KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI EKSTRAK ETANOL PUCUK LABU SIAM (Sechium edule (Jacq.) Sw.) SKRIPSI OLEH: TARZIAH NIM 101524036 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012 1
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI EKSTRAK ETANOL PUCUK LABU SIAM (Sechium edule (Jacq.) Sw.) SKRIPSI Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: TARZIAH NIM 101524036 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012 2
PENGESAHAN SKRIPSI KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI EKSTRAK ETANOL PUCUK LABU SIAM (Sechium edule (Jacq.) Sw.) OLEH: TARZIAH NIM 101524036 Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: Juli 2012 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. NIP 195112231980032002 NIP 195709091985112001 Pembimbing II, Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. NIP 195112231980032002 Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt. Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 194908111976031001 NIP 195310301980031002 Medan, Juli 2012 Fakultas Farmasi Dekan, Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP 195304031983032001 Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002 3
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Allah SWT, karena limpahan rahmat dan karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Steroid/Triterpenoid dari Ekstrak Etanol Pucuk Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.), yang merupakan salah satu syarat memperoleh gelar sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatra Utara Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat selama penelitian dengan penuh kesabaran hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu Marianne, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang telah membimbing penulis selama menjalani pendidikan. Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi yang telah mendidik selama perkuliahan. Ibu dan Bapak Kepala Laboratorium Penelitian dan Laboratorium Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Bapak Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt., Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dan saran selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. 4
Penulis juga ingin mempersembahan terimakasih yang tak terhingga dan rasa cinta yang mendalam kepada kedua orangtua, ayahanda Armoza dan ibunda Syamsiar, untuk nasehat dan motivasinya dalam menyelesaikan pendidikan ini. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangannya, oleh karena itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang Farmasi. Medan, Juli 2012 Penulis, Tarziah 5
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI EKSTRAK ETANOL PUCUK LABU SIAM (Sechium edule (Jacq.) Sw.) ABSTRAK Salah satu suku Cucurbitaceae yaitu labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.), dapat digunakan untuk mengobati penyakit batu ginjal, arteriosklerosis dan tekanan darah tinggi. Labu siam mengandung saponin, flavonoid, polifenol, dan steroid/triterpenoid. Karakterisasi simplisia serta kandungan senyawa kimia yang terkandung dalam pucuk labu siam belum tercantum di buku Materia Medika Indonesia. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakterisasi simplisia, skrining fitokimia untuk senyawa yang terkandung di dalam pucuk labu siam dan mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid. Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, ekstraksi dilakukan secara maserasi dengan etanol, kemudian ekstrak yang diperoleh dilakukan ekstraksi cair-cair dengan n-heksan dan kromatografi cair vakum (KCV), isolasi dengan kromatografi kolom (KK) dan dikromatografi lapis tipis (KLT), isolasi triterpenoid dilakukan dengan menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) preparatif, uji kemurnian dengan kromatografi lapis tipis (KLT) dua arah dan isolat yang diperoleh dikarakterisasi secara spektrofotometri ultraviolet (UV) dan spektrofotometri inframerah (IR). Hasil karakterisasi simplisia pucuk labu siam meliputi kadar air 3,99%, kadar sari yang