Gambar 5 Kurva pertumbuhan Chlorella vulgaris

Transkripsi

1 26 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Kurv Pertumuhn Chlorell vulgris Pertumuhn pd orgnisme uniseluler (termsuk Chlorell vulgris) didefinisikn segi sutu peningktn mss sel dn diserti ukurnny oleh sintesis mkromolekul yng menghsilkn struktur ru (Becker 1994). Penentun pol pertumuhn pd Chlorell vulgris dengn melkukn smpling untuk menghitung jumlh sel Chlorell vulgris setip hri menggunkn hemsitometer dn mikroskop. Nili kepdtn sel yng didpt dri penghitungn mtemtis selnjutny diturunkn dengn pendektn logritmik (log) kemudin diplotkn ke dlm sutu grfik sehingg didptkn kurv pertumuhn. Tel kepdtn sel Chlorell vulgris selm pertumuhn dpt diliht pd Lmpirn 2. Kurv pertumuhn Chlorell vulgris dpt diliht pd Gmr Log jumlh sel (sel/ml) Umur Kultur (Hri) Keterngn : = Kurv pertumuhn Chlorell vulgris umur pnen 9 hri = Kurv pertumuhn Chlorell vulgris umur pnen 18 hri = Kurv pertumuhn Chlorell vulgris umur pnen 27 hri Gmr 5 Kurv pertumuhn Chlorell vulgris Pertumuhn Chlorell vulgris selin ditentukn dengn penghitungn jumlh sel jug dpt ditentukn dengn penghitungn kepdtn optik. Kepdtn optik Chlorell vulgris diukur setip hriny menggunkn spektrofotometer uv-vis pd pnjng gelomng 450 nm. Nili sornsi yng didpt dri pengukurn rpt optis selnjutny diturunkn dengn pendektn

2 27 logritmik norml (ln) kemudin diplotkn ke dlm sutu grfik sehingg didptkn kurv pertumuhn. Tel kepdtn optik Chlorell vulgris selm pertumuhn dpt diliht pd Lmpirn 3. Kurv kepdtn optik Chlorell vulgris dpt diliht pd Gmr 6. 1 Ln jumlh sel Umur Pnen (Hri) Keterngn : = Kurv kepdtn optik Chlorell vulgris umur pnen 9 hri = Kurv kepdtn optik Chlorell vulgris umur pnen 18 hri = Kurv kepdtn optik Chlorell vulgris umur pnen 27 hri Gmr 6 Kurv kepdtn optik Chlorell vulgris Huungn ntr kepdtn sel dn kepdtn optik pd fse pertumuhn dpt ditentukn dengn nlis regresi linier. Kurv huungn ntr kepdtn sel dengn kepdtn optik (450 nm) pd kultur Chlorell vulgris dpt diliht pd Gmr 7. Asorn kepdtn sel 450 nm y = 0.053x R² = Jumlh sel (10 6 sel/ml) Gmr 7 Huungn ntr kepdtn sel dn kepdtn optik kultur Chlorell vulgris (450 nm) pd

3 28 Berdsrkn hsil nlis regresi linier huungn ntr kepdtn sel dn kepdtn optik (450 nm) pd kultur Chlorell vulgris dpt dinytkn ert. Nili R 2 memiliki korelsi positif ntr kepdtn optik dn kepdtn sel Chlorell vulgris kren titik-titik dt menggeromol mengikuti sutu gris lurus dengn kemiringn positif. Chlorell vulgris pd penelitin ini memiliki pol pertumuhn yng dimuli dri fse logritmik (eksponensil), fse penurunn lju pertumuhn dn fse stsioner. Gmr 5 dn 6 menunjukn hw fse logritmik Chlorell vulgris pd semu perlkun umur pnen dimuli pd wl kultivsi smpi hri ke-4, fse penurunn lju pertumuhn dicpi pd hri ke-5 smpi hri ke-6 dn fse stsioner dicpi pd hri ke-7 smpi dengn pd hri pemnenn tip perlkun. Chlorell vulgris yng diinokulsi ersl dri fse log sehingg tidk menglmi fse lg (fse dptsi). Medi dn kondisi lingkungn yng sm ntr medi inokulum dengn kultur menyekn Chlorell vulgris tidk perlu lgi mellui fse lg tu dptsi untuk dpt tumuh. Fse logritmik ditndi dengn nikny lju pertumuhn yng diserti dengn meningktny kepdtn sel dn kepdtn optik. Kepdtn sel umur pnen 9 hri pd hri pertm dlh 9,16 x 10 5 sel/ml dn hri ke-4 dlh 12,80 x 10 6 sel/ml, sedngkn kepdtn optik umur pnen 9 hri pd hri pertm dlh 0,08 dn hri ke-4 dlh 0,59. Kepdtn sel umur pnen 18 hri pd hri pertm dlh 2,46 x 10 6 sel/ml dn hri ke-4 dlh 12,83 x 10 6 sel/ml, sedngkn kepdtn optik umur pnen 18 hri pd hri pertm dlh 0,19 dn hri ke-4 dlh 0,79. Kepdtn sel umur pnen 27 hri pd hri pertm dlh 9,58 x 10 5 sel/ml dn hri ke-4 dlh 10,04 x 10 6 sel/ml, sedngkn kepdtn optik umur pnen 27 hri pd hri pertm dlh 0,12 dn hri ke-4 dlh 0,56. Ciri metolisme selm fse log dlh ktivits fotosintesis yng tinggi untuk pementukn protein dn komponen penyusun plsm sel yng diutuhkn dlm pertumuhn (Fogg 1975). Chlorell vulgris memsuki fse penurunn lju pertumuhn pd hri ke-5 smpi hri ke-6. Penmhn jumlh sel memsuki fse penurunn lju

