Lampiran 1. Prosedur Penentuan Jumlah Sel Hidup (AOAC, 2012) Hancurkan 1 gram bibit ragi kering dalam lumping hingga halus, masukkan

Transkripsi

1 Lampiran 1. Prosedur Penentuan Jumlah Sel Hidup (AOAC, 2012) Hancurkan 1 gram bibit ragi kering dalam lumping hingga halus, masukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi air steril 9 ml dan buat dalam tabung kimia suatu suspensi bibit ragi. Konsentrasinya harus sedemikian, hingga dalam preparat yang diperiksa dengan mikroskop pada tiap-tiap bidang pandangan terlihat sel. Tempatkan beberapa tetes suspensi tersebut di atas kaca objek dan campurkan dengan larutan methylene blue hingga cairan di atas kaca objek berwarna biru muda. Sesudahnya di tutup dengan kaca tutup, periksalah preparat dengan mikroskop. Sel yang mati akan berwarna biru, sedangkan sel yang hidup tidak menyerap warna. Catatlah jumlah sel yang tidak berwarna, tentukan perbandingan dan hitung dengan memeriksa 10 bidang pandangan, jumlah % sel yang hidup (tidak berwarna). Dengan perhitungan sebagai berikut : sel = sel hidup 5 x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Pengenceran 78

2 Lampiran 2. Prosedur Penentuan Kadar Gula Reduksi Metode Luff Schoorl (Egan, 1991) Sampel padat ditimbang sebanyak 1 gram kemudian dihancurkan sampai halus dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml yang ditambahkan aquadest sampai tanda batas. Kemudian dipipet sebanyak 10 ml pada labu dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer 250 ml. ditambahkan 50 ml aquadest dan 10 ml larutan luff schoorl ke dalam erlenmeyer. Kemudian erlenmeyer tersebut dipanaskan selama 10 menit, dihitung setelah mendidih, matikan api, dan didinginkan sampai benar-benar dingin. Selanjutnya ditambahkan 10 ml H 2 SO 4 6 N dan 1,5 gram KI ke dalam erlenmeyer. Titrasi dengan Na 2 S 2 O 3 0,1 baku hingga berwarna kuning jerami, ditambahkan larutan amylum 1 ml dam titrasi kembali sampai warna biru hilang. Catat berapa ml Na 2 S 2 O 3 dan hitung gula reduksinya. ml Na 2 S 2 O 3 = (Vb - Vs) NNa 2 S 2 O 3 0,1 Mg glukosa (tabel): ml Na 2 S 2 O 3 0 X = 0 + x (4,8-2,4) 1 0 mg gula (tabel) x Fp Kadar gula reduksi = x 100 % Ws x 1000 Keterangan : Vb = volume blanko Vs = volume sampel Ws = berat sampel 79

3 Lampiran 3. Perhitungan dan Kebutuhan Bahan 1. Menentukan banyak ulangan (t-1) x (r-1) 15 Diketahui : t = 9 perlakuan Dit : r? Maka : (t-1) (r-1) 15 (9-1) (r-1) 15 8 x (r -1) 15 8r r r = 2,875 = 3 kali ulangan Banyak Perlakuan : 3 kali ulangan x 9 perlakuan = 27 perlakuan 2. Menentukan Formulasi penelitian pendahuluan Perhitungan : 120 gram x 9 sampel x 3 ulangan = 3240 gram Formulasi 1 : Tepung beras : 68,93% x 1350 = 930,55 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 2,50 % x 1350 = 33,75 gram 80

4 81 Formulasi 2 : Tepung beras : 66,43% x 1350 = 896,80 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 5,00% x 1350 = 67,50 gram Formulasi 3 : Tepung beras : 63,93% x 1350 = 863,05 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 7,50% x 1350 = 101,25 gram 3. Formulasi penelitian utama Perhitungan : 100 gram x 9 sampel x 3 ulangan = 3240 gram Formulasi 1 : Tepung beras : 68,93% x 1350 = 930,55 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram 81

