ANALISIS KOMPONEN KIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN LEGUNDI (Vitex trifolia L) SKRIPSI IREKHA RAMOT OLIVIA PARAPAT 120822008 DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
ANALISIS KOMPONEN KIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN LEGUNDI (Vitex trifolia L) SKRIPSI Diajukkan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains IREKHA RAMOT OLIVIA PARAPAT 120822008 DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
PERSETUJUAN Judul : ANALISIS KOMPONEN KIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN LEGUNDI (Vitex trifolia L) Kategori : SKRIPSI Nama : Irekha Ramot Olivia Parapat Nomor Induk Mahasiswa : 120822008 Program Studi : SARJANA (S-1) KIMIA Departemen Fakultas : KIMIA : MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Komisi Pembimbing Disetujui di Medan, Agustus 2014 Pembimbing 2, Pembimbing 1, Dr. Mimpin Ginting,MS Drs. Darwis Surbakti, M.S NIP:195510131986011001 NIP: 195307071983031001 Diketahui/Disetujui oleh Departemen Kimia FMIPA USU Ketua, Dr. Rumondang Bulan Nasution,MS NIP: 195408301985032001
PERNYATAAN ANALISIS KOMPONEN KIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN LEGUNDI (Vitex trifolia L) SKRIPSI Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil karya sendiri, kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya. Medan, Agustus 2014 IREKHA RAMOT OLIVIA PARAPAT 120822008
PENGHARGAAN Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus, yang telah melimpahkan kasih dan karunianya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan Sarjana Sains di fakultas MIPA USU. Adapun judul skripsi adalah Analisis Komponen Kimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Legundi (Vitex trifolia L). Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan, masukan dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dalam kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada : 1. Ibu Dr. Rumondang Bulan, MS dan Bapak Albert Pasaribu, M.Sc selaku Ketua dan Sekertaris Departemen Kimia, serta seluruh staff pengajar Departemen Kimia FMIPA USU yang telah membimbing penulis selama perkuliahan. 2. Bapak Drs. Darwis Surbakti, MS selaku pembimbing I dan Bapak Dr. Mimpin Ginting, MS selaku pembimbing II yang telah meluangkan waktu selama penulis melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini hingga selesai. 3. Kedua orang tua penulis, bapak H. Parapat dan Ibu R. Sidabutar, Opung penulis T. Simanjuntak, serta saudara-saudari penulis (Sofyan, Riccad dan Maylyta) yang telah banyak mendukung baik dalam doa dan juga dukungan semangat kepada penulis. 4. Teman-teman terkasih seperjuangan stambuk 2012 kimia ekstensi yang tidak dapat disebutkan namanya satu per satu namun tulus membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Semoga Tuhan Yang Maha Esa dengan segala kebaikan dan kemurahannya memberkati Bapak/Ibu serta saudara-saudari sekalian yang telah meluangkan waktu dan pemikiran serta memberikan motivasi kepada penulis. Penulis juga menyadari bahwa didalam penulisan skripsi masih jauh dari kesempurnaan dan masih banyak memiliki kekurangan. Akhir kata penulis berharap agar skripsi ini dapat berguna dan bermanfaat bagi kita semua.
ABSTRAK Minyak atsiri daun legundi ( Vitex trifolia L) diisolasi dengan metode hidrodestilasi menggunakan alat Stahl. Daun legundi dihidrodestilasi selama ± 4-5 jam menghasilkan minyak atsiri sebesar 0,18 % (b/b). Komponen kimia minyak atsiri daun legundi yang dianalisa menggunakan GC-MS menunjukkan adanya 24 senyawa dan senyawa utamanya yaitu 1,8 sineol (24,35 %), sabinen (19,10 %), β- kariofilen (17,49%), α-pinen (10,06%), β-pinen (4,07%), α-terpineol (4,07 %), 7- okten-4-ol (2,99%). Uji aktivitas antibakteri minyak atsiri daun legundi telah dilakukan dengan metode difusi agar, dimana minyak atsiri daun legundi memiliki aktivitas antibakteri yang kurang sensitif pada konsentrasi 20% tetapi sensitif pada konsentrasi 30% terhadap bakteri Escherchia coli dan sensitif pada konsentrasi 20% dan 30% terhadap bakteri Streptococcus mutans.
ANALYSIS OF CHEMICAL COMPONENTS AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY IN ESSENTIAL OIL FROM Vitex trifolia L LEAVES ABSTRACT Essential oil of Vitex trifolia L leaves have been isolated with hydrodistillation method using Sthal. Vitex trifolia L leaves have hydrodestillated for ±4-5 hours produced essential oil 0,18% (b/b). Chemical components in essential oil of Vitex trifolia L leaves have been analyzed use GC-MS shows 24 compounds and some major compounds such as 1,8 cineole (24,35 %), Sabinene (19,10 %), β- Caryophyllen (17,49%), α-pinene (10,06%), β-pinene (4,07%), α-terpineol (4,07 %) and 7-oktene-4-ol (2,99%). Antibacterial activity test of Vitex trifolia L leaves have been done using diffuse agar method which essential oil of Vitex trifolia L leaves have less sensitive antibacterial activity to 20% concentrate but it was sensitive to 30% concentrate to Escherchia coli and have sensitive antibacterial activity to 20% and 30% concentrate to Streptococcus mutans.
