TERHADAP SURVIVAL DAN PATOGENISITAS CENDAWAN Aspergillus niger. Oleh: DENY KURNIAWAN G

Transkripsi

1 PENGARUH KEPADATAN LARVA Aedes egypti DAN KEKERINGAN TERHADAP SURVIVAL DAN PATOGENISITAS CENDAWAN Aspergillus niger Oleh: DENY KURNIAWAN G DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2010

2 ABSTRAK DENY KURNIAWAN. Pengruh Kepdtn Lrv Aedes egypti dn Kekeringn Terhdp Survivl dn Ptogenisits Cendwn Aspergillus niger. Diiming oleh NAMPIAH SUKARNO, dn UPIK KESUMAWATI HADI. Penelitin ini ertujun untuk mempeljri pengruh kepdtn lrv Aedes egypti dn kekeringn terhdp survivl dn ptogenisits cendwn Aspergillus niger. Pengruh kepdtn lrv terhdp survivl dn ptogenisits cendwn dipeljri pd lrv instr III, sedngkn pengruh kekeringn dipeljri pd telur A. egypti. Uji survivl dn ptogenisits A. niger terhdp lrv A. egypti dilkukn pd medi ir krn tidk steril. Cendwn yng digunkn ilh A. niger trnsgenik yng mempunyi mrker pennd molekuler gfp. Perlkun kepdtn lrv yng digunkn ilh 10, 50, 100, 150, dn 200 ekor, sedngkn telur yng digunkn ilh telur yng erumur stu minggu. Prmeter yng dimti ilh jumlh koloni cendwn A. niger, kemtin lrv, dn dy tets telur A. egypti. Survivl cendwn pd medi ir menurun pd hri kedu pd semu perlkun. Jumlh koloni cendwn pd hri kedu setelh inokulsi menurun dri 1x10 8 menjdi sekitr 225 spor per ml medi dn pd hri keenm menjdi 30 spor per ml. Pd hri ketujuh terjdi peningktn kemli menjdi sekitr 40 spor per ml. Kemtin lrv terjdi muli pd hri ketig inkusi. Kemtin lrv pd hri ketig inkusi pd kepdtn 10, 50, 100, 150, dn 200 ekor lrv, msing-msing ilh seesr 6.7, 9.3, 13.0, 18.0, dn 21.5%. Kemtin lrv terus meningkt smpi pd hri keempt els inkusi yitu menjdi 33.3, 38.7, 52.0, 54.4, dn 58.5% untuk msing-msing perlkun kepdtn lrv. Ptogenisits A. niger terhdp telur A. egypti sngt tinggi. Senyk 200 utir telur A. egypti yng diinokulsi A. niger dn diinkusi selm empt els hri seluruhny tidk menets. ABSTRACT DENY KURNIAWAN. Effect of lrvl density of Aedes egypti nd dryness on survivl nd pthogenicity of Aspergillus niger. Supervised y NAMPIAH SUKARNO, nd UPIK KESUMAWATI HADI. The im of the experiment ws to study the effect of Aedes egypti lrvl density nd dryness on survivl nd pthogenicity of Aspergillus niger. The effect of lrvl density on survivl nd pthogenicity of A. niger ws studied using instr III of A. egypti lrve, wheres the effect of dryness ws studied on A. egypti egg. The survivl nd pthogenicity test of A. niger on A. egypti lrve were crried out in unsterilized tp wter. The fungi used ws A. niger crrying gfp gene s mrker. The tretment of lrvl density used were 10, 50, 100, 150, nd 200 lrve. The numer nd ge of eggs used were 200 nd week-old, respectively. Prmeters mesured were numer of A. niger colony, lrvl mortlity, nd eggs htching. The result showed tht fungl survivl tht indicted y numer of colony reduced from 1x10 8 spores in first dy to 225 spores in the second dy nd the reduction continued until 6 dys fter incution to 30 spores. At 7 dys incution, the colony incresed to 40 spores. A. niger hd high pthogenicity on lrve nd eggs of A. egypti. The mortlity of lrve t ll tretments strted t 3 dys fter inocultion. The mortlity t 3 dys fter inocultion were 6.7, 9.3, 13.0, 18.0, nd 21.5% t 10, 50, 100, 150, nd 200 lrvl, respectively. The mortlity incresed t 14 dys fter inocultion. The vlues were 33.3, 38.7, 52.0, 54.4, nd 58.5% t 10, 50, 100, 150, nd 200 lrvl density tretment, respectively. The A. niger hd high pthogenicity on A. egypti eggs. All of eggs tested did not htch fter inoculted y A. niger nd incuted for 14 dys.

3 PENGARUH KEPADATAN LARVA Aedes egypti dn KEKERINGAN TERHADAP SURVIVAL DAN PATOGENISITAS CENDAWAN Aspergillus niger Skripsi Segi slh stu syrt untuk memperoleh gelr Srjn Sins pd Fkults Mtemtik dn Ilmu Pengethun Alm Institut Pertnin Bogor Oleh: Deny Kurniwn G DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2010

4 Judul : Pengruh Kepdtn Lrv Aedes egypti dn Kekeringn Terhdp Survivl dn Ptogenisits Cendwn Aspergillus niger. Nm : Deny Kurniwn NIM : G Menyetujui : Pemiming I, Pemiming II, Dr. Ir. Nmpih Sukrno Dr. drh. Upik Kesumwti H, MS NIP NIP Mengethui : Ketu Deprtemen Dr. Ir. Ence Drmo Jy Supen, M. Si NIP Tnggl Lulus :

5 PRAKATA Alhmdulillh, puji dn syukur penulis pnjtkn kepd Allh SWT, ts segl kruni yng telh dilimphkn-ny sehingg penulis dpt menyelesikn kry ilmih yng erjudul Pengruh Kepdtn Lrv Aedes egypti dn Kekeringn Terhdp Survivl dn Ptogenisits Cendwn Aspergillus niger. Kry ilmih ini dilksnkn dri uln Feruri 2008 smpi dengn April 2009 ertempt di Bgin Mikologi FMIPA IPB dn Lortorium Entomologi FKH IPB. Terim ksih penulis ucpkn kepd Iu Dr. Ir. Nmpih Sukrno dn Iu Dr. drh. Upik Kesumwti Hdi, MS selku pemiming yng telh memerikn srn, imingn, dn motivsi sert kepd Iu Dr. Hild Akml selku penguji yng telh memerikn srn dn kritik dlm penyusunn kry ilmih ini. Ucpn terim ksih jug penulis smpikn kepd Bpk, Iu, dn dikku ts do, ksih syng, dn dukungnny. Terim ksih jug penulis ucpkn kepd stf Lortorium Entomologi FKH IPB, stf Bgin Mikologi, M Rid, Teh Yuli, Sint, Ydi, Andik, dn temn-temn di L Mikologi, M Nindi, K Mifth, temn-temn kost COKLAT, rekn-rekn Biologi 41 ts ntun, perhtin, dn pershtnny dlm penyelesin Kry Ilmih ini. Semog kry ilmih ini ermnft. Bogor, April 2010 Deny Kurniwn

