LAMPIRAN 34
35 Lampiran 1. Tata Letak Perlakuan Tata letak percobaan secara acak selama penelitian adalah sebagai berikut : D2 B1 D3 B3 B2 E3 C2 C3 A2 D1 A3 E2 A1 E1 C1 Keterangan : A = Kontrol/Tanpa Pemberian Probiotik B = 10 6 CFU/ml C = 10 7 CFU/ml D = 10 8 CFU/ml E = 10 9 CFU/ml 1, 2, 3 = Ulangan
36 Lampiran 2. Proses Isolasi Probiotik (Lactobacillus sp.) dari Saluran Pencernaan Ikan Tagih. - Mematikan ikan Tagih dewasa. - Mengeluarkan saluran pencernaan (lambung dan usus) ikan tagih - Menggerus lambung dan usus, kemudian sebanyak 1 gram ditambah dengan 1 ml cairan fisiologis (NaCl 0.85%) steril (Aslamyah 2006) dan dihomogenkan dengan vortex mixer. - Setelah dihomogenkan, diambil larutan sebanyak 0.1 ml, dan disebarkan dalam cawan petri berisi TSA yang dibuat secara duplo. - Menginkubasi kultur pada suhu 29 o C selama 24-48 jam sampai koloni bakteri dapat tumbuh. - Mengidentifikasi bakteri yang tumbuh berdasarkan perbedaan warna, bentuk dan ukurannya. Setiap jenis koloni yang didapat dimurnikan dengan metode penggoresan kuadran, sampai didapatkan koloni bakteri yang tunggal dan seragam dan benar-benar yakin bahwa itu adalah Lactobacillus sp. - Memperbanyak kultur murni untuk mendapatkan isolat.
37 Lampiran 3. Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo Jumlah Kematian Ikan Per Hari Hari Perlakuan 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Jumlah A1 0 2 4 4 5 5 5 5 4 6 8 10 8 8 74 A2 0 0 0 1 0 3 7 6 8 6 3 4 4 6 48 A3 0 2 1 2 10 2 6 5 3 5 8 8 6 9 67 B1 0 0 0 0 1 1 4 6 3 6 4 3 5 6 39 B2 0 2 0 0 6 0 3 3 2 3 4 6 6 7 44 B3 0 0 0 2 0 0 3 4 4 3 1 4 3 4 28 C1 0 3 4 4 4 3 4 4 4 4 5 5 2 3 44 C2 0 4 0 2 2 3 4 3 3 4 4 4 6 7 39 C3 0 2 0 0 1 2 3 3 3 4 0 5 4 5 34 D1 0 2 0 1 2 4 2 4 3 3 4 9 7 9 50 D2 0 1 1 0 2 2 2 3 2 3 2 1 0 1 20 D3 0 0 0 2 2 2 4 4 4 4 2 2 0 4 30 E1 0 4 2 0 2 5 4 4 2 3 3 4 4 7 44 E2 0 0 8 2 2 5 5 4 4 5 6 5 4 7 67 E3 0 0 0 2 1 4 4 3 5 4 3 3 6 8 43 Kelangsungan Hidup Perlakuan Ulangan No Nt Mortalitas(%) KH (%) A 1 75,00 1,00 74,00 1,33 2 75,00 27,00 48,00 36,00 3 75,00 8,00 67,00 10,67 Rata-rata 63,00 16,00 B 1 75,00 36,00 39,00 48,00 2 75,00 31,00 44,00 41,33 3 75,00 47,00 28,00 62,67 Rata-rata 37,00 50,67 C 1 75,00 39,00 36,00 52,00 2 75,00 45,00 30,00 60,00 3 75,00 34,00 41,00 45,33 Rata-rata 35,67 52,44 D 1 75,00 25,00 50,00 33,33 2 75,00 55,00 20,00 73,33 3 75,00 45,00 30,00 60,00 Rata-rata 33,33 55,56
38 E 1 75,00 31,00 44,00 41,33 2 75,00 8,00 67,00 10,67 3 75,00 32,00 43,00 42,67 Rata-rata 51,33 31,56 Keterangan : KH : Kelangsungan hidup (%) N t : Jumlah larva yang hidup pada akhir pemeliharaan (ekor) N 0 : Jumlah larva yang ditebar (ekor)