5 82 Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 2,50% x 1350 = 33,75 gram Formulasi 2 : Tepung beras : 69,43% x 1350 = 937,30 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 2,00% x 1350 = 27,00 gram Formulasi 3 : Tepung beras : 70,43% x 1350 = 950,80 gram Merica : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Cabe jawa : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Bawang putih : 2,39% x 1350 = 32,26 gram Lengkuas : 0,36% x 1350 = 4,86 gram Sukrosa : 21,04% x 1350 = 284,04 gram Urea : 1,00% x 1350 = 13,50 gram 82

6 Lampiran 4. Perhitungan Penentuan Sel dengan Metode Counting Chamber 1. Ragi Tape (a 1 b 1 x) Diketahui : jumlah sel = 13 Pengenceran = 10-4 sel = sel hidup 5 x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Pengenceran 13 sel = = 6,5 x x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Ragi Tape (a 1 b 2 x) Diketahui : jumlah sel = 11 sel = Pengenceran = 10-4 sel hidup 5 x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Pengenceran 11 sel = = 5,5 x x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Ragi Tape (a 1 b 3 x) Diketahui : jumlah sel = 35 sel = Pengenceran = 10-4 sel hidup 5 x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x Pengenceran 35 sel = = 17,5 x x 16 x 0,05 x 0,05 x 0,1 x 10-3 x

7 Lampiran 5. Perhitungan Kadar Gula Reduksi Metode Luff Schoorl 1. Ragi Tape (a 1 b 1 x) Diketahui : Wsampel : 1,03 gram Vtitrasi : 7,1 ml Vblanko : 10,6 ml N AgNO 3 : 0,089 N ml Na 2 S 2 O 3 = (10,6 7,1 ml) 0,089 N 0,1 = 3,115 ml Mg glukosa (tabel): 3,115 0 X = x (4,8-2,4) = 7,476 mg 7,476 mg x 100/10 Kadar gula reduksi = x 100 % = 7,262 % 1,03 g x Ragi Tape (a 1 b 2 x) Diketahui : Wsampel : 1,01 gram Vtitrasi Vblanko N AgNO 3 : 7,0 ml : 10,6 ml : 0,089 N ml Na 2 S 2 O 3 = (10,6 7,0 ml) 0,089 N 0,1 = 3,204 ml Mg glukosa (tabel): 3,204 0 X = x (4,8-2,4) = 7,689 mg 7,689 mg x 100/10 Kadar gula reduksi = x 100 % = 7,613 % 1,01 g x

8 85 3. Ragi Tape (a 1 b 3 x) Diketahui : Wsampel : 1,06 gram Vtitrasi : 7,0 ml Vblanko : 10,6 ml N AgNO 3 : 0,089 N ml Na 2 S 2 O 3 = (10,6 7,0 ml) 0,089 N 0,1 = 3,204 ml Mg glukosa (tabel): 3,204 0 X = x (4,8-2,4) = 7,689 mg 7,689 mg x 100/10 Kadar gula reduksi = x 100 % = 7,253 % 1,06 g x Ragi Tape (a 2 b 1 x) Diketahui : Wsampel : 1,07 gram Vtitrasi Vblanko N AgNO 3 : 6,9 ml : 10,6 ml : 0,089 N ml Na 2 S 2 O 3 = (10,6 6,9 ml) 0,089 N 0,1 = 3,293 ml Mg glukosa (tabel): 3,293 0 X = x (4,8-2,4) = 7,903 mg 7,903 mg x 100/10 Kadar gula reduksi = x 100 % = 7,386 % 1,07 g x