6 RIWAYAT HIDUP Penulis dilhirkn di Jkrt tnggl 3 Desemer 1985 dri yh Hdi Suroyo dn iu Purwti. Penulis merupkn nk kedu dri tig ersudr. Thun 2004 penulis lulus dri SMU YPI 45 Beksi dn pd thun yng sm diterim di Institut Pertnin Bogor mellui jlur Undngn Seleksi Msuk IPB (USMI). Penulis memilih Deprtemen Biologi, Fkults Mtemtik dn Ilmu Pengethun Alm. Selm mengikuti perkulihn penulis pernh menjdi sisten mt kulih Ekologi Dsr thun jrn 2004/2005, mt kulih Biologi Dsr 2006/2007 dn 2007/2008, mt kulih Fisiologi Tumuhn thun jrn 2006/2007, dn mt kulih Biologi Cendwn thun jrn 2007/2008. Penulis jug pernh ktif segi nggot BEM FMIPA periode 2006/2007 dn kegitn ekstrkurikuler dlm idng kewirushn di Deprtemen Biologi yitu BIOWORLD dn turut sert segi pniti dlm ergi kegitn kemhsiswn. Penulis pernh mendpt esisw BBM pd thun 2006/2007, dn 2007/2008. Penulis melksnkn prktik lpngn dengn judul Ttlksn Pemerin Pkn pd Spi Perh di PT Susu Sury Sukumi, Jw Brt pd uln Jnuri 2007.

7 DAFTAR ISI Hlmn DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR.. DAFTAR LAMPIRAN... PENDAHULUAN... Tujun Wktu dn Tempt... BAHAN DAN METODE Alt dn Bhn.. Metode Penelitin... Produksi telur dn lrv nymuk A. egypti... Produksi cendwn... Survivl cendwn A. niger pd ir krn tidk steril.... Ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti Pengruh A. niger terhdp penetsn telur A. egypti. Uji Postult Koch.... Morfologi lrv mti kit inokulsi A. niger..... Anlisis Dt... HASIL DAN PEMBAHASAN Survivl cendwn A. niger pd ir krn tidk steril... Ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti.. Pengruh A. niger terhdp penetsn telur A. egypti.... Uji Postult Koch Morfologi lrv mti kit inokulsi A. niger..... SIMPULAN. SARAN DAFTAR PUSTAKA.. LAMPIRAN.... viii viii viii vii

8 1 DAFTAR TABEL Hlmn Pengruh jumlh lrv A. egypti terhdp populsi cendwn A. niger pd hri keempt els Pengruh inokulum cendwn A. niger terhdp telur A. egypti. 8 DAFTAR GAMBAR Hlmn Jumlh koloni A. niger selm 7 hri inkusi. A) Botol selnjutny ditmhkn 10 ekor lrv pd hri kedelpn, B) Botol selnjutny ditmhkn 50 ekor lrv pd hri kedelpn, C) Botol selnjutny ditmhkn 100 ekor lrv pd hri kedelpn, D) Botol selnjutny ditmhkn 150 ekor lrv pd hri kedelpn, dn E) Botol selnjutny ditmhkn 200 ekor lrv pd hri kedelpn. Jumlh koloni pd perlkun inokulsi A. niger seelum pemerin lrv A. egypti (SI), dn jumlh koloni pd perlkun tnp inokulsi (kontrol) seelum pemerin lrv A. egypti Koloni A. niger hsil uji survivl yng ditumuhkn pd medi PDA Kurv persentse kemtin lrv A. egypti pd ergi kepdtn dindingkn dengn msing-msing kontrol selm 14 hri inkusi. A) Kepdtn 10 ekor lrv, B) Kepdtn 50 ekor lrv, C) Kepdtn 100 ekor lrv, D) Kepdtn 150 ekor lrv, dn E) Kepdtn 200 ekor lrv. Jumlh lrv (L), Inokulsi A. niger (I), dn tnp inokulsi A. niger (K).... Koloni A. niger hsil uji postult Koch Proses kolonissi cendwn pd lrv. A) Miselium yng menemus slurn pencernn (peresrn 100x), B) Miselium yng tumuh di sel ntr sekt (peresrn 100x), dn C) Kepl konidi (peresrn 400x) DAFTAR LAMPIRAN Hlmn Struktur mikroskopis Aspergillus niger... Jumlh koloni cendwn A. niger seelum penmhn lrv A. egypti... Persentse kemtin pd ergi kepdtn lrv A. egypti yng diinokulsi A. niger dindingkn dengn kontrol... Persentse kemtin lrv pd tip-tip kepdtn lrv A. egypti yng diinokulsi A. niger viii

