Lampiran 1. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran Diketahui: Nilai Absorptivitas spesifik (A 1 1 = 351b) λ= 276 nm Tebal sel (b) = 1 cm A = A 1 1 x b x c c = c = c = 0,001237 g/100ml c = 12,37 µg/ml Konsentrasi untuk pengukuran panjang gelombang digunakan 12 µg/ml 37
Lampiran 2. Tabel Perhitungan Persamaan Regresi Kalium Diklofenak dalam pelarut KOH 0,2 N NO X Y X 2 Y 2 XY 1 0 0 0 0 0 2 6 0,210 36 0,0441 1,26 3 9 0,325 81 0,105625 2,925 4 11 0,398 121 0,158404 4,378 5 14 0,510 196 0,2601 7,14 6 17 0,624 289 0,389376 10,608 57 2,067 723 0,957605 26,311 Rata-rata 9,5 0,3445 Y= ax + b a = ( )( ) ( ) = ( )( ) ( ) = 0,0367 b= - a = 0,3445- (0,0367)(9,5) = - 0,0041 r = ( )( ), ( ) -, ( ) - r = ( )( ), ( ) -, ( ) - r = 0,9998 Jadi persamaan regresi Y= 0,0367X 0,0041 38
Lampiran 3. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel (Etil Diklofenak) Berat Molekul Sampel (etil diklofenak) = 324,20 Berat molekul baku pembanding (kalium diklofenak) = 334,24 = Konsentrasi = x 1000 µg/ml = 969,96 µg/ml Berat Sampel = 969,96 µg/ml x 25 ml = 24249,043 µg = 24,25 mg Jadi, berat penimbangan sampel adalah 24,25 mg. Sampel yang ditimbang dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, lalu ditambahkan etanol hingga larut, kemudian ditambahkan KOH 0,2 N dan dicukupkan hingga garis tanda, dikocok homogen. (Konsentrasi larutan uji = 969,96 µg/ml). Kemudian dipipet 2,5 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, dilarutkan dengan pelarut KOH 0,2 N dan dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen. Kadar larutan uji = x 969,96 µg/ml = 96,969 ml. Lalu dipipet lagi 3 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dan dilarutkan dengan KOH 0,2 N, dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok homogen. Kadar larutan uji = x 96,996 mcg/ml = 11,639 µg/ml. 39
Lampiran 4. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel (Tablet Cataflam) Berat 20 tablet = 6331,2 mg Kandungan kalium diklofenak pada etiket = 50 mg Dibuat larutan uji dengan kadar lebih kurang 12 µg /ml. Ditimbang serbuk seksama serbuk setara dengan 50 mg kalium diklofenak, maka berat sampel yang ditimbang adalah: Berat penimbangan sampel = = 316,5 mg Sampel yang telah ditimbang dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, lalu ditambahkan KOH 0,2 N dikocok hingga larut, kemudian ditambahkan KOH 0,2 N dan dicukupkan hingga garis tanda, dikocok homogen lalu disaring, 10 ml filtrat pertama dibuang (Konsentrasi larutan uji = 1000 µg/ml). Setelah disaring, kemudian filtrat larutan uji dipipet 5 ml, lalu dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan dengan pelarut KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok homogen. Kadar larutan uji = x 1000 µg/ml = 100 µg/ml. Lalu dipipet lagi 3 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, kemudian dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok homogen. Kadar larutan uji = x 100 µg/ml= 12 µg/ml. 40
Lampiran 5. Tabel Data kadar Etil Diklofenak dan Tablet Cataflam dalam pelarut KOH 0,2 N Sampel Penimbangan (mg) Absorbansi (A) Kosentrasi Teoritis ( µg/ml ) Konsentrasi perolehan ( µg/ml ) Kadar (%) 24,28 0,4264 11,727 11,720 97,72 24,26 0,4113 11,316 11,308 94,3 Etil Diklofenak 24,29 0,4181 11,501 11,494 95,84 24,27 0,4286 11,787 11,780 98,22 24,30 0,4325 11,893 11,886 99,10 24,26 0,4362 11,994 11,985 99,95 318,2 0,4529 12,449 12,440 103,74 317,4 0,4524 12,435 12,427 103,63 Tablet Cataplam 317,9 0,4495 12,357 12,347 102,97 316,8 0,4515 12,411 12,440 103,42 317,1 0,4510 12,398 12,390 103,32 317,6 0,4518 12,419 12,410 103,49 41
