Lampiran 1. Flowsheet Rancangan Percobaan

Transkripsi

1 43 Lampiran 1. Flowsheet Rancangan Percobaan Furosemida Sifat Fisikokimia Serbuk hablur berwarna putih s/d kekuningan dan tidak berbau Praktis tidak larut dalam air pka 3,9 Log P 0,74 Kelarutan 0,01 (mg/ml) Panjang gelombang 275 nm Titik lebur 206 o C Penelitian yang telah dilakukan antara lain : 1. Laju Penguraian Furosemida Dalam Suasana Asam (Joshita D.,1991) 2. Uji Bioekivalensi Tablet Furosemida Generik dan Nama Dagang (Doharni Tanjung,2001) 3. Pengaruh Perbedaan ph Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Duodenum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Siregar,2006) 4. Pengaruh Perbedaan ph Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Matondang,2006) 5. Pengaruh Perbedaan ph Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Ileum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Panggabean, 2006) absorpsi furosemida pada intestine kelinci paling tinggi dalam jejunum pada ph 6,0. Proses absorpsi yang terjadi selain difusi pasif kemungkinan juga terjadi mekanisme absorpsi lain Faktor yang mempengaruhi transpor aktif antara lain : 1. Molekul (senyawa) ditranspor dari daerah yang mempunyai perbedaan potensial kimia yang rendah menuju yang lebih tinggi. 2. Hasil metabolisme senyawa akan mengganggu transpor. 3. Kecepatan transpor akan mengalami penjenuhan apabila konsentrasi dari senyawa meningkat. 4. Sistem transpor umumnya memperlihatkan struktur kimia spesifik. 5. Senyawa kimia dengan struktur yang hampir sama akan bekerja sebagai kompetitif inhibitor. Pengaruh Perbedaan Terhadap Laju Absorpsi Tablet Furosemida Generik Pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci Dilakukan melalui proses Uptake Variasi waktu dan tetap Variasi dan Waktu tetap Diukur secara Spektrofotometri UV (277,0 nm) Diukur secara Spektrofotometri UV (277,0 nm) Diperoleh Hasil AUC, C maks, dan t maks Diperoleh hasil V maks dan Km melalui Kurva Lineweaver -Burk Kesimpulan

2 44 Lampiran 2. Contoh Perhitungan Kadar Furosemida Baku 1. Pembakuan NaOH 0,1 N No Berat Kalium Biftalat (mg) Volume Titrasi(ml) , , ,15 Perhitungan : N = mgkaliumbiftalat VxBEKaliumBiftalat 151 N 1 = = 0,0924 N 8,00x204, 2 N2 N3 = 0,0936 N = 0,0913 N Dihitung harga N rata-rata dan deviasi (d) Nr N1+ N 2 = 2 0, , = = 0,093N N1 Nr1 d 1 = x100% = 0,6451% Nr1 Nr 2 = 0,0918 N dengan d 2 = 0,5988 % Nr3 = 0,0924 N dengan d 3 = 1,24 % Maka, normalitas NaOH adalah harga Nrata-rata dengan deviasi terkecil yaitu d 2 = 0,5988 % dengan N = 0,0918 N.

3 45 2. Penetapan Kadar Furosemida Baku No. Berat Sampel (mg) Volume titrasi (ml) , , ,80 Contoh Perhitungan : VxNxBE Kadar (K) = x100% beratsampel 19,75mlx0,0918Nx330,74 K 1 = x100% = 98,9518 % 606 K2 = 99,2890 % K3 = 99,3663 % Dihitung harga K rata-rata dan deviasi (d) Kr K1+ K ,9518% + 99,2890% 2 1 = = = 99,1204% K1 Kr1 d 1 = x100% = 0,1701% Kr1 Kr 2 = 99,1590 % dengan d 2 = 0,2090 % Kr3 = 99,3276 % dengan d 3 = 0,0389 % Maka, kadar furosemida baku adalah harga Krata-rata dengan deviasi terkecil yaitu d 3 = 0,0389 % dengan K = 99,3276 %.

