LAMPIRAN. Larutan dapar fosfat ph 7,4 isotonis

Transkripsi

1 LAMPIRAN Lampiran 1. Flowsheet pembuatan larutan dapar fosfat ph 7,4 isotonis Natrium dihidrogen fosfat ditimbang 0,8 g Dinatrium hidrogen fosfat ditimbang 0,9 g dilarutkan dengan 100 ml aquadest bebas CO 2 dipipet 20 ml dilarutkan dengan 100 ml aquadest bebas CO 2 dipipet 80 ml campuran ditambahkan 0,44 g/100 ml NaCl diaduk sampai larut dan dihomogenkan Larutan dapar fosfat ph 7,4 isotonis

2 Lampiran 2. Flowsheet pembuatan usus halus homogen Kelinci jantan dipuasakan selama jam dianastesi Usus halus dibedah pada bagian perut tetapi jangan sampai mengenai tulang dada dibersihkan bagian dalam dan bagian luarnya Usus halus homogen dicuci dengan NaCl fisiologis dingin ditimbang dipotong kecil-kecil dimasukkan kedalam alat homogenizer mixer ditambahkan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dingin sebanyak 5 kali berat usus halus dihomogenkan dipipet 50 µl dimasukkan kedalam politube disimpan pada temperature C dengan bantuan es 50 µl usus halus homogen

3 Lampiran 3. Flowsheet pembuatan LIB I parasetamol dalam dapar fosfat ph 7,4 isotonis 100 mg parasetamol dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis ditambahkan dapar fosfat ph 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok homogen LIB I dengan konsentrasi 2000 mcg/ml

4 Lampiran 4. Flowsheet pembuatan LIB II parasetamol dalam dapar fosfat ph 7,4 isotonis LIB I parasetamol dipipet masing-masing 0,5 ml; 1 ml; 1,5 ml; 2 ml; 3,5 ml; 4,5 ml; 5,5 ml; 6,5 ml dan 7,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml ditambahkan dapar fosfat ph 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok homogen LIB II dengan konsentrasi 100 mcg/ml, 200 mcg/ml, 300 mcg/ml, 400 mcg/ml, 700 mcg/ml, 900 mcg/ml, 1100 mcg/ml, 1300 mcg/ml, 1500 mcg/ml

5 Lampiran 5. Flowsheet pembuatan larutan parasetamol dengan berbagai konsentrasi 7,5 mg; 15,1 mg; 22,6 mg; 37,8 mg; 75,5 mg parasetamol baku dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dicukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok sampai homogen Larutan parasetamol dengan konsentrasi 1 mm, 2 mm, 3 mm, 5 mm, 10 mm

6 Lampiran 6. Flowsheet pembuatan larutan aspirin dengan berbagai konsentrasi 0,9 mg; 2,7 mg, 4,5 mg aspirin baku Larutan aspirin dengan konsentrasi 0,1 mm, 0,3 mm dan 0,5 mm dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dicukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok sampai homogen

7 Lampiran 7. Flowsheet penentuan kurva absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50 µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur C dengan bantuan es diprainkubasikan selama 3 menit pada suhu kamar dimasukkan 100 µl LIB I kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm Supernatan dipipet 0,5 ml Endapan (dibuang) dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dingin diukur absorbansinya pada panjang gelombang nm Panjang gelombang maksimum

8 Lampiran 8. Kurva absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan

9 Lampiran 9. Flowsheet penentuan kurva kalibrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50µl Usus halus homogen disimpan pada temperature C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl LIB II kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada temperatur 27 0 C ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm Supernatan dipipet 0,5 ml Endapan (dibuang) dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dingin sampai garis tanda diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada λ 243,5 nm Hasil

10 Lampiran 10. Flowsheet penentuan absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl larutan obat berbagai konsentrasi kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar diinkubasi dengan variasi waktu 0,5 menit, 0,75 menit, 1 menit, 2 menit, 3 menit, 5 menit, 7 menit, 10 menit dan 15 menit ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm Supernatan dipipet 0,5 ml Endapan (dibuang) dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dingin sampai garis tanda diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada λ 243,5 nm Hasil

11 Lampiran 11. Flowsheet penentuan absorpsi parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl larutan obat parasetamol berbagai konsentrasi kedalam politube dimasukkan 100 µl larutan aspirin berbagai konsentrasi ke dalam politube yang sama dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar diinkubasi dengan variasi waktu 0,75 menit, 2 menit dan 5 menit ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm Supernatan dipipet 0,5 ml Endapan (dibuang) dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat ph 7,4 isotonis dingin sampai garis tanda diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada λ 243,5 nm Hasil

