UJI AKTIVITASANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI n-heksana SERTAETILASETAT DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.) SKRIPSI OLEH: HAFIZAN NIM 121501069 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI n-heksana SERTAETIL ASETAT DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: HAFIZAN NIM 121501069 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
PENGESAHAN SKRIPSI UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI n-heksana SERTA ETIL ASETAT DAUN KETEPENG (Senna alata (L.)Roxb.) OLEH: HAFIZAN NIM 121501069 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi Pada tanggal : 18 Juli 2016 Disetujui Oleh: Pembimbing I, Panitia Penguji, Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP 195109081985031002 Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP195707231986012001 Pembimbing II, Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP195109081985031002 Dr. Marline Nainggolan,MS., Apt. Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. NIP 195709091985112001 NIP 197812052010121004 Medan, 23Agustus 2016 Fakultas Farmasi Dekan, Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195107231982032001 Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
KATA PENGANTAR Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini, shalawat beriring salam untuk Rasulullah Muhammad SAW sebagai suri tauladan dalam kehidupan. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi n-heksana serta Etilasetat Daun Ketepeng (Senna alata (L.)Roxb.). Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih kepada Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USUyang telah memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian. Penulis juga berterima kasih yang sebesar-besarnya kepada Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbingdan Dr.Marline Nainggolan, M.S., Apt.,selaku dosen pembimbing sekaligus penasehat akademik yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan dan bantuan selama masa studi, penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung.penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada Dr. Masfria,M.S., Apt., Dra.Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini. Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan yang tulus kepada orangtua tercinta Ayahanda Muhammad Yusuf Usman dan Ibunda Asniar Abdul Wahab, saudara-saudaraku tercinta Rohaya, Kamalia, Sofyan, Nurzila dan Fauzian, serta Keluarga Besar UKMI Ath-Thibb, HMF Magna Consilium, keluarga Rumah Kepemimpinan Nurul Fikri atas do a dan iv
dukungan baik moril maupun materil kepada penulis. Terkhusus penulis menyampaikan terima kasih yang setinggi-tingginya kepada Kementerian Riset, Teknologi dan Pendidikan Tinggi RI yang telah memberikan beasiswa Bidik Misi selama studi sarjana. Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat dalam skripsi ini.untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini.akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang farmasi. Medan, Agustus 2016 Penulis Hafizan NIM 121501069 v
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT Saya yang bertandatangan dibawah ini, Nama : Hafizan Nomor Induk Mahasiswa : 121501069 Program Studi : Reguler Farmasi Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi n-heksan serta Etilasetat Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggungjawab pembimbing. Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya. Medan, Agustus 2016 Yang membuat pernyataan, Hafizan NIM 121501069 vi
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI n-heksana SERTA ETILASETAT DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb) ABSTRAK Penggunaan obat tradisional di Indonesia dewasa ini semakin diperhatikan dengan berbagai alasan namun khasiatnya masih berdasarkan data empiris yang perlu dibuktikan secara ilmiah. Ketepeng merupakan salah satu tanaman obat yang dapat dimanfaatkan untuk mengobati infeksi bakteri pada kulit seperti kudis,.tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, golongan senyawa metabolit sekunder dan aktivitas antibakteri ekstrak etanol, fraksi n-heksana, dan fraksi etilasetat daun ketepeng terhadap Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. Serbuk simplisia dikarakterisasi dan diskrining fitokimia kemudian diekstraksi secara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%, ekstrak etanol yang diperoleh difraksinasi dengan cara ekstraksi cair-cair menggunakan pelarut n- heksana dan dilanjutkan dengan pelarut etilasetat. Selanjutnya ekstrak dan fraksi diskrining fitokimia dan diuji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, fraksi n-heksan dan etil asetat terhadap Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa secara in vitro dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas. Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 6,62%, kadar sari larut air 20,46%, kadar sari larut etanol 15,40%, kadar abu total 4,14% dan kadar abu tidak larut dalam asam 0,37%. Skrining fitokimia menunjukkan adanya golongan senyawa flavonoid, glikosida, glikosida antrakinon, steroid/triterpenoid, tanin dan saponin, Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa fraksi etilasetat memiliki aktivitas terbaik sebagai antibakteri yaitu memiliki konsentrasi hambat minimum 6,25 mg/ml terhadap ketiga bakteri. Ekstrak etanol memberikan aktivitas antibakteri dimana KHM terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa adalah 6,25 mg/ml sedangkan terhadap Staphylococcus epidermidis diperoleh KHM sebesar 25 mg/ml. Fraksi n-heksana daun ketepeng memiliki aktivitas antibakteri terhadap ketiga bakteri dengan KHM sebesar 25 mg/ml terhadap ketiga bakteri. Kata kunci: Daun ketepeng, Antibakteri, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa. vii
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT n-hexane AND ETHYLACETATE FRACTION OF KETEPENG LEAF (Senna alata (L.) Roxb) ABSTRACK Use of traditional medicine in Indonesia today is increasingly considered with variety of reasons but the efficacy is still based on empirical data that needs to proven scientifically. Ketepeng is one of the herbs that can be used to treat skin infection disease like skin ulcer. The aim of this research is for detect the simplicia characteristic, secunder metabolite compounds group and antibacterial activity of ethanol extract, n-hexane fraction, and ethylacetate fraction of ketepeng leaf against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa. Simplicia was characterized, screened and extracted by maceration using ethanol 80% as solvent and then fractionated by liquid-liquid extraction method using n-hexane then fractionated using ethylacetate as solvent. Exract and fraction was screened and antibacterial activity tests against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa by agar diffusion method. Result of simplicia characterized were 6.62% for water content, 20.46% for water soluble extract, 15.40% for ethanol soluble extract, 4.14% for total ash, and 0.37% for acid insoluble ash. The pytochemical screening were showed the presence of flavonoids, glycosides, antraquinone glycoside, steroids/triterpenoids, tanin, and saponins. Antibacterial activity test result showed ethylacetate fraction is the best antibacterial obtained minimum inhibition concentration (MIC) 6.25 mg/ml against three kinds of bacterias. Ethanol extract showed effective antibacterial activity with MIC 6.25 mg/ml againststaphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa while 25 mg/ml against Staphylococcus epidermidis.nhexane fraction of ketepeng leaf showed MIC 25 mg/ml against three kinds of bacteria. Keywords: Ketepeng leaf, Antibacterial, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa. viii
DAFTAR ISI JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... SURAT PERNYATAAN... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... Halaman i iii iv vi vii viii ix xiii xiv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 3 1.3 Hipotesis... 3 1.4 Tujuan Penelitian... 3 1.5 Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5 2.1 Uraian Tumbuhan... 5 2.1.1 Morfologi... 5 2.1.2 Sistematika... 5 2.1.3 Nama daerah dan nama asing... 6 2.1.4 Sinonim... 6 2.1.5 Manfaat... 6 2.1.6 Kandungan kimia... 6 2.2 Uraian Kandungan Kimia... 6 ix
