UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PIRDOT (Saurauia vulcani Korth) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli SKRIPSI OLEH: CLARA NATALIA MARPAUNG NIM 101501157 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PIRDOT (Saurauia vulcani Korth) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: CLARA NATALIA MARPAUNG NIM 101501157 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
PENGESAHAN SKRIPSI UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PIRDOT (Saurauia vulcani Korth) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli OLEH: CLARA NATALIA MARPAUNG NIM 101501157 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: 16 Agustus 2016 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195310301980031002 Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001 Pembimbing II, Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195310301980031002 Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. NIP 197812052010121004 Dra. Suwarti Aris, M.S., Apt. NIP 195107231982032001 Medan, Oktober 2016 Fakultas Farmasi Dekan, Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. NIP 195112231980032002 Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pirdot (Saurauia vulcani Korth) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi. Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., dan Bapak Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku ketua penguji, Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Ibu Kepala Laboratorium Farmakognosi dan Bapak Kepala Laboratorium Mikrobiologi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada bapak tercinta, P. Marpaung dan Ibunda R.Z. Ritonga (+) serta abang Golfrid F. Marpaung dan dr. Eddy J. Ritonga, SpOT., DR. Elisabeth Siahaan, SE., iv
MEc., kakak Novie Ester Gurusinga, S.Sos., dan adik-adik tersayang, atas limpahan kasih sayang, doa dan dukungan yang tak ternilai dengan apapun. Dan juga terimakasih kepada Grace A. Ginting, S.Farm., Pretti A. Sipayung., Novia A. Sormin, S.Farm dan teman-teman angkatan 2010, atas doa dan dukungan selama ini kepada penulis. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi. Medan, Oktober 2016 Penulis, Clara Natalia Marpaung NIM 101501157 v
SURAT PENYATAAN BEBAS PLAGIAT Saya yang bertanda tangan dibawah ini : Nama : Clara Natalia Marpaung NIM : 101501157 Departemen : Biologi Fakultas : Farmasi Judul skripsi : Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pirdot (Saurauia vulcani Korth) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli Dengan ini menyatakan : 1. Bahwa isi skripsi yang saya tulis tersebut di atas adalah tidak merupakan ciplakan dari skripsi atau karya ilmiah orang lain. 2. Apabila terbukti di kemudian hari skripsi tersebut adalah ciplakan, maka segala akibat hukum yang timbul menjadi tanggung jawab saya. Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya tanpa ada paksaan atau tekanan dari pihak manapun. Medan, 16 Agustus 2016 Clara Natalia Marpaung NIM 101501157 vi
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PIRDOT (Saurauia vulcani Korth) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli ABSTRAK Tumbuhan di Indonesia banyak dimanfaatkan oleh masyarakat secara tradisional untuk penanggulangan penyakit, di antaranya daun pirdot (Saurauia vulcani Korth) famili Actinidiaceae, yang digunakan masyarakat desa Sipangan Bolon, Kecamatan Girsang Sipangan Bolon, Kabupaten Tapanuli Utara, Provinsi Sumatera Utara untuk pengobatan luka. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot (Saurauia vulcani Korth). Tahapan penelitian yang dilakukan meliputi pengumpulan dan pengolahan bahan tumbuhan, karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol 96% dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% serta uji aktivitas antibakteri dengan metode difusi agar menggunakan kertas pencadang terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan mengukur diameter zona hambat pertumbuhan bakteri. Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun pirdot diperoleh kadar air 3,99%, kadar sari yang larut dalam air 12,15%, kadar sari yang larut dalam etanol 8,89%, kadar abu total 9,97%, kadar abu yang tidak larut dalam asam 3,17%. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia terdapat kandungan senyawa kimia golongan steroid/triterpenoid, flavonoid, glikosida, tanin dan saponin. Ekstrak etanol daun pirdot memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot terhadap bakteri Staphylococcus aureus diperoleh KHM 10 mg/ml dengan diameter 6,48 mm dan bakteri Escherichia coli diperoleh KHM 10 mg/ml dengan diameter 6,10 mm. Ekstrak etanol daun pirdot mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Gram positif dan Gram Negatif. Kata Kunci: Uji antibakteri, Daun pirdot, Staphylococcus aureus, Escherichia coli vii
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT OF PIRDOT LEAVES (Saurauia vulcani Korth) AGAINST Staphylococcus aureus AND Escherichia coli ABSTRACT Some plants in Indonesia are used traditionally for diseases treatment, including pirdot (Saurauia vulcani Korth) leaves of Actinidiaceae family, that in Sipangan Bolon, Girsang Sipangan Bolon, Tapanuli Utara, Sumatera Utara for wound treatment. This research aims to determine the antibacterial activity of ethanol extract of pirdot leaves (Saurauia vulcani Korth). The stages in this research were collecting and processing the plants, simplex characteristization, phytochemical screening, simplex preparation, phytochemical screening, simplex characteristization, the preparation of pirdot leaves extract was done by maseration using 96% ethanol and the antibacterial activity test was done using agar diffusion method with the paper disk against the Staphylococcus aureus dan Escherichia coli in which the inhibition zone diameter of bacterial growth was measured. The result of characterization of pirdot leaves simplex showed water content 3.99%, water-soluble extract content 12.15%, ethanol-soluble extract content 8.89%, total ash content 9.97% and acid insoluble ash content 3.17%. The result of phytochemical screening contains steroids/triterpenoids, flavonoids, glycosides, saponins and tannins. The ethanol extract of pirdot leaves has antibacterial activity on the bacteria Staphylococcus aureus dan Esherichia coli. The result of antibacterial activity of ethanol extract of pirdot leaves showed MIC 10 mg/ml with diameter of 6.48 mm for Staphylococcus aureus and 10 mg/ml with diameter of 6.10 mm for Escherichia coli. Ethanol extract of pirdot leaves has antibacterial activity on Gram positive and Gram Negative bacteria. Keywords: Antibacterial test, Pirdot leaf, Staphylococcus aureus, Escherichia coli viii
DAFTAR ISI Halaman JUDUL... i LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... iii iv vi vii viii ix xiv xv xvi BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 3 1.3 Hipotesis... 4 1.4 Tujuan Penelitian... 4 1.5 Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA..... 5 2.1 Uraian Tumbuhan... 5 2.1.1 Sistematika tumbuhan... 5 2.1.2 Morfologi tumbuhan...... 5 2.1.3 Kandungan kimia...... 6 2.1.3.1 Flavonoida...... 6 2.1.3.2 Saponin.... 6 2.1.3.3 Tanin... 7 ix
2.1.3.4 Steroid/Triterpenoid... 7 2.1.3.5 Glikosida..... 8 2.2 Ekstrak... 8 2.3 Simplisia...... 10 2.4 Sterilisasi...... 11 2.4.1 Sterilisasi dengan pemanasan secara kering...... 11 2.4.2 Sterilisasi dengan pemanasan secara basah...... 12 2.5 Bakteri...... 12 2.5.1 Morfologi bakteri...... 13 2.5.2 Fase pertumbuhan mikroorganisme...... 15 2.5.3 Uraian bakteri...... 16 2.5.3.1 Uraian Staphylococcus aureus...... 18 2.5.3.2 Uraian Escherichia coli.. 19 2.6 Pengujian Aktivitas Antibakteri... 19 2.7 Mekanisme Kerja Antibakteri... 20 2.8 Proses Pewarnaan Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif... 21 BAB III METODE PENELITIAN... 22 3.1 Alat dan Bahan... 22 3.1.1 Alat-alat... 22 3.1.2 Bahan-bahan... 23 3.2 Penyiapan Bahan Tumbuhan... 23 3.2.1 Pengambilan bahan tumbuhan... 23 3.2.2 Identifikasi bahan tumbuhan... 23 3.2.3 Pengolahan bahan tumbuhan... 24 3.3 Pembuatan Pereaksi... 24 x
