Lampiran 1. Sertifikat Pengujian Metoklopramid HCl Baku Pabrik (BP)

Transkripsi

1 Lampiran 1. Sertifikat Pengujian Metoklopramid HCl Baku Pabrik (BP)

2 Lampiran. Hasil Orientasi Menentukan Perbandingan Fase Gerak dengan Menggunakan Alat KCKT.1. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 60:40... Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 75:5.

3 .3. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 50: Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml dalam plasma, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 60:40.

4 .5. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml dalam plasma, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 50: Kromatogram hasil penyuntikan larutan Metoklopramid BP dengan konsentrasi 10 mcg/ml dalam plasma, fase gerak (a) Campuran 1% Asam asetat glasial dalam Air dan, (b) Campuran Asetonitril-methanol (3,7 : 1), dimana a : b = 30:70.

5 Lampiran 3. Kromatogram Hasil Penyuntikan Plasma Kosong dari Hewan Percobaan.

6 Lampiran 4. Perhitungan persamaan regresi dari kurva kalibrasi Metoklopramid BP yang diperoleh secara KCKT Data X Y X Y XY 1 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,5000 4,830 0, ,851 1, , ,440 1, , , , ,7360, , ,1040 5, ,0300 4, ,8409 8,0600 6, ,8500 6, ,55 337,150 Total 7, , , , ,875 Rataan 1,500 74,390, , ,811 y = ax + b 51,8734 b = y ax b = 74,390 51,8734 (1,500) b = 74,390 64,8418

7 b = 9,5484 r = 0,9913 Jadi, persamaannya didapat : Y = X

8 Lampiran 5. Pengambilan Plasma Untuk Kurva Kalibrasi Metoklopramid HCl Kelinci Dipuasakan minimal 8 jam sebelum percobaan Ditimbang Dicukur bulu telinganya hingga bersih Diambil darah lebih kurang 10 ml Dimasukkan kedalam 5 tabung yang telah berisi tetes heparin Ditambahkan ml TCA 0% Divorteks hingga homogen Disentrifuge pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit Diambil supernatannya Plasma

9 Lampiran 6. Pembuatan Kurva Kalibrasi Metoklopramid HCl Metoklopramid HCl Larutan Metoklopramid HCl (LIB I) (1000mcg/ml) Ditimbang sebanyak 10 mg Dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml Ditambahkan Aquabidest hingga larut dan cukupkan sampai garis tanda Larutan Metoklopramid HCl (LIB II) (100 mcg/ml) Dipipet sebanyak 1 ml Dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml Ditambahkan Aquadest hingga larut dan cukupkan hingga garis tanda Larutan Metoklopramid HCl (LIB III) (10 mcg/ml) Dipipet sebanyak 1 ml Dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml Ditambahkan Aquadest hingga larut dan cukupkan hingga garis tanda

10 Lampiran 6. (lanjutan) Larutan Metoklopramid HCl (LIB III) (10 mcg/ml) Dipipet sebanyak 0,05 ml, 0,1 ml, 0,15 ml, 0, ml dan 0,5 ml Diencerkan dengan plasma hingga 1 ml Diinjekkan ke alat KCKT pada panjang gelombang 73 nm Hasil

11 Lampiran 7. Perlakuan Pada Hewan Percobaan dengan Pemberian Tablet Metoklopramid HCl Kelinci Dipuasakan minimal 8 jam sebelum percobaan Ditimbang Dicukur bulu telinganya hingga bersih dan diambil 1 ml darah untuk blanko Diberikan Tablet Metoklopramid HCl dengan dosis 10 mg secara peroral Dibilas spuit dengan heparin dan diambil darah sebanyak 1 ml pada waktu 10 menit setelah pemberian obat, kemudian 0, 30, 45, 60, 90, 10, 180, 300, dan 40 menit Dimasukkan kedalam tabung sentrifuge yang telah berisi tetes heparin Cuplikan Darah Hasil Ditambahkan TCA 0% sebanyak 1 ml Divorteks hingga homogeny Disentrifuge pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit Diambil supernatan Diukur pada alat KCKT pada panjang gelombang 73 nm

12 Lampiran 8. Kadar Metoklopramid Bahan Tambahan Sari Tape (BTST) dalam Plasma Pada Kelinci Jantan Setiap Waktu Pengambilan Sampel Hewan Uji waktu (menit) I II III IV V VI Area Kadar Area Kadar Area Kadar Area kadar Area Kadar Area Kadar Rata-rata Kadar ± SD (mcg/ml) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.76

13 Lampiran 9. Gambar Konsentrasi (C) vs Waktu ( t ) Metoklopramid BTST (Bahan Tambahan Sari Tape) pada Plasma Kelinci, n=6 ekor

