ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN BUNGA KUPU-KUPU RAMBAT (Bauhinia kockiana Lour.) SKRIPSI CINTAKU PANJAITAN 120802037 DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN BUNGA KUPU-KUPU RAMBAT (Bauhinia kockiana Lour.) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains CINTAKU PANJAITAN 120802037 DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
PERSETUJUAN Judul : Isolasi Senyawa Flavonoida Dari Daun Tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat (Bauhinia kockiana Lour.) Kategori : Skripsi Nama Mahasiswa : Cintaku Panjaitan Nomor Induk Mahasiswa : 120802037 Program Studi : Sarjana (S1) Kimia Departemen : Kimia Fakultas : Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Komisi Pembimbing : Disetujui di Medan, Juni 2016 Pembimbing 2 Pembimbing 1 Prof.Dr. Tonel Barus Drs. Albert Pasaribu, M.Sc NIP. 1945 0801 1974 121001 NIP. 1964 0810 1991 031002 Diketahui/Disetujui oleh Departemen Kimia FMIPA USU Ketua Dr. Rumondang Bulan Nst., MS NIP. 1954 0830 1985 032001
PERNYATAAN ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN BUNGA KUPU- KUPU RAMBAT (Bauhinia Kockiana Lour.) SKRIPSI Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya. Medan, Juni 2016 CINTAKU PANJAITAN 120802037
PENGHARGAAN Puji syukur penulis panjatkan kehadiran Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan karunia yang begitu luar biasa karena melalui penyertaannya skripsi ini dapat diselesaikan dalam waktu yang telah ditetapkannya. Ucapan terima kasih secara khusus penulis sampaikan dengan segala kerendahan hati kepada kedua orang tua tercinta penulis, Bapak M. Panjaitan dan Ibu D. Pakpahan, atas doa, dukungan dan kasihnya kepada penulis sejak mula terlahir kedunia sampai pada seorang Sarjana dan sampai selama-lamanya, serta kakak, abang dan adik tersayang Marini Panjaitan, Rimpun Panjaitan, Edwin Panjaitan, Marpen Panjaitan, Lamris Panjaitan, Tetty Panjaitan, Rejeki Panjaitan dan Roberto Panjaitan atas bantuan, dukungan dan doa yang tak henti-hentinya kepada penulis. Penulis juga menyadari bahwa skripsi ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan dari berbagai pihak, maka penulis juga mengucapkan terima kasih yang luar biasa kepada: 1. Bapak Drs. Albert Pasaribu, M.Sc selaku pembimbing I sekaligus Sekertaris Departemen Kimia FMIPA USU dan Bapak Prof.Dr. Tonel Barus selaku dosen pembimbing II yang telah banyak membimbing, mengajari dan memotivasi penulis selama melakukan penelitian dan penulisan skripsi. 2. Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst, M.S selaku ketua Departemen Kimia FMIPA USU, serta Bapak Dr. Firman Sebayang, M.S selaku dosen PA penulis dan kepada staf pengajar di Kimia FMIPA USU 3. Kepala laboratorium Bapak Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D atas bantuan kepercayaan dan kerja sama selama saya menjadi asisten dan kepada seluruh asisten Laboratorium Kimia Bahan Alam Hayati (Bang Andre, Bang Rickson, Bang Handes, Kak Debi, Kak Rut, Geofrey, Haposan, Jessy, Debby, Defrista, Ronal, Ferdinan, Yuni dan Parawita). 4. Seluruh teman-teman saya stambuk 2012 beserta adik-adik stambuk 2013, 2014 dan 2015 terimakasih atas seluruh dukungannya. 5. Teman-teman satu kelompok (Ka Chapryn dan David Sinaga) serta adik-adik kelompokku (Ratijul, Titin dan Mawar) terimakasih atas perhatiannya dan doa-doannya. 6. Teman-teman satu kos (Kak Dewi, Kak Awen dan Rico) terimakasih atas semua motivasinya dan doanya. 7. Teman-teman dari Koordinasi K.O GLORIA (Keynes, Sri, Lisa, Devinta, Devi, David, Bagus dan Iin) terimakasih untuk dukungan semangatnya. 8. Dan kepada semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu, terima kasih. Kiranya Tuhan selalu memberikan perlindungan dan kasih sayang kepada kita. Tuhan memberkati kita semua. Penulis
ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN BUNGA KUPU-KUPU RAMBAT (Bauhinia kockiana Lour) ABSTRAK Isolasi senyawa flavonoida yang terkandung di dalam daun tumbuhan bunga kupu-kupu rambat (Bauhinia kockiana Lour.) dilakukan dengan cara ekstraksi maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak metanol dipekatkan lalu dilarutkan dengan etil asetat kemudian disaring dan diuapkan hingga seluruh etil asetat menguap. Ekstrak pekat etil asetat yang diperoleh dilarutkan dengan metanol dan diekstraksi partisi dengan n- heksana. Ekstrak pekat metanol dihidrolisis dengan HCl 6% dan selanjutnya diekstraksi partisi dengan kloroform. Ekstrak pekat kloroform dipisahkan dengan kromatografi kolom dengan eluen n-heksana : etil asetat (90:10; 80:20; 70:30; 60:40; 50:50 (v/v)). Fraksi dari perbandingan (60:40) v/v dimurnikan dan dikristalisasi, menghasilkan kristal kuning amorf dengan massa=33,8 mg, titik lebur 155 0 C dan harga Rf=0,29. Selanjutnya senyawa yang diperoleh dianalisis dengan Spektrofotometer UV-Visibel, Inframerah (FT-IR) dan Spektrometer Resonansi Magnetik Inti Proton ( 1 H-NMR). Dari hasil identifikasi data spektrofotometer diindikasikan senyawa hasil isolasi adalah senyawa flavonoida golongan Flavonol. Kata kunci : Bunga kupu-kupu rambat, Bauhini kockiana Lour, Flavonoida, Flavonol
ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUNDS FROM LEAVES OF KUPU- KUPU RAMBAT (Bauhinia kockiana Lour) ABSTRACT Isolation of flavonoid compounds from the leaves of bunga kupu-kupu rambat (Bauhinia kockiana Lour.) has been done by maceration technique with methanol solvent. The concentrated methanol extract was evaporated and dissolved with ethyl acetate, filtered, concentrated and evaporated. Concentrated ethyl acetate extract was dissolved with methanol and partitioned with n-hexane solvent. Concentrated methanol extract was hydrolyzed with HCl 6% and then partitioned with chloroform solvent. Concentrated chloroform extract was separated by column chromatography with the eluent n-hexane: ethyl acetate (90:10; 80:20; 70:30; 60:40; 50:50 (v/v)) as mobile phase. The fraction from n-hexane : ethyl acetate (60:40 ) v/v was crystallized to get a pure compound, yielding a yellow crystalline amorphous with mass = 33.8 mg, melting point = 155 o C and Rf = 0.29. And then, the compounds were analyzed by UV-Visible, Infrared (FT-IR) and Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer ( 1 H-NMR). Based on spectrofotometer analysis indicated that the compound isolated is flavonoid an a flavonol. Keywords :Bunga kupu-kupu rambat, Bauhinia kockiana Lour, Flavonoid, Flavonol
DAFTAR ISI Halama n Persetujuan Pernyataan Penghargaan Abstrak Abstract Daftar Isi Daftar Tabel Daftar Gambar Daftar Lampiran Bab 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang 1.2 Permasalahan 1.3 Tujuan Penelitian 1.4 Manfaat Penelitian 1.5 Lokasi Penelitian 1.6 Metodologi Penelitian Bab 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat 1.1.1 Sistematika Tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat 1.1.2 Morfologi dan Manfaat Tumbuhan 2.2 Senyawa Organik Bahan Alam 2.3 Metabolit Sekunder 2.4 Senyawa Flavonoida 2.4.1 Jalur Metabolisme Flavonoid 2.4.2 Klasifikasi Senyawa Flavonoida 2.5 Skrining Fitokimia 2.6 Teknik Pemisahan 2.6.1 Ekstraksi 2.6.2 Partisi 2.6.3 Hidrolisis 2.6.3.1 Hidrolisis Asam 2.6.3.2 Hidrolisis Enzim 2.6.3.3 Hidrolisis Basa 2.6.4 Kromatografi 2.6.4.1 Kromatografi Lapis Tipis 2.6.4.2 Kromatografi Kolom 2.7 Teknik Spektroskopi 2.7.1 Spektroskopi Ultraviolet (UV-Vis) 2.7.2 Spektroskopi Inframerah (FT-IR) 2.7.3 Spektroskopi Resonansi Magnetik Inti Proton ( 1 H- NMR) i ii iii iv v vi viii ix x 1 1 3 3 3 3 4 5 5 5 5 6 9 11 11 13 20 20 21 22 23 23 23 23 24 24 26 27 27 29 30