Lampiran 6. Tabel Perhitungan Statistik Kadar Hasil Sintetis Etil Diklofenak N0 Kadar [X] (%) Xi- ( ) 1 97,72 0,203 0,0412 2 94,3-3,222 10,381 3 95,84-1,682 2,829 4 98,22 0,698 0,487 5 99,10 1,578 2,490 6 99,95 2,428 5,895 = 97,522 = 22,1232 SD = ( ) = = 2,10348 Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03 Data ditolak jika t hitung t tabel atau t hitung - tabel t hitung = t hitung 1 : 0,203/0,8589 = 0,2363 t hitung 2 : -3,222/ 0,8589 = -3,7513 t hitung 3 : -1,682/ 0,8589 = -1,9583 t hitung 4 : 0,698/ 0,8589 = 0,8126 t hitung 5 : 1,578/ 0,8589 = 0,1837 t hitung 6 : 2,428/ 0,8589 = 2,8268 42
karena t hitung t tabel maka data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara: µ = % ± t (1-1/2α)dk x % = 97,52% ± (4,03 x 2,10348/ ) % = 97,52 % ± 3,461% 43
Lampiran 7. Tabel Perhitungan Statistik Kadar Kalium Diklofenak pada Tablet Cataflam. NO Kadar [X] (%) Xi- ( ) 1 103,74 0,312 0,097344 2 103,63 0,202 0,040804 3 102,97-0,458 0,209764 4 103,42-0,008 0,000064 5 103,32-0,111 0,012321 6 103,49 0,062 0,003844 = 103,428 = 0,364141 SD = ( ) = = 0,26987 Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03 Data ditolak jika t hitung t tabel atau t hitung - tabel t hitung = t hitung 1: 0,312/ 0,110174 = 2,8319 t hitung 2 : 0,202/ 0,110174 = 1,8335 t hitung 3 : - 0,458/ 0,110174 = - 4,1571 t hitung 4 : - 0,008/ 0,110174 = - 0,0726 t hitung 5 : - 0,111/ 0,110174 = - 0,10075 t hitung 6 : -0,062/ 0,110174 = 0,5627 44
karena t hitung t tabel maka data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara: µ = % ± t (1-1/2α)dk x % = 103,428% ± (4,03 x 0,26987/ ) % = 103,428 % ± 0,444 % 45
Lampiran 8. Contoh Perhitungan Persentase Perolehan Kembali (% recovery) Berat Molekul Sampel (etil diklofenak) = 324,20 Berat molekul baku pembanding (kalium diklofenak) = 334,24 = Konsentrasi = x 1000 µg/ml = 969,96 µg/ml Berat Sampel = 969,96 µg/ml x 25 ml = 24249,043 µg = 24,25 mg Jadi, Berat kesetaraan penimbangan sampel pada penetapan kadar = 24,25 mg. Perolehan 80% Sampel (Etil Diklofenak) = x 24,25 mg = 19,4 mg Analit 70% x 19,4 = 13,58 mg Sampel yang ditimbang = 13,60 mg Bahan baku 30% (PT. Dexa Medica) x 19,4 x 99,8% = 5,98 mg Baku yang ditimbang = 6,1 mg 46
Perolehan 100% Sampel (Etil Diklofenak) = x 24,25 mg = 24,25 mg Analit 70% x 24,25 = 16,97 mg Sampel yang ditimbang = 16,99 mg Bahan baku 30% (PT. Dexa Medica) x 24,25 x 99,8% = 7,485 mg Baku yang ditimbang = 7,5 mg Perolehan 120% Sampel (Etil Diklofenak) = x 24,25 mg =29,1mg Analit 70% x 29,1 = 20,37 mg Sampel yang ditimbang = 20,39 Bahan baku 30% (PT. Dexa Medica) x 29,1 x 99,8% = 8,98 mg Baku yang ditimbang = 9,2 mg 47
Lampiran 9. Contoh Perhitungan Penimbangan Analit pada Persen Perolehan Kembali Perolehan 80% Sampel (Etil Diklofenak ) = x 24,25 mg = 19,4 mg Analit 70% x 19,4 = 13,58 mg Sampel yang ditimbang = 13,60 mg Sampel yang ditimbang dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, lalu ditambahkan etanol hingga larut, kemudian ditambahkan KOH 0,2 N dan dicukupkan hingga garis tanda dikocok homogen. Kadar larutan uji = = 544 µg/ml. Kemudian dipipet 2,5 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, dilarutkan dengan pelarut KOH 0,2 N dan dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen. Kadar larutan uji = x 544 µg/ml = 54,4 µg/ml. Lalu dipipet lagi 3 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dan dilarutkan dengan KOH 0,2 N, dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok homogen. Kadar larutan uji = x 54,4 µg/ml = 6,528 µg/ml. 48