4 46 Lampiran 3. Flowsheet Pembuatan Larutan Induk Baku Furosemida dalam Dapar Fosfat ph 6,0 Isotonis Furosemida baku Dikeringkan pada suhu 105 C selama 3 jam Ditimbang seksama 50,0 mg Dimasukkan secara kuantitatif kedalam labu tentukur 100 ml. Ditambah tetes demi tetes NaOH 0,1 N sampai serbuk larut. Dicukupkan dengan dapar posfat ph 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Larutan Induk Baku 500 mcg/ml

5 47 Lampiran 4. Flowsheet Penentuan λ Maksimum Furosemida dalam Dapar Fosfat ph 6,0 Isotonis Larutan Induk Baku Dipipet 0,75 ml Dimasukkan dalam labu tentukur 50 ml Dicukupkan dengan dapar posfat ph 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Diukur pada panjang gelombang nm. Panjang Gelombang maksimum

6 48 Lampiran 5. Penentuan Kurva Serapan Furosemida Baku dalam Larutan Dapar Fosfat ph 6,0 Isotonis

7 49 Lampiran 6. Flowsheet Pembuatan Kurva Kalibrasi Furosemida Baku dalam Dapar Fosfat ph 6,0 Isotonis Larutan Induk Baku Dipipet masing-masing 0,2; 0,25; 0,30; 0,35; 0,55; 0,75; 0,95; 1,15 ml atau setara dengan konsentrasi 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5; 3,0; 3,5; 5,5; 7,5; 9,5; 11,5 mcg/ml. Dimasukkan dalam labu tentukur 50 ml. Dicukupkan dengan dapar fosfat ph 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Diukur pada panjang gelombang maksimum 277,0 nm.

8 50 Lampiran 7. Penentuan Persamaan Regresi dan Kurva Kalibrasi Furosemida Baku dalam Larutan Dapar Fosfat ph 6,0 Isotonis (mcg/ml) Rata-rata SD I II III IV V VI 2,0 0,1285 0,1168 0,1245 0,1189 0,1119 0,1165 0,1195 0,0060 2,5 0,1407 0,1495 0,1575 0,1489 0,1417 0,1471 0,1476 0,0061 3,0 0,1782 0,1826 0,1902 0,1735 0,1753 0,1786 0,1797 0,0060 3,5 0,2096 0,2122 0,2203 0,2048 0,2045 0,2087 0,2100 0,0058 5,5 0,3306 0,3464 0,3547 0,3348 0,3314 0,3365 0,3391 0,0095 7,5 0,4536 0,4738 0,4816 0,4683 0,4644 0,4656 0,4679 0,0094 9,5 0,5829 0,5974 0,6191 0,5931 0,5891 0,5942 0,5960 0, ,5 0,7113 0,7241 0,7473 0,7314 0,7108 0,7216 0,7244 0,0137 (mcg/ml) ( X ) Rata-rata (Y) 2 X Y XY 0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 2,0 0,1195 4,0000 0,0143 0,2390 2,5 0,1476 6,2500 0,0218 0,3689 3,0 0,1797 9,0000 0,0323 0,5392 3,5 0, ,2500 0,0441 0,7350 5,5 0, ,2500 0,1150 1,8648 7,5 0, ,2500 0,2189 3,5091 9,5 0, ,2500 0,3552 5, ,5 0, ,2500 0,5248 8,3307 X = 45,0000 Y = 2,7842 X 2 = 340,5000 Y = 1,3263 Persamaan garis regresi : Y = ax + b n XY X. Y a = 2 2 n X ( X ) 9(21,2486) (45)(2,7842) a = 2 9(340,500) (45) a = 0, XY = b = b = Y a X n ( 2,7842) (0,0634)(45) 9 b = - 0,0079