14 Lampiran 10. Kadar Metoklopramid HCl merek dagang (Primperan ) dalam Plasma Kelinci Jantan Setiap Waktu Pengambilan Sampel waktu (menit) Hewan Uji I II III IV V VI Area Kadar Area Kadar Area Kadar Area kadar Area Kadar Area Kadar Rata-rata Kadar ± SD (mcg/ml) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.413

15 Lampiran 11. Gambar Konsentrasi ( C ) vs Waktu (t) Primperan dalam Plasma Kelinci Jantan, n = 6 ekor

16 Lampiran 1. Parameter Bioavailabilitas Tablet Metoklopramid Bahan Tambahan Sari Tape (BTST) pada 6 ekor kelinci jantan dengan dosis 10 mg. Kelinci BB (Kg) Ka (menit ) t1/ a (menit) Tmaks (menit) Cmaks (mcg/ml) Vd (ml) AUC0- (mcg/ml menit) Kel (menit ) t1/ e (menit) I ,55 58, ,00 971, II , III ,86 67, IV ,50 58, V ,86 67, VI Rata-rata ,43 61, , SD ,68 6, ,1 86,53 0 0

17 Lampiran 13. Parameter Bioavailabilitas Metoklopramid Merek Dagang (Primperan ) pada 6 ekor kelinci jantan dengan dosis 10 mg. Kelinci BB (Kg) Ka (menit ) t1/ a (menit) Tmaks (menit) Cmaks (mcg/ml) Vd (ml) AUC0- (mcg/ml menit) Kel (menit ) t1/ e (menit) I ,33 78, ,61 650, II ,86 67, ,86 787, III ,33 78, ,76 637, IV ,90 5, ,97 783, V , , VI , Rata-rata ,89 74, ,38 745, SD ,48, ,58 11, ,80

18 Lampiran 14. Contoh Perhitungan Parameter Bioavailabilitas Secara Manual Waktu (t) Konsentrasi (C) A.e K el t Residual (menit) (mcg / ml) (mcg/ml) (mcg/ml) 10 0,94 1,59 /0,65/ ln R = lnb- K a.t 0 0,99 1,56 /0,57/ = 0,3911 0,06t 30 1,36 1,5 /0,16/ R = B.e -K a. t 45 1,66 = 1,479 e -0,06t 60 1,95 r = -0,9 90 1, ,48 ln CE = ln A-K el.t 180 1,05 = 0,4816-0,00t 300 0,96 CE = A.e -K el.t 40 0,83 = 1,6187e -0,00 t r = -0,9 K el = 0,0017 menit -1 T 1/ el = 0,693 0,00 = 346,5 menit K a = 0,06 menit -1 T 1/ ab = 0,693 0,06 = 11,5 menit AUC (Area Under the Curve) C AUC 0-t = { 1 xt 1 } + { ( C t1 + C1) x( t ) } +.. { ( Cn + Cn 1) x( tn tn 1) } AUC 0-40 = { (0,94)(10) }+{ ( 0,94 + 0,99)(0 10) }+ ( 0,99 + 1,36)(30 0) ( 1,36 + 1,66)(45 30) { }+{ }+

19 ( 1,66 + 1,95)(60 45) ( 1,95 + 1,55)(90 60) { }+{ }+ ( 1,55 + 1,48)(10 90) ( 1,48 + 1,05)(180 10) { }+{ }+ ( 1,05 + 0,96)( ) ( 0,96 + 0,83)(40 300) { }+{ } = 477,775 mcg / ml menit AUC 40- Ctn = Kel = 0,83 0,0017 = 488,35 (mcg / ml) menit AUC 0- = AUC AUC 40- = 477, ,35 = 966,01 (mcg/ml) menit Vd = = = = 6089,39 ml T maks =,303 log Ka ke Ka Ke

20 =,303 0,06 = 58,65 menit log 0,00 0,06 0,00 Ka.( Dosis) ke. tmaks C maks = e Vd( Ka Kel) = 1,5 mcg / ml

21 Lampiran 15. Contoh Perhitungan Pengujian Hipotesis Perhitungan Cmaks No Metoklopramid BTS Primperan 1 1,54 1,0,11 1,14 3,13 1,6 4 1,88 1,4 5 1,7 1,78 6 1,85 1,16 X 1,86 1,35 SD 0,3 0,7 Ho: σ 1 = σ H1: σ 1 σ Pengujian Hipotesis f = S 1 / S 0,3 f = 0,7 = 0,73 dibandingkan dengan nilai kritis : f α/, v1, v f tabel = f α/, v1, v f tabel = f 0,05, 6, 6 = 4,8 f hitung < f tabel

