Lampiran 1. Hasil identifikasi sponge

Transkripsi

1 Lampiran 1. Hasil identifikasi sponge 49

2 Lampiran 2. Gambar sponge Suberites diversicolor Becking & Lim yang segar 50

3 Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk sponge Suberites diversicolor Becking & Lim Simplisia sponge Suberites diversicolor Becking & Lim 51

4 Lampiran 3 (Lanjutan) Serbuk sponge Suberites diversicolor Becking & Lim 52

5 Lampiran 4. Gambar miroskopik serbuk simplisia sponge Suberites diversicolor Becking & Lim Spikula Keterangan gambar: 1. Spikula megasklera monoaxon tipe substylostyle 53

6 Lampiran 5. Bagan kerja penelitian Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim Berat sponge Suberites diversicolor Becking & Lim = 2,2 kg Serbuk sponge dipisahkan dari pengotor dicuci dengan air kran mengalir ditiriskan ditimbang dipotong-potong dikeringkan dalam lemari pengering dengan suhu o C selama 6 hari ditimbang Berat sponge Suberites diversicolor Becking & Lim = 400 g dihaluskan dengan blender Karakterisasi serbuk Isolat simplisia rni -Pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik -Penetapan kadar air -Penetapan kadar sari yang larut dalam air -Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol -Penetapan kadar abu total -Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam Pemeriksaan senyawa kimia - Alkaloid - Flavonoid - Saponin - Tanin - Glikosida - Steroid/ Triterpenoid Pembuatan ekstrak n-heksan Isolat Isolat rni dianalisis estrak secara KLT diklt preparatif di KLT satu arah dan dua arah diidentifikasi secara spektrofotometri UV dan IR Spektrum 54

7 Lampiran 6. Bagan pembuatan ekstrak n-heksan simplisia sponge Suberites diversicolor Becking & Lim Serbuk sponge (280 g) dimasukkan ke dalam sebuah bejana ditambahkan sebanyak 75 bagian n-heksan ditutup dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk diserkai dan diperas Maserat Ampas dicuci ampas dengan n-heksan dan disaring hingga diperoleh 100 bagian Maserat dipindahkan ke dalam bejana tertutup dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari dienap tuangkan atau saring Maserat dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu tidak lebih dari 40 C Ekstrak kental n-heksan 55

8 Lampiran 7. Bagan isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari ekstrak n-heksan sponge Suberites diversicolor Becking & Lim Ekstrak n-heksan diklt, fase gerak: n-heksan etilasetat dengan berbagai perbandingan, fase diam silika gel 60 F 254, penampak bercak Liebermann-Burchard diklt preparatif dengan fase diam silika gel GF 254, fase gerak n- heksan-etilasetat (70:30) disemprot dengan Lieberrmann-Burchard s Kromatogram Bagian yang tidak disemprot dikerok dimasukkan ke dalam vial direndam dengan metanol selama 1 malam disaring Filtrat diuapkan hingga kering ditambahkan sedikit metanol dingin dimasukkan ke dalam lemari pendingin Isolat Isolat rni diuji kernian dengan KLT satu arah dan dua arah diidentifikasi dengan spektrofotometer UV dan IR Spektrum 56

9 Lampiran 8. Kromatogram KLT ekstrak n-heksan sponge Suberites diversicolor Becking & Lim bp bp bp bp bp b hm hm ht hm hm hm hm b hm tp tp tp tp tp a b c d e Keterangan: Fase gerak: n-heksan-etilasetat, a. (90:10); b. (80:20); c.(70:30); d; (60:40); e. (50:50), fase diam: silika gel 60 F 254, penampak bercak: Liebermann-Burchard, tp = titik penotolan, hm = hijau da, = merah ungu, b = biru, ht = hijau tua, bp = batas pengembangan. 57

10 Lampiran 9. Kromatogram hasil KLT preparatif bp tp Keterangan: Penampak bercak Liebermann-Burchard, fase diam: silika gel 60 GF 254, fase gerak: n-heksan-etilasetat (70:30), tp = titik penotolan, bp = batas pengembangan. 58

11 Lampiran 10. Kromatogram isolat hasil KLT preparatif bp tp Keterangan: Penampak bercak Liebermann-Burchard, fase diam: silika gel 60 F 254, fase gerak: n-heksan-etilasetat (70:30), tp = titik penotolan, bp = batas pengembangan 59