9 PENDAHULUAN Demm Berdrh Dengue (DBD) msih merupkn mslh kesehtn utm di nyk negr su tropis dn tropis. Penykit ini menyer ik di pedesn mupun di perkotn sert menimulkn kejdin lur is (KLB) di ergi derh. Pndemi DBD muli timul di Asi pd ms perng duni ke-2. Akit proses urnissi penduduk gun mencri penghidupn, tempt tinggl, dn pekerjn sert migrsi ke derh-derh lin segi dmpk perng duni ke-2, penyern dengue semkin melus. Epidemi pertm DBD di Asi Tenggr terjdi di Mnil, Filipin pd thun Semkin sering terjdi, hingg pd thun 1995 DBD telh menjdi penye utm kemtin pd nk-nk di ergi negr Asi (Guler 1997). Di Indonesi, DBD pertm kli dicurigi di Sury pd thun 1968, tetpi konfirmsi virologis ru diperoleh pd thun Thun 1972 ksus DBD erturut-turut dilporkn di Jkrt, Bndung, dn Yogykrt. Dri thun 1968 smpi thun 1972 wh hny dilporkn di Pulu Jw. Epidemi pertm di lur Pulu Jw dilporkn pd thun 1972 di Sumter Brt dn Lmpung, disusul pd thun 1973 di Riu, Sulwesi Utr dn Bli. Pd thun 2007 senyk orng meninggl dri ksus (Suhryono et l. 2007). Penykit DBD disekn oleh virus dri fmili Flviride yng ditulrkn oleh nymuk (rthropod orne virus = rovirus). Virus terseut mempunyi 4 serotipe yitu DEN-1, DEN-2, DEN-3 dn DEN-4. Di Indonesi, vektor utm virus dengue yng menyekn penykit demm erdrh dlh Aedes egypti dn A. lopictus. Nymuk A. lopictus hidup di semk-semk dn erd di lur rumh di pepohonn, keun, tu kwsn pinggir hutn sert di pedesn (Hdi & Koeshrto 2006), sedngkn A. egypti ersift ntropofilik (senng pd mnusi) dn menyuki genngn ir ersih untuk tempt erikny, sehingg yng nyk erpern menulrkn DBD dlh A. egypti. Selin penykit DBD, nymuk A. egypti jug dpt menulrkn penykit cikunguny (Hdi & Koeshrto 2006), filrisis sert demm kuning. Smpi st ini pengotn untuk DBD elum ditemukn, sedngkn pengotn yng d hny ersift menyemuhkn gejl yng terjdi. Oleh kren itu, cr penceghn yng dilkukn dlh dengn memutus siklus hidup nymuk vektor. Cr-cr penceghn vektor yng umum dilkukn dlh dengn cr meknis, kimiwi, dn menggunkn gen iotik. Cr meknis yitu dengn upy-upy penghilngn tempt erkemng ik nymuk A. egypti seperti gerkn 3M (Mengurs, Menutup tempt penmpungn dn Menguur rng-rng eks), dn menjg keersihn lingkungn. Adpun cr kimiwi menggunkn insektisid. Insektisid dpt menyekn resistensi terhdp serngg trget tu memunuh serngg nontrget, meningglkn residu pd lingkungn sert menyekn gnggun kesehtn pd mnusi. Nymuk A. egypti termsuk ke dlm kels Insekt, ordo Dipter, suordo Nemtocer, fmili Culicide, sufmili Culicine, dn genus Aedes (Borror & White 1970). Nymuk A. egypti menglmi metmorfosis sempurn, yitu telur, lrv (jentik), pup, dn dews. Nymuk penulr demm erdrh dlh A. egypti dn A. lopictus. Nymuk dri genus Aedes ini erwrn elng hitm putih, terser di derh tropis, tetpi ersl dri Afrik. Nymuk Aedes dpt diedkn dri jenis nymuk umum linny dengn meliht ujung domen (perut) yng meruncing. Aedes yng erpern segi vektor penykit, semuny tergolong dri sugenus Stegomyi, dengn ciri-ciri tuuhny memiliki cork elng hitm putih pd torks (dd), domen (perut), dn tungki (kki). Cork ini merupkn sisik yng menempel di lur tuuh nymuk (Hdi & Koeshrto 2006). Nymuk A. egypti umumny erkemng ik dlm tempt penmpungn ir yng tidk erlskn tnh seperti k mndi, tempyn, drum, vs ung, dn rng eks yng dpt menmpung ir hujn di derh urn dn suurn. A. lopictus jug memiliki sift yng sm nmun leih nyk terdpt di lur rumh. Telur Aedes erwrn hitm, ovl, dengn permukn poligonl, sert erwrn hitm. Telur diletkkn stu perstu tu erkelompok di dekt permukn ir di 1

10 dinding wdh. Jumlh telur untuk stu kli ms ertelur erkisr ntr utir. Apil telur ini dlm kedn kering, telur dpt erthn (dormn) selm eerp minggu tu hkn hingg stu thun. Ketik wdh ir terseut erisi ir lgi seluruh gin telur terendm ir, mk telur terseut kn menets menjdi jentik (lrv). Jentik nymuk tidk erlengn, ddny leih ler dri keplny. Keplny erkemng ik dengn sepsng nten dn mt mjemuk, sert sikt mulut yng menonjol. Stdium lrv tu jentik, sewktu istirht tuuhny mementuk sudut dengn permukn ir. Mknn lrv erup erup lg, kteri, dn hn-hn kecil seesr mikron. Jentik menglmi empt kli proses pergntin kulit (instr) dn dlm kondisi yng sesui kn erkemng menjdi pup (kepompong) dlm wktu 6-8 hri (Hdi & Koeshrto 2006). Stdium selnjutny dlh pup, merupkn stdium terkhir erd dlm ir. Pup erentuk kom dengn kepl yng esr. Stdium pup ini dlh stdium tidk mkn. Bil tergnggu di kn ergerk nik turun di dlm wdh ir. Setelh menjdi pup, khirny menjdi imgo (dews) yng dpt terng dn kelur dri ir (Hdi & Koeshrto 2006). Nymuk etin isny sngt ktif di dlm rumh tu kdng-kdng jug di lur rumh. Pd mlm hri nymuk ini eristirht di dlm rumh pd endend yng digntung di dinding tu di lur rumh dekt dengn tempt erikny yng gk gelp. A. egypti mempunyi keisn menggigit erulng kli (multiple itters) yitu menggigit eerp orng secr ergntin dlm wktu yng singkt. Hl ini disekn di sngt sensitif dn mudh tergnggu. Kedn ini sngt memntuny dlm memindhkn virus ke eerp orng sekligus sehingg dilporkn dny eerp orng penderit DBD pd stu rumh. Nymuk A. egypti ktif pd sing hri ntr pukul dn sore pukul Nymuk etin mengisp drh dn nymuk jntn menghisp mdu, ir gul, tu ir uh-uhn. Nymuk etin yng telh mengisp drh, tig hri sesudhny mmpu ertelur senyk 100 utir dn 24 jm kemudin nymuk itu dpt mengisp drh kemli untuk selnjutny kemli ertelur. Siklus hidup is lengkp hny dlm wktu stu minggu tu leih, tergntung pd suhu, mknn, spesies dn fktor lin (Hdi & Koeshrto 2006). Pengendlin A. egypti segi vektor DBD dpt ditunjukkn pd individu mupun populsiny. Seperti serngg pd umumny, stdium terlemh dlm siklus hidupny dlh stdium lrv (Putr 1995). Teknn pengendlin pd ssrn ini dlh memutus siklus hidupny. Stdium lrv sngt rentn kren hmpir seluruh ms hidupny dilkukn di dlm ir dn medi terseut mempermudh dlm pengmtn. Dlm perkemngnny, pertumuhn lrv dipengruhi oleh nyk fktor, yitu suhu, nutrisi, predtor tu prsit. Oleh kren itu, pliksi penggunn cendwn entomoptogen sngt ik dilkukn pd stdium ini. Pd stdium erikutny, yitu telur merupkn stdium yng pling thn terhdp peruhn lingkungn. Nmun telur ersift nonmotil tu tidk dpt ergerk, sehingg memudhkn infeksi cendwn entomoptogen dn meliht pengruh kekeringn dlm pertumuhn cendwn. Sensitivits stdium telur terhdp kolonissi cendwn entomoptogen leih rendh dri lrv nmun telur merupkn slh stu stdium nymuk Aedes yng thn terhdp kekeringn dlm wktu yng lm (Hdi & Koeshrto 2006), sehingg stdium telur didug erpern penting dlm menjg kelngsungn hidup cendwn pd st menglmi proses kekeringn. Dlm rngk upy pengendlin nymuk vektor DBD, penelitin dlm skl lortorium digunkn ir steril dn tidk steril dn telh menghsilkn eerp isolt potensil yng mmpu memunuh leih dri 80% lrv nymuk dri ergi instr dlm wktu yng reltif singkt yitu kurng dri 12 jm. Slh stu isolt yng potensil terseut ilh A. niger (Ntli et l. 2000; Oktvini 2007). Cendwn ini mempunyi potensi yng ik segi gen pengendli hyti nymuk A. egypti jik dindingkn dengn isolt-isolt yng dipki di lur negeri seperti Amerik kren ersift prsitik fkulttif sehingg mudh untuk dipernyk. Selin itu, isolt terseut telh erhsil disisipi dengn gen gfp yng dpt digunkn segi pennd khusus untuk mempeljri kelngsungn hidup, ekologi, proses kolonissi, dn interksi ntr cendwn dengn inng di lm (Lorng et l. 2001). Oleh kren itu diperlukn penelitin leih lnjut mengeni 2

