Lampiran 1. Perhitungan Pembuatan Tablet Asam Folat Sebagai contoh F1 (Formula dengan penambahan Pharmacoat 615 1%). Dibuat formula untuk 100 tablet, berat pertablet 00 mg dan penampang tablet 9 mm. Berat 100 tablet Asam Folat Pharmacoat 615 = 100 tablet x 0, gram = 0 gram = 100 tablet x 0,005 gram = 0,5 gram 1% x 6,6 gram = 0,066 gram Amilum manihot 10% Pengembang dalam 5% x 0 gram = 1 gram Pengembang luar 5% x 0 gram = 1gram Talkum : 1% x 0 gram = 0, gram Magnesium stearat : 1% x 0 gram = 0, gram Laktosa = 0 gram ( 0,5 + 0,066 + 1 + 1 + 0, + 0, ) gram = 17,034 gram Pembuatan Tablet Asam Folat Cara kerja : Granulasi basah 1. Dimasukkan 0,066 g Pharmacoat 615 ke dalam cawan porselin dan dilarutkan dengan Air suling pada suhu ± 60 o C sampai bobot 6,6 g.. Dalam lumpang dimasukkan asam folat, pengembang dalam (amilum manihot) dan pengisi (laktosa). 3. Kemudian ditambahkan Pharmacoat 615 sedikit demi sedikit sambil digerus hingga diperoleh massa yang kompak.
4. Kemudian digranulasi dengan ayakan mesh 14, granulat dikeringkan pada suhu 40 60 o C pada lemari pengering setelah kering diayak dengan mesh 16. ditimbang dan ditambahkan magnesium stearat, talkum dan amilum manihot ( pengembang luar ). Berat granul kering = 18 gram Berat teoritis = bahan obat + pengikat + pengembang dalam + pengisi = 0,5 gram + 0,01 gram + 1gram + 17,034 gram. = 18,6 gram Berat teoritis Persentase berat = x 100% Berat seluruhnya 18,6 gram = x 100% 0 gram = 93% Maka jumlah granul seluruhnya = 100% x berat granulkering 93% 100% = x18 gram 93% = 19,35 gram Maka jumlah Magnesium stearat,talkum dan amilum manihot ( pengembang luar) yang ditambahkan adalah : Amilum manihot = 5% x 19,35 gram = 0,967 gram Talkum Magnesium stearat = 1% x 19,35 gram = 0,193 gram = 1% x 19,35 gram = 0,193 gram Setelah bahan tersebut ditimbang lalu ditambahkan pada granul kering kemudian diuji preformulasi dan dicetak menjadi tablet dengan diameter 9 mm.
Lampiran. Hasil Penentuan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi Asam Folat BPFI pada Panjang Gelombang = 56 nm dalam Pelarut NaOH 0,1 N..
Lampiran. (Lanjutan) Tabel 7. Data Kurva Kalibrasi C (mcg/ml) (X) A (Y) XY X Y 0,0 4,0 6,0 8,0 10,0 1,0 0.000 0,01 0,318 0,47 0,530 0,67 0,000 0,804 1,908 3,416 5,300 7,54 0 16 36 64 100 144 0,0000 0,0404 0,1011 0,183 0,809 0,3931 ΣX = 40 ΣY =,103 ΣXY = 18,95 ΣX = 360 ΣY = 0,9978 X = 6.6667 Y = 0,3505 a n XY X. n X ( X ) = Y 6 (18,95) (40)(,103) = 6(360) (40) = 0,058 Y = a X + b b = Y a X = 0,3505 (0,058 x 6.6667) = 0,0016 Persamaan regresi diperoleh dengan mensubsitusikan nilai a dan b, sehingga persamaan regresi adalah: Y = 0,058 X+0,0016
Lampiran. (Lanjutan) Dengan nilai r sebagai berikut : r = ( X ( XY X ) n X )( n Y Y ( Y ) n ) r = 18,95 (40)(,103) 6 (360 40 )(0,9978,103 6 ) 6 = 0,9994
Lampiran 3. Perhitungan Kadar Tablet Asam Folat Misalnya untuk F1 (Formula dengan penambahan Pharmacoat 615 1%) Berat 0 tablet = 410 mg Berat asam folat dalam 0 tablet = 0 x 5 mg = 100 mg Berat setara 800 mcg asam folat = 800 mcg 100 mg x 4090 mg = 3,90 mg - Pengujian 1 Serbuk ditimbang seksama sebanyak 33 mg kemudian dilarutkan sesuai prosedur yang telah disebutkan sebelumnya dan diukur serapan pada panjang gelombang maksimum. Misalnya A(Y) = 0,400 dengan menggunakan persamaan regresi : Y = 0,058 X + 0,0016 Diperoleh konsentrasi (X) larutan = 0,400 0,0016 0,058 = 7,94 mcg/ml Diketahui konsentrasi teoritisnya = Berat yang ditimbang X Konsentrasi tengah Berat setara 800 mcg 33mg Diketahui konsentrasi teoritisnya= 8 mcg/ml = 8,043 mcg/ml 3,90mg Kadar = 7,94 mcg / ml 8,043 mcg / ml x 100% = 99,05% - Pengujian II Kadar asam folat = 98,46% - Pengujian III Kadar asam folat = 98,36%
- Pengujian IV Kadar asam folat = 101,04% - Pengujian V Kadar asam folat = 98,36% - Pengujian VI Kadar asam folat = 101,5% SD = ( X X ) n 1 = (99,05 99,5) + (98,46 99,5) 6 1 +... + (101,5 99,5) = 1,17 Dengan cara yang sama dihitung kadar pada formula tablet lainnya.