12 Lampiran 12. Penentuan persamaan regresi dan kurva kalibrasi parasetamol pada usus halus kelinci yang dihomogenkan dalam dapar fosfat ph 7,4 isotonis Konsentrasi Absorbansi (ppm) x 2 y 2 XY X Y , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,3000 Σx = 6500 Σy = 2,5582 Σ x 2 = Σ y 2 = Σxy = , ,0500 x = 650 y = 0,25582 Persamaan regresi : y = ax + b a = xy ( x)( 2 2 x ( x) y) / n / n 2627,05 (6500)(2,5582) /10 a = (6500) /10 a = 0,0003 b = y ax b = 0,25582 (0,0003)(650) b = 0,0200 Jadi, persamaan regresi adalah y = 0,0003x + 0,0200 r = { xy ( x)( y) / n 2 2 x ( x) / n)}( y ( y) 2 / n} 2627,05 (6500)(2,5582) /10 r = 2 { (6500) /10}{1, (2,5582) r = 0, /10}

13 Lampiran 13. Contoh perhitungan konsentrasi larutan obat parasetamol 2 mm Contoh perhitungan konsentrasi larutan obat parasetamol dengan menggunakan rumus sebagai berikut sehingga diperoleh konsentrasi 2 mm : C = mg BM 1000 x V C = 15,11 151,16 C = 2 mm 1000 x 50

14 Lampiran 14. Contoh perhitungan konsentrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan pada dapar fosfat ph 7,4 isotonis Konsentrasi parasetamol dihitung dengan menggunakan persamaan regresi dari kurva kalibrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan pada dapar fosfat ph 7,4 isotonis: Y = 0,0003x + 0,02 Sebagai contoh, absorpsi parasetamol dengan konsentrasi 1 mm pada t = 0,5 menit diperoleh absorbansi = 0,0552 maka : X 0,02 = Y 0,0003 X 0,0552 0,02 = 0,0003 X = 117,67 mcg/ml = 0,7785 mm Ini merupakan konsentrasi supernatan, untuk memperoleh konsentrasi yang diabsorpsi maka dikurangkan dengan konsentrasi awal, maka diperoleh konsentrasi yang diabsorpsi: C terabsorpsi = C 0 - C supernatan C terabsorpsi = 1-0,7785 mm C terabsorpsi = 0,2215 mm

15 Lampiran 15. Contoh perhitungan Standar Deviasi No x x-x (x-x) 2 1 0,2700 0,0463 0, ,1995-0,0242 0, ,2017-0,022 0, Σx = 0,6711 x = 0,2237 Σ(x-x) 2 = 0, Untuk menghitung standar deviasi digunakan persamaan : SD = SD = ( x x) n 1 2 0, SD = 0,0398

16 Lampiran 16. Gambar usus halus kelinci usus halus Es batu Usus halus yang telah dipotong kecil-kecil

17 Lampiran 17. Gambar Alat Homogenizer Mixer Modifikasi dan usus halus homogen Alat Homogenizer Mixer (Modifikasi) Usus halus yang dihomogenkan Es batu

18 Lampiran 18. Hasil uji T-Test profil laju absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan H 0 : Tidak ada perbedaan laju absorpsi parasetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan H 1 : Ada perbedaan laju absorpsi parsetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan Group Statistics Std. Error Jenis N Mean Std. Deviation Mean Konsentrasi_1 Paracetamol Paracetamol+Aspirin Konsentrasi_2 Paracetamol E Paracetamol+Aspirin E Konsentrasi_3 Paracetamol E Paracetamol+Aspirin E Konsentrasi_5 Paracetamol E Paracetamol+Aspirin E Konsentrasi_10 Paracetamol E Paracetamol+Aspirin E

19 Independent Samples Test Konsentrasi_1 Konsentrasi_2 Konsentrasi_3 Konsentrasi_5 Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed Konsentrasi_10 Equal variances assumed Equal variances not assumed Levene's Test for Equality of Variances F Sig. t df Sig. (2- tailed) t-test for Equality of Means Mean Differenc e Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper

20 Uji Independent T-Test laju absorpsi parasetamol: T tabel : T 0,05 = 3,182 T hitung > T tabel = H 0 ditolak dan H 1 diterima. Jadi, ada perbedaan laju absorpsi parsetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan.

21 Lampiran 19. Tabel Nilai Kritis Distribusi t