11 survivl dn ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv dn telur nymuk A. egypti. Kepdtn lrv A. egypti segi inng didug dpt mempengruhi survivl dn ptogenisits cendwn A. niger segi cendwn entomoptogen. Telur A. egypti merupkn stdium yng thn terhdp kekeringn sehingg perlu dilkukn penelitin terhdp kemmpun cendwn dlm mengendlikn dy tets telur. Informsi ini diperlukn untuk mengethui survivl cendwn pd kondisi kekeringn dn pengruhny terhdp pengendlin nymuk A. egypti terutm pd stdium telur. Cendwn A. niger merupkn cendwn kosmopolit sl tnh. Cendwn A. niger tergolong dlm kels Deuteromycetes, Fmili Monilicee, dn Genus Aspergillus (Kiffer & Morelet 2000). Secr mikroskopik memiliki hif septt dn tidk erwrn. Koloni pd gr Czpek pd suhu 25 0 C memiliki dimeter sekitr 4-5 cm slm 7 hri inkusi, dengn gin yng pdt erwrn putih tu kuning il diliht pd gin elkng medi, dn konidiospor erwrn coklt gelp tu hitm. Kepl konidi erentuk rdit. Konidiofor erdinding tipis, hilin, nmun sering erwrn coklt. Vesikel erentuk glous tu suglous, dn erdimeter µm. Filid tumuh pd metul, dengn metul erwrn hilin tu coklt. Konidi erentuk glus tu suglous dengn dimeter µm (Smson & vn Reenen-Hoekstr 1998). Penyern utm cendwn entomoptogen ini ilh dengn cr menghsilkn propgul yng infektif dlm jumlh esr ke lingkungn. Siklus infeksi kn erlnjut pil inng yng rentn melkukn kontk dengn propgul cendwn yng infektif sehingg keerhsiln dri penyern cendwn terseut ergntung pd kerptn (jumlh) populsi inng yng rentn. Kren keerhsiln kolonissi pd inng ergntung pd jumlh inokulum yng tinggi mk cendwn melkukn eksploitsi inng untuk menghsilkn jumlh spor tu miselium yng sngt esr. Sedngkn di lm, penyern inng tidk homogen sehingg pelung kontk dengn cendwn entomoptogen ini rendh. Oleh kren itu, perlu dipeljri pengruh jumlh lrv pd populsi yng ered dn kethnn telur terhdp infeksi ptogen. Tujun Penelitin ini ertujun untuk mempeljri pengruh kepdtn lrv nymuk A. egypti segi inng terhdp survivl dn ptogenisits cendwn A. niger pd lrv dn telur nymuk A. egypti terseut. Wktu dn Tempt Penelitin ini dilksnkn muli uln Jnuri 2008 smpi dengn Mret 2009 di Lortorium Mikologi dn Lortorium Entomologi Fkults Kedoktern Hewn (FKH), Institut Pertnin Bogor. Alt dn Bhn BAHAN DAN METODE Alt yng digunkn dlh otol seli ukurn 300 ml, tung Flcon 15 ml, mikroskop chy dn flourescens, nmpn plstik, pipet mikro, dn perltn umum lortorium mikologi linny. Bhn yng digunkn ilh telur koleksi Lortorium Entomologi FKH-IPB, lrv nymuk A. egypti instr III, kloroks 1%, Tween 80 1%, medi Potto Dextrose Agr (PDA) yng mengndung ntiiotik higromisin, dn hti ym. Metode Produksi telur dn lrv nymuk A. egypti. Lrv A. egypti yng es dri infeksi ptogen (lrv steril) diproduksi dri telur koleksi Lortorium Entomologi FKH, IPB. Telur terseut ditetskn dlm nmpn erisi ir hingg menets menjdi lrv instr I, kemudin dieri mkn hti ym reus selm eerp hri smpi terentuk pup. Pup-pup dimsukkn ke dlm wdh plstik erisi ir kemudin dipelihr di dlm kndng nymuk smpi stdium dews (nymuk). Nymuk dews kn melkukn perkwinn, dn setelh eerp hri nymuk-nymuk terseut dierikn pkn drh mrmut untuk merngsng pengelurn telur. Nymuk etin yng telh dieri mkn drh setelh 2-3 hri kn meletkkn telurny pd permukn kerts sring yng direndm 3

