Lampiran 1. Gambar alat KCKT

Lampiran 1. Gambar alat KCKT

Lampiran. Gambar alat ultrasonic cleaner

Lampiran 3. Kromatogram dari larutan Sulfametoksazol BPFI a konsentrasi 50 mcg/ml b konsentrasi 100 mcg/ml c konsentrasi 160 mcg/ml d konsentrasi 00 mcg/ml

Lampiran 3. (Lanjutan) e konsentrasi 50 mcg/ml a, b, c, d, dan e merupakan kromatogram penyuntikan 3 kali dari larutan sulfametoksazol BPFI pada konsentrasi yang berbeda-beda, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air; asetonitril; trietilamin; volume penyuntikan 0 µl, laju aliran ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 4. Perhitungan persamaan regresi dari kurva kalibrasi Sulfametoksazol BPFI yang diperoleh secara KCKT pada λ 70 nm Tabel 5. Data hasil penyuntikan larutan Sulfametoksazol BPFI berdasarkan Luas Puncak No Konsentrasi (mcg/ml) Luas Puncak 1 50 6936 100 43541 3 160 68689 4 00 860143 5 50 1086009 Konsentrasi (X) -vs- Luas Puncak (Y) untuk Sulfametoksazol BPFI No x y xy x y 1 50 6936 113466300 500 5.14984E+1 100 43541 4354100 10000 1.79144E+13 3 160 68689 10980670 5600 4.70993E+13 4 00 860143 17408600 40000 7.43069E+13 5 50 10586009 6465050 6500 1.1064E+14 x 760 y 3570911 xy 6005313970 x 140600 y.56534e+14 Y a + bx ( x )( y) ( x)( xy) a n ( x ) ( x) (140600)(3570911) (760)(6005313970) a 5(140600) (760) a a 4.57947E + 1-4.56404E + 1 703000-577600 15431469400 15400 a 13057.9697

Lampiran 4. (Lanjutan) b n ( xy) ( x)( y) n ( x ) ( x) 5(6005313970) (760)(3570911) b 5(140600) (760) b b 3006569850-475389360 703000-577600 57677490 15400 b 4046.8699 Y a + bx Sehingga diperoleh persamaan regresi Y 13057,9697 + 4046,8699X Untuk mencari hubungan kadar (X) dengan luas puncak (Y) digunakan pengujian koefisien korelasi (r). r n( xy) ( x)( y) ( x) ( x) n y [ n ][ ( ) ( y) ] 5(6005313970) (760)(3570911) [ 5(140600) (760) ][ 5(.56534E + 14) - (3570911)] 3006569850-475389360 [703000-577600][1.867E + 15-1.06086E + 15] 57677490 [15400][.1806E + 14] 57677490.78144E + 19 57677490 573938830 0.9997

Lampiran 5. Kromatogram dari larutan trimetoprim BPFI a konsentrasi 10 mcg/ml b konsentrasi 0 mcg/ml c konsentrasi 3 mcg/ml d konsentrasi 40 mcg/ml

Lampiran 5. (Lanjutan) e konsentrasi 50 mcg/ml a, b, c, d, dan e merupakan kromatogram penyuntikan 3 kali dari larutan trimetoprim BPFI pada konsentrasi yang berbeda-beda, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air, asetonitril, trietilamin dengan volume penyuntikan 0 μl, laju aliran ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 6. Perhitungan persamaan regresi dari kurva kalibrasi Trimetoprim BPFI yang diperoleh secara KCKT pada λ 70 nm Tabel 6. Data hasil penyuntikan larutan Trimetoprim BPFI berdasarkan Luas Puncak No Konsentrasi (mcg/ml) Luas Puncak 1 10 13303 0 39058 3 3 389469 4 40 476973 5 50 594569 Konsentrasi (X) Vs Luas Puncak (Y) untuk Trimetoprim BPFI No x y xy x y 1 10 13303 133030 100 150369809 0 39058 4781160 400 5714877364 3 3 389469 1463008 104 1.51686E+11 4 40 476973 1907890 1600.7503E+11 5 50 594569 978450 500 3.5351E+11 x 15 y 18337 xy 6784568 x 564 y 8.05054E+11 Y a + bx ( x )( y) ( x)( xy) a n ( x ) ( x) (564)(18337) (15)(6784568) a 5(564) (15) a a 105464418 10754336 810 3104 738979 5016 a 5460,4848