39 Lampiran 4. Analisis Data Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo Hasil Penelitian Dengan menggunakan rumus KH = (Nt / N 0 ) x 100%. Diperoleh nilai kelangsungan Hidup sebagai berikut : Perlakuan Ulangan jumlah Rata-rata 1 2 3 A 1,33 36,00 10,67 48,00 16,00 B 48,00 41,33 62,67 152,00 50,67 C 52,00 60,00 45,33 157,33 52,44 D 33,33 73,33 60,00 166,67 55,56 E 41,33 10,67 42,67 94,67 31,56 Jumlah 618,67 Data Kelangsungan Hidup (%) setelah ditranformasikan Arcsin Ulangan Perlakuan 1 2 3 Jumlah Rata-rata A 6,63 36,87 19,06 62,56 20,85 B 43,85 40,01 52,34 136,20 45,40 C 46,15 50,77 42,32 139,24 46,41 D 35,26 58,91 50,77 144,94 48,31 E 40,01 19,06 40,78 99,85 33,28 Jumlah 582,80 Perhitungan Analisis ragam : 1. Faktor Koreksi (FK) = ij 2 r.t = (582,80) 2 3.5 = 22643,5 2. Jumlah Kuadrat Total (JKT) = ij 2 FK = {(6,63) 2 +... + (40,78) 2 } - 22643,5 = 2803,083
40 3. Jumlah Kuadrat Perlakuan (JKP) = ij 2 FK r = {(62,56) 2 +... + (99,85) 2 } -22643,5 3 = 1633,419 4. Jumlah Kuadrat Galat (JKG) = JKT-JKP = 2803,083-1633,419 = 1169,664 5. KT Perlakuan (KTP) = JKP t-1 = 1633,419 5-1 = 408,35 6. KT Galat (KTG) = JKG t (r-1) = 1169,664 10 = 116,96 7. F Hitung = KTP KTG = 408,3548 116,9664 = 3,491215
41 Tabel Analisis Sidik Ragam Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo SK DB JK KT F.Hit F 0.05 Perlakuan 4 1633,419 408,3548 3,491215 3,47805 Galat 10 1169,664 116,9664 Total 14 2803,083 Keterangan : F Hitung > F Tabel = Berbeda nyata pada taraf 5% Uji Jarak Berganda Duncan Pada Taraf 5% KT Galat = 116,9664 Sx = = = 6,24 SSR 5% = Tabel (Gasperz 1991) dengan db Galat = 10 Untuk taraf 5% LSR = Sx x SSR 5% Sx 6,24 P 2 3 4 5 SSR 5% 3,15 3,30 3,37 3,43 LSR 19,65 20,59 21,03 21,40 Tabel Perbandingan Antara Perlakuan Perlakuan Rata-rata Selisih LSR 5% A 16,00 - a E 31,56 15,6-19,65 ab B 50,67 34,67 19,11-20,59 bc C 52,44 36,44 20,88 1,77-21,03 c D 55,56 39,56 24,00 4,89 3,12 21,40 c
42 Tabel Hasil Uji Lanjutan Jarak Berganda Duncan Perlakuan Kelangsungan Hidup (%) A (Kontrol) B (10 6 ) C (10 7 ) D (10 8 ) E (10 9 ) 16,00 a 50,67 bc 52,44 c 55,56 c 31,56 ab Keterangan : Nilai yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji jarak berganda Duncan
43 Lampiran 5. Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo Perlakuan ulangan panjang awal Panjang Akhir Ln Lt Ln Lo LP (%) 1 4 11,80 2,47 1,39 7,73 2 4 11,40 2,43 1,39 7,48 A 3 4 11,00 2,40 1,39 7,23 Rata-rata 4 11,40 2,43 1,39 7,48 1 4 12,60 2,53 1,39 8,20 2 4 12,60 2,53 1,39 8,20 B 3 4 12,40 2,52 1,39 8,08 Rata-rata 4 12,53 2,53 1,39 8,16 1 4 12,80 2,55 1,39 8,31 2 4 12,60 2,53 1,39 8,20 C 3 4 13,20 2,58 1,39 8,53 Rata-rata 4 12,87 2,55 1,39 8,34 1 4 13,80 2,62 1,39 8,85 2 4 13,40 2,60 1,39 8,64 D 3 4 13,20 2,58 1,39 8,53 Rata-rata 4 13,47 2,60 1,39 8,67 1 4 12,20 2,50 1,39 7,97 2 4 12,40 2,52 1,39 8,08 E 3 4 11,80 2,47 1,39 7,73 Rata-rata 4 12,13 2,50 1,39 7,92 Keterangan : LP = Laju Pertumbuhan lnlt = Panjang Rata-rata ikan diakhir periode sampling. lnlo = Panjang rata-rata iikan diawal periode sampling.
