SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK n-heksana DAN ETILASETAT SERTA ETANOL ALGA MERAH (Galaxaura oblongata) SKRIPSI OLEH: NOMITA SARI SAGALA NIM 081501061 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK n-heksana DAN ETILASETAT SERTA ETANOL ALGA MERAH (Galaxaura oblongata) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: NOMITA SARI SAGALA NIM 081501061 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
PENGESAHAN SKRIPSI SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK n-heksana DAN ETILASETAT SERTA ETANOL ALGA MERAH (Galaxaura oblongata) OLEH: NOMITA SARI SAGALA NIM 081501061 Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: 19 Juli 2013 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. NIP 195107231982032001 NIP 195709091985112001 Pembimbing II, Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195107231982032001 Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195304031983032001 NIP 195310301980031002 Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP 195109081985031002 Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat, kasih dan karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul: Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak n- Heksana dan Etilasetat serta Etanol Alga Merah (Galaxaura oblongata). Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi. Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tulus dan ikhlas kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberi waktu, bimbingan dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., Bapak Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan dan Ibu Dra. Azizah Nasution, M.Sc., Apt., selaku penasehat akademis yang telah memberikan bimbingan kepada penulis. Ibu kepala Laboratorium Farmakognosi dan Ibu kepala Laboratorium Mikrobiologi yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama penulis melakukan penelitian.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Ayahanda (Alm) K. Sagala dan Ibunda tercinta K. Sinaga, yang tiada hentinya berkorban dan berdoa dengan tulus ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga kepada abang, kakak dan adikku yang selalu setia memberi doa dan motivasi selama penulis melakukan penelitian. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna, sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Harapan saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan kefarmasian. Medan, Juli 2013 Penulis Nomita Sari Sagala NIM 081501061
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK n-heksana DAN ETILASETAT SERTA ETANOL ALGA MERAH (Galaxaura oblongata) ABSTRAK Rumput laut atau alga yang juga dikenal dengan nama seaweeds merupakan bagian terbesar dari tanaman laut dan sejak zaman dahulu telah digunakan sebagai makanan dan obat-obatan. Salah satu jenis alga merah yang terdapat di Desa Halodan, Kabupaten Singkil adalah Galaxaura oblongata yang merupakan alga penghasil karaginan. Selain itu, Galaxaura oblongata juga mengandung senyawa flavonoid dan steroid/triterpenoid. Senyawa flavonoid dan beberapa senyawa steroid/triterpenoid memiliki aktivitas antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan senyawa kimia dan uji aktivitas antibakteri dari alga merah (Galaxaura oblongata). Skrining fitokimia dilakukan terhadap serbuk simplisia selanjutnya simplisia diekstraksi secara perkolasi bertahap menggunakan pelarut penyari n- heksana, etilasetat dan etanol kemudian diuji aktivitas antibakterinya terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa dengan metode difusi agar menggunakan punch hole. Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya kandungan senyawa kimia flavonoid, saponin, glikosida, dan steroid/triterpenoid. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa ekstrak n-heksana tidak memberikan daerah hambat terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa, ekstrak etanol kurang memberikan daerah hambat yang memuaskan terhadap kedua bakteri sedangkan ekstrak etilasetat memberikan daerah hambat yang memuaskan terhadap kedua bakteri. Ekstrak etilasetat memberikan daerah hambat yang memuaskan terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 200 mg/ml yaitu 14,18 mm dan terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan konsentrasi 200 mg/ml yaitu 14 mm. Kata kunci : Alga merah, Galaxaura oblongata, antibakteri
PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF n-hexane AND ETHYLACETATE AND ETHANOL EXTRACTS OF RED ALGAE (Galaxaura oblongata) ABSTRACT Seaweeds or algae is the biggest part of the marine plants and since immemorial time have been used as a food and traditional medicine. One of the red algae that found in Desa Halodan, Kabupaten Singkil is Galaxaura oblongata which is a carrageenophyte red algae. In addition Galaxaura oblongata also contain flavonoid and steroid/ triterpenoid compounds. Flavonoid and several steroid/triterpenoid compounds showed antibacterial activity. The object of this study was to know about chemical constituents and antibacterial activity test of red algae (Galaxaura oblongata). Phytochemical screening of simplicia powder subsequent gradual percolation of crude extracted using solvents n-hexane, ethylacetate and ethanol are then tested antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa by agar diffusion method using punch hole. Phytochemical screening results showed the present of flavonoid, saponin, glycoside, and steroid/triterpenoid. The result of antibacterial activity test showed that n-hexane extract do not provide local inhibitory to the growth of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, ethanol extract do not give a satisfactory local inhibitory against both bacteria while ethylacetate extract provide a satisfactory local inhibitory against both bacteria. Ethylacetate extract give a satisfactory inhibitory regions of the bacteria Staphylococcus aureus with a concentration of 200 mg/ml is 14.18 mm and the bacteria Pseudomonas aeruginosa with a concentration of 200 mg/ml is 14 mm. Keywords: Red algae, Galaxaura oblongata, antibacterial