Lampiran 6. (Lanjutan) b b b b ( xy) ( x)( y) n n ( x ) ( x) 5(6784568) (15)(18337) 5(564) (15) 3364840 7715544 810 3104 597096 5016 b 11816,47 Y a + bx Sehingga diperoleh persamaan regresi Y 5460,4848 + 11816,47X Untuk mencari hubungan kadar (X) dengan luas puncak (Y) digunakan pengujian koefisien korelasi (r). r n( xy) ( x)( y) ( x) ( x) n y [ n ][ ( ) ( y) ] 5(6784568) (15)(18337) [5(564) (15)][5(8.05054E + 11) - (18337)] 3364840 7715544 [810 3104][5(8.05054E + 11) 597096 [5016][7.00585E + 11] 597096 3.5141E + 15 597096 5980115.06 - (3.3469E + 1)] 0.9998

Lampiran 7. Kromatogram dari larutan tablet yang dibuat sendiri (PT.Indofarma) a b c d

Lampiran 7. (Lanjutan) e f a, b, c, d, e dan f merupakan kromatogram penyuntikan 6 kali dari larutan tablet yang dibuat sendiri (PT. Indofarma) pada konsentrasi setara dengan sulfametoksazol 160 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air, asetonitril, trietilamin, volume penyuntikan 0 μl, laju aliran (flow rate) ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 8. Analisa data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan tablet yang dibuat sendiri ( PT. Indofarma ) a. Sulfametoksazol KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1* 99.17 6844597.83 7.986 96.43 6658889 0.09 0.0074 3 95.57 6600435-0.78 0.609 4 98.0 6778905 1.86 3.4475 5 94.7 65105 -.08 4.3301 6 94.43 653516-1.91 3.6533 X 578.08 ( X X ) 0.074 X 96.35 SD ( X X ) n 1 0.074 6 1.0014 Data yang diuji adalah data 1* dengan ( X X ).83, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n.83.0014 / 6 3.4587 Karena t hitung < t tabel, maka data 1* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n.0014 96,35 ± 4.03X 6 96.35 ± 3.9 93.06% μ 99.64 %

Lampiran 8. (Lanjutan) b. Trimetoprim KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1* 99.3 38085.65 7.067 96.73 37050 0.06 0.0034 3 95.89 367310-0.79 0.6196 4 98.55 377394 1.89 3.553 5 94.71 36904-1.95 3.806 6 94.81 36390-1.85 3.431 X 579.99 ( X X ) 18.4539 X 96.67 SD ( X X ) n 1 18.4539 6 1 1.911 Data yang diuji adalah data 1* dengan ( X X ).65, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n.65 1.911/ 6 3.3798 Karena t hitung < t tabel, maka data 1* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 1.911 96.67 ± 4.03X 6 96.67 ± 3.16 93.51% μ 99.83%

Lampiran 9. Uji Validasi dari Tablet Yang Dibuat Sendiri a. Sulfametoksazol No U X Parameter mcg/ml % mcg/ml % Xi (%) SD KR (%) KV (%) 1 158.68 99.17 154.9 96.43 3 160 100 15.91 95.57 96.35.0014 3.65.0 4 157.1 98.0 5 150.8 94.7 6 151.10 94.43 Ketelitian : KR Xi U U x 100% 96.35 100 100 x 100% 3.65% Ketepatan SD.0014 : KV x 100% Xi 96. 35 x 100%.0% b. Trimetoprim No U X Parameter mcg/ml % mcg/ml % Xi (%) SD KR (%) KV (%) 1 31.78 99.3 30.95 96.73 3 3 100 30.68 95.89 96.67 1.911 3.33 1.98 4 31.54 98.55 5 30.31 94.71 6 30.34 94.81 Ketelitian : KR Xi U U x 100% 96.67 100 100 x 100% 3.33% Ketepatan SD 1.911 : KV x 100% Xi 96. 67 x 100% 1.98%