9 51 Jadi persamaan regresi furosemida dalam larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis adalah : Y = 0,0634X 0,0079 Nilai koefisien korelasi (r) = 0,9998 rata-rata (nm) y = x R 2 = Data : rata-rata ± SD n = konsentrasi (mcg/ml)

10 52 Lampiran 8. Flowsheet Pembuatan Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci Kelinci jantan Berat 1,5-2 kg. Dipuasakan selama jam Dianastesi dengan eter sampai pingsan Perutnya dibuka dan ususnya dikeluarkan Dibersihkan dari jaringan ikat, pembuluh darah halus dan jaringan saraf Usus bersih Potongan usus Dikanulasi pada jarak 25 cm dari pylorus. Bagian atas jejunum diukur 10 cm dan diikat dgn benang digunakan sebagai kontrol Bagian bawahnya diukur 10 cm diikat dan dilakukan sebanyak 3 kali, digunakan untuk percobaan Dipotong pada setiap bagian tetapi pada salah satu ujung tetap terikat. Isinya dibersihkan dengan cara dicelupkan dalam larutan NaCl dingin Dibalik menggunakan batang pengaduk berpenampang 2 mm. Dilepaskan dari batang pengaduk dan dicelupkan kembali dalam larutan NaCl dingin. Usus terbalik

11 53 Lampiran 9. Flowsheet Penentuan Pola Penembusan Membran oleh Tablet Furosemida Generik dengan Berbagai pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci 10 cm potongan jejunum terbalik Ujung bagian atas dihubungkan dan diikat pd kanula dengan panjang 7 cm. Ke dalam kantong usus diisi 2 ml cairan serosa berupa larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis Dimasukkan cairan mukosa pada bagian atas (sebagai kontrol) berupa larutan dapar fosfar ph 6,0 isotonis tanpa mengandung bahan obat dan bagian bawah (sebagai percobaan) berupa larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis yang mengandung larutan tablet furosemida generik 0,001 M ke dalam tabung cairan Diatur termostat pada temperatur 37 ± 0,5 o C. Dialiri oksigen secara terus-menerus dengan kecepatan kira-kira 1 gelembung/detik. Pada menit ke-5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 cairan serosa diambil sebanyak 1 ml melalui kanula dan dimasukkan 1 ml setiap pengambilan Dipipet 0,5 ml masing-masing cairan diencerkan dengan larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis sampai dengan Diukur serapan dengan Spektrofotometer UV pada λ 277,0 nm Dilakukan cara yang sama untuk konsentrasi 0,002 M dan 0,003 M

12 54 Lampiran 10. Contoh Perhitungan Penentuan Harga Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam mcg/ml Harga konsentrasi dari tablet furosemida generik dalam larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis pada interval waktu tertentu dihitung dengan menggunakan persamaan garis regresi : Y = 0,0634 X 0,0079 Dimana; Y = X = Misal, pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik dengan konsentrasi 0,001 M diperoleh absorbansi 0,0759. Maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-5 adalah : X = 0, ,0079 0,0634 X = 1,3218 mcg/ml Dilakukan cara yang sama untuk menit berikutnya dan pada masing masing konsentrasi yaitu 0,002 M dan 0,003 M.

