8% (Ghitino dlm Rdu 2009). Secr umum, kdr hemtokrit drh ikn uji setelh vksinsi cenderung stil setelh vksinsi (Gmr 9). Sest setelh uji tntng, kdr hemtokrit menglmi peningktn llu muli menurun hingg khir ms pemelihrn. Penurunn kdr hemtokrit setelh uji tntng menunjukkn hw infeksi KHV yng menyerng ikn sudh cukup serius. Wedemeyer dn Ysutke dlm Khefh (2011) menytkn hw kdr hemtokrit yng rendh merupkn petunjuk kurngny protein dlm pkn, defisiensi vitmin, tu ikn terken infeksi. 15

27 16 Kulits ir selm penelitin dijg gr lyk segi medi pemelihrn ikn, se ikn kn mudh terserng penykit pil kondisi medi hidupny kurng ik. Pergntin ir dn penyifonn dilkukn secr rutin, sert dilkukn pengukurn prmeter kulits ir yng meliputi suhu, ph, DO, dn NH 3. Hsil pengmtn terhdp prmeter kulits ir pd Tel 2 menunjukkn hw prmeter terseut msih erd pd kisrn norml sehingg lyk digunkn segi medi pemelihrn. Hl ini jug memuktikn hw ikn uji yng terserng penykit dn menglmi kemtin ukn disekn oleh kulits ir yng uruk, tetpi kit infeksi KHV. KESIMPULAN Hsil penelitin menunjukkn seklipun terjdi peningktn jumlh totl leukosit, eritrosit, dn limfosit sert penurunn jumlh monosit dn tromosit pd perlkun A, B, dn C, kn tetpi perlkun terik ditunjukkn oleh perlkun C (pemerin vksin tig kli dlm seminggu) yng menghsilkn kelngsungn hidup reltif seesr 84,6%. DAFTAR PUSTAKA Affndi R, Tng UM Fisiologi Hewn Air. Peknru (ID): Unri Pr. Amrullh Penggunn imunostimuln Spirulin plntesis untuk meningktkn kethnn tuuh ikn koi (Cyprinus crpio) terhdp virus herpes [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Blxhll PC The hemtologicl ssessment of the helth of fresh wter fish: review of selected literture. J Fish Biol. 4: Chinut S, Limsuwn C, Ktsuwn Histology of Wlking Ctfish Clris trchus. Knd (CA): IDRC. 96p. Cluss TM, Dove ADM, Arnold JE Hemtologic Dissorders of Fish. Vet Clin Exot Anim. 11: Ellis AE Generl Principle of Fish Vccintion. In: Ellis AE, editor. Fish Vccintion. Sn Diego (US): Acdemic Pr. Fitri IH Efektivits vksin DNA dlm meningktkn kelngsungn hidup ikn ms yng terinveksi koi herpesvirus (KHV) [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Fujy Y Fisiologi Ikn: Dsr Pengemngn Teknologi Periknn. Jkrt (ID): Tinek Cipt. Grisez L, Tn Z Vccine development for Asin quculture. Dis Asin Aqucul. 5: Hoole D, Bucke D, Burgess P, Welly I Disese of Crp nd Other Cyprinid Fishes. Cornwl (US): MPG Books Ltd. Irinto A Ptologi Ikn Teleostei. Yogykrt (ID): Gdjh Md Univ Pr.