Bab 3 METODE PENELITIAN 3.1 Alat-alat 3.2 Bahan-bahan 3.3 Prosedur Penelitian 3.3.1 Penyiapan Sampel 3.3.2 Uji Pendahuluan Terhadap Ekstrak Daun Tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat 3.3.3 Ekstraksi Daun Tumbuhan Bunga Kupu-kupu rambat 3.3.4 Analisis Kromatografi Lapis Tipis 3.3.5 Isolasi Senyawa Flavonoida dengan Kromatografi Kolom 3.3.6 Pemurnian 3.3.7 Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 3.3.8 Identifikasi Senyawa Hasil Isolasi 3.3.8.1iIdentifikasi dengan Spektrofotometer UV- Visible 3.3.8.2 Identifikasi dengan Spektrofotometer Inframerah (FT-IR) 3.3.8.3 Identifikasi dengan Spektrometer Resonansi Magnetik Inti Proton ( 1 H-NMR) 3.4 Bagan Skrining Fitokimia 3.4.1 Maserasi dengan menggunakan pelarut metanol 3.4.2 Maserasi dengan menggunakan pelarut etil asetat 3.5 Bagan Penelitian Bab 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian 4.2 Pembahasan Bab 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan 5.2 Saran 32 32 33 33 33 34 35 35 36 37 37 37 38 38 38 39 39 40 41 43 43 47 50 50 50 DAFTAR PUSTAKA 51 LAMPIRAN 53
DAFTAR TABEL Nomor Lampiran Judul Halaman 2.1 Urutan pelarut sesuai dengan efek elusinya 25 2.2 Rentangan Serapan Spektrum UV-Visible golongan Flavonoida 28 4.1 Serapan panjang gelombang Ultraviolet-Visible (UV- Vis) senyawa hasil isolasi 44 4.2 Interpretasi Spektrum FT-IR Senyawa Hasil Isolasi 45 4.3 Pergeseran Kimia 1 H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 47
Nomor Gambar DAFTAR GAMBAR Judul Halaman 2.1 Jalur Metabolisme Flavonoid 12 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 Flavonoid-O-Glikosida Flavonoid-C-Glikosida Biflavonoid Aglikon flavonoid yang aktif-optik Diagram teknik Pemisahan Metabolit Sekunder 13 14 15 15 21 4.1 Spektrum Ultraviolet-Visible (UV-Vis) Senyawa Hasil Isolasi 43 4.2 Spektrum Inframerah (FT-IR) Senyawa Hasil Isolasi 44 4.3 Spektrum 1 H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 45 4.4 Struktur Senyawa Hasil Isolasi Flavonol 49
DAFTAR LAMPIRAN Nomor Lampiran Judul Halaman 1 Gambar daun tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat (Bauhinia kockiana Lour.) 54 2 Hasil Determinasi daun tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat (Bauhinia kockiana Lour.) 55 3 Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Pekat Kloroform daun tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat (Bauhinia kockiana Lour.) sebelum Kromatografi Kolom 56 4 Kromatografi Lapis Tipis ekstrak daun tumbuhan Bunga Kupu-kupu Rambat (Bauhinia kockiana Lour) setelah penggabungan fraksi 57 5 Kromatografi Lapis Tipis Setelah Kromatografi Kolom yang Kedua 58 6 Kromatografi Lapis Tipis senyawa murni hasil isolasi 59 7 Spektrum Ultraviolet-Visible beberapa senyawa Flavonoida 60 8 Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi pada δ=2,8-8,1 ppm 61 9 Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi pada δ=6,2-7,9 ppm 62 10 Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi pada δ=3,59-3,91 ppm 63 11 Spektrum 1H-NMR Senyawa Pembanding 64