Lampiran 9. (Lanjutan) Perhitungan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) a. Sulfametoksazol Persamaan regresi : Y a + bx Y 13058 + 4046.87x No X Y Yi Y-Yi (Y-Yi) 1 50 6936 5401 4394 199364643 100 43541 437745-9504 9063794631 3 160 68689 6850557 1334 1514890 4 00 860143 85343 87711 76937075 5 50 10586009 10634775-48766 378167011 n6 (Y-Yi) 116701651 Simpangan Baku (SB) Σ(Y - Yi) n 116701651 789.77 6 3xSB Limit Deteksi (LOD) slope Limit Kuantitasi (LOQ) 10xSB slope 3x789.77 5.19 mcg/ml 4046.87 10x789.77 17.3 mcg/ml 4046.87 b. Trimetoprim Persamaan regresi : Y a + bx Y 5460.48 + 11816.5x No X Y Yi Y-Yi (Y-Yi) 1 10 13303 1363-319.957 1037.44 0 39058 41785.4-77.43 7438869.09 3 3 389469 383580.4 5888.60 3467566.55 4 40 476973 478110.4-1137.37 193617.81 5 50 594569 5967.8-1703.85 903088.79 n6 (Y-Yi) 46413610.69

Lampiran 9. (Lanjutan) Simpangan Baku (SB) Σ(Y - Yi) n 46413610.69 6 3406.37 3xSB 3x3406. 37 Limit Deteksi (LOD) 0.87 mcg/ml slope 11816.5 10xSB Limit Kuantitasi (LOQ) slope 10x3406.37.89 mcg/ml 11816.5

Lampiran 10. Kromatogram dari larutan tablet Cotrimoksazole (PT. Phyto Kemo Agung Farma) a b c d

Lampiran 10. (Lanjutan) e f a, b, c, d, e dan f merupakan kromatogram penyuntikan 6 kali dari larutan tablet Cotrimoksazole (PT. Phyto Kemo Agung Farma) pada konsentrasi setara dengan sulfametoksazol 160 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air, asetonitril, trietilamin, volume penyuntikan 0 μl, laju aliran (flow rate) ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 11. Analisa data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan tablet Cotrimoksazole (PT. Phyto Kemo Agung ) a. Sulfametoksazol KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 101.59 700815 0.69 0.4738 101.4 6984865 0.34 0.118 3* 94.13 6503000-6.77 45.7763 4 101.33 6990866 0.43 0.1869 5 103.67 7149777.78 7.7115 6 103.4 713660.5 6.377 X 605.39 ( X X ) 60.6394 X 100.89 SD ( X X ) n 1 60.6394 6 1 3.485 Data yang diuji adalah data 3* dengan ( X X ) -6.77, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n 6.77 3.485/ 6-4.7589 Karena t hitung -t tabel, maka data 3* ditolak. KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 101.59 700815-0.66 0.440 101.4 6984865-1.01 1.0188 3 101.33 6990866-0.9 0.8479 4* 103.67 7149777 1.4.07 5 103.4 713660 1.17 1.3718 X 511.5 ( X X ) 5.7078 X 10.5 SD ( X X ) n 1 5.7078 5 1 1.1945 Data yang diuji adalah data 4* dengan ( X X ) 1.4, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel.

Lampiran 11. (Lanjutan) t hitung X X SD / n 1.4 1.1945/ 5.665 Karena t hitung < t tabel, maka data 4* diterima Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 5 dan dk 4 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 1.1945 10.5 ± 4.60X 5 10.5 ±.46 99.79% μ 104.71 % b. Trimetoprim KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 100.9 386346 1.11 1.303 99.95 38710 0.15 0.013 3* 94.3 361088-5.58 31.174 4 100.3 383715 0.41 0.1698 5 10.06 390640.5 5.0489 6 101.48 388460 1.67.7867 X 598.88 ( X X ) 40.431 X 99.81 SD ( X X ) n 1 40.431 6 1.8436 Data yang diuji adalah data 3* dengan ( X X ) -5.58, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n - 5.58.8436/ 6-4.8095 Karena t hitung -t tabel, maka data 3* ditolak.