28 Khefh Lm pemerin ekstrk wng putih Allium stivum yng optimum pd pkn untuk mencegh penykit Koi Herpes Virus pd ikn ms Cyprinus crpio [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Khodijh S Efektivits pemerin vksin DNA mellui pkn terhdp kelngsungn hidup reltif ikn ms yng diinfeksi koi herpesvirus [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Kresno SB Imunologi Dignosis dn Prosedur Lortorium.Edisi ketig. Fkults Kedoktern Universits Indonesi: Jkrt. Lgler KF, Brdch JE, Miller RR, Pssino DRM Ichthyology. New York: John Willey nd Sons. Inc. Lorenzen N, Lptr SE DNA vccine for quculture fish. Ref Sci Tech Off Int Epiz. 24 (1): Mrtins ML, Mourino JLP, Amr GV, Vieir FN, Dott G, Jto AMB, Pedrotti FS, Jeronimo GT Hemtologicl chnges in nile tilpi experimentlly infected with Enterococcus sp. Brz Journl Biol 68 (3): Miyzki T, Ysumoto S, Kuzuy Y, Yoshimur T A primry study on orl vccintion with liposomes entrpping koi herpesvirus (KHV) ntigens ginst KHV infection in crp. Dis Asin Aqucul. 6: Ni R, Psriu FH Ptologi dn PenykitIkn.Bogor (ID): PAU IPB. Nuryti S, Mswn NA, Alimuddin, Sukend, Sumntdint K, Psriu FH, Soejoeno RD, Sntik A Gmrn drh ikn ms setelh divksinsi dengn vksin DNA dn diuji tntng dengn koi herpesvirus. JAI. 9 (1): Pokorov D, Vesely T, PickovV, Reschov S, Hulov J Current knowledge on koi herpesvirus (KHV): A Review. Vet Med Czech. 50: Purwnto A Gmrn drh ikn ms Cyprinus crpioyng terinfeksi koi herpes virus [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Rdu D, Opre L, Bucur C, Costche M, Opre D Chrcteristics of hemtologicl prmeters for crp culture nd koi (Cyprinus crpio) rered in n intensive system. Bull UASVM Animl Sci Biotech. 66 (1-2): Sunrto A, Rukyni A, Itmi T Indonesin experience on the outrek of koi herpesvirus in koi nd crp (Cyprinus crpio). Bull Fish Res Agen Supp. 2: Svoodov Z, Vyukusov B Dignostik, prevention nd therpy of fish disese nd intoxiction.reserch Institute of fish Culture nd Hydroiology Vodnny Czechoslovki. [http// Tniyskur Efektivits pemerin proiotik, preiotic, dn siniotik mellui pkn untuk pengendlin infeksi Streptococcus glctie pd ikn nil (Oreochromis niloticus) [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Tukhid, Sunrto A, Koeshryni I, Supriydi H, Gedeni L Strtegi pengendlin penykit koi herpes virus (KHV) pd ikn ms dn koi. Mklh seminr pengendlin penykit koi herpes virus (KHV) pd udidy ikn ir twr. Bogor 17

29 18 Thkur GK, dn Pndey PK BHC (Gmmxene) poisoning effect on leucocytes of n ir rething fish. Clris trchus.(linn). J Env Bio. 11(2): Tizrd I Pengntr Imunologi Veteriner. Edisi ke-2. Prtodirejo M, Hrdjosworo S, penerjemh. Sury (ID): Airlngg Univ Pr. Terjemhn dri: An Introduction to Veterinry Immunology. Tripthi NK, Ltimer KS, Burnley VV Hemtologic reference intervl for koi (Cyprinus crpio), including lood cell morphology, cytochemistry nd ultrstructure. Vet Clin Pth. 33: Vonti O Gmrn drh ikn ms (Cyprinus crpio Lynn) strin sinyony yng ersl dri derh Cimpe-Bogor [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. Wedemeyer GA, Ysutke Clinicl methods for the ssessment of the effect of environmentl stress on fish helth, Technicl Pper of the US Deprtment of the Interior Fish nd the Wildlife Service. 89: Yuliynti Persistensi vksin DNA penyndi Glikoprotein 25 yng dierikn melui pkn utn pd ikn ms Cyprinus crpio [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertnin Bogor. LAMPIRAN Lmpirn 1. Anlisis sttistik jumlh totl leukosit ikn uji selm pemelihrn TOTAL LEUKOSIT Source PERLAKUAN MINGGU PERLAKUAN * MINGGU Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis 2.637E E Error 2.501E E9 Hypothesis 1.638E E Error 2.483E E9 Hypothesis 5.081E E Error 1.694E E9 Duncn PERLAKUAN N K E5 B E5 A E5 C E5 Suset 1 2 K E5 Sig