larut air 33,45%, kadar sari yang larut dalam etanol 9,96%, kadar abu total 4,13% dan kadar abu tidak larut asam 0,96%. Hasil skrining fitokimia pucuk daun labu siam mengandung flavonoid, steroid/triterpenoid, tanin, glikosida, dan saponin. Hasil analisis isolat menunjukkan bahwa isolat yang diperoleh adalah senyawa golongan steroid/triterpenoid dengan harga Rf 0,35 dengan penampak bercak Liebermann-Burchard berwarna merah ungu dan isolat yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri UV memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang (λ) 207,5 nm menunjukkan adanya gugus kromofor dan hasil spektrofotometri IR diketahui adanya gugus OH, C-H alifatis, C=O, C=C, -CH 2, CH 3 dan C-O. Kata kunci: Sechium edule (Jacq.) Sw., karakterisasi, skrining fitokimia, isolasi, steroid/triterpenoid. 6
SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ISOLATION OF STEROID/TRITERPENOID n-hexane FRACTION ETHANOL EXTRACT OF CHAYOTE SHOOTS (Sechium edule (Jacq.) Sw.) ABSTRACT One of the Cucurbitaceou plans is chayote (Sechium edule (Jacq.) Sw.). used to treat kidney stone disease, arteriosclerosis and high blood pressure that contains saponin, flavonoid, polyphenol, and steroid/triterpenoid. Simplex characterization and chemical content contained in chayote shoots are not listed in the book Materia Medika Indonesia. The purpose of this study was to determine the simplex characterization, phytochemical screening for compounds that contained in chayote shoots and isolating the compound of steroid/triterpenoid. This research included the simplex characterization, phytochemical screening, extraction accomplished by maceration with ethanol, the extract with liquid extraction, isolated with Vacuum Liquid Chromatography, isolated with Coloumn Chromatography and the fraction with Thin Layer Chromatography, the steroidal isolation was accomplished by using the preparative Thin Layer Chromatography, the purity test by two-dimensional Thin Layer Chromatography, and the resulting isolate was identified by ultraviolet spectrophotometry and infrared spectophotometry. The result of simplex characterization included the water content 3.99%, water-soluble extract content 33.45%, ethanol-soluble extract content 9.96%, total ash content 4.13%, acid-insoluble ash content 0.96%. The result of phytochemical screening of chayote shoots contain flavonoid, steroid/triterpenoid, tannin, glikosida, and saponin. The result of isolate analysis indicated that the isolate was steroid/triterpenoid Rf 0.35 red purple with Liebermann-Burchard reagent, and the resulting isolat was then analyzed by UV spectrophotometry that have maximum absorbtion at wavelength 207.5 nm to indicate the presence of chromophor and the result of IR spectrophotometry indicated the presence of OH and C-H, C=O, C=C, CH 2, CH 3, C-O functional groups. Key words: Sechium edule (Jacq.) Sw.), characterization, phytochemical screening, isolation, steroid/triterpenoid. 7
DAFTAR ISI Halaman JUDUL... HALAMAN JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii iv vi vii viii xiii xiv xv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 2 1.3 Hipotesis... 3 1.4 Tujuan... 3 1.5 Manfaat... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5 2.1 Uraian Tumbuhan... 5 2.1.1 Daerah tumbuh... 5 2.1.2 Nama daerah... 5 2.1.3 Nama asing... 6 2.1.4 Sistematika tumbuhan... 6 8
2.1.5 Morfologi tumbuhan... 6 2.1.6 Kandungan kimia... 7 2.1.7 Kegunaan labu siam... 7 2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan... 10 2.2.1 Alkaloida... 10 2.2.2 Flavonoida... 11 2.2.3 Saponin... 11 2.2.4 Tanin... 12 2.2.5 Glikosida... 13 2.2.6 Glikosida antrakuinon... 13 2.2.7 Steroid/Triterpenoid... 14 2.3 Metode Ekstraksi... 15 2.4 Kromatografi... 17 2.4.1 Kromatografi lapis tipis... 17 2.4.2 Kromatografi cair vakum... 20 2.4.3 Kromatografi kolom... 21 2.4.4 Kromatografi lapis tipis preparatif... 21 2.4.5 Kromatografi lapis tipis dua arah... 22 2.5 Spektrofotometri... 23 2.5.1 Spektrofotometri sinar ultraviolet... 23 2.5.2 Spektrofotometri sinar inframerah... 23 BAB III METODE PENELITIAN... 25 3.1 Alat-alat... 25 3.2 Bahan-bahan... 26 9