44 Lampiran 6. Analisis Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo Dengan Menggunakan rumus P = lnl t lnl 0 x 100%. Diperoleh Laju Pertumbuhan sebagai berikut : Data Asli Perhitungan Laju Pertumbuhan Ulangan Jumlah Perlakuan 1 2 3 total Rata-rata A 7,73 7,48 7,23 22,43 7,48 B 8,20 8,20 8,08 24,47 8,16 C 8,31 8,20 8,53 25,03 8,34 D 8,85 8,64 8,53 26,01 8,67 E 7,97 8,08 7,73 23,77 7,92 Jumlah 121,72 T Nilai Laju Pertumbuhan (%) setelah Ditranformasikan ulangan Jumlah perlakuan 1 2 3 total Rata-rata A 2,78 2,74 2,69 8,20 2,73 B 2,86 2,86 2,84 8,57 2,86 C 2,88 2,86 2,92 8,67 2,89 D 2,97 2,94 2,92 8,83 2,94 E 2,82 2,84 2,78 8,44 2,81 Jumlah 42,71 8. Faktor Koreksi (FK) = ij 2 r.t = (42,71) 2 3.5 = 121,6358 9. Jumlah Kuadrat Total (JKT) = ij 2 FK = {(2,78) 2 +... + (2,78) 2 } 121,6358 = 0,08 10. Jumlah Kuadrat Perlakuan (JKP) = ij 2 FK
45 r = {(8,20) 2 +... + (8,44) 2 } 3 = 0,075009-121,6358 11. Jumlah Kuadrat Galat (JKG) = JKT-JKP = 0,08 0,075009 = 0,01 12. KT Perlakuan (KTP) = JKP t-1 = 0,075009 5-1 = 0,018752 13. KT Galat (KTG) = JKG t (r-1) = 0,1 10 = 0,000975 14. F Hitung = KTP KTG = 0,018752 0,000975 = 19,24059 Tabel Analisis Sidik Ragam Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo SK DB JK KT F.Hit F 0.05 Perlakuan 4 0,075009 0,018752 19,24059 3,47805 Galat 10 0,01 0,000975 Total 14 0,08 Keterangan : *F hitung > F Tabel = berbeda nyata pada taraf 5% Uji Jarak Berganda Duncan pada Taraf Kepercayaan 95%
46 KT Galat = 0,000975 Sx = = = 0,018 SSR 5% = Tabel (Gasperz 1991) dengan db Galat = 10 Untuk taraf 5% LSR = Sx x SSR 5% Sx 0,018 P 2 3 4 5 SSR 5% 3,15 3,3 3,37 3,43 LSR 0,0567 0,0594 0,06066 0,06174 Tabel Perbandingan antar Perlakuan Perlakuan Rata-rata Selisih LSR 5% A 7,48 - a E 7,92 0,44-0,0567 b B 8,16 0,68 0,24-0,0594 c C 8,34 0,86 0,42 0,18-0,06066 d D 8,67 1,19 0,75 0,51 0,33 0,06174 e Tabel Hasil Lanjutan dengan Jarak berganda Duncan Perlakuan Laju Pertumbuhan (%) A (Kontrol) 7,48 a B (10 6 ) C (10 7 ) D (10 8 ) E (10 9 ) 8,16 c 8,34 d 8,67 e 7,92 b Lampiran 7. Hasil Pengukuran Kualitas Air ( suhu, ph, DO dan Amoniak)
47 1. Suhu C Perlakuan Hari Ke- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 A1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 A2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 A3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 B1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 B2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 B3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 C1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 C2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 C3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 D1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 D2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 D3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 E1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 E2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 E3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 2. ph Perlakuan Hari Ke- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 A1 6,9 6,9 6,9 7 7 7,2 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,4 A2 6,8 6,8 6,9 7 7 7 7 7 7,1 7,3 7,3 7,5 7,5 7,6 A3 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 