12 pd wdh gelp erisi ir yng sisiny telh ditempelkn kerts untuk memerngkp telur. Telur-telur kemudin dikeringudrkn dn disimpn dlm wdh tertutup untuk kemudin ditetskn kemli untuk perlkun. Produksi Cendwn. Cendwn A. niger dipernyk pd medi PDA yng mengndung ntiiotik klormfenikol dn higromisin senyk 50 mg/ml selm 7-14 hri. Spor dipnen dengn cr dikerok menggunkn tng pengduk kemudin dimsukkn ke dlm cirn Tween 80 1% steril (Trrnd et l. 2005; Glre & Milner 1991). Jumlh spor dpt dihitung dengn menggunkn hemsitometer (Neuuer chmer). Spor yng diutuhkn senyk 1x10 8 spor per ml. Survivl cendwn A. niger pd ir krn tidk steril. Senyk 1x10 8 spor diinokulsikn ke dlm otol erukurn 300 ml yng erisi 150 ml ir krn, selnjutny cirn yng mengndung spor di dlm otol diinkusi selm 7 hri. Pemnenn dilkukn dengn mengmil smpel cirn senyk 100 µl kemudin ditumuhkn pd medi PDA yng mengndung 50 mg/ml higromisin dn klormfenikol. Medi terseut selnjutny diinkusi selm 1 hri dn dimti di wh mikroskop chy gun memstikn koloni yng tumuh dlh cendwn A. niger sert pengmtn di wh mikroskop stereo untuk menghitung jumlh koloni yng tumuh. Ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti. Setelh dilkukn pengmiln smpel cirn pd hri ketujuh otol percon untuk dy survivl cendwn A. niger selnjutny digi kedlm 5 kelompok; yitu kelompok pertm, ditmhkn 10 ekor lrv; kelompok ke-2, ditmhkn 50 ekor lrv; kelompok ke-3, ditmhkn 100 ekor lrv; kelompok ke- 4, ditmhkn 150 ekor lrv; dn kelompok ke-5, ditmhkn 200 ekor lrv. Setip otol diinkusi pd suhu rung selm 14 hri. Pengmtn terhdp kemtin lrv dilkukn setip hri dn penghitungn terhdp jumlh koloni dilkukn pd inkusi hri ketujuh dn hri keempt els. Setip perlkukn diulng senyk 3 kli. Pengruh A. niger terhdp penetsn telur A. egypti. Senyk 1x10 8 spor dlm 1 ml lrutn diinokulsikn pd 200 telur yng diletkkn di dlm cwn dn diinkusi selm 7 hri. Setelh 7 hri telur ditetskn dengn cr direndm dengn ir krn dn dihitung jumlh telur yng telh menets menjdi lrv. Perlkun diulng senyk 3 kli. Uji Postult Koch. Lrv nymuk yng mti dimil dri otol kultur kemudin direndm di dlm klorox stu persen selm stu menit dn diils dengn ir steril selm stu menit senyk 2 kli, kemudin diirkn kering pd kerts tisu steril. Setelh kering, lrv diinokulsikn pd medi PDA yng ditmh ntiiotik higromisin dn diinkusi selm 3-4 hri. Morfologi lrv mti kit inokulsi A. niger. Lrv diktkn mti pil memiliki ciri, yitu: tidk ergerk sm sekli tu sudh tidk erenng, wrn tuuh puct, kondisi tuuh msih utuh tu hny eerp gin tuuh sj yng rusk, erd di dsr otol tu mengpung di permukn ir. Lrv yng mti diletkkn di ts gels ojek dn dieri gliserin kemudin ditutup kc penutup untuk diut preprt semi permnen untuk kemudin dimti di wh mikroskop chy. Lrv yng mti dimti seluruh gin tuuhny, muli dri kepl hingg ekor gun mencri gin yng terinfeksi oleh cendwn. Anlisis Dt. Dt pertumuhn koloni dinlisis secr sttistik menggunkn progrm SAS dengn Rncngn Ack Lengkp (RAL) dn dilnjutkn dengn uji Duncn pd trf α=5%. HASIL DAN PEMBAHASAN I. Survivl cendwn A. niger pd ir krn tidk steril. Spor cendwn entomoptogen A. niger yng ditumuhkn pd medi ir krn tumuh, dn mementuk koloni, tetpi populsiny menurun selm ms inkusi. 4

13 A B D C E Gmr 1 Jumlh koloni A. niger selm 7 hri inkusi. A) Botol selnjutny ditmhkn 10 ekor lrv pd hri kedelpn, B) Botol selnjutny ditmhkn 50 ekor lrv pd hri kedelpn, C) Botol selnjutny ditmhkn 100 ekor lrv pd hri kedelpn, D) Botol selnjutny ditmhkn 150 ekor lrv pd hri kedelpn, dn E) Botol selnjutny ditmhkn 200 ekor lrv pd hri kedelpn. Jumlh koloni pd perlkun inokulsi A. niger seelum pemerin lrv A. egypti (SI), dn jumlh koloni pd perlkun tnp inokulsi (kontrol) seelum pemerin lrv A. egypti. Populsi cendwn menurun dengn tjm pd hri kedu setelh inkusi dn penurunn ini terus erlnjut smpi pd hri ketujuh seelum inokulsi, keculi pd perlkun otol D (Gmr 1). Pd hri keenm inkusi, jumlh koloni A. niger tumuh mendekti nili pd perlkun kontrol tu tnp inokulsi cendwn. Secr umum jumlh populsi cendwn muli meningkt kemli pd hri ketujuh inkusi, keculi pd perlkun otol C yng menunjukkn penurunn jumlh koloni. Pd perlkun otol A jumlh koloni pd hri kedu sudh terjdi penurunn dri jumlh koloni senyk 210 menjdi 85 koloni. Pd hri ketig populsi cendwn nik kemli menjdi 100 koloni, dn pd hri keenm jumlh koloniny 5