Lampiran 4. Data Kadar Asam Folat Dalam Tablet No Formula Absorbansi (A) Konsentrasi (mcg/ml) Kadar (%) 0.400 7,9840 99,05 0.4175 7.9355 98,46 1 F1 0.4171 7.985 98,36 0.44 8,065 101,04 0.4171 7,985 98,36 0.493 8,1595 101,5 0.4 8,055 99,57 0.410 8,004 99,8 F 0.400 7.9840 99.05 0.40 7.9863 98.10 0.4197 7.9770 98,98 0.4196 7,9747 98,95 0.4561 7.8761 98.34 0.459 7.994 99.00 3 0.4598 7.9398 99.13 F3 0.450 7.8055 97.46 0.4580 7.9088 98.75 0.4561 7.8761 98.34 0.453 8.0833 100,30 0.461 8,0994 100,49 4 0.417 8,1179 100,73 F4 0.480 8,1341 100,94 0.494 8,1618 101,7 0.4308 8,187 101,66 0.468 8,1110 100,66 0.438 8,0556 99,95 5 0.4374 8,3119 103,17 F5 0.468 8,1110 100,66 0.4391 8,3443 103,57 0.459 8,0948 100,44 KadarRata-rata (%) 99,5±1,17 99,15±0,3 98.50±0.61 100,88±0,48 101,40±1,54 6 F6 0.4353 0.4371 0.4343 0.4365 0.4376 0.461 8,77 8,3073 8,54 8,958 8,3166 8,0994 10,67 103,10 10,43 10,95 103,1 100,49 10,47±1,01
Lampiran 5. Perhitungan Keseragaman Kandungan Tablet Asam Folat Misalnya untuk F1 (Formula dengan penambahan Pharmacoat 615 1%). Timbang 10 tablet satu per satu masing-masing berat tablet : 1. 0 mg 6. 09 mg. 1 mg 7. 05 mg 3. 10 mg 8. 01 mg 4. 07 mg 9. 03 mg 5. 13 mg 10. 15 mg - Pengujian I Ditimbang serbuk seksama dan dilakukan pengujian seperti pada penetapan kadar. Maka diperoleh serapan ( Y ) = 0,4189 Konsentrasi asam folat dapat dihitung dengan memasukkan nilai absorbansi ke persamaan regresi berikut : Y = 0,058 X + 0,0016 X = 0,4189 0,0016 0,058 = 7,9034 mcg/ml 33mg Diketahui konsentrasi teoritisnya= 8 mcg/ml = 8,1683 mcg/ml 3,3mg 7,9034mcg/ml Maka kadar asam folat = x100% 8,1683mcg/ml = 98,79% - Pengujian II Kadar asam folat = 98,48% - Pengujian III Kadar asam folat = 98,46%
Lampiran 5. (Lanjutan) - Pengujian IV Kadar asam folat = 98,69% - Pengujian V Kadar asam folat = 99,79% - Pengujian VI Kadar asam folat = 98,46% Rata rata hasil penetapan kadar = 98,6116% x 5 mg = 4,9305 mg zat berkhasiat/tablet SD = ( X X ) n 1 SD = ( 98,61 98,74) + ( 98,6 98,74) +... + ( 99,69 98,74) 10 1 = 0,7369 SD SBR = x100% X 0,7369 SBR = x 100% = 0,74 98,74 Perlakuan perhitungan keseragaman kandungan asam folat dalam sediaan tablet ini dilakukan sebanyak 6 (enam) kali. Perhitungan kadar asam folat dalam formula tablet lainnya dilakukan dengan cara yang sama.
