Lampiran 1. Gambar 2. Hasil identifikasi tanaman sirih merah. Universitas Sumatera Utara

Transkripsi

1 Lampiran 1 Gambar 2. Hasil identifikasi tanaman sirih merah

2 Lampiran 2 Gambar 3. Tanaman sirih merah (Piper cf. fragile Benth.) Gambar 4. Daun sirih merah

3 Lampiran 2 (Lanjutan) Gambar 5. Simplisia daun sirih merah

4 Lampiran 3 Tabel 1. Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia daun sirih merah No. Organoleptis Hasil 1 Bentuk Daun bertangkai berbentuk jantung, ujung daun runcing, bertepi rata, daun berkerut, panjang daun cm, lebar 7-8 cm 2 Bau Beraroma wangi khas sirih 3 Rasa Sangat pahit 4 Warna Berwarna coklat

5 Lampiran Gambar 6. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun sirih merah pada perbesaran Keterangan: 1. Berkas pembuluh ylem 2. Rambut penutup 3. Stomata tipe anomositik 4. Kelenjar minyak atsiri 5. Tetesan minyak

6 Lampiran 5 Hasil perhitungan karakteristik simplisia 5.1 Penetapan kadar air Volume air (ml) Kadar air = 100 % Berat sampel (g) a. Berat sampel I = 5,000 g Volume air = 0,4 ml Kadar air 0,4 = 100 % = 8,00 % 5,000 b. Berat sampel II = 5,002 g Volume air = 0,5 ml Kadar air 0,5 = 100 % = 9,99 % 5,002 c. Berat sampel III = 5,001 g Volume air = 0,4 ml 0,4 Kadar air = 100 % = 7,99 % 5,001 Kadar air rata-rata = 8,00 % + 9,99 % + 3 7,99 % = 8,66 %

7 Lampiran 5 (lanjutan) 5.2 Penetapan kadar sari larut air Kadar sari larut air = Berat sari (g) 100 Berat sampel (g) % a. Berat sampel I = 5,001 g Berat sari = 0,183 g Kadar sari larut air = 0,183 g 5,001g % = 18,29 % b. Berat sampel II = 5,002 g Berat sari = 0,175 g Kadar sari larut air = 0,175 g 5,002 g % = 17,49 % c. Berat sampel III = 5,002 g Berat sari = 0,194 g Kadar sari larut air = 0,194 g 5,002 g % = 19,39 % Kadar sari rata-rata = 18,29 % + 17,49 % ,39 % = 18,39 %

8 Lampiran 5 (lanjutan) 5.3 Penetapan kadar sari larut etanol Kadar sari larut etanol = Berat sari (g) 100 Berat sampel (g) % a. Berat sampel I = 5,001 g Berat sari = 0,125 g Kadar sari larut etanol = 0,125 g 5,001g % = 12,49 % b. Berat sampel II = 5,001 g Berat sari = 0,109 g Kadar sari larut etanol = 0,109 g 5,001g % = 10,89 % c. Berat sampel III = 5,002 g Berat sari = 0,115 g Kadar sari larut etanol = 0,115 g 5,002 g % = 11,49 % Kadar sari rata-rata = 12,49 % + 10,89 % ,49 % = 11,62 %

9 Lampiran 5 (lanjutan) 5.4 Penetapan kadar abu total Kadar abu total = Berat abu (g) Berat sampel (g) 100 % a. Berat sampel I = 2,0006 g Berat abu = 0,1900 g 0,1900 Kadar abu total = 100 % 2,0006 = 9,49 % b. Berat sampel II = 2,0002 g Berat abu = 0,1884 g 0,1884 Kadar abu total = 100 % 2,0002 = 9,42 % c. Berat sampel III = 2,0005 g Berat abu = 0,1960 g 0,1960 Kadar abu total = 100 % 2,0005 = 9,79 % Kadar abu total rata-rata = 9,49 % + 9,42 % + 3 9,79 % = 9,56 %

10 Lampiran 5 (lanjutan) 5.5 Penetapan kadar abu tidak larut asam Kadar abu tidak larut asam = a. Berat sampel I = 2,0006 g Berat abu (g) Berat sampel (g) 100 % Berat abu = 0,0253 g 0,0253 Kadar abu = 100 % 2,0006 = 1,26 % b. Berat sampel II = 2,0002 g Berat abu = 0,0241 g 0,0241 Kadar abu = 100 % 2,0002 = 1,20 % c. Berat sampel III = 2,0005 g Berat abu = 0,0229 g 0,0229 Kadar abu = 100 % 2,0005 = 1,14 % Kadar abu rata-rata = 1,26 % + 1,20 % + 3 1,14% = 1,20 %