14 mendekti jumlh koloni pd kontrol. Pd hri ketujuh inkusi, populsi muli meningkt kemli menjdi 35 koloni. Pd perlkun otol B, jumlh koloni pd inkusi hri kedu terjdi penurunn dri 230 koloni menjdi 105 koloni. Pd hri ketig terjdi peningktn menjdi 120 koloni dn terjdi penurunn kemli hingg hri keenm dn ketujuh dengn jumlh mendekti kontrol. Pd perlkun otol C jug terjdi penurunn jumlh koloni pd hri kedu yitu dri 200 koloni menjdi 85 koloni, dn terjdi peningktn pd hri ketig menjdi 145 koloni sert terjdi penurunn kemli hingg hri ketujuh dengn jumlh mendekti kontrol. Pd perlkun otol D, terjdi penurunn jumlh populsi pd inkusi hri kedu, yitu dri 160 menjdi 110 koloni dn populsi meningkt kemli menjdi 130 koloni pd hri ketig. Pd hri erikutny terjdi penurunn jumlh koloni smpi mendekti kontrol. Pd perlkun otol E, terjdi penurunn di hri kedu dri 200 koloni menjdi 85 koloni, dn nik kemli pd hri ketig menjdi 120 koloni. Selnjutny terjdi penurunn hingg hri keenm hkn smpi pd jumlh di wh jumlh populsi kontrol. Kemudin populsi meningkt kemli pd hri ketujuh yitu menjdi 55 koloni sedngkn pd kontrol senyk 25 koloni. Cendwn A. niger merupkn cendwn sl tnh yng ersift prsit fkulttif sehingg sngt mudh erdptsi pd ergi mcm lingkungn. Wlupun cendwn sl tnh, A. niger mmpu erthn pd kondisi lingkungn ir. Penurunn jumlh kolonissi cendwn pd penelitin ini kemungkinn disekn oleh tidk is erdptsiny A. niger trnsformn yng mengndung gen gfp di lingkungn kutik. Koloni yng tumuh pd pemerin inokulum spor yng ditumuhkn di medi PDA dengn penmhn ntiiotik higromisin menunjukkn ciri-ciri yng sm dengn A. niger yng digunkn (Gmr 2). Pd perlkun seelum inokulsi lrv yng tidk mendpt inokulum spor (kontrol) terdpt koloni A. niger yng terhitung. Hl ini didug medi ir yng dipki merupkn ir kern yng tidk disterilissi gr menyerupi kedn seperti di lpng. Sehingg didug terdpt cendwn A. niger lmi yng resisten terhdp ntiiotik higromisin yng tumuh segi kontminn. Gmr 2 Koloni A. niger hsil uji survivl yng ditumuhkn pd medi PDA. II. Ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti. Pd perlkun ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti, menunjukkn hw terjdi kemtin lrv pd semu perlkun kepdtn (Gmr 3) Persentse kemtin meningkt seiring meningktny kepdtn populsi lrv A. egpti. Pd kepdtn 10 ekor lrv (kurv A), kemtin lrv yng mendpt inokulum cendwn mempunyi jumlh kemtin leih rendh dri perlkun yng tidk mendpt inokulsi cendwn. A B 6

15 C D E Gmr 3 Kurv persentse kemtin lrv A. egypti pd ergi kepdtn dindingkn dengn msing-msing kontrol selm 14 hri inkusi. A) Kepdtn 10 ekor lrv, B) Kepdtn 50 ekor lrv, C) Kepdtn 100 ekor lrv, D) Kepdtn 150 ekor lrv, dn E) Kepdtn 200 ekor lrv. Jumlh lrv (L), Inokulsi A. niger (I), dn tnp inokulsi A. niger (K). Pd kurv kepdtn 50 ekor lrv (kurv B), kemtin lrv yng mendpt inokulum cendwn hmpir sm tu mendekti kemtin lrv yng tidk dieri inokulum cendwn. Hl ini mungkin terjdi kren lrv yng dimsukkn ke dlm otol perlkun kondisiny tidk seht. Pd kepdtn lrv 100, 150, dn 200 ekor pd perlkun terseut terjdi peruhn jumlh kemtin lrv yng signifikn ntr lrv yng mendpt inokulsi dengn perlkun kontrol. Pd kepdtn 100 ekor lrv (kurv C), pd hri kedu terjdi kemtin lrv seesr 0.3%, dn pd hri ke empt els selm perlkun persentse kemtin lrv nik menjdi 52.0%. Sedngkn pd perlkun kontrol dengn lrv 100 ekor, kemtin lrv pd hri kedu seesr 2.0% dn terus meningkt hingg hri keempt els menjdi 20.0%. Pd kurv kepdtn 150 ekor lrv (kurv D), persentse kemtin pd perlkun yng mendpt inokulsi pd hri kedu inkusi seesr 0.4% sedngkn pd perlkun kontrol seesr 2.0%. Pd hri keempt els persentse kemtin lrv pd yng diinokulsi seesr 54.4% sedngkn yng tidk diinokulsi tu kontrol seesr 16.0%. Pd perlkun kepdtn 200 ekor lrv (kurv E). Pd hri kedu perlkun tidk terjdi kemtin pd lrv yng diinokulsi sedngkn pd yng tidk diinokulsi terjdi kemtin lrv seesr 1.0%. Pd hri keempt els inkusi, terjdi kemtin lrv seesr 58.5% pd perlkun yng mendpt inokulum sedngkn pd kontrol seesr 16.0%. Di lm, kepdtn populsi lrv A. egypti ergm, sehingg erpengruh terhdp ptogenisits cendwn A. niger. Dy ptogenisits A. niger ergntung kepd kondisi lingkungn, umur inng, dn kepdtn inokulum yng dierikn (Glre & Milner 1991). Meningktny jumlh lrv mengkitkn meningkt pul jumlh feses yng dpt digunkn segi sumer mknn oleh cendwn. Menurut Glre dn Milner (1991) meningktny kepdtn inng kn meningktkn persentse kemtin inng yng terppr oleh cendwn. Pd penelitin yng dilkukn Annd (2009) yng menggunkn A. 7