Lampiran 6. Contoh Perhitungan Friabilitas Tablet Asam Folat Rumus : F = (a-b)/a x 100% Keterangan : F = Friabilitas a = Bobot tablet sebelum diputar dalam alat Friabilitas Tester selama 4 menit (100 putaran) b = Bobot tablet setelah diputar dalam alat Friabilitas Tester selama 4 menit (100 putaran) Syarat friabilitas tablet : Kehilangan bobot tidak boleh lebih dari 0,8 % (x 0,8 %), sebagai contoh diambil Tablet formula F1 Bobot 0 tablet sebelum diputar = 3,975 g Bobot 0 tablet setelah diputar = 3,914 g Friabilitas Tablet = 3,975 3,914/3,975 x 100% = 1,53% Perhitungan yang sama dilakukan terhadap formula F sampai formula F6
Lampiran 7. Hasil Penentuan Kurva Serapan Asam Folat BPFI pada C = 8 mcg/ml dalam Pelarut Akuades.
Lampiran 8. Hasil Penentuan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi Asam Folat Baku Pembanding pada Panjang Gelombang = 56 nm dalam Pelarut Akuades.
Lampiran 8. (Lanjutan) Tabel 8. Data Kurva Kalibrasi C (mcg/ml) (X) 0,0 4,0 6,0 8.0 10,0 1.0 A (Y) XY X Y 0.000 0,7 0,334 0,437 0,55 0,648 0,000 0,908,004 3,496 5,50 7,776 0,00 16 36 64 100 144 0,0000 0,0515 0,1115 0,1909 0,3047 0,4199 ΣX = 40 ΣY =,1980 ΣXY = 19,704 ΣX = 360 ΣY = 1,0785 X = 6,6700 Y = 0,3663 a n XY X. n X ( X ) = Y 6 (19,704) (40)(,1980) = 6(360) (40) = 0,0541 Y = a X + b b = Y a X = 0,3663 (0,0541 x 6,67) = 0,0055 Persamaan regresi diperoleh dengan mensubsitusikan nilai a dan b, sehingga persamaan regresi adalah: Y = 0,0541 X + 0,0055
Lampiran 8. (Lanjutan) Dengan nilai r sebagai berikut r = ( X ( XY X ) n X )( n Y Y ( Y ) n ) r = 19,704 (40)(,198) 6 (360 40 )(1,0785,198 6 ) 6 = 0,9995
Lampiran 9. Perhitungan Disolusi Tablet Asam Folat Misalnya pada tablet asam folat dengan Pharmacoat 615 1% (F1) - Pengujian I Diambil aliquat 0 ml pada t = 10 menit, kemudian diencerkan dengan NaOH 0,1 N sampai 5 ml. Serapan diukur pada panjang gelombang 56 nm, Serapan (Y) = 0,491 Dengan persamaan regresi, konsentrasi asam folat pada t = 10 menit dalam kuvet adalah : Y = 0,0541 X + 0,0055 X = 0,491 0,0055 0,0541 = 4,507 mcg/ml Konsentrasi asam folat dalam medium = 4,507 mcg/ml x 5ml/ 0ml = 5,683 mcg/ml Bobot zat dalam 0 ml larutan (faktor penambah) = 4,119 mcg/ml x 0 ml = 8,438 mcg = 0,084 mg Bobot zat dalam 500 ml medium = 11,566 mcg/ml x 500ml/ 0 ml = 814,15 mcg =,81 mg Kadar zat berkhasiat terlepas = kadar zat terlepas + faktor penambah =,81 mg + 0,084 mg =,894 mg Persen kumulatif asam folat terlepas = bobot hasil/ bobot teoretis x 100% =,894 mg / 5 mg x 100% = 56,6%
Lampiran 9. (Lanjutan) - Pengujian II Persen kumulatif = 55,55% - Pengujian III Persen kumulatif = 54,88% - Pengujian IV Persen kumulatif = 55,7% - Pengujian V Persen kumulatif = 55,.10% - Pengujian VI Persen kumulatif = 54,45% SD = ( X X ) n 1 = (56,6 55,5) + (55,55 55,5) 6 1 +... + (54,45 55,5) = 1,143 Perlakuan perhitungan % kumulatif asam folat yang terlepas untuk menit ke-5, 15, 0, 5, 30, 35, 40, dan 45 dilakukan sebanyak 6 kali terhadap 6 tablet. Perhitungan dalam formula tablet lainnya dilakukan dengan cara yang sama.
Lampiran 10. Sertifikat Analisis Bahan Baku Asam Folat
Lampiran 11. Sertifikat Analisis Baku Pembanding Asam Folat
Lampiran 1. Sertifikat Analisis Pharmacoat 615