9 Lampiran 6. Perhitungan Kadar Gula Reduksi Metode Luff Schoorl Penelitian Utama Tabel Kadar Gula Reduksi Ragi Tape Ulangan 1 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.5 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1.0 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 7,262 7,613 7, % (a 2 ) 7,386 7,962 7, % (a 3 ) 8,709 9,005 9,296 Tabel Kadar Gula Reduksi Ragi Tape Ulangan 2 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.5 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1.0 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 7,613 7,323 7, % (a 2 ) 7,805 7,119 8, % (a 3 ) 8,087 8,748 8,341 Tabel Kadar Gula Reduksi Ragi Tape Ulangan 3 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.5 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1.0 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 7,393 7,538 7, % (a 2 ) 7,673 7,819 8, % (a 3 ) 8,671 8,427 8,950 Data Asli Analisis Kadar Gula Reduksi Ragi Tape Faktor Ulangan a dan b Jumlah Rata-rata a 1 b 1 7,262 7,613 7,393 22,268 7,423 a 1 b 2 7,613 7,323 7,538 22,474 7,491 a 1 b 3 7,253 7,393 7,456 22,102 7,367 a 2 b 1 7,386 7,805 7,673 22,864 7,621 a 2 b 2 7,962 7,119 7,819 22,900 7,633 a 2 b 3 7,447 8,009 8,087 23,543 7,848 a 3 b 1 8,709 8,087 8,671 25,467 8,489 a 3 b 2 9,005 8,748 8,427 26,180 8,727 a 3 b 3 9,296 8,341 8,950 26,587 8,862 Keterangan : a b : Konsentrasi Urea : Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae 86

10 Perhitungan : Faktor Koreksi (FK) = r x a x b = (214,385) 2 3 x 3 x 2 = 1702,257 Jangkauan Kuadrat Total (JKT) = [(a1b1) 2 + (a1b2) (a3b3) 2 ] - FK = {(7,262) (8,950) 2 )} 1702,257 = 10,067 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKK) = {( Σa1) 2 + (Σa2) 2 + (Σa3) 2 - FK a x b = {(71,93) 2 + (70,44) 2 + (72,01) 2 } 1702,257 3 = 0,175 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKA) = (Σa1) 2 + (Σa2) 2 + (Σa3) 2 } - FK B x r ={(70,60) 2 + (71,55) 2 + (72,23) ,257 9 = 0,150 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKB) = (Σb1) 2 + (Σb2) 2 + (Σb3) 2 } - FK a x r = (66,84) 2 + (69,31) 2 + (78,23) ,257 9 = 7,981 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKAB) = (Σa1b1) (a3b3) 2 FK- JKA-JKB r ={(22,68) (26,48) ,25-0,15-7,98 3

11 = 0,185 Jangkauan Kuadrat Galat (JKG) = JKT JKK JKA JKB JKAB = 10,067 0,175 0,15 7,981 0,185 = 1,576 Tabel analisis variasi Gula Reduksi Sumber Keragaman DB JK KT F hitung F tabel 1% Kelompok Faktor a * Faktor b 2 0, Interaksi ab Galat Total Kesimpulan : Karena F hitung < F tabel 5% maka diberi notasi * ) perlu dilakukan uji lanjut Duncan. Tabel Uji Lanjut Duncan Sy(a) = = = 0,1046 Sy(ab) = = = 0,1812

12 Uji Lanjut Duncan Faktor a SSR 5% LSR 5% Kode Rata2 Perlakuan Taraf Nyata - - a a a tn - a a * 4.66 * - b Uji lanjut duncan interaksi faktor A dan B SS LSR Ratarata R Kode Perlakuan Taraf 5% 5% Nyata - - a1b a 3, a1b tn - a a1b tn 0.07 tn - a a2b tn 0.20 tn 0.13 tn - a a2b tn 0.21 tn 0.14 tn 0.01 tn - a a2b tn 0.43 tn 0.36 tn 0.23 tn 0.22 tn - a a3b * 1.07 * 1.00 * 0.87 * 0.86 * 0.64 * - b a3b * 1.31 * 1.24 * 1.11 * 1.1 * 0.88 * 0.24 tn - b a3b * 1.44 * 1.37 * 1.24 * 1.23 * 1.01 * 0.37 tn 0.13 tn - b