DAFTAR ISI Halaman Persetujuan Pernyataan Penghargaan Absrak Abstract Daftar isi Daftar Tabel Daftar Gambar Daftar Lampiran ii iii iv v vi vii ix x xi Bab 1. Pendahuluan 1.1. Latar Belakang 1 1.2. Permasalahan 3 1.3. Pembatasan Masalah 3 1.4. Tujuan Penelitian 3 1.5. Manfaat Penelitian 3 1.6. Lokasi Penelitian 4 1.7. Metodologi Penelitian 4 Bab 2. Tinjauan Pustaka 2.1. Tumbuhan legundi ( Vitex trifolia L) 5 2.2. Minyak Atsiri 6 2.2.1. Komposisi Kimia Minyak Atsiri 7 2.2.2. Biosintesis Minyak Atsiri 8 2.2.3. Isolasi Minyak Atsiri dengan Destilasi 12 2.3. Analisis Komponen Kimia Minyak Atsiri dengan GC-MS 13 2.3.1. Kromatografi Gas 14 2.3.1.1. Gas Pembawa 14 2.3.1.2. Sistem Injeksi 14 2.3.1.3. Kolom 15 2.3.1.4. Fase Diam 15 2.3.1.5. Suhu 15 2.3.1.6. Detektor 16 2.3.2. Spektroskopi Massa 16 2.3.2.1. Instrumentasi Spektrometer Massa 17 2.4. Bakteri 19 2.4.1. Bakteri Gram Positif 20 2.4.1.1. Streptococcus mutans 20 2.4.2. Bakteri Gram Negatif 21 2.4.2.1. Escherichia coli 21
23 2.5. Antibakteri 22 2.5.1. Metode Difusi 2.5.2. Metode Dilusi 23 Bab 3. Metodologi Penelitian 3.1. Alat-alat 24 3.2. Bahan-bahan 24 3.3. Prosedur Penelitian 25 3.3.1. Penyediaan Sampel 25 3.3.2. Isolasi Minyak Atsiri Daun legundi dengan Alat Stahl 25 3.3.3. Analisa Minyak Atsiri Daun legundi dengan GC-MS 26 3.3.4. Pengujian Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun legundi 27 3.3.4.1. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) 27 3.3.4.2. Pembuatan Media Agar Miring dan Stok Kultur bakteri 27 3.3.4.3. Pembuatan Media Mueller Hinton Agar (MHA) 27 3.3.4.4. Penyiapan Inokulum Bakteri 27 3.3.4.5. Pembuatan Variasi Konsentrasi Minyak Atsiri Daun legundi (Vitex trifolia L) 28 3.3.4.6. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun legundi 28 3.4. Bagan Penelitian 29 3.4.1. Isolasi Minyak Atsiri Daun legundi dengan Alat Sthal 29 3.4.2. Pengujian Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun legundi 30 3.4.2.1. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) Miring dan Stok kultur Bakteri 30 3.4.2.2. Pembuatan Media Mueller Hinton Agar (MHA) 31 3.4.2.3. Penyiapan Inokulum Bakteri 31 3.4.2.4. Uji Aktivitas Antibakteri 32 Bab 4. Hasil Dan Pembahasan 4.1. Hasil Penelitian 33 4.1.1. Penentuan volume Minyak Atsiri 33 4.1.2. Hasil Analisa dengan GC-MS 33 4.1.3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri 36 4.2. Pembahasan 37 4.2.1. Minyak Atsiri dari Hasil Destilasi dengan Alat Stahl 37 4.2.2. Analisa Minyak Atsiri Daun legundi 38 4.2.3. Uji Antibakteri Minyak Arsiri Daun legundi 52
Bab 5. Kesimpulan Dan Saran 5.1. Kesimpulan 54 5.2. Saran 54 Daftar Pustaka 55 Lampiran 58
DAFTAR TABEL Nomor Judul Halaman Tabel 2.1 Perbedaan relatif sifat bakteri gram positif dan 22 bakteri gram negatif 4.1 Hasil Hidrodestilasi Minyak Atsiri Daun legundi 33 4.2 Senyawa Hasil Analsia GC-MS Minyak Atsiri Daun legundi 35 4.3 Hasil Pengukuran diameter zona bening beberapa 37 kultur bakteri oleh minyak atsiri daun legundi
DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Halaman Gambar 2. 1 Daun legundi (Vitex trifolia L) 5 2. 2 Reaksi Biosintesis Terpenoid 10 2. 3 Perubahan senyawa monoterpen 11 2. 4 Reaksi Biogenetik beberapa seskuiterpen 12 2. 5 Diagram Spektrometer Massa 19 2. 6 Streptococcus mutans 20 2. 7 Esherichia coli 21 4. 1 Kromatogram hasil analisa GC minyak atsiri daun Legundi 34 4. 2 Zona hambat dari minyak atsiri daun legundi 36 4. 3 Spektrum massa senyawa1,8 sineol 38 4. 4 Pola fragmentasi dari senyawa 1,8 sineol 39 4. 5 Spektrum massa senyawa Sabinen 40 4. 6 Pola fragmentasi dari Sabinen 41 4. 7 Spektrum masssa senyawa β-kariofilen 42 4. 8 Pola fragmentasi dari senyawa β-kariofilen 43 4. 9 Spektrum massa senyawa α-pinen 44 4.10 Pola fragmentasi dari senyawa α-pinen 45 4.11 Spektrum massa senyawa β-pinen 46 4.12 Pola fragmentasi dari senyawa β-pinen 47 4.13 Spektrum massa senyawa 7-okten-4-ol 48 4.14 Pola fragmentasi dari senyawa 7-okten-4-ol 49 4.15 Spektrum massa senyawa α-terpineol 50 4.16 Pola fragmentasi senyawa α-terpineol 51
DAFTAR LAMPIRAN Nomor Judul Halaman Lamp 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan 58 2. Alat Stahl 59 3. Minyak Atsiri Daun Legundi 59