11 Lampiran 6 Tabel 2. Hasil karakteristik simplisia daun sirih merah dibandingkan dengan daun sirih (Piper betle L.) No. Parameter Daun sirih merah Daun sirih (Piper betle L.) 1 Kadar air 8,66% Tidak lebih dari 10% 2 Kadar sari larut air 18,39% Tidak kurang dari 14% 3 Kadar sari larut etanol 11,62% Tidak kurang dari 4,5% 4 Kadar abu total 9,56% Tidak lebih dari 14% 5 Kadar abu tidak larut asam 1,20% Tidak lebih dari 7% Tabel 3. Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun sirih merah No. Golongan senyawa kimia Hasil 1 Flavonoid + 2 Alkaloid + 3 Saponin + 4 Tanin + 5 Glikosida + 6 Steroid/triterpenoid + Keterangan : + = memberikan hasil = tidak memberikan hasil

12 Lampiran 7 Serbuk simplisia daun sirih merah (200 g) Dimaserasi selama 3 jam dengan pelarut etanol 96% Dimasukkan ke dalam perkolator Dituangkan pelarut etanol 96% secukupnya sampai semua simplisia terendam Didiamkan selama 24 jam Dibuka kran perkolator dan dibiarkan perkolat menetes dengan kecepatan 1 ml/menit Perkolat Ampas Diuapkan dengan rotary evaporator Dipekatkan dengan freeze dryer Ekstrak kental (53,2 g) Gambar 7. Bagan pembuatan ekstrak etanol daun sirih merah secara perkolasi

13 Lampiran 8 Perhitungan Kadar Glibenklamid Dari Tablet Glibenklamid Tabel 5. Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9 0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0 0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0 Diketahui: Tiap 1 tablet Glibenklamid mengandung 5 mg Glibenklamid. Dosis Glibenklamid yang digunakan 1 mg/kg berat badan (dosis dewasa 5 mg-20 mg, berat dewasa dari data konversi 70 kg, dosis untuk tikus 200 g yaitu 5 mg-20 mg 0,018 = 0,09 mg-0,36 mg). Ditanya: Berapa berat serbuk Glibenklamid yang akan diambil? Dijawab: Tablet Glibenklamid ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 4029 mg). 20 tablet Glibenklamid mengandung Glibenklamid sebanyak 100 mg. Glibenklamid yang digunakan = 1 mg. Maka serbuk Glibenklamid yang diambil = 1mg 100 mg 4029 mg = 40,29 mg Jadi serbuk Glibenklamid sebanyak 40,29 mg mengandung Glibenklamid sebanyak 1 mg.

14 Lampiran 8 (lanjutan) Contoh perhitungan dosisnya sebagai berikut: Dosis Glibenklamid yang digunakan 1 mg/kg BB = 1mg 1000 g 180 g = 0,18 mg Suspensi Glibenklamid = 40,29 mg/100 ml Maka volume larutan yang diberi = 0,18 mg 100 ml 40,29 mg = 0,44 ml

15 Lampiran 9 Tikus Dikondisikan selama 2 minggu Dipuasakan selama 18 jam Ditimbang berat badan Dicukur bulu ekor tikus dan dibersihkan dengan alkohol Diukur kadar gula darah puasa dengan cara mengambil darah melalui vena bagian ekor yang ditusuk dengan jarum suntik Diteteskan darah yang keluar pada test strip yang terpasang pada glukometer Kadar gula darah puasa (mg/dl) Diberikan larutan glukosa 50% dosis 5 g/kg BB secara oral Diukur kadar gula darah setelah 30 menit Tikus diabetes Diberikan perlakuan secara oral pada setiap kelompok: I.Tidak diberi obat hanya diberi larutan glukosa 50% dosis 5 g/kg BB II.Diberikan suspensi CMC 0,5% dosis 1% BB III.Diberikan suspensi glibenklamid dosis 1 mg/kg BB IV.Diberikan suspensi EESM dosis 50 mg/kg BB V.Diberikan suspensi EESM dosis 100 mg/kg BB VI.Diberikan suspensi EESM dosis 200 mg/kg BB Diukur kadar gula darah setelah perlakuan pada menit ke-60, 90, 120, 150 dan 180 Kadar gula darah tikus (mg/dl) Gambar 8. Bagan prosedur kerja pengujian farmakologi

16 Lampiran Gambar 9. Alat Glukometer Keterangan : 1. Accu-Chek check strip 2. Accu-Chek test strip 3. Accu-Chek vial test 4. Accu-Chek Meter

17 Lampiran 11 Hasil analisis data SPSS Oneway ANOVA Sum of Squares df Mean Square F Sig. Menit 0 Between Groups Within Groups Total Menit 30 Between Groups Within Groups Total Menit 60 Between Groups Within Groups Total Menit 90 Between Groups Within Groups Total Menit 120 Between Groups Within Groups Total Menit 150 Between Groups Within Groups Total Menit 180 Between Groups Within Groups Total Post Hoc Tests Homogeneous Subsets Menit 0 perlakuan N Subset for alpha = Duncan a Glibenklamid EESM EESM Kontrol negatif EESM Kontrol diabetes Sig..125 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =

18 Lampiran 11 (lanjutan) Menit 30 perlakuan N Subset for alpha = 0.05 Duncan a EESM Kontrol diabetes Kontrol negatif Glibenklamid EESM EESM Sig..547 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = Menit 60 Subset for alpha = 0.05 perlakuan N Duncan a EESM Glibenklamid EESM EESM Kontrol negatif Kontrol diabetes Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = Menit 90 Subset for alpha = 0.05 perlakuan N Duncan a EESM Glibenklamid EESM EESM Kontrol negatif Kontrol diabetes Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =

19 Lampiran 11 (lanjutan) Menit 120 Subset for alpha = 0.05 perlakuan N Duncan a EESM Glibenklamid EESM EESM Kontrol negatif Kontrol diabetes Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = Menit 150 Subset for alpha = 0.05 perlakuan N Duncan a Glibenklamid EESM EESM EESM Kontrol negatif Kontrol diabetes Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = Menit 180 Subset for alpha = 0.05 perlakuan N 1 2 Duncan a Glibenklamid EESM EESM EESM Kontrol negatif Kontrol diabetes Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =

20 Lampiran 12 Tabel 6. Data hasil pengukuran KGD tikus setelah perlakuan Kelompok I II III IV V BB tikus (g) KGD puasa (mg/dl) KGD setelah 30 menit pemberian larutan glukosa 50% (mg/dl) 60 menit KGD setelah perlakuan (mg/dl) 90 menit 120 menit 150 menit 180 menit VI Rata-rata 104,40 202,32 182,27 158,70 137,67 118,00 105,83

21 Lampiran 13 Tabel 7. Data hasil pengukuran rata-rata KGD tikus Kelompok BB tikus (g) KGD puasa (mg/dl) KGD setelah 30 menit pemberian larutan glukosa 50% (mg/dl) 60 menit KGD setelah perlakuan (mg/dl) 90 menit 120 menit 150 menit 180 menit I Jumlah Rata-rata 107, ,16 189,33 172,83 149,16 117,16 II Jumlah Rata-rata 104,66 202,5 193,83 183,16 169,5 142,33 114,33 III Jumlah Rata-rata 101,66 203,16 175,33 141,16 120,5 100,5 98,16

22 Lampiran 13 (lanjutan) Tabel 7 (lanjutan) IV Jumlah Rata-rata 104,5 203,5 188,5 166, ,33 102,83 V Jumlah Rata-rata 105,5 204,16 180,5 147,83 123,83 104,83 103, VI Jumlah Rata-rata 103,5 200,16 162,5 129,16 104,5 101,16 99,83 Keterangan: I. Tidak diberi obat hanya diberi larutan glukosa 50% dosis 5 g/kg BB II. Diberikan suspensi CMC 0,5% dosis 1% BB III. Diberikan suspensi glibenklamid dosis 1 mg/kg BB IV. Diberikan suspensi EESM dosis 50 mg/kg BB V. Diberikan suspensi EESM dosis 100 mg/kg BB VI. Diberikan suspensi EESM dosis 200 mg/kg BB

23 Lampiran 14 Perhitungan dosis Perhitungan dosis ekstrak etanol daun sirih merah (EESM) dosis 1 ml. Volume yang diberikan = 1 ml Konsentrasi ekstrak 1% = 1 g/100 ml = 1000 mg/100 ml = 10 mg/ml Volume 1 ml = jumlah obat 10 mg/ml Maka jumlah obat yang diberikan = 10 mg Jadi, 10 mg dosis = 200 g 1000 g mg = dosis 200 Dosis mg = 200 Dosis = 50 mg/kg BB Jadi dosis sebenarnya untuk tikus adalah 50 mg/kg BB. Dimana perhitungan dosisnya sebagai berikut: Jumlah obat yang diberikan 50 mg = 200 g 1000 g = 10 mg Maka volume larutan yang diberi = 10 mg 10 mg/ml = 1 ml

24 Lampiran 14 (lanjutan) Tabel 8. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada beberapa hewan uji Jenis hewan uji Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian i.v. i.m. i.p. s.c. p.o. Mencit (20-30 g) 0,5 0,05 1,0 0,5-1,0 1,0 Tikus (200 g) 1,0 0, ,0 Hamster (50 g) - 0, ,5 2,5 Marmut (250 g) - 0, ,0 10,0 Kelinci (2,5 kg) , ,0 Kucing (3 kg) , ,0 Anjing (5 kg) , ,0 100,0 Lampiran 15

25 Daun sirih merah segar Dicuci dengan air mengalir Ditiriskan dan ditimbang Dikeringkan di lemari pengering pada temperatur ± 40 C Simplisia Ditimbang Diserbukkan Serbuk simplisia Skrining fitokimia Karakterisasi simplisia Pembuatan ekstrak - Alkaloid - Flavonoid - Saponin - Tanin - Glikosida - Steroid/triterpenoid - Pemeriksaan makroskopik - Pemeriksaan mikroskopik - Penetapan kadar air - Penetapan kadar sari larut air - Penetapan kadar sari larut etanol - Penetapan kadar abu total - Penetapan kadar abu tidak larut asam Perkolat Diperkolasi dengan pelarut etanol 96% Diuapkan dengan rotary evaporator Dipekatkan dengan freeze dryer Ekstrak kental Uji efek hipoglikemik terhadap tikus putih Gambar 16.Bagan penelitian uji efek hipoglikemik EESM terhadap tikus putih jantan