PENETAPAN KADAR CAMPURAN RIFAMPISIN DAN ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DENGAN METODE PANJANG GELOMBANG BERGANDA SKRIPSI OLEH: RIRIS ANUGRAH REMA SITORUS NIM 121524192 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
PENETAPAN KADAR CAMPURAN RIFAMPISIN DAN ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DENGAN METODE PANJANG GELOMBANG BERGANDA SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: RIRIS ANUGRAH REMA SITORUS NIM 121524192 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016 2
PENGESAHAN SKRIPSI PENETAPAN KADAR CAMPURAN RIFAMPISIN DAN ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DENGAN METODE PANJANG GELOMBANG BERGANDA OLEH: RIRIS ANUGRAH REMA SITORUS NIM 121524192 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: 28 Maret 2016 Disetujui oleh: Pembimbing I Panitia Penguji, Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. NIP 195108161980031002 Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt. NIP 195306191983031001 Pembimbing II Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. NIP 195108161980031002 Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195006221980021001 Dra. Sudarmi, M.Si., Apt. NIP 195409101983032001 Medan, 28 Maret 2016 Fakultas Farmasi Pejabat Dekan, Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt. NIP 195401101980032001 Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001 3
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala karunia dan rahmatnya, sehingga penulis dapat menjalani masa perkuliahan dan penelitian hingga akhirnya menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul Penetapan Kadar Campuran Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode Panjang Gelombang Berganda. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi dan Ibu Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku Wakil Dekan I Fakultas Farmasi yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan dan penelitian. Rasa hormat dan terima kasih yang setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Bapak Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt., dan Bapak Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan dan motivasi dengan penuh kesabaran dan keikhlasan selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung, juga kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., Ibu Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt., selaku penguji yang telah memberikan kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis menyampaikan rasa terima kasih yang tulus kepada Ayah dan Ibu tercinta Resman Sitorus dan Maiyana Tambunan serta abang saya Putra Caisar Mangara Rema Sitorus dan Jimmi Ardi Rema Sitorus serta adik saya Lidia i
Mentari Rema Sitorus dan Adhe Tamara Rema Sitorus yang selalu memberi semangat dan dukungan terbesar, doa, serta materil selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini. Pada kesempatan ini juga penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih kepada sahabat, teman-teman seperjuangan di Laboratorium Penelitian, serta teman-teman seangkatan lainnya yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah banyak memberikan saran, dukungan, dan doa selama penelitian dan penyusunan skripsi ini berlangsung. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak kekurangan, oleh sebab itu dengan segala kerendahan hati penulis bersedia menerima kritik dan saran yang membangun untuk kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua. Medan, April 2016 Penulis, Riris Anugrah Rema Sitorus NIM 121524192 ii
SURAT PERNYATAAN Saya yang bertandatangan dibawah ini, Nama : Riris Anugrah Rema Sitorus Nomor Induk Mahasiswa : 121524192 Program Studi : Ekstensi Farmasi Judul Skripsi : Penetapan Kadar Campuran Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet secara Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode Panjang Gelombang Berganda. Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah di ajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing. Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya. Medan, April 2016 Yang membuat pernyataan, Nama: Riris Anugrah Rema Sitorus NIM : 121524192 iii
PENETAPAN KADAR CAMPURAN RIFAMPISIN DAN ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DENGAN METODE PANJANG GELOMBANG BERGANDA ABSTRAK Obat yang digunakan untuk penyakit tuberkulosis digolongkan atas dua kelompok, yaitu obat primer dan obat sekunder. Rifampisin dan isoniazid termasuk kedalam kelompok obat primer. Tablet kombinasi rifampisin dan isoniazid merupakan salah satu sediaan obat kombinasi dalam pengobatan tuberkulosis. Tujuan penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar rifampisin dan isoniazid dalam sediaan tablet yang beredar di pasaran secara spektrofotometri ultraviolet dengan metode panjang gelombang berganda. Penelitian ini dilakukan dengan pengambilan sampel secara purposif. Penetapan kadar rifampisin dan isoniazid secara spektrofotometri ultraviolet dengan metode panjang gelombang berganda. Tahapan yang dilakukan dengan menentukan spekrum serapan, menentukan lima panjang gelombang analisis, menentukan nilai serapan (a), kemudian menghitung kadar dengan menggunakan perhitungan matriks. Dari hasil penelitian diperoleh kadar campuran rifampisin dan isoniazid pada tablet Rimactazid menggunakan pelarut HCl 0,1 N adalah sebesar (97,40 ± 0,30)% dengan KV = 0,1951% untuk rifampisin, dan (97,83 ± 0,12)%, dengan nilai KV = 0,0787 % untuk isoniazid. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kadar campuran rifampisin dan isoniazid dalam sediaan tablet yang diteliti memenuhi persyaratan tablet menurut WHO (2006), yaitu mengandung rifampisin dan isoniazid tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada etiket. Serta memenuhi persyaratan akurasi dan presisi, sehingga dapat disimpulkan bahwa metode spektrofotometri dengan panjang gelombang berganda dapat digunakan untuk melakukan penetapan kadar campuran rifampisin dan isoniazid dalam sediaan tablet. Kata kunci: Rifampisin, Isoniazid, Tablet, Spektrofotometri Ultraviolet, Panjang Gelombang Berganda iv
DETERMINATION OF CONCENTRATION OF MIXED RIFAMPISIN AND ISONIAZID TABLET IN STOCKS BY SPECTROPHOTOMETRY ULTRAVIOLET WITH MULTIPLE WAVELENGHT METHOD ABSTRACT The drugs used for tuberculosis were classified into two groups, there is primary drugs and secondary drugs. Rifampicin and isoniazid are the primary drugs. Combination of rifampicin and isoniazid in the tablet is one of the drugs that used in tuberculosis treatment. Combination of rifampicin and isoniazid in the tablet is one of the drugs that used in tuberculosis treatment. The purpose of this study is to determination value of rifampicin and isoniazid in tablets which circulates in the general by spectrophotometry ultraviolet with multiple wavelength method. This research was conducted with a purposive sampling. Assay of rifampicin and isoniazid ultraviolet spectrophotometry with multiple wavelength method. Steps being taken to determine spekrum absorption, determine the fivewavelength analysis, determining the uptake value (a), and then calculates the levels by using matrix calculations. The result showed that the levels of rifampicin were obtained in tablet Rimactazid was (97.40 ± 0.30)% with KV = 0.1951%, and to isoniazid (97.83 ± 0.12)% with the value of KV = 0.0787%. The results showed that levels of a mixture of rifampicin and isoniazid in tablets studied meet the requirements of tablets according to WHO (2006), which contains rifampicin and isoniazid not less than 90% and not more than 110% of the amount listed on the label. As well as meet the requirements of accuracy and precision, so it can be concluded that the spectrophotometric method at multiple wavelengths can be used to perform the assay mixture of rifampicin and isoniazid in the preparation of tablets. Keywords: Rifampicin, Isoniazid, Tablets, Spectrophotometry Ultraviolet, Multiwavelength v
DAFTAR ISI Halaman LEMBAR JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... SURAT PERNYATAAN... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... i iii iv vi vii viii ix xii xiv xv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 4 1.3 Hipotesis Penelitian... 4 1.4 Tujuan Penelitian... 5 1.5 Manfaat Penelitian... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 6 2.1 Uraian Umum... 6 2.2 2.1.1 Rifampisin... 6 2.3 2.1.2 Isoniazid... 7 2.2 Spektrofotometri... 8 2.3 Komponen spektrofotometer... 10 vi
2.4 Hukum Lambert-Beer... 11 2.5 Analisis Multikomponen dengan Spektrofotometri Ultraviolet... 11 2.6 Validasi Metode Analisis... 15 2.6.1 Akurasi... 15 2.6.2 Presisi... 16 2.6.3 Linearitas... 16 2.6.4 Rentang... 17 BAB III METODOLOGI PENELITIAN... 18 3.1 Jenis Penelitian... 18 3.2 Tempat dan Waktu Penelitian... 18 3.3 Alat... 18 3.4 Bahan... 18 3.5 Pengambilan Sampel... 18 3.6 Prosedur Penelitian... 19 3.6.1 Pembuatan Pelarut... 19 3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Rifampisin... 19 3.6.3 Pembuatan Larutan Induk Baku Isoniazid... 19 3.6.4 Penentuan Spektrum Serapan Maksimum Rifampisin... 20 3.6.5 Penentuan Spektrum Serapan Maksimum Isoniazid... 20 3.6.6 Pembuatan Larutan Standar Rifampisin... 20 3.6.7 Pembuatan Larutan Standar Isoniazid... 21 3.6.8 Penentuan Spektrum Serapan... 21 3.6.9 Penentuan Panjang Gelombang Analisis... 21 vii
3.6.10 Penentuan Serapan... 22 3.6.11 Pembuatan Kadar Baku Campuran Rifampisin dan Isoniazid... 22 3.6.12 Pembuatan Kadar Sampel Campuran Rifampisin dan Isoniazid... 23 3.6.13 Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid dalam Campuran... 23 3.6.14 Analisis Hasil... 24 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Penentuan Spektrum Serapan Maksimum... 26 4.2 Spektrum Serapan... 27 4.3 Penentuan Panjang Gelombang Analisis... 30 4.4 Penentuan Serapan... 31 4.5 Kadar dan Koefisien Variasi (%KV) dari Rifampisin dan Isoniazid pada Sediaan Tablet... 37 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 40 5.1 Kesimpulan... 40 5.2 Saran... 40 DAFTAR PUSTAKA... 41 LAMPIRAN... 43 viii
DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 4.1 Spektrum Serapan Maksimum Rifampisin Konsentrasi 13,5 µg/ml... 26 4.2 Spektrum Serapan Maksimum Rifampisin Konsentrasi 11 µg/ml... 27 4.3 Spektrum Serapan Rifampisin Konsentrasi 6,0 µg/ml- 18,0 µg/ml... 27 4.4 Spektrum Serapan Isoniazid Konsentrasi 5,0 µg/ml- 15,0 µg/ml... 28 4.5 Spektrum Tumpang Tindih Rifampisin dan Isoniazid Konsentrasi 7,5 µg/ml - 5,0 µg/ml... 28 4.6 Spektrum Campuran Baku Rifampisin dan Isoniazid Konsentrasi 7,5 µg/ml - 5,0 µg/ml... 29 4.7 Spektrum Tumpang Tindih Rifampisin dan Isoniazid Konsentrasi 7,5 µg/ml - 5,0 µg/ml... 30 4.8 Spektrum Lima Titik Panjang Gelombang Analisis... 31 4.9 Spektrum Serapan Sediaan Tablet Rimactazid Enam Kali Replikasi... 37 1.1 Sampel Tablet Rimactazid... 43 3.1 Gambar Alat... 45 3.2 Gambar Alat... 45 3.3 Gambar Alat... 45 49.1 Replikasi 1... 91 49.2 Replikasi 2... 91 50.1 Replikasi 3... 92 50.2 Replikasi 4... 92 ix
51.1 Replikasi 5... 93 52.1 Replikasi 1... 94 52.2 Replikasi 2... 94 53.1 Replikasi 3... 95 53.2 Replikasi 4... 95 54.1 Replikasi 5... 96 x
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 1 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan I... 32 2 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan II... 33 3 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan III... 33 4 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan IV... 33 5 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan V... 34 6 Data Perhitungan Serapan Rifampisin Pengulangan VI... 34 7 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan I... 34 8 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan II... 35 9 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan III... 35 10 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan IV... 35 11 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan V... 36 12 Data Perhitungan Serapan Isoniazid Pengulangan VI... 36 13 Data Kadar dan Koefisien Variasi Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet Rimactazid... 38 xi
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1 Sampel Tablet Rimactazid... 43 2 Komposisi Tablet Rimactazid... 44 3 Gambar Alat... 45 4 Perhitungan Pembuatan HCl 0,1 N... 46 5 Bagan Alir Pembuatan Larutan Baku Rifampisin... 47 6 Bagan Alir Pembuatan Larutan Baku Isoniazid... 48 7 Bagan Alir Penentuan Panjang Gelombang Analisis... 49 8 Bagan Alir Pembuatan Larutan Baku Campuran... 50 9 Bagan Alir Pembuatan Kadar Sampel... 51 10 Data Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid... 52 11 Data Perhitungan Kadar Teoritis Baku Rifampisin dan Isoniazid... 53 12 Data Perhitungan Kadar Teoritis Baku Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 54 13 Data Perhitungan Kadar Teoritis Baku Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 55 14 Data Perhitungan Kadar Teoritis Baku Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 56 15 Data Penimbangan Baku Serta Kadar Teoritis... 57 16 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 58 17 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 59 18 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 60 xii
19 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 61 20 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 62 21 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 63 22 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 64 23 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 65 24 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 66 25 Data Kalibrasi Replikasi VI dari Rifampisin baku ARS, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 67 26 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 68 27 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 69 28 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 70 29 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 71 30 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 72 31 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 73 32 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 74 33 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 75 34 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi... 76 xiii
35 Data Kalibrasi Isoniazid, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi (lanjutan)... 77 36 Data Penimbangan Sampel... 78 37 Data Serapan Larutan Sampel... 79 38 Data Serapan Larutan campuran Baku... 80 39 Perhitungan Akurasi dari Matriks dan % CV... 81 40 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid... 82 41 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 83 42 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 84 43 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 85 44 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 86 45 Perhitungan Statistik Kadar Rifampisin dan Isoniazid (lanjutan)... 87 46 Perhitungan %KV... 88 47 Contoh Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet... 89 48 Contoh Perhitungan Kadar Rifampisin dan Isoniazid dalam Sediaan Tablet (lanjutan)... 90 49 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Rifampisin... 91 50 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Rifampisin (lanjutan)... 92 51 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Rifampisin (lanjutan)... 93 52 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Isoniazid (lanjutan)... 94 xiv
53 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Isoniazid (lanjutan)... 95 54 Spectrum Serapan dari Larutan Standar Isoniazid (lanjutan)... 96 55 Daftar Nilai Distribusi r... 97 56 Daftar Nilai Distribusi t... 98 57 Sertifikat Pengujian Rifampisin... 99 58 Sertifikat Pengujian Isoniazid... 100 xv