13 55 Lampiran 11. Contoh Perhitungan Penentuan Harga Kumulatif Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam mcg/ml Nilai konsentrasi dari tablet furosemida dalam larutan dapar fosfat ph 6,0 isotonis pada interval waktu dihitung dengan menggunakan persamaan garis regresi; Y = 0,0634X 0,0079 Pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik, dipipet larutan sebanyak 0,5 ml, diencerkan dengan larutan dapar fosfat ph 6,0 dalam labu tentukur 25 ml sampai garis tanda. Kemudian serapannya diukur pada panjang gelombang 277,0 nm sehingga diperoleh absorbansi 0,0759. Maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-5 adalah : 0, , ml x x1ml = 66,0883mcg / ml = 0, M 0,0634 0,5ml Pada waktu t = 10 menit, diperoleh absorbansi (A) = 0,0555, maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-10 adalah: 0, , ml x x1ml + 66,0883mcg / ml 0,0634 0,5ml = 50,0000 mcg/ml + 66,0883 mcg/ml = 116,0883 mcg/ml = 0, M Pada waktu t = 15 menit, diperoleh absorbansi (A) = 0,0251, maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-15 adalah : 0, , ml x x1ml + 115,0883mcg / ml 0,0634 0,5ml = 26,0250 mcg/ml + 116,0883 mcg/ml = 142,1136 mcg/ml = 0, M Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh kadar kumulatif tablet furosemida pada menit ke-45.

14 56 Lampiran 12. Contoh Perhitungan Penentuan Harga AUC (Area Under The Curve) Tablet Furosemida Generik pada Berbagai dalam mcg.menit/ml Penentuan harga AUC dari tablet furosemida generik pada konsentrasi 0,001 M diperoleh dengan cara memplot konsentrasi terhadap waktu sehingga dihasilkan kurva absorpsi. Kemudian luas daerah di bawah kurva absorpsi dihitung dengan menggunakan metode luas trapesium berdasarkan rumus: Luas= ½ (Jumlah sisi yang sejajar) x tinggi Misal, pada waktu t = 5 menit sampai dengan t = 10 menit maka luas daerah di bawah kurva adalah: = (½ ( 1,3218 mcg/ml + 1,0000 mcg/ml) x (10 menit-5 menit) = 1,1609 mcg/ml x 5 menit = 5,8045 mcg.menit/ml Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh jumlah total AUC pada konsentrasi 0,001 M tablet furosemida generik hingga menit ke-45 dan dilakukan cara yang sama untuk konsentrasi 0,002 M dan 0,003 M.

15 57 Lampiran 13. Data Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai a. Data Furosemida dalam Cairan Serosa pada 0,001 M No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,1058 0,0299 0, ,0686 0,0131 0, ,0269 0,0018 0, ,0101 0,0042 0, ,0156-0,011 0, ,0049-0,0177 0, ,0176-0,0211 0, ,0049-0,0216 0, ,0071-0,0159 0,0088 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,1028 0,0299 0, ,0314 0,0131 0, ,0061 0,0018 0, ,0021 0,0042-0, ,0099-0,011 0, ,0126-0,0177 0, ,0128-0,0211 0, ,0122-0,0216 0, ,0104-0,0159 0,0263 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,1277 0,0299 0, ,0342 0,0131 0, ,0045 0,0018 0, ,0356 0,0042 0, ,0187-0,011 0, ,0103-0,0177 0, ,0233-0,0211 0, ,0162-0,0216 0, ,002-0,0159 0,0179

16 58 b. Data Furosemida dalam Cairan Serosa pada 0,002 M No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0120 0,0050 0, ,0020 0,0071-0, ,0045-0,0078 0, ,0106 0,0027 0, ,0033 0,0007 0, ,0004-0,0021 0, ,0021-0,0049 0, ,0000-0,0122 0, ,0024-0,0170 0,0194 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0061 0,0050 0, ,0068 0,0071-0, ,0176-0,0078 0, ,0004 0,0027-0, ,0037 0,0007-0, ,0095-0,0021-0, ,0013-0,0049 0, ,0045-0,0122 0, ,0096-0,0170 0,0266 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0017 0,0050-0, ,0000 0,0071-0, ,0006-0,0078 0, ,0018 0,0027-0, ,0026 0,0007-0, ,0094-0,0021-0, ,0029-0,0049 0, ,0081-0,0122 0, ,0004-0,0170 0,0166