2.2.1 Glikosida... 6 2.2.2 Flavonoid... 7 2.2.3 Steroid/triterpenoid... 7 2.2.4 Saponin... 8 2.2.5 Tanin... 8 2.2.6 Glikosida antrakinon... 8 2.3 Ekstrak... 9 2.3.1 Pengertian ekstrak... 9 2.3.2 Metode ekstraksi... 10 2.4 Fraksinasi... 11 2.5 Bakteri... 12 2.5.1 Morfologi bakteri... 13 2.5.2 Staphylococcus aures... 14 2.5.3 Staphylococcus epidermidis... 15 2.5.4 Pseudomonas aeruginosa... 16 2.5 Fase Pertumbuhan Bakteri... 17 2.6 Pengukuran Aktivitas Antibakteri... 18 BAB IIIMETODE PENELITIAN... 20 3.1 Alat-alat... 20 3.2 Bahan-bahan... 20 3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi dan Media... 21 3.3.1 Pembuatan larutan pereaksi... 21 3.3.1.1 Pereaksi Mayer... 21 3.3.1.2 Pereaksi Bouchardat... 21 3.3.1.3 Pereaksi natrium hidroksida 2 N... 21 x
3.3.1.4 Pereaksi Dragendroff... 21 3.3.1.5 Pereaksi besi (III) klorida 1%... 22 3.3.1.6 Pereaksi asam klorida 2 N... 22 3.3.1.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M... 22 3.3.1.8 Pereaksi Liebermann-Burchard... 22 3.3.1.9 Pereaksi Molish... 22 3.3.2 Pembuatan media... 22 3.3.2.1 Media nutrient agar... 22 3.3.2.2 Media nutrient broth... 23 3.3.2.3 Pembuatan agar miring... 23 3.4 Sterilisasi Alat dan Bahan... 23 3.5 Pengumpulan dan Pengolahan Bahan Tumbuhan... 23 3.5.1 Pengumpulan bahan tumbuhan... 23 2.5.2 Identifikasi tumbuhan... 24 2.5.3 Pembuatan simplisia... 24 3.6 Karakteristisasi Simplisia... 24 3.6.1 Pemeriksaan makroskopik... 24 3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik... 24 3.6.3 Penetapan kadar air... 25 3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air... 25 3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol... 26 3.6.6 Penetapan kadar abu total... 26 3.6.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam... 26 3.7 Skrining Fitokimia... 26 3.7.1 Pemeriksaan alkaloida... 27 xi
3.7.2 Pemeriksaan flavonoida... 27 3.7.3 Pemeriksaan saponin... 27 3.7.4 Pemeriksaan glikosida... 28 3.7.5 Pemeriksaan tanin... 28 3.7.6 Pemeriksaan steroida/ triterpenoida... 28 3.7.7 Pemeriksaanglikosida antrakinon... 29 3.8 Pembuatan Ekstrak... 29 3.9 Pembuatan Fraksi n-heksana dan Fraksi Etilasetat... 30 3,10 Pembuatan Larutan Uji dengan Berbagai Konsentrasi... 30 3.11 Pembiakan Bakteri... 30 3.11.1 Pembuatan stok kultur bakteri... 30 3.11.2 Penyiapan inokulum bakteri... 31 3.12 Uji Aktivitas Antibakteri... 31 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 32 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 32 4.2 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia... 32 4.3 Hasil Skrining Fitokimia... 34 4.4 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi... 35 4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi n- heksana dan Fraksi etilasetat Daun Ketepeng... 35 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 40 5.1 Kesimpulan... 40 5.2 Saran... 40 DAFTAR PUSTAKA... 41 LAMPIRAN... 42 xii
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 4.1 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun ketepeng... 32 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun ketepeng... 34 4.3 Data hasil pengukuran diameter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus... 35 4.4 Data hasil pengukuran diameter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis... 36 4.5 Data hasil pengukuran dimeter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa... 37 xiii
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1 Hasil identifikasi tumbuhan... 44 2 Gambar tumbuhan dan daun ketepeng... 45 3 Gambarsimplisia dan serbuk simplisia saun setepeng... 46 4 Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun ketepeng... 47 5 Bagan kerja penelitian... 48 6 Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ketepeng... 49 7 Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun ketepeng... 50 8 Bagan pengujian aktivitas antibakteri... 51 9 Perhitungan karakterisasi simplisia daun ketepeng... 52 10 Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ketepeng... 56 11 Data hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksan daun ketepeng... 57 12 Data hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun ketepeng... 58 13 Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ketepeng... 59 14 Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana daun ketepeng... 60 15 Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun ketepeng... 61 xiv