DAFTAR ISI Halaman JUDUL... HALAMAN JUDUL... PENGESAHAN SKRIPSI... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii iv vi vii viii xii xiii BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 3 1.3 Hipotesis... 3 1.4 Tujuan Penelitian... 4 1.5 Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5 2.1 Uraian Tumbuhan... 5 2.1.1 Habitat dan sebaran alga... 5 2.1.2 Perkembangbiakan alga... 6 2.1.3 Morfologi tumbuhan... 6 2.1.4 Sistematika tumbuhan... 7
2.1.5 Kandungan kimia dan manfaat... 7 2.2 Ekstraksi... 7 2.3 Bakteri... 9 2.3.1 Bakteri Gram positif... 10 2.3.2 Bakteri Gram negatif... 11 2.3.3 Fase pertumbuhan bakteri... 11 2.3.4 Media biakan mikroba... 14 2.4 Pengujian Aktivitas Antimikroba... 19 BAB III METODE PENELITIAN... 21 3.1 Alat-alat... 21 3.2 Bahan-bahan... 22 3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan... 22 3.3.1 Pengambilan bahan tumbuhan... 22 3.3.2 Identifikasi bahan tumbuhan... 23 3.3.3 Pembuatan simplisia... 23 3.4 Pembuatan Pereaksi... 23 3.4.1 Pereaksi Mayer... 23 3.4.2 Pereaksi Bouchardat... 23 3.4.3 Pereaksi Dragendorff... 24 3.4.4 Pereaksi Molish... 24 3.4.5 Pereaksi besi (III) klorida 1% b/v... 24 3.4.6 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M... 24 3.4.7 Pereaksi natrium hidroksida 2 N... 24
3.4.8 Pereaksi asam klorida 2 N... 24 3.4.9 Pereaksi asam sulfat 2 N... 24 3.4.10 Pereaksi Lieberman-Bourchard... 25 3.4.11 Larutan kloralhidrat... 25 3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia... 25 3.5.1 Pemeriksaan makroskopik... 25 3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik... 25 3.5.3 Penetapan kadar air... 26 3.5.4 Penetapan kadar sari larut air... 26 3.5.5 Penetapan kadar sari larut etanol... 27 3.5.6 Penetapan kadar abu total... 27 3.5.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam... 27 3.6 Skrining Fitokimia... 28 3.6.1 Pemeriksaan alkaloid... 28 3.6.2 Pemeriksaan flavonoid... 28 3.6.3 Pemeriksaan glikosida... 28 3.6.4 Pemeriksaan glikosida antrakinon... 29 3.6.5 Pemeriksaan saponin... 29 3.6.6 Pemeriksaan tanin... 30 3.6.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid... 30 3.7 Pembuatan Ekstrak... 30 3.8 Sterilisasi Alat... 31 3.9 Pembuatan Media... 31
3.9.1 Media nutrient agar... 31 3.9.2 Media nutrient broth... 32 3.9.3 Media Mueller Hinton agar... 32 3.10 Pembuatan Agar Miring... 33 3.11 Pembuatan Stok Kultur Bakteri... 33 3.12 Penyiapan Inokulum Bakteri... 33 3.13 Pembuatan Larutan Uji dengan Berbagai Konsentrasi.. 33 3.14 Pengujian Aktivitas Antibakteri... 34 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 35 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 35 4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia... 35 4.2.1 Pemeriksaan makroskopik... 35 4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik... 35 4.2.3 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia 35 4.3 Hasil Ekstraksi... 37 4.4 Hasil Skrining Fitokimia... 37 4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri... 39 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 42 5.1 Kesimpulan... 42 5.2 Saran... 42 DAFTAR PUSTAKA... 43 LAMPIRAN... 46
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 4.1 Hasil skrining fitokimia simplisia, ekstrak n-heksana, ekstrak etilasetat dan ekstrak etanol alga merah (Galaxaura oblongata).. 37 4.2 Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa... 39
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1 Hasil identifikasi tumbuhan... 46 2 Gambar simplisia alga Galaxaura oblongata (Ellis et Solander) Lamouroux... 47 3 Gambar serbuk simplisia alga Galaxaura oblongata (Ellis et Solander) Lamouroux... 48 4 Gambar mikroskopik serbuk simplisia alga Galaxaura oblongata (Ellis et Solander) Lamouroux pada pembesaran 10x40... 49 5 Bagan pembuatan serbuk simplisia talus alga merah (Galaxaura oblongata)... 50 6 Bagan pembuatan ekstrak alga merah dengan cara perkolasi bertahap... 51 7 Bagan pengujian aktivitas antibakteri... 52 8 Tabel hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 53 9 Perhitungan penetapan kadar air simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 54 10 Perhitungan penetapan kadar sari larut air simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 55 11 Perhitungan penetapan kadar sari larut etanol simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 56 12 Perhitungan penetapan kadar abu total simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 57 13 Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam simplisia alga merah (Galaxaura oblongata)... 58 14 Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak n-heksana... 59
15 Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak etilasetat... 60 16 Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa oleh ekstrak etanol... 61 17 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak n-heksana alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Staphylococcus aureus... 62 18 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak n-heksana alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa... 63 19 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etilasetat alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Staphylococcus aureus... 64 20 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etilasetat alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa... 67 21 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Staphylococcus aureus... 70 22 Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol alga merah (Galaxaura oblongata) terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa... 72