17 59 c. Data Furosemida dalam Cairan Serosa pada 0,003 M No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0267 0,0178 0, ,0140 0,0121 0, ,027 0,0072 0, ,0266 0,0117 0, ,0228 0,0085 0, ,0306 0,0205 0, ,0496 0,0277 0, ,0718 0,0139 0, ,0531 0,0111 0,0420 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0137 0,0178-0, ,0172 0,0121 0, ,0739 0,0072 0, ,0311 0,0117 0, ,012 0,0085 0, ,0172 0,0205-0, ,0367 0,0277 0, ,0244 0,0139 0, ,0507 0,0111 0,0396 No Waktu (menit) Sampel Blanko Sebenarnya 1 5 0,0159 0,0178-0, ,0044 0,0121-0, ,0085 0,0072 0, ,015 0,0117 0, ,0258 0,0085 0, ,0115 0,0205-0, ,0151 0,0277-0, ,0481 0,0139 0, ,0293 0,0111 0,0182

18 60 Lampiran 14. Data Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam mcg/ml Perlakuan 0,001 M Tabet Generik 0,002 M Tablet Generik 0,003 M Tablet Generik Waktu Tablet Furosemid Dalam Interval Waktu Tertentu (mcg/ml) Rata-rata ± SD (menit) I II III 5 1,3218 1,2744 1,6672 1,4211 0, ,0000 0,4132 0,4574 0,4353 0, ,5205 0,1924 0,1672 0,2934 0, ,2177 0,0915 0,6199 0,4188 0, ,5442 0,1420 0,5931 0,5686 0, ,3265 0,6025 0,2413 0,3901 0, ,1798 0,2555 0,8249 0,4201 0, ,3880 0,2729 0,2098 0,2902 0, ,2634 0,5394 0,4069 0,4033 0, ,2350 0,1420 0,0726 0,1073 0, ,0189 0,1199 0,0126 0,0662 0, ,3186 0,5252 0,2571 0,3670 0, ,2492 0,0883 0,1104 0,1798 0, ,1656 0,0552 0,0726 0,0978 0, ,1640 0,0079 0,0095 0,0868 0, ,1688 0,1814 0,1562 0,1688 0, ,3170 0,2461 0,1893 0,2815 0, ,4306 0,5442 0,3864 0,4085 0, ,2650 0,0599 0,0946 0,1798 0, ,1546 0,2050 0,0032 0,1798 0, ,4369 1,1767 0,1451 0,5862 0, ,3596 0,4306 0,1767 0,3223 0, ,3502 0,1798 0,3975 0,3738 0, ,2839 0,0726-0,0174 0,1782 0, ,4700 0,2666-0,0741 0,3683 0, ,0379 0,2902 0,6640 0,8509 0, ,7871 0,7492 0,4117 0,7681 0,0268

19 61 Lampiran 15. Data Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam 10-3 M Perlakuan 0,001 M Tabet Generik 0,002 M Tablet Generik 0,003 M Tablet Generik Waktu Tablet Furosemid Dalam Interval Waktu Tertentu (10-3 M) Rata-rata ± SD (menit) I II III 5 0,0040 0,0039 0,0050 0,0043 0, ,0030 0,0012 0,0014 0,0013 0, ,0016 0,0006 0,0005 0,0009 0, ,0007 0,0003 0,0019 0,0013 0, ,0016 0,0004 0,0018 0,0017 0, ,0010 0,0018 0,0007 0,0012 0, ,0005 0,0008 0,0025 0,0013 0, ,0012 0,0008 0,0006 0,0009 0, ,0008 0,0016 0,0012 0,0012 0, ,0007 0,0004 0,0002 0,0003 0, ,0001 0,0004 0,0000 0,0002 0, ,0010 0,0016 0,0008 0,0011 0, ,0008 0,0003 0,0003 0,0005 0, ,0005 0,0002 0,0002 0,0003 0, ,0005 0,0000 0,0000 0,0003 0, ,0005 0,0005 0,0005 0,0005 0, ,0010 0,0007 0,0006 0,0009 0, ,0013 0,0016 0,0012 0,0012 0, ,0008 0,0002 0,0003 0,0005 0, ,0005 0,0006 0,0000 0,0005 0, ,0013 0,0036 0,0004 0,0018 0, ,0011 0,0013 0,0005 0,0010 0, ,0011 0,0005 0,0012 0,0011 0, ,0009 0,0002-0,0001 0,0005 0, ,0014 0,0008-0,0002 0,0011 0, ,0031 0,0009 0,0020 0,0026 0, ,0024 0,0023 0,0012 0,0023 0,0006

