KARAKTERISASI DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAN JUS BUAH SALAK (Salacca sumatrana Becc) DENGAN METODE DPPH SKRIPSI OLEH: ERIDA NOVRIANI NIM 101524073 \\ PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
KARAKTERISASI DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAN JUS BUAH SALAK (Salacca sumatrana Becc) DENGAN METODE DPPH SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: ERIDA NOVRIANI NIM 101524073 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
KARAKTERISASI DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAN JUS BUAH SALAK (Salacca sumatrana Becc) DENGAN METODE DPPH OLEH : ERIDA NOVRIANI NIM 101524073 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: Februari 2014 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP 194909061980032001 NIP 195304031983032001 Pembimbing II, Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt. NIP 194909061980032001 Dra. Masfria, M.S., Apt. Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195707231986012001 NIP 195107231982032001 Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. NIP 195008221974121002 Medan, Maret 2014 Fakultas Farmasi Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat kasih dan karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul Karakterisasi dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dan Jus Daging Buah Salak (Salacca Sumatrana Becc) dengan Metode DPPH. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Pada kesempatan ini, penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt., dan Dra. Masfria, M.S., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu T. Ismanelly Hanum, S.Si., M.Si, Apt., selaku penasehat akademis yang memberikan bimbingan kepada penulis selama ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.,selaku dosen penguji yang memberikan masukan, kritik, arahan, dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
Penulis juga ingin mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada Ayahanda H. Pahri Siregar, S.Sos., Ibunda Dra. Hj.Erlina Yanti Lubis dan Suami tercinta Hendra Bangsawan Daulay atas doa, semangat dan pengorbanannya dengan tulus dan ikhlas bagi kesuksesan penulis, untuk abang dan adik-adikku tersayang, dan teman-teman yang selalu setia memberi doa, dorongan dan semangat. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangannya. Oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi. Medan, Februari 2014 Penulis, Erida Novriani
KARAKTERISASI DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAN JUS BUAH SALAK (Salacca sumatrana Becc) DENGAN METODE DPPH ABSTRAK Antioksidan mempunyai aktivitas menetralisir senyawa radikal bebas yang merupakan salah satu penyebab kerusakan sel dan jaringan. Daging buah salak memiliki kandungan kimia yang berpotensi sebagai antioksidan yang dapat menetralkan radikal bebas. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakterisasi simplisia, skrining fitokimia dan uji aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol dan jus daging buah salak. Ekstrak etanol daging buah salak dapat diperoleh secara maserasi dengan pelarut etanol 96%. Selanjutnya, ekstrak dipekatkan menggunakan alat rotary evaporator dan dikeringkan menggunakan freeze dryer sehingga diperoleh ekstrak kental. Jus daging buah salak diperoleh dengan memasukkan salak ke dalam juicer hingga diperoleh jus daging buah salak. Uji aktivitas antioksidan terhadap ekstrak etanol dan jus daging buah salak dilakukan dengan metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) setelah didiamkan selama 60 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer uv-visibel pada panjang gelombang 516 nm. Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia daging buah salak diperoleh kadar air 9,83%, kadar sari yang larut dalam air 56,73%, kadar sari yang larut dalam etanol 60,43%, kadar abu total 2,38% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,19%. Hasil skrining fitokimia dari simplisia, ekstrak etanol dan jus daging buah salak adalah flavonoid, glikosida, tanin, steroid dan saponin. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode pemerangkapan radikal bebas DPPH menunjukkan bahwa ekstrak etanol daging buah salak memiliki nilai IC 50 sebesar 371,61 ppm, jus daging buah salak nilai IC 50 sebesar 198,04 ppm dan untuk vitamin C nilai IC 50 sebesar 4,17 ppm. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol dan jus daging buah salak sangat lemah dibandingkan dengan vitamin C. Kata kunci: buah salak, aktivitas antioksidan, DPPH
CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST OF SALAK FLESH ETHANOL EXTRACT AND JUICE (Salacca sumatrana Becc) WITH DPPH METHOD ABSTRACT Antioxidant can neutralize the free radical formation, one of substances cause cell or tissue damage. Salak flesh contain chemicals that have the potential as an antioxidant that can neutralize free radicals. The purpose of this study was to obserb simplex characterization, phytochemical screening, and the antioxidant activity of salak flesh ethanol extracts and juice. Salak ethanol extract can be obtained by maceration with ethanol 96%. Subsequently, the extract was concentrated using a rotary evaporator and dried using a freeze dryer to obtain a viscous extract. Salak flesh juice is placed in juicer up to get the salak flesh juice. Antioxidant activity test of the salak flesh ethanol extract and juice fruits is done by the method of trapping of free radical 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) after settling for 60 minutes at room temperature and absorbance was measured with spektrofotometer uv-visible at a wavelength of 516 nm. The results of the characterization of salak flesh simplex obtained moisture content 9, 83 %, levels of water-soluble extract 56.73%, content of ethanol -soluble extract 60.43%, 2.38% total ash content, and ash content that does not dissolve in 0.19% acid. Results of phytochemical screening of salak flesh simplex, ethanol extract and juice are flavonoids, glycosides, tannins, steroids and saponins. Results of testing antioxidant activity with DPPH free radical method of capture showed that the ethanol extract of fruits flesh had IC 50 values of 371.61ppm, salak flesh juice fruits have IC 50 value of 198.04ppm and for vitamin C obtained IC 50 value of 4.17 ppm. The test results of antioxidant activity of salak flesh ethanol extract and juice are very weak compared to vitamin C. Keyword : salak fruits, antioxidant activity, DPPH
DAFTAR ISI Halaman JUDUL... HALAMAN JUDUL... HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii iv vi vii viii xiii xiv xv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 3 1.3 Hipotesis... 3 1.4 Tujuan Penelitian... 4 1.5 Manfaat Penelitian... 4 1.6 Kerangka Pikir Penelitian... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 6 2.1 Uraian Umum... 6 2.1.1 Daerah Tumbuhan... 6 2.1.2 Morfologi Tumbuhan... 6 2.1.3 Sistematika Tumbuhan... 7
2.1.4 Nama daerah... 7 2.1.5 Nama Asing... 8 2.1.6 Kandungan Kimia... 8 2.1.7 Kegunaan... 8 2.2 Ekstraksi... 8 2.3 Radikal Bebas... 10 2.4 Antioksidan... 12 2.4.1 Vitamin C... 12 2.4.1 Flavonoid... 13 2.5 Metode Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH... 14 2.5.1 Pelarut... 17 2.5.2 Pengukuran absorbansi panjang-gelombang... 17 2.5.3 Waktu pengukuran... 17 2.6 Spektrofotometri UV-Visibel... 18 BAB III METODE PENELITIAN... 19 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian... 19 3.2 Alat... 19 3.3 Bahan... 19 3.4 Penyiapan Buah Salak... 20 3.4.1 Pengumpulan buah salak... 20 3.4.2 Identifikasi buah salak... 20 3.4.3 Pembuatan simplisia... 20 3.5 Pembuatan Pereaksi... 21 3.5.1 Pereaksi Bouchardat... 21