12 Lampiran 11. Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat rni A2 bp2 bp 1 A1 tp Keterangan: A1= arah pengembangan pertama, A2 = arah pengembangan kedua, penampak bercak Liebermann Burchard, fase gerak I: n-heksan etilasetat (70:30), fase gerak II: toluen-etilasetat (80:20), fase diam silika gel 60 F 254, tp = titik pentotolan, bp1= arah pengembangan 1, bp2= arah pengembangan 2. 60

13 Lampiran 12. Spektrum ultraviolet dari isolat rni sponge Suberites diversicolor Becking & Lim a 3.50 b s o r b 0.500/ div a n s i /div Panjang gelombang (nm) 61

14 Lampiran 13. Spektrum IR isolat rni sponge Suberites diversicolor Becking & Lim %T Bilangan gelombang (1/cm) 62

15 Lampiran 14. Perhitungan Hasil Penetapan Kadar a. Perhitungan hasil penetapan kadar air Kadar air = Volume air (ml ) Berat sampel (g) x100% 1. Sampel 1 Berat sampel Volume air = 5,004 g = 0,2 ml Kadar air = 0,2 5,004 x100% = 3,99% 2. Sampel 2 Berat sampel Volume air = 5,006 g = 0,1 ml Kadar air = 0,1 5,006 x100% = 1,99 % 3. Sampel 3 Berat sampel Volume air = 5,004 g = 0,1 ml Kadar air = 0,1 5,004 x100% = 1,99% v b 3,99% + 1,99% + 1,99% Kadar air rata rata = 3 = 2,65% v b 63

16 Lampiran 14.(Lanjutan) b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air Kadar sari yang larut dalam air = berat sari berat simplisia x x100% 1. Kadar sari yang larut dalam air I Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 47,8147 g = 48,0404 g = 5,0030 g = 0,2257 g Kadar sari yang larut dalam air = 0,2245 5,0030 x x 100% 2. Kadar sari yang larut dalam air II = 22,55% Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 47,8150 g = 48,0558 g = 5,0035 g = 0,2408 g Kadar sari yang larut dalam air = 0,2408 5,0035 x x100% 3. Kadar sari larut dalam air III = 24,06% Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 47,8154 g = 48,0303 g = 5,0040 g = 0,2149 g 64

17 Lampiran 14.(Lanjutan) Kadar sari yang larut dalam air = 0,2149 5,0040 x x100% = 21,47% 22,55% + 24,06% + 21,47% Kadar sari yang larut dalam air rata rata = 3 = 22,69% c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol d. Kadar e. sari yang larut dalam etanol = 1. Kadar sari yang larut dalam etanol I Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 47,8138 g = 47,9809 g = 5,0045 g = 0,1671 g Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,1671 5,0045 x x100% 2. Kadar sari yang larut dalam etanol II Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 16,69% = 47,8103 g = 47,9769 g = 5,0050 g = 0,1625 g Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,1625 5,0050 x x100% 3. Kadar sari yang larutdalam etanol III Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari berat sari berat simplisia x x 100% = 16,58% = 47,8105 g = 47,9730 g = 5,0055 g = 0,1625 g 65

18 Lampiran 14.(lanjutan) Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,1625 5,0055 x x100% = 16,23% Kadar sari yang larut dalam etanol rata-rata = 16,69%+16,58%+16,23% 3 =16,5% d. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total Kadar abu total = berat abu berat simplisia x 100% 1. Sampel I Berat simplisia Berat abu = 2,0020 g = 0,5107 g Kadar abu total = 0,5107 2,0020 x100% = 25,50% 2. Sampel II Berat simplisia Berat abu = 2,0022 g = 0,526 g Kadar abu total = 0,526 2,0022 x100% = 26,27% 3. Sampel III Berat simplisia Berat abu = 2,0020 g = 0,5002 g Kadar abu total = 0,5002 2,0020 x100% = 25,58% 66

19 Lampiran 14.(lanjutan) 25,50% + 26,27% + 24,9% Kadar abu total rata-rata = 3 = 25,58% e. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidak larut dalam asam Kadar abu tidak larut dalam asam = berat abu berat simplisia x100% 1. Sampel I Berat simplisia Berat abu = 2,0020 g = 0,0773 g Kadar abu tidak larut asam = 0,0773 2,0020 x 100% 2. Sampel II Berat simplisia Berat abu = 3,86% = 2,0022 g = 0,1087 g Kadar abu tidak larut asam = 0,1087 2,0022 x 100% = 5,38% 3.Sampel III Berat simplisia Berat abu = 2,0020 g = 0,0237 g Kadar abu tidak larut asam = 0,0237 2,0020 x100% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = = 1,18% 3,86% + 5,38 % + 1,18% 3 = 3,47% 67