13 Lampiran 7. Perhitungan Sel dengan Metode Counting Chamber Penelitian Utama Tabel Sel Ragi Tape Ulangan 1 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.50 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 6,50 x ,50 x ,50 x % (a 2 ) 12 x ,50 x x % (a 3 ) 7,50 x ,50 x ,50 x 10 9 Tabel Sel Ragi Tape Ulangan 2 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.50 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 7 x x ,50 x % (a 2 ) 9 x ,50 x ,50 x % (a 3 ) 13 x ,50 x x 10 9 Tabel Sel Ragi Tape Ulangan 3 Konsentrasi Urea (a) Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae (b) 0.50 ml (b 1 ) 0.75 ml (b 2 ) 1 ml (b 3 ) 2.5 % (a 1 ) 3,50 x ,50 x x % (a 2 ) 11 x ,50 x ,50 x % (a 3 ) 5 x ,50 x x 10 9 Data Asli Analisis Sel Ragi Tape Faktor Ulangan a dan b Jumlah Rata-rata a 1 b 1 6,5 x x ,5 x x ,67 x 10 9 a 1 b 2 5,5 x x ,5 x x ,30 x 10 9 a 1 b 3 17,5 x ,5 x x x x 10 9 a 2 b 1 12 x x x x ,60 x 10 9 a 2 b 2 8,5 x ,5 x ,5 x ,5 x ,20 x 10 9 a 2 b 3 6 x ,5 x ,5 x x ,30 x 10 9 a 3 b 1 7,5 x x x ,5 x ,50 x 10 9 a 3 b 2 7,5 x ,5 x ,5 x ,5 x ,83 x 10 9 a 3 b 3 10,5 x x x ,5 x ,5 x 10 9 Keterangan : a : Konsentrasi Urea b : Konsentrasi Saccharomyces cerevisiae

14 Perhitungan : Faktor Koreksi (FK) = r x a x b = (252) 2 3 x 3 x 3 = 2352 Jangkauan Kuadrat Total (JKT) = [(a1b1) 2 + (a1b2) (a3b3) 2 ] - FK = {(6,50) (16) 2 )} 2352 = 559 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKK) = {( Σa1) 2 + (Σa2) 2 + (Σa3) 2 } - FK a x b = {(93) 2 + (69,50) 2 + (89,50) 2 } x 3 = 35,72 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKA) = (Σa1) 2 + (Σa2) 2 + (Σa3) 2 } - FK b x r = {(74,50) 2 + (61) 2 + (116,50) 2 } = 186,17 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKB) = (Σb1) 2 + (Σb2) 2 + (Σb3) 2 } - FK a x r = (93) 2 + (69,50) 2 + (89,50) = 35,72 Jangkauan Kuadrat Kelompok (JKAB) = (Σa1b1) (a3b3) 2 FK- JKA-JKB r ={(17) (89,50) ,167-35,72 3

15 = 219,11 Jangkauan Kuadrat Galat (JKG) = JKT JKK JKA JKB JKAB = ,72 186,17 35,72 219,11 = 82,27 Tabel analisis variasi jumla sel Saccharomyces cerevisiae Sumber Keragaman DB JK KT F hitung F tabel 5% Kelompok Faktor a Faktor b Interaksi ab Galat Total Kesimpulan : Karena F hitung < F tabel 5% maka diberi notasi * ) perlu dilakukan uji lanjut Duncan. Tabel Uji Lanjut Duncan Sy (b) = = = Sy (ab) = = =1.5587

16 Uji Lanjut Duncan Faktor b SSR LSR Kode Rata2 Perlakuan Taraf 5% 5% Nyata - - b a b tn - a b * 4.66 * - b Uji lanjut duncan interaksi faktor A dan B Ratarata SSR LSR Kode Perlakuan Taraf 5% 5% Nyata - - a1b a a2b tn - a a2b tn 0.16 tn - a a3b tn 0.66 tn 0.50 tn - a a1b tn 1.16 tn 1.00 tn 0.50 tn - a a3b tn 2.33 tn 2.17 tn 1.67 tn 1.17 tn - a a2b tn 4.50 tn 4.34 tn 3.84 tn 3.34 tn 2.17 tn - ab a3b * 8.33 * 8.17 * 7.67 * 7.17 * 6.00 * 3.83 tn - bc a1b * * * * 10.7 * 9.5 * 7.33 * 3.5 tn - c