3.3.1 Pereaksi asam klorida 2 N... 24 3.3.2 Pereaksi Mayer... 24 3.3.3 Pereaksi Dragendorff... 24 3.3.4 Pereaksi Molisch... 25 3.3.5 Pereaksi Bouchardat... 25 3.3.6 Pereaksi asam sulfat 2 N...... 25 3.3.7 Pereaksi natrium hidroksida 2 N... 25 3.3.8 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M... 25 3.3.9 Pereaksi besi (III) klorida 1%... 25 3.3.10 Pereaksi Liebermann-Burchard... 25 3.4 Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak... 26 3.4.1 Pemeriksaan makroskopik... 26 3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik... 26 3.4.3 Penetapan kadar abu total... 26 3.4.4 Penetapan kadar air... 26 3.4.5 Penetapan kadar sari larut dalam air... 27 3.4.6 Penetapan kadar sari larut dalam etanol... 27 3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam... 27 3.5 Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak... 28 3.5.1 Pemeriksaan tanin... 28 3.5.2 Pemeriksaan alkaloida... 28 3.5.3 Pemeriksaan flavonoida... 29 3.5.4 Pemeriksaan glikosida... 29 3.5.5 Pemeriksaan saponin... 30 3.5.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida... 30 3.6 Tahap Persiapan Penelitian... 30 xi
3.7 Uji Aktivitas Antibakteri... 31 3.7.1 Pengecatan Gram bakteri... 31 3.7.1.1 Bakteri Staphylococcus aureus... 31 3.7.1.2 Bakteri Escherichia coli... 31 3.7.2 Sterilisasi alat... 31 3.7.3 Pembuatan media... 32 3.7.4 Pembuatan media agar miring... 33 3.7.5 Pembuatan pembiakan stok kultur bakteri... 33 3.7.6 Penyiapan inokulum... 33 3.7.6.1 Bakteri Staphtlococcus aureus... 33 3.7.6.2 Bakteri Escherichia coli... 34 3.7.7 Pembuatan larutan uji ekstrak etanol daun pirdot dengan berbagai konsentrasi... 34 3.7.8 Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli... 34 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN...... 35 4.1 Hasil Identifikasi Bahan Tumbuhan... 35 4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia... 35 4.2.1 Pemeriksaan makroskopik... 35 4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik...35 4.2.3 Pemeriksaan karakterisasi simplisia... 35 4.3 Hasil Skrining Fitokimia... 37 4.4 Hasil Ekstraksi... 38 4.5 Hasil Pengecatan Gram Bakteri... 38 4.6 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pirdot (Saurauia Vulcani, Korth) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli... 38 xii
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 42 5.1 Kesimpulan.... 42 5.2 Saran... 42 DAFTAR PUSTAKA... 43 LAMPIRAN... 46 xiii
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 2.1 Proses pewarnaan bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif..... 21 4.1 Hasil karakterisasi simplisia daun pirdot... 36 4.2 Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun pirdot... 37 4.3 Hasil pengukuran diameter daerah hambat pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli... 40 xiv
DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1 Bakteri bentuk basil... 13 2.2 Bakteri bentuk kokus... 14 2.3 Bakteri bentuk spiral... 14 xv
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1. Hasil identifikasi tumbuhan... 46 2. Tanaman pirdot... 47 3. Daun pirdot...... 48 4. Hasil pemeriksaan mikroskopik daun pirdot... 49 5. Perhitungan kadar air simplisia daun pirdot... 50 6. Perhitungan kadar sari larut air simplisia daun pirdot... 51 7. Perhitungan kadar sari larut etanol simplisia daun pirdot... 52 8. Perhitungan kadar abu total simplisia daun pirdot... 53 9. Perhitungan kadar abu tidak larut asam simplisia daun pirdot... 54 10. Bagan pembuatan skrining fitokimia dan karakterisasi serbuk simplisia... 55 11. Bagan pembuatan ekstrak etanol... 56 12. Bagan pembuatan uji aktivitas antibakteri... 57 13. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot pada Staphylococcus aureus... 58 14. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot pada Escherichia coli... 59 15. Pembuatan agar miring... 60 16. Gambar hasil pewarnaan Gram positif Staphylococcus aureus dan Gram negatif Escherichia coli... 61 17. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot terhadap Staphylococcus aureus... 62 18. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pirdot terhadap Escherichia coli... 63 19. Perhitungan pembuatan variasi konsentrasi larutan uji... 64 xvi