20 62 Lampiran 16. Data Kumulatif Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam mcg/ml Perlakuan 0,001 M tablet generik Waktu kumulatif tablet furosemid pada interval waktu tertentu (mcg/ml) Rata-rata ± SD (menit) I II III ( mcg/ml ) 5 66, , , , , , , , , , , , , , , , , , ,2902 5, , , , ,7208 3, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,7508 7,0978 3,6278 5,3628 2,4537 0,002 M tablet generik 10 10, ,0915 4,2587 8,6751 6, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,1325 8, , , , , , ,2492 2,9968 4,7319 8,9905 6,0227 0,003 M tablet generik 10 20, ,2492 4, ,1136 5, , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,3691 9, , , , ,7839 2, , , , , , , , , , ,2618

21 63 Lampiran 17. Data Kumulatif Tablet Furosemidan Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai dalam 10-3 M Perlakuan 0,001 M tablet generik Waktu kumulatif tablet furosemid pada interval waktu tertentu (10-3 M) Rata-rata ± SD (menit) I II III ( 10-3 M ) 5 0,1998 0,1927 0,2520 0,2148 0, ,3510 0,2551 0,3212 0,2882 0, ,4297 0,2842 0,3465 0,3535 0, ,4626 0,2981 0,4402 0,4514 0, ,5449 0,3195 0,5298 0,5373 0, ,5942 0,4106 0,5663 0,5237 0, ,6214 0,4492 0,6910 0,5872 0, ,6801 0,4905 0,7227 0,6311 0, ,7199 0,5720 0,7843 0,6921 0, ,0355 0,0215 0,0110 0,0162 0,0123 0,002 M tablet generik 10 0,0327 0,0396 0,0129 0,0262 0, ,0808 0,1190 0,0517 0,0839 0, ,1185 0,1323 0,0684 0,0935 0, ,1435 0,1407 0,0794 0,1212 0, ,1683 0,1419 0,0808 0,1246 0, ,1939 0,1693 0,1044 0,1559 0, ,2418 0,2065 0,1331 0,2241 0, ,3069 0,2888 0,1915 0,2492 0, ,0401 0,0091 0,0143 0,0272 0,0166 0,003 M tablet generik 10 0,0634 0,0401 0,0148 0,0517 0, ,1295 0,2179 0,0367 0,1280 0, ,1838 0,2830 0,0634 0,1768 0, ,2368 0,3102 0,1235 0,1801 0, ,2797 0,3212 0,1209 0,3004 0, ,3508 0,3615 0,1097 0,3561 0, ,5077 0,4054 0,2101 0,3589 0, ,6266 0,5186 0,2723 0,5726 0,1816