16 egypti instr III melporkn hw kemtin lrv terjdi pd hri ketig setelh inokulsi, sedngkn Oktvini (2006) melporkn terjdi kemtin wl pd hri pertm dengn menggunkn instr yng sm. Pd penelitin Nnkumusn (1985) yng menggunkn A. prsiticus melporkn hw kemtin lrv pd 24 jm setelh inokulsi seesr 25.6% pd kepdtn 200 ekor lrv. Kemtin tertinggi terjdi pd kepdtn 200 ekor lrv di hri keempt els yitu seesr 58.5%. Glre dn Milner (1991) menytkn hw wktu yng diperlukn oleh cendwn smpi inng mti dpt terjdi 24 jm tu hkn 1 minggu, ergntung kepd kondisi lingkungn, umur inng, dn kepdtn inokulum. Kepdtn inng kn mempengruhi kerentnn inng terhdp infeksi cendwn. Pd perlkun kontrol jug terjdi kemtin, hl ini dikitkn kren ik perlkun mupun kontrol selm 14 hri inkusi lrv tidk dieri mkn. Menurut Indrwti (2006) kemtin lrv pd kontrol ini didug kit dri dy thn tuuh, kemmpun mencri mkn (kelprn), dn umur lrv. pd lrv dengn umur leih mud (thp instr leih kecil) kerentnn terhdp pengruh lingkungn seperti penykit dn ptogen sngt erpengruh pd pertumuhn dn perkemngn lrv. Hl inilh kemungkinn yng erpengruh pd kemtin populsi 10 dn 50 ekor lrv dimn perlkun dengn kontrol hmpir mendekti persentse kemtin yng sm tu hkn kemtin kontrol leih tinggi dri persentse kemtin perlkun seperti pd populsi 10 ekor lrv. Tel 1 Pengruh jumlh lrv A. egypti terhdp populsi cendwn A. niger pd hri keempt els Jumlh koloni untuk kepdtn Perlkun c c kontrol 1 5 Setelh dilkukn uji ptogenisits cendwn A. niger terhdp lrv A. egypti, kemudin diliht pengruh jumlh lrv terhdp populsi A. niger (Tel 1) dengn menumuhkn dri medi ir yng c c 20 8 c c 4 5 c 23 6 c digunkn dlm penelitin ini ke dlm medi PDA dn meliht jumlh koloni A. niger yng tumuh. Tel terseut menunjukkn hny pd perlkun 10 dn 200 ekor lrv terdpt ed nyt erdsrkn uji sttistik. III. Pengruh A. niger Terhdp Penetsn Telur A. egypti. Pd perlkun pemerin inokulum pd penetsn dn perkemngn telur, seluruh telur dri 200 utir telur seluruhny tidk menets sedngkn pd kontrol telur menets senyk 165 utir dri 200 utir telur (Tel 2). Hl ini memuktikn hw inokulum yng dierikn dpt menghmt tu menekn ngk penetsn telur lrv. Menurut Luz et l. (2008) hw telur dpt terinfeksi oleh ptogen yng secr ktif msuk mellui cngkng telur dn erpengruh pd lrv di dlmny kit dri metolit yng dikelurkn oleh ptogen. Coelomomyces opifexi dpt menginfeksi semu tipe instr dri lrv nymuk dn semu fse dri copepod keculi fse telur. Pd fse telur yng terinfeksi dpt menets segi inng intermediet (Glre & Milner 1991). Tel 2 Pengruh inokulum cendwn A. niger terhdp telur A. egypti Yng diuji Yng menets Perlkun Kontrol Perlkun diulng senyk 3 kli IV. Uji Postult Koch. Untuk memuktikn lrv yng mti disekn oleh cendwn entomoptogen mk dilkukn uji postult Koch. Uji postult Koch menunjukkn hw cendwn yng tumuh pd lrv nymuk yng mti pd medi PDA memiliki kesmn ciri dengn A. niger (Gmr 5). Hl ini menunjukkn hw kemtin lrv disekn oleh A. niger yng diinokulsikn ke dlm otol kultur. Postult Koch digunkn untuk menunjukkn pkh cendwn yng tumuh merupkn sprofit tu cendwn ptogen yng seenrny (Glre & Milner 1991). 8

17 A Gmr 4 Koloni A. niger hsil uji postult Koch. 100 µm V. Morfologi Lrv Mti kit inokulsi A. niger. Lrv memperoleh mknn dengn jln mengmil end dengn sikt mulut tu dengn jln menggigit hn-hn yng usuk di pinggir perirn. Pd st istirht, tung pernpsnny erd di ts ir sedngkn keplny menggntung ke dlm ir (Hdi & Koeshrto 2006). Sift seperti ini memudhkn infeksi spor secr eksternl mupun internl. Akn tetpi hny eerp spor sj yng dpt menginfeksi inng (Glre & Milner 1991). Slurn pencernn lrv erwrn hitm yng mirip dengn spor cendwn A. niger (ditunjukkn oleh Gmr 6). Kemudin pd ntrsekt kutikul lrv terliht propgul cendwn yng telh ersporulsi mementuk konidi. Pd kenykn cendwn ptogen, cendwn menginfeksi tuuh inng dengn mempenetrsi lngsung dinding kutikul, d jug yng mellui luk, sert orgn inder (Moore & Lndecker 1996). Nmun d jug yng mellui slurn pencernn (Glre & Milner 1991). G Spor yng mengikuti slurn pencernn, kn erkecmh dn mempenetrsi kutikul. Dri titik tumuh terseut, kn tumuh hif, dn menyer mellui cirn hemosol inng. Pd Metrhizium nisoplie kitinse dihsilkn hny dlm wktu yng singkt selm penetrsi kutikul inng (Leger 1998). mr µm 100 µm Gmr 5 Proses kolonissi cendwn pd lrv. A) Miselium yng menemus slurn pencernn (peresrn 100x), B) Miselium yng tumuh di sel ntr sekt (peresrn 100x), dn C) Kepl konidi (peresrn 400x). B C 9

18 SIMPULAN Fktor kepdtn populsi nymuk mempengruhi ptogenisits cendwn A. niger. Dri uji postult Koch, kemtin nymuk A. egypti disekn oleh A. niger. Pd umumny kepdtn inng yng tinggi persentse infeksi kn leih tinggi. Pd perlkun telur penggunn cendwn A. niger segi pengendli hyti dpt dipergunkn. SARAN Perlu dilkukn uji interksi ntr fktor iotik dengn iotik yng terjdi sehingg dpt dipstikn meknisme infeksi cendwn A. niger. Dilkukn jug pengujin pd ergi tingkt kelempn yng mempengruhi dy hmt terhdp dy tets telur. DAFTAR PUSTAKA Annd S Pengruh Suhu, Kporit dn ph Terhdp Pertumuhn Cendwn Entomoptogen Aspergillus niger-gfp dn Ptogenisitsny pd Lrv Nymuk Aedes egypti. [skripsi]. Bogor: Fkults Mtemtik dn Ilmu Pengethun Alm, Institut Pertnin Bogor. Borror DJ & Richrd EW A Field Guide to Insects Americe North of Mexico. New York: Houghton Mifflin Compny. Coronel MAR, Gustvo VG, Aln D, nd Cristopher A A Novel Tnnse from Aspergillus niger with β-glucosidse Activity. J Microiol. 149: Glre TR, Milner RJ. Ecology of Entomopthogenic Fungi. Di dlm: Aror DK, Ajello L, Mukerji KG, editor. Hndook of Applied Mycology. Vol 2. New York: Mrcell Dekker, Inc; hlm Griffin DH Fungl Physiology. New York: John Wiley & Sons, Inc. Guler DJ Dengue nd Dengue Hemorrhgic Fever. Clinicl Microiol Review 11 (3): Hdi, UK, Koeshrto FX. Nymuk Di dlm: Sigit SH, Hdi UK, editor. Hm Pemukimn Indonesi. Bogor: UKPHP IPB. hlm Indrwti A Kpng Entomoptogen Lgenidium gignteum segi Agen Pengendli Hyti Lrv Nymuk Aedes egypti Vektor Penykit Demm Berdrh Dengue [tesis]. Bogor: Progrm Pscsrjn, Institut Pertnin Bogor. Kiffer E, Morelet M The Deuteromycetes, Mitosporic Fungi: Clssifiction nd Generic Keys. New Hmpshire: Sciense Pu., Inc. Leger ST, Nelsen JO, Screen SE The Entomophtogenic Fungus Metrhizium nisoplie lters mient ph, llowing extrcellulr protese production nd ctivity. Microiol 145: Lorng JM, Tuori RP, Mrtinez JP, Swyer TL, Redmn RS, Rollins JA, Wolpert TJ, Johnson KB, Rodriguez RJ, Dickmn MB, Ciuffetti LM Green Flourescent Protein Is Lighting Up Fungl Biology. Appl Environt Microiol. 67(5): Luz C, Ti MHH, Sntos AH, Silv HHG Impct of Moisture on Survivl of Aedes egypti Eggs nd Ovicidl Activity of Metrhizium nisoplie under Lortory Conditions. Mem Inst Oswldo Cruz. 103(2): Ntli T, Sukrno N, dn Hdi UK Isolsi cendwn ptogen pd lrv nymuk demm erdrh (Aedes egypti) dn pemnftnny segi pengendli hyti. Seminr jurusn iologi, FMIPA-IPB, Bogor. Nnkumusn SE Lortory infection of Mosquito Lrve y Entomopthogenic Fungi with 10