3.5.2 Pereaksi Mayer... 21 3.5.3 Pereaksi Dragendroff... 21 3.5.4 Pereaksi Molish... 22 3.5.5 Pereaksi asam klorida 2 N... 22 3.5.6 Pereaksi asam sulfat 2 N... 22 3.5.7 Pereaksi natrium hidroksida 2 N... 22 3.5.8 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M... 22 3.5.9 Pereaksi besi (III) klorida 1%... 22 3.5.10 Pereaksi kloralhidrat... 22 3.5.11 Pereaksi Liebermann-Burchardat... 22 3.5.12 Larutan DPPH 0,5 mm... 23 3.6 Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia... 23 3.6.1 Pemeriksaan makroskopik... 23 3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik... 23 3.6.3 Penetapan kadar air simplisia... 23 a. Penjenuhan toluen... 24 b. Penetapan kadar air simplisia... 24 3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air... 24 3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol... 25 3.6.6 Penetapan kadar abu total... 25 3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam... 25 3.7 Pemeriksaan Skrining Fitokimia... 26 3.7.1 Pemeriksaan alkaloid... 26 3.7.2 Pemeriksaan saponin... 26
3.7.3 Pemeriksaan Tanin... 27 3.7.4 Pemeriksaan steroida/triterpenoida... 27 3.7.5 Pemeriksaan flavonoida... 27 3.7.6 Pemeriksaan glikosida... 27 3.7.7 Pemeriksaan glikosida antrakinon... 28 3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol dan Jus Daging Buah Salak... 28 3.8.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Daging Buah Salak... 28 3.8.2 Pembuatan Jus Daging Buah Salak... 29 3.9 Pengujian Aktivitas Antioksidan Secara Spektrofotometer UV-visible... 29 3.9.1 Prinsip metode pemerangkapan radikal bebas DPPH... 29 3.9.2 Pembuatan larutan blanko... 30 3.9.3 Pembuatan larutan induk... 30 3.9.3.1 Pembuatan larutan induk ekstrak etanol daging buah salak... 30 3.9.3.2 Pembuatan larutan induk jus daging buah salak... 30 3.9.3.3 Pembuatan larutan induk vitamin C... 30 3.9.4 Pembuatan larutan uji... 30 3.9.4.1 Larutan uji ekstrak etanol daging buah salak... 30 3.9.4.2 Larutan uji jus daging buah salak... 31 3.9.4.3 Larutan uji vitamin C... 31 3.9.5 Prosedur Uji Aktivitas Antioksidan... 31 3.9.5.1 Prosedur uji aktivitas antioksidan ekstrak Etanol daging buah salak... 31
3.9.5.2 Prosedur uji aktivitas antioksidan jus daging Buah salak... 31 3.9.5.3 Prosedur uji aktivitas antioksidan vitamin C... 32 3.9.6 Analisis persen pemerangkapan radikal bebas DPPH.. 32 3.9.7 Analisis nilai IC 50... 32 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 33 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 33 4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik dan Mikroskopik Daging Buah Salak... 33 4.2.1 Hasil Pemeriksaan Makroskopik... 33 4.2.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik... 33 4.3 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia... 34 4.4 Hasil Skrining Fitokimia... 35 4.5 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji... 36 4.6 Hasil Analisis Nilai IC 50 (Inhibitory Concentration) Sampel Uji... 38 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 41 5.1 Kesimpulan... 41 5.2 Saran... 41 DAFTAR PUSTAKA... 42 LAMPIRAN... 44
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia daging buah Salak... 34 Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia...... 35 Tabel 4.3 Penurunan absorbansi DPPH dengan Penambahan Ekstrak Etanol dan Jus Daging Buah Salak... 37 Tabel 4.4 Penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan vitamin C... 37 Tabel 4.5 Kategori kekuatan aktivitas antioksidan... 39 Tabel 4.6 Nilai IC 50 ekstrak etanol sampel uji dan vitamin C... 39
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Struktur Vitamin C... 13 Gambar 2.2 Struktur Dasar Flavonoid... 14 Gambar 2.3 Struktur Kimia DPPH... 15 Gambar 2.4 Resonansi DPPH... 16 Gambar 2.5 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari senyawa Antioksidan... 16 Gambar 4.1 Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol secara spktrofotometri visible... 36
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan... 44 Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Salak, Buah Salak, Simplisia, Serbuk Simplisia dan Jus Daging Buah Salak... 45 Lampiran 3. Gambar Mikroskopik Serbuk Simplisia Daging Buah Salak... 49 Lampiran 4. Bagan Kerja Pembuatan Simplisia... 50 Lampiran 5. Perhitungan Hasil karakterisasi simplisia daging Buah salak... 51 Lampiran 6. Bagan Pembuatan Ekstrak Etanol Daging Buah Salak.. 55 Lampiran 7. Hasil Uji Antioksidan... 56 Lampiran 8. Gambar Alat Spektrofotometri UV-Visibel... 71