3.3 Pembuatan Pereaksi... 26 3.3.1 Pereaksi Bouchardat... 26 3.3.2 Pereaksi Mayer... 26 3.3.3 Pereaksi Dragendorff... 26 3.3.4 Pereaksi Molish... 27 3.3.5 Larutan Asam Klorida 2 N... 27 3.3.6. Larutan Asam Sulfat 2 N... 27 3.3.7 Larutan Asam Nitrat 0,5 N... 27 3.3.8 Larutan Timbal (II) Asetat 0,4 M... 27 3.3.9 Larutan Besi (III) Klorida 1% b/v... 27 3.3.10 Larutan Pereaksi Kloralhidrat... 27 3.3.11 Larutan Pereaksi Lieberman-Burchard... 27 3.3.12 Larutan Floroglusin HCl... 28 3.4 Pengumpulan Bahan Tumbuhan, Identifikasi Tumbuhan Dan Pembuatan Simplisia... 28 3.4.1 Pengumpulan bahan tumbuhan... 28 3.4.2 Identifikasi tumbuhan... 28 3.4.3 Pembuatan simplisia... 28 3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia... 29 3.5.1 Pemeriksaan makroskopik... 29 3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik... 29 3.5.3 Penetapan kadar air... 29 3.5.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air... 30 3.5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol... 31 3.5.6 Penetapan kadar abu total... 31 10
3.5.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam... 31 3.6 Skrining Fitokimia... 32 3.6.1 Pemeriksaan alkaloida... 32 3.6.2 Pemeriksaan flavonoid... 32 3.6.3 Pemeriksaan tanin... 32 3.6.4 Pemeriksaan glikosida... 33 3.6.5 Pemeriksaan saponin... 33 3.6.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida... 33 3.6.7 Pemeriksaan glikosida antrakuinon... 34 3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Dan Ekstraksi Cair-Cair Ekstrak Etanol... 34 3.7.1 Pembuatan ekstrak etanol... 34 3.7.2 Ekstraksi cair-cair ekstrak etanol... 35 3.8 Analisis Fraksi n-heksan Secara KLT... 35 3.9 Pemisahan Ekstrak n-heksan Dengan KCV... 36 3.10 Pemisahan Ekstrak n-heksan Dengan Kromatografi Kolom.. 37 3.11 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Hasil Kromatografi Kolom... 38 3.12 Uji Kemurnian Terhadap Kristal Hasil Isolasi... 39 3.13 Karakterisasi Isolat... 39 3.13.1 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri UV... 39 3.13.2 Karakterisasi isolat dengan spektrofotometri IR... 40 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 41 4.1 Hasil Identifikasi Sampel... 41 4.2 Hasil Karakteristik Serbuk Simplisia... 41 11
4.3 Hasil Skrining Fitokimia... 43 4.4 Hasil Ekstraksi Dan Fraksinasi Cair-Cair Senyawa Aktif Dari Ekstrak Etanol Dan Isolasi Senyawa Aktif... 45 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 48 5.1 Kesimpulan... 48 5.2 Saran... 48 DAFTAR PUSTAKA... 49 LAMPIRAN... 52 12
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 2.1 Komposisi gizi per 100 gram labu siam... 9 4.1 Hasil karakteristik simplisia dari pucuk labu siam... 42 4.2 Hasil skrining fitokimia dari simplisia pucuk labu siam... 44 4.3 Hasil spektrofotometer infrared... 47 13
DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1 Kerangka dasar flavonoida... 11 2.2 Sruktur dasar steroida dan sistem penomorannya... 14 14
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1. Identifikasi tumbuhan... 52 2. Bagan kerja penelitian... 53 3. Bagian makroskopik tumbuhan dari pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.... 54 4. Bagian mikroskopik dari pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.... 56 5. Bagan skrining fitokimia dan karakterisasi serbuk simplisia... 59 6. Bagan pembuatan ekstrak etanol pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)... 60 7. Bagan ekstraksi cair-cair ekstrak etanol... 61 8. Isolasi steroid/triterpenoid dari fraksi n-heksan pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)... 62 9. Kromatogram dan harga Rf dari fraksi n-heksan pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)... 64 10. Kromatogram cair vakum I... 65 11. Kromatogram cair vakum II... 66 12. Kromatogram kolom... 67 13. KLT preparatif... 68 14. KLT dua arah dan harga Rf... 69 15. Panjang gelombang isolat pucuk labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)... 70 16. Spektrum isolat... 71 17. Perhitungan hasil penetapan kadar... 72 15