19 prticulr Reference to Aspergillus prsiticus nd Its Effects on Fecundity nd Longevity of Mosquitoes exposed to Conidil Infections in Lrvl Stges. Curr Sci 54(23): Oktvinti Z Isolsi, Identifiksi, Ptogenisits, dn Proses Kolonissi Cendwn Entomoptogen pd Lrv Nymuk Aedes egypti. [skripsi]. Bogor: Fkults Mtemtik dn Ilmu Pengethun Alm, Institut Pertnin Bogor. Ppp L, Drvs B, editor Mnul of Pl Erctic Dipter (With Specil Reference to Flies of Economic Importnt. Vol 1 Generl nd Applied Dipterologi. Budpest: Science Herld. Trrnd JJ, Xing YH, Dimitros PK, nd Gregory SM Aspergillus Hyphe in Infected Tissue: Evidence of Physiologic Adpttion nd Effect on Culture Recovery. J of Clin Microiol 45(1): Smson RA, Reenen-Hoekstr ES vn Introduction to Food-Borne Fungi. Netherlnds: Centrlureu voor Schimmelcultures Suhryono SR, dn Imri S Anlisis Epidemiologi Demm Berdrh Indonesi, Wrt DBD. 16:

20 LAMPIRAN 12

21 Lmpirn 1 Struktur mikroskopis Aspergillus niger. d 100 µm c A c. 30 µm C Gmr Struktur mikroskopis A. niger peresrn 100X (A) yng terdiri dri konidi (), vesikel (), dn konidiofor (c); peresrn 400X (B) yng terdir dri konidi (), vesikel (), konidiofor (c), dn filid (d); dn peresrn 1000X yng terdiri dri konidi (), vesikel (), dn filid (c).

22 Lmpirn 2 Jumlh koloni cendwn A. niger seelum penmhn lrv A. egypti. Tel 1 Jumlh koloni A. niger seelum penmhn 10 ekor lrv (tip ml) Hri SI SI K Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5%. Koloni pd perlkun inokulsi A. niger tetpi seelum perlkun penmhn lrv A. egypti (SI), dn koloni pd perlkun tnp inokulsi A. niger (perlkun control) seelum penmhn lrv A. egypti (SI K). Tel 2 Jumlh koloni A. niger seelum penmhn 50 ekor lrv (tip ml) Hri SI c 40 SI K Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5%. Koloni pd perlkun inokulsi A. niger tetpi seelum perlkun penmhn lrv A. egypti (SI), dn koloni pd perlkun tnp inokulsi A. niger (perlkun control) seelum penmhn lrv A. egypti (SI K). Tel 3 Jumlh koloni A. niger seelum penmhn 100 ekor lrv (tip ml) Hri SI SI K Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5%. Koloni pd perlkun inokulsi A. niger tetpi seelum perlkun penmhn lrv A. egypti (SI), dn koloni pd perlkun tnp inokulsi A. niger (perlkun control) seelum penmhn lrv A. egypti (SI K). Tel 4 Jumlh koloni A. niger seelum penmhn 150 ekor lrv (tip ml) Hri SI SI K Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5%. Koloni pd perlkun inokulsi A. niger tetpi seelum perlkun penmhn lrv A. egypti (SI), dn koloni pd perlkun tnp inokulsi A. niger (perlkun control) seelum penmhn lrv A. egypti (SI K). Tel 5 Jumlh koloni A. niger seelum penmhn 200 ekor lrv (tip ml) Hri SI c 40 SI K Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5%. Koloni pd perlkun inokulsi A. niger tetpi seelum perlkun penmhn lrv A. egypti (SI), dn koloni pd perlkun tnp inokulsi A. niger (perlkun control) seelum penmhn lrv A. egypti (SI K) d d e e 13 14

23 Lmpirn 3 Persentse kemtin lrv pd ergi kepdtn lrv A. egypti yng diinokulsi A. niger dindingkn dengn kontrol. Tel 6 Persentse kemtin lrv A. egypti pd kepdtn 10 ekor lrv selm 14 hri inokulsi spor A. niger Hri P1(10) Kontrol Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5% Tel 7 Persentse kemtin lrv A. egypti pd kepdtn 50 ekor lrv selm 14 hri inokulsi spor A. niger Hri P2(50) Kontrol Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5% Tel 8 Persentse kemtin lrv A. egypti pd kepdtn 100 ekor lrv selm 14 hri inokulsi spor A. niger Hri P3(100) Kontrol Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5% Tel 9 Persentse kemtin lrv A. egypti pd kepdtn 150 ekor lrv selm 14 hri inokulsi spor A. niger Hri P4(150) Kontrol Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5% Tel 10 Persentse kemtin lrv A. egypti pd kepdtn 200 ekor lrv selm 14 hri inokulsi spor A. niger Hri P5(200) Kontrol Huruf yng sm menunjukkn perlkun tidk ered nyt sesui uji lnjut Duncn dengn α=5% 15

24 Lmpirn 4 Persentse kemtin lrv pd tip-tip kepdtn lrv A. egypti yng diinokulsi A. niger Tel 1 Persentse kemtin lrv A. egypti pd ergi kepdtn lrv (10 ekor lrv, 50 ekor lrv, 100 ekor lrv, 150 ekor lrv, dn 200 ekor lrv) Hri kjnml P1 (10) 0 0 fgh P2 (50) 0 0 cd kjnml fgh P3 (100) P4 (150) P5 (200) 0 0 cd kjnml fgh cd kjnml ijgh de c knml kijgh ef c cd nml kijghl f nml kijgmhl fg nml igh nml kijnmhl nml nml nml kjnml nml nml kjnml kjnml nml n kjnml knml kjnml nm 16