22 64 Lampiran 18. Perhitungan Analysis of Variance (ANOVA) Kumulatif Tablet Furosemida Generik pada Kantung Terbalik (everted sac) Jejunum Kelinci dengan Berbagai Waktu Source of variation Sum of Squares df Mean Square F hitung F tabel Sig. Between Groups 8144, ,460 75,583* 5,14 0,000 5 menit Within Groups 323, ,881 Total 8468,206 8 Between Groups 16590, ,134 71,303* 5,14 0, menit Within Groups 698, ,337 Total 17288,289 8 Between Groups 13722, ,481 12,823* 5,14 0, menit Within Groups 3210, ,089 Total 16933,494 8 Between Groups 15451, ,550 10,000* 5,14 0, menit Within Groups 4635, ,529 Total 20086,276 8 Between Groups 20419, ,550 10,756* 5,14 0, menit Within Groups 5695, ,195 Total 26114,272 8 Between Groups 27023, ,780 16,126* 5,14 0, menit Within Groups 5027, ,909 Total 32051,013 8 Between Groups 32612, ,378 11,800* 5,14 0, menit Within Groups 8291, ,869 Total 40903,969 8 Between Groups 31697, ,507 10,545* 5,14 0, menit Within Groups 9017, ,982 Total 40714,903 8 Between Groups 24704, ,077 6,500* 5,14 0, menit Within Groups 11402, ,339 Total 36106,185 8 * The mean difference is significant at the 0.05 level.

23 65 Lampiran 19. Perhitungan Analysis Variance (ANOVA) dan Least Significant Difference (LSD) terhadap Area Under The Curve (AUC) Tablet Furosemida Generik pada Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci dengan Berbagai ANOVA Source of Sum of df Mean F F Sig. variation Squares Square hitung tabel Between Groups 289, ,689 15,470* 5,14 0,004 Within Groups 56, ,353 Total 345,494 8 LSD Mean Difference (I-J) Std.Error Sig. (I) (J) 1 mm 2 mm 13,84443* 2, ,001 3 mm 5, , ,054 2 mm 1 mm -13,84443* 2, ,001 3 mm -7,89037* 2, ,020 3 mm 1 mm -5, , ,054 2 mm 7,89037* 2, ,020 * The mean difference is significant at the 0.05 level.

24 66 Lampiran 20. Gambar Grafik Log Kumulatif Terhadap Waktu dari 0,001 M, 0,002 M dan 0,003 M Tablet Furosemida Generik dengan Menggunakan Orde Satu 3.0 Log Kumulatif (mcg/ml) waktu (menit) 0,001 M; y = 0,0119 x + 1,8732 0,002 M; y = 0,0273 x + 0,7959 0,003 M; y = 0,0298 x + 1,0082

25 67 Lampiran 21. Gambar Grafik Kumulatif Terhadap Akar Waktu dari 0,001 M, 0,002 M dan 0,003 M Tablet Furosemida Generik dengan Menggunakan Orde Higuchi 250 Kumulatif (mcg/ml) Akar waktu (menit) 0,001 M; y =35,344 x - 12,272 0,002 M; y = 16,794 x - 40, 325 0,003 M; y = 36,02 x - 93,691

26 68 Pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik dengan konsentrasi 1,0 mm, dipipet larutan sebanyak 0,5 ml, diencerkan dengan larutan dapar fosfat ph 6,0 dalam labu tentukur 25 ml sampai garis tanda. Kemudian serapannya diukur pada panjang gelombang 277,0 nm sehingga diperoleh absorbansi 0,0759. Kemudian dihitung harga konsentrasi berdasarkan nilai absorbansi tersebut dengan menggunakan metode pendekatan berdasarkan rumus : A 1 = C 1 A C 2 2 Sehingga diperoleh harga konsentrasi cuplikan. Pada waktu t = 5 menit, diperoleh konsentrasi = mcg/ml, maka harga konsentrasi kumulatif pada menit ke-5 adalah : 25ml mcg/ml x x 1 ml = mcg/ml = M 0,5ml Pada waktu t = 10 menit, diperoleh konsentrasi = mcg/ml, maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-10 adalah: 25ml mcg / mlx x1ml + 0,5ml mcg/ml = + mcg/ml = mcg/ml = M Pada waktu t = 15 menit, diperoleh konsentrasi = konsentrasi cuplikan pada menit ke-15 adalah : mcg/ml, maka 25ml mcg / mlx x1ml + mcg/ml= 0,5ml = + mcg/ml = mcg/ml = M Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh kadar kumulatif tablet furosemida pada menit ke-45.