22 Bila f hitung < f kritis (diterima), maka harga kedua variansi tersebut adalah sama, maka uji selanjutnya dalam membedakan dua mean menggunakan uji t. Ho : µ 1 = µ H1: µ 1 µ Pengujian hipotesis t = ( y y / s 1/ r1 + 1 r ) 1 / Lampiran 15, (lanjutan) s= r1 r1 y1 i i 1 i= 1 y 1i \ r r / r1 + y i y i / r / 1 i 1 1 i= ( r + r ) atau s = = = 0,5 t = ( y y / s 1/ r1 + 1 r ) 1 / t = 1 1 ( 1,86 1,35 / 0,5 + ) 6 6 t = 0,51 / 0,14 t = 3,54 nilai t hitung hasil pengujian statistik ini, kemudian dibandingkan dengan nilai kritis ( t tabel) yaitu : t tabel = ± t α/, (r1+r-) t tabel = ± t 0,05, (6+6-)

23 t tabel = ± t 0,05, 10 t tabel = ±,8 t hitung > t tabel (bermakna, p < 0,05) Kesimpulan : Ho ditolak (Hipotesis Ditolak), karena terdapat perbedaan yang bermakna antara konsentrasi maksimum (Cmaks) kedua sediaan tersebut

24 Lampiran 16. Data Statistik Kadar Metoklopramid BTST dan Primperan dalam Plasma Tiap Waktu Pengambilan pada 6 ekor Kelinci Menggunakan Statistik Independent T-Test Waktu Pengambilan 10 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (10 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (10 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (10 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Sample Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (10 menit)

25 Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (10 menit) not Waktu Pengambilan 0 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (0 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (0 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (0 menit) Metoklopramid BTST Primperan

26 Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper Waktu (0 menit) not Waktu Pengambilan 30 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (30 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (30 menit)

27 Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (30 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper Waktu (30 menit) not Waktu Pengambilan 45 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (45 menit)

28 Descriptive Statistics Primperan waktu (45 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (45 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper Waktu (45 menit) not Waktu Pengambilan 60 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (60 menit)

29 Descriptive Statistics Primperan waktu (60 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (60 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (60 menit) not Waktu Pengambilan 90 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (90 menit)

30 Descriptive Statistics Primperan waktu (90 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (90 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. T Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (90 menit) not

31 16.7 Waktu Pengambilan 10 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (10 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (10 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (10 menit) Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. T Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper Waktu (10 menit) not

32 16.8 Waktu Pengambilan 180 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (180 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (180 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (180 menit) Metoklopramid BTS Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (180 menit) not

33 16.9 Waktu Pengambilan 300 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (300 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (300 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (300 menit) Metoklopramid BTST Primperan

34 Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (300 menit) not Waktu Pengambilan 40 menit Descriptive Statistics Metoklopramid BTST waktu (40 menit) Descriptive Statistics Primperan waktu (40 menit) Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean waktu (40 menit) Metoklopramid BTST Primperan

35 Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. t Df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper waktu (40 menit) not

36 Lampiran 17. Data Statistik Parameter Bioavailabilitas Metoklopramid BTST dan Primperan Menggunakan Statistik Independent T-Test Data Statistik Waktu Maksimum ( ) Descriptive Statistics Metoklopramid BTST Tmaks Descriptive Statistics Primperan Tmaks Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean Tmaks Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference Sig. (- Mean Std. Error F Sig. t df tailed) Difference Difference Lower Upper Tmaks

37 Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference Sig. (- Mean Std. Error F Sig. t df tailed) Difference Difference Lower Upper Tmaks not Data Statistik Konsentrasi Maksimum ( ) Descriptive Statistics Metoklopramid BTST Cmaks Descriptive Statistics Primperan Cmaks

38 Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean Cmaks Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variances t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference F Sig. T df Sig. (- Mean Std. Error tailed) Difference Difference Lower Upper Cmaks not Data Statistik Area Di Bawah Kurva (AUC) Descriptive Statistics Metoklopramid BTST AUC

39 Descriptive Statistics Primperan AUC Group Statistics Perlakuan N Mean Std. Deviation Std. Error Mean AUC Metoklopramid BTST Primperan Independent Samples Test Levene's Test for ity of Variance s t-test for ity of Means 95% Confidence Interval of the Difference Sig. (- tailed Mean Std. Error F Sig. t df ) Difference Difference Lower Upper AU C variance s variance s not

40 Lampiran 18. Formula Metoklopramid Bahan Tambahan Sari Tape R/ Metoklopramid HCl 10 mg Sari Tape Padat (Brem) 7 mg Corn starch 7 mg Avicel 54 mg LH-11,5mg Aspartam 5 mg Mg. Stearat 1,5 mg Talkum add 150 mg