B1 6,9 6,9 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 B2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,5 7,5 7,5 7,5 7,6 B3 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 C1 6,7 6,7 6,8 6,9 6,9 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 C2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 C3 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 D1 6,9 6,9 6,9 7 7 7,1 7,2 7,2 7,2 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3
48 D2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,2 7,2 7,2 7,2 7,3 D3 6,9 6,9 6,8 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7,2 7,2 7,2 7,2 7,2 E1 6,8 6,8 6,9 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,6 E2 6,9 6,9 7 7 7 7,1 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 E3 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 3. DO (Disolved Oxygen) Perlakuan Hari Ke- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 A1 6 5,9 5,7 5,6 5,6 5,4 5,3 5,3 5,3 5,2 5,2 5 4,7 4,5 A2 5,9 5,9 5,6 5,4 5,4 5,3 5,2 5,3 5,2 5,2 5 5 4,7 4,5 A3 5,9 5,7 5,6 5,4 5,3 5,3 5,1 5 5 4,8 4,6 4,3 4,6 4,4 B1 6 5,7 5,7 5,4 5,3 5,2 5,2 5 4,9 4,9 4,8 4,9 4,7 4,6 B2 6,1 5,7 5,6 5,3 5,3 5,2 5,2 5,1 5,1 5 5 4,9 4,6 4,6 B3 6 6 5,3 5,2 5,2 5,1 5 5 4,9 4,9 4,8 4,8 4,6 4,4 C1 5,9 5,7 5,3 5,2 5,2 5 5 5 4,9 4,8 4,8 4,8 4,6 4,4 C2 6 5,9 5,3 5,2 5,1 4,9 4,6 4,7 4,7 4,8 4,7 4,7 4,5 4,3 C3 5,7 5,9 5,4 5,3 5,1 5 4,9 4,8 4,9 4,8 4,8 4,8 4,4 4,3 D1 5,9 5,7 5,4 5,2 5,1 5 5 4,8 4,9 4,9 4,8 4,9 4,4 4,3 D2 6,1 6 5,7 5,3 5,2 4,9 5 4,9 4,8 4,7 4,8 4,7 4,5 4,3 D3 5,8 5,7 5,5 5,3 5,2 5,2 5,2 5 4,9 4,9 4,8 4,8 4,5 4,3 E1 5,7 5,7 5,6 5,3 5,2 5,1 5 5 4,9 4,8 4,8 4,9 4,4 4,2 E2 6 5,6 5,1 5,2 5,1 5 5 4,6 4,8 4,7 4,7 4,7 4,5 4,3 E3 6,1 5,7 5,3 5,1 5 5 4,9 4,8 4,8 4,7 4,6 4,6 4,4 4,3 4. Amonia
49 Perlakuan Sampling Ke- 1 2 3 A1 0 0,1 0,25 A2 0 0,2 0,5 A3 0 0,1 0,25 Rata-rata : 0 0,13 0,33 B1 0 0 0,1 B2 0 0,05 0,1 B3 0 0 0,1 Rata-rata : 0 0,016 0,1 C1 0 0 0,05 C2 0 0,05 0,1 C3 0 0,05 0,1 Rata-rata : 0 0,03 0,083 D1 0 0 0,05 D2 0 0 0,05 D3 0 0,05 0,1 Rata-rata : 0 0,016 0,06 E1 0 0,25 0,75 E2 0 0,25 0,50 E3 0 0,25 0,75 Rata-rata : 0 0,25 0,66
50 Lampiran 8. Kegiatan Selama Penelitian A. Kultur bakteri Lactobacillus sp. Persiapan Alat dan Bahan Untuk Kultur Bakteri. Penimbangan MRS Agar Sterilisasi Alat dengan Autoclave. Pelarutan MRS Agar untuk media kultur Penuangan MRS Agar ke dalam Tabung Reaksi. Teknik Penggoresan Bakteri pada Agar Miring
51 B. Perhiungan Kepadatan Bakteri Lactobacillus sp. Bakteri yang telah di inkubasi selama 48 jam dan tumbuh dipanen secara asepik dengan menggunakan jarum ose. Pngambilan akteri dengan menggunakan jarum ose dan dipindahkan kedalam ttabung falcon yang berisi NaCl. Pemanenan dilakukan di laminar flow. Campuran bakterii dengan NaCl dihomogenkan dengan menggunakan vortex mixer. Penghitungan kepadatan bakteri dengan menggunakan spektrofotometer.
52 C. Pemeliharaan Larva Lele Dumbo Penentuan Tata Letak Perlakuan Pengisian ikan sebanyak 75 ekor pada setiap wadah Pemberian Lactobacillus sp. ke Pengukuran ph Pengukuran DO Pengukuran Konsentrasi Amonia Penetasan Artemia Pemberian pakan berupa Artemia Pengamatan terhadap Kelangsungan Hidup Pengukuran Panjang Larva Penghitungan Kematian Ikan