Lampiran 11. (Lanjutan) KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 100.9 386346-0.01 0.0001 99.95 38710-0.98 0.956 3 100.3 383715-0.71 0.4984 4* 10.06 390640 1.13 1.859 5 101.48 388460 0.55 0.3069 X 504.63 ( ) X 100.93 X X 3.0439 SD ( X X ) n 1 3.0439 5 1 0.873 Data yang diuji adalah data 4* dengan ( X X ) 1.13, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n 1.13 0.873/ 5.9068 Karena t hitung < t tabel, maka data 4* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 5 dan dk 4 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 0.873 100.93 ± 4.60X 5 100.93 ± 1.79 99.14% μ 10.7%

Lampiran 1. Kromatogram dari larutan tablet Cotrimoksazole (PT. Indofarma) a b c d

Lampiran 1. (Lanjutan) e f a, b, c, d, e dan f merupakan kromatogram penyuntikan 6 kali dari larutan tablet Cotrimoksazole (PT. Indofarma) pada konsentrasi setara dengan sulfametoksazol 160 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air, asetonitril, trietilamin, volume penyuntikan 0 μl, laju aliran (flow rate) ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 13. Analisa data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan tablet Cotrimoksazole ( PT. Indofarma ) a. Sulfametoksazol KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 97.74 6747556-0.59 0.349 100.01 69013 1.68.886 3 98.7 6813899 0.39 0.1547 4 96.6 6671561-1.71.9131 5 96.78 66836-1.55.396 6* 100.09 6906880 1.77 3.1159 X 589.96 ( X X ) 11.7514 X 98.33 SD ( X X ) n 1 11.7514 6 1 1.5331 Data yang diuji adalah data 6* dengan ( X X ) 1.77, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n 1.77 1.5331/ 6.804 Karena t hitung < t tabel, maka data 6* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 1.5331 98.33 ± 4.03X 6 98.33 ±.5 95.81% μ 100.85 %

Lampiran 13. (Lanjutan) b. Trimetoprim KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 98.57 377459-0.14 0.0185 99.31 38068 0.61 0.3700 3 99.6 38141 0.91 0.8306 4 98.01 375338-0.7 0.487 5* 97.6 37540-1.44.0718 6 99.46 380817 0.75 0.5681 X 59.3 ( X X ) 4.3464 X 98.70 SD ( X X ) n 1 4.3464 6 1 0.934 Data yang diuji adalah data 5* dengan ( X X ) -1.44, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n 1.44 0.934 / 6-3.7816 Karena t hitung -t tabel, maka data 5* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 0.934 98.70 ± 4.03X 6 98.70 ± 1.53 97.17% μ 100.3%

Lampiran 14. Kromatogram dari larutan tablet Bactrim (PT. Roche) a b c d

Lampiran 14. (Lanjutan) e f a, b, c, d, e dan f merupakan kromatogram penyuntikan 6 kali dari larutan tablet Bactrim (PT. Roche) pada konsentrasi setara dengan sulfametoksazol 160 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT, kolom VP-ODS (4,6 mm x 5 cm), fase gerak campuran air, asetonitril, trietilamin, volume penyuntikan 0 μl, laju aliran (flow rate) ml/menit pada λ 70 nm. Kromatogram di perkecil 50%.

Lampiran 15. Analisa data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari penyuntikan larutan tablet Bactrim ( PT. Roche ) a. Sulfametoksazol KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 103.07 7108619 1.4.083 101.96 703363 0.31 0.0976 3 10.09 704646 0.45 0.03 4 99.7 6881776-1.9 3.6969 5* 99.49 6866140 -.15 4.6373 6 103.53 7140110 1.89 3.5676 X 609.86 ( X X ) 14.309 X 101.64 SD ( X X ) n 1 14.309 6 1 1.6871 Data yang diuji adalah data 5* dengan ( X X ) -.15, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel.. t hitung X X SD / n.15 1.6871/ 6-3.166 Karena t hitung -t tabel, maka data 5* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 1.6871 101.64 ± 4.03X 6 101.64 ±.78 98.86% μ 104.4%