30 19 Lmpirn 2. Anlisis sttistik persentse limfosit ikn uji selm pemelihrn LIMFOSIT Intercept PERLAKUAN MINGGU Source Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N K Suset 1 2 C K A B Sig Lmpirn 3. Anlisis sttistik persentse monosit ikn uji selm pemelihrn MONOSIT Intercept Source PERLAKUAN MINGGU Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N B Suset A C K K Sig

31 20 Lmpirn 4. Anlisis sttistik persentse neutrofil ikn uji selm pemelihrn NEUTROFIL Intercept PERLAKUAN MINGGU Source Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N Suset C K A B K Sig Lmpirn 5. Anlisis sttistik persentse tromosit ikn uji selm pemelihrn TROMBOSIT Intercept PERLAKUAN MINGGU Source Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N K Suset 1 2 C K A B Sig

32 Lmpirn 6. Anlisis sttistik jumlh totl eritrosit ikn uji selm pemelihrn 21 TOTAL ERITROSIT Source PERLAKUAN MINGGU PERLAKUAN * MINGGU Type III df Men Squre F Sig. Sum of Squres Hypothesis 2.507E E Error 2.003E E10 Hypothesis 1.756E E Error 7.113E E11 Hypothesis 1.190E E Error 2.363E E10 Duncn PERLAKUAN N B E6 A E6 Suset 1 2 K E6 C E6 K E6 Sig Lmpirn 7. Anlisis sttistik kdr hemogloin ikn uji selm pemelihrn HEMOGLOBIN Intercept Source PERLAKUAN MINGGU Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N Suset K K B A C Sig

33 22 Lmpirn 8. Anlisis sttistik kdr hemtokrit ikn uji selm pemelihrn HEMATOKRIT Intercept Source PERLAKUAN MINGGU Type III Sum of Squres df Men Squre F Sig. Hypothesis Error Hypothesis Error Hypothesis Error Duncn PERLAKUAN N Suset 1 K K B A C Sig..213

34 23 RIWAYAT HIDUP Penulis dilhirkn di Kot Btu, pd tnggl 29 Desemer 1988 dri psngn Bpk Ftkhul Khoiri dn Iu Shofih. Penulis merupkn nk pertm dri du ersudr. Pendidikn forml ditempuh penulis di SMA Negeri 1 Btu dn lulus thun Pd thun yng sm penulis lulus seleksi msuk IPB mellui jlur Undngn Seleksi Msuk IPB pd progrm studi Teknologi dn Mnjemen Periknn Budidy, Deprtemen Budidy Perirn, Fkults Periknn dn Ilmu Kelutn. Selm mengikuti perkulihn, penulis pernh mengikuti prktik lpngn di Bli Besr Pengemngn Budidy Air Twr (BBPBAT) Sukumi pd thun Penulis jug pernh menjdi sisten mt kulih Fisiologi Hewn Air dn Pendidikn Agm Islm pd thun Selin itu penulis jug ktif segi pengurus Himpunn Mhsisw Akukultur IPB, Lemg Dkwh Fkults Periknn dn Ilmu Kelutn, sert penyir di rdio komunits muslim IPB. Penulis memperoleh esisw Ek Tjipt Foundtion dri thun 2007 smpi thun Tugs khir dlm pendidikn tinggi diselesikn dengn menuliskn skripsi yng erjudul Anlisis Gmrn Drh terhdp Kelngsungn Hidup Reltif Ikn Ms yng dieri Vksin DNA Anti-KHV mellui Pkn dengn Frekuensi Bered.