Lampiran 10. Contoh Perhitungan Penimbangan Bahan Baku pada Persen Perolehan Kembali Perolehan 80% Bahan baku 30% (PT. Dexa Medica) x 19,4 x 99,8% = 5,98 mg Baku yang ditimbang = 6,1 mg Baku yang ditimbang dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, lalu ditambahkan etanol hingga larut, kemudian ditambahkan KOH 0,2 N dan dicukupkan hingga garis tanda dikocok homogen. Kadar larutan uji = = 244 µg/ml. Kemudian dipipet 2,5 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, dilarutkan dengan pelarut KOH 0,2 N dan dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen. Kadar larutan uji = x 24,4 µg/ml = 24,4 µg/ml. Lalu dipipet lagi 3 ml dari larutan uji, dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dan dilarutkan dengan KOH 0,2 N, dicukupkan dengan KOH 0,2 N sampai garis tanda dan dikocok homogen. Kadar larutan uji = x 24,4µg/ml = 2,928 µg/ml. 49
Lampiran 11. Contoh Perhitungan Persen Perolehan Kembali dengan Metode Penambahan Bahan Baku (Standard Addition Method) dari sampel etil diklofenak. % Recovery = X 100% Dimana: A = Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan bahan baku B = Konsentrasi sampel sebelum penambahan bahan baku C = Konsentrasi baku yang ditambahkan % Recovery etil diklofenak = = 94,45 % 50
Lampiran 12. Tabel Data hasil persen perolehan kembali Etil Diklofenak dengan Metode penambahan baku (Standard Addition Method). No Konsentrasi % Absorbansi Konsentrasi Baku yang ditambahkan (C) g/ml Setelah penambahan baku (A) g/ml Sebelum penambahan baku (B) g/ml Persen perolehan kembali 100% 1 80 0,2227 8,9455 6,1799 2,928 94,45 2 0,2292 9,0763 6,3569 2,928 92,87 3 0,2308 9,1608 6,4005 2,928 94,27 4 100 0,2927 11,547 8,0872 3,6 96,11 5 0,2894 11,506 8,1054 3,6 96,46 6 0,2900 11,455 8,0136 3,6 95,60 7 120 0,3492 13,809 9,6268 4,416 94,71 8 0,3497 13,786 9,6403 4,416 93,87 9 0,3500 13,850 9,6485 4,416 95,14 Rata-rata (% recovery) 94,83 Standard Deviasi (SD) 1,130 Relatif Standard Deviasi (RSD)(%) 1,191 SD = ( ) = = 1,130 RSD = x 100% = x 100% = 1,191% 51
Lampiran 13. Tabel Contoh Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Persamaan garis regresi adalah Y= 0,0367 X 0,0041 NO Konsentrasi g/ml (X) Absorbansi (Y) Yi Y-Yi ( ) 1 0 0 0 0 0 2 6 0,210 0,2161-0,000061 0,00003721 3 9 0,325 0,3262-0,0021 0,00000144 4 11 0,398 0,3996-0,0016 0,00000256 5 14 0,510 0,5067 0,0003 0,00000009 6 17 0,624 0,6198 0,0042 0,00001764 57 2,067 0,00006038 Ratarata 9,5 0,3445 SY/X = ( ) = = 0,00388 LOD = = = 0,317 µg/ml LOQ = = = 1,057 µg/ml 52
Lampiran 14. Tabel Data uji perolehan kembali (% Recovery) 1. Rentang 80% Sebelum penambahan baku Setelah penambahan baku 53
Lampiran 15. Tabel Data uji perolehan kembali (% Recovery) 1. Rentang 100% Sebelum penambahan baku Setelah penambahan baku 54
Lampiran 16. Tabel Data uji perolehan kembali (% Recovery) 1. Rentang 120% Sebelum penambahan baku Setelah penambahan baku 55
Lampiran 17. Data kadar Etil Diklofenak dan Tablet Cataflam dalam pelarut KOH 0,2 N 1. Data kadar etil diklofenak 2. Data kadar tablet cataflam 56
Lampiran 18. Sertifikat Bahan Baku Kalium Diklofenak dari PT. Dexa Medica 57
Lampiran 19. Hasil Sintesis Etil Diklofenak dan Tablet Cataflam Cataflam (PT. Novartis Indonesia) No. Batch : ID4094 No. Reg : DKL 9930408316B1 Expire Date : Oktober 2017 Komposisi : Kalium Diklofenak 50 mg 58
Lampiran 20. Tabel Nilai Distribusi t 59
Lampiran 21. Gambar Alat Spektrofotometri Ultraviolet (UV mini Shimadzu 1240) 60