Lampiran 15. (Lanjutan) b. Trimetoprim KADAR(%) AREA NO (X- X ) (X- X ) X Y 1 103.74 396986 1.79 3.1997 101.03 386737-0.93 0.859 3 10.68 39985 0.73 0.5309 4* 99.99 38830-1.96 3.8499 5 100.63 38536-1.3 1.7546 6 103.65 396637 1.70.8774 X 611.7 ( X X ) 13.0717 X 101.95 SD ( X X ) n 1 13.0717 6 1 1.6169 Data yang diuji adalah data 4* dengan ( X X ) -1.96, dasar penolakan data adalah apabila t hitung t tabel. t hitung X X SD / n 1.96 1.6169 / 6 -.975 Karena t hitung -t tabel, maka data 4* diterima. Sehingga kadar sebenarnya dengan tingkat kepercayaan 99% dengan α 0.01; n 6 dan dk 5 terletak antara : μ X ± t ( 1 1/ α ). dk X SD n 1.6169 101.95 ± 4.03X 6 101.95 ±.66 99.9% μ 104.61%

Lampiran 16. Uji preformulasi tablet 1. Uji sudut diam No Tinggi (h cm) Diameter (d cm) 1 3.5 10.8 3.6 10.6 3 3.5 10.8 h 3.53 d 10.73 Tg θ h d 3.53 10.73 0.6579 θ 33.34 Syarat : 0 o < θ < 40 o Kesimpulan : memenuhi persyaratan. Uji waktu alir (t alir ) No Waktu alir (detik) 1 5.4 5.5 3 5.3 t 5.4 Syarat : t alir < 10 detik Kesimpulan : memenuhi persyaratan

Lampiran 16. (Lanjutan) 3. Uji indeks tap No Vo Vtap 1 48 46.5 50 48.5 3 48.5 47 Vo 48.83 V tap 47.33 I Vo 1 x 100% V 47.33 1 x 100% 48. 83 (1-0.969) x 100% 3.08% Syarat : I 0% Kesimpulan : memenuhi persyaratan

Lampiran 17. Perhitungan Penimbangan sampel Dik : Berat 0 tablet Kandungan sulfametoksazol di etiket Kandungan trimetoprim di etiket Labu ukur 1,0834 g 400 mg 80 mg 5 ml Dit: Dibuat larutan uji dengan konsentrasi sulfametoksazol 160 mcg/ml. Ditimbang serbuk setara dengan sulfametoksazol 40 mg. Berat penimbangan sampel 40mg 0x400mg x 1,0834 mg 60,417 mg Sampel yang sudah ditimbang (60,417 mg) dimasukkan ke dalam labu tentukur 5 ml dilarutkan ke dalam pelarut sampai garis tanda Kadar larutan uji 40mg 5ml x 1000 1600 mcg/ml Kemudian dipipet 1 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml dilarutkan ke dalam ke dalam pelarut sampai garis tanda Kadar larutan uji 1 ml x 1600 mcg/ml 10 ml 160 mcg/ml

Lampiran 18. Contoh perhitungan untuk mencari kadar sulfametoksazol dan trimetoprim Perhitungan kadar sampel a. Sulfametoksazol Y 13057,9697 + 4046,8699X Luas puncak 6813899 X 6813899 13057,9697 4046,8699 X 159,18 Kadar 159,18 160 x 99,6 % 98,7 % b. Trimetoprim Y 5460.48 + 11816.5X Luas Puncak 375338 X 375338 5460.48 11816.5 X 31.305 Kadar 31.305 x 100.19% 3 98.01%

Lampiran 19. Daftar spesifikasi sampel 1. Tablet Cotrimoksazole No. Batch : RB 91141 Produsen : PT. Indofarma No. Pendaftaran : GKL913000310A1 Tgl. Kadaluwarsa : 1 009. Tablet Cotrimoksazole 480 mg No. Batch : 0705007 0 Produsen : PT. Phyto Kemo Agung Farma No. Pendaftaran : GKL89090010B1 Tgl. Kadaluwarsa : 09 01 3. Bactrim adult No. Batch : 1700814 Produsen : PT. Roche No. Pendaftaran : DKL851500910A1 Tgl. Kadaluwarsa : 07 01

Lampiran 0. Sertifikat pengujian trimetoprim BPFI

Lampiran 1. Sertifikat pengujian sulfametoksazol BPFI

Lampiran. Sertifikat pengujian trimetoprim baku

Lampiran 3. Sertifikat pengujian sulfametoksazol baku