4 29 pertumuhn sedikit leih lmt dindingkn fse log. Kepdtn sel umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri pd hri ke-5 secr erturut-turut dlh 14,23 x 10 6 sel/ml; 15,34 x 10 6 sel/ml; dn 10,39 x 10 6 sel/ml sedngkn hri ke-6 kepdtn sel umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 15,79 x 10 6 sel/ml; 16,95 x 10 6 sel/ml; dn 11,03 x 10 6 sel/ml. Kepdtn optik umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri pd hri ke-5 secr erturut-turut dlh 0,63; 0,86 dn 0,63; sedngkn hri ke-6 kepdtn optik umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 0,63; 0,81; dn 0,66. Pertumuhn sel tidk stil, tetpi jumlh populsi msih nik kren jumlh sel yng tumuh msih leih nyk dripd jumlh sel yng mti pd fse penurunn lju pertumuhn (Frdiz 1989). Chlorell vulgris memsuki fse stsioner pd hri ke-7. Fse stsioner merupkn thp pertumuhn yng konstn dimn lju reproduksi sm dengn lju kemtin. Penmhn dn pengurngn jumlh mikrolg reltif sm tu seimng sehingg kepdtnny tetp (Becker 1994). Kepdtn sel hri ke-7 untuk umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 15, 86 x 10 6 sel/ml; 19,97 x 10 6 sel/ml; dn 12,85 x 10 6 sel/ml. Kepdtn optik hri ke-7 untuk umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 0,77; 0,96; dn 0,68. Kepdtn sel Chlorell vulgris pd st umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 19, 64 x 10 6 sel/ml; 22,67 x 10 6 sel/ml; dn 17,84 x 10 6 sel/ml. Kepdtn optik pd st pemnenn untuk umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 0,87; 1,33; dn 1,06. Hl ini menunjukkn hw selm fse stsioner msih terjdi pemelhn sel. Selm proses kultivsi, wrn kultur kn eruh dri hiju cerh menjdi hiju tu. Peruhn wrn terseut menndkn terjdiny peningktn kepdtn sel. Peruhn wrn pd kultur Chlorell vulgris terjdi kren dominsi pigmen klorofil yng erwrn hiju (Borowitzk 1988). Peruhn wrn kultur Chlorell vulgris pd hri yng ered ditunjukkn pd Gmr 8.

5 30 (A) Gmr 8 Peruhn wrn kultur Chlorell vulgris pd hri yng ered (A = hri ke-1, B= hri ke-18). Bert kering dn ert orgnik meningkt seiring dengn ertmhny umur pnen. Biomss Chlorell pyrenoidos dn Chlorell sp. menunjukkn kecenderungn peningktn iomss kering sehuungn dengn wktu pengukurn, yitu pd umur pnen 4 hri ert iomss kering Chlorell pyrenoidos dn Chlorell sp. dlh 0,7 mg/l dn pd umur pnen 15 hri iomss kering Chlorell pyrenoidos dn Chlorell sp. secr erturut-turut dlh 1,5 mg/l dn 1,8 mg/l (Srihrti 2004). Kepdtn populsi erd pd punckny pd fse stsioner, sehingg meningktkn iomss dri kultur (Fogg 1975). Bert kering (g/l) pd umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 0,22; 0,35; dn 0,37. Bert orgnik (g/l) pd umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut dlh 0,20; 0,33; dn 0,35. Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen yng ered mempengruhi ert kering dn ert orgnik Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 4c dn 4f). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw ert kering dn ert orgnik umur pnen 9 hri mempunyi peredn yng signifikn stu dengn yng linny, sert umur pnen 18 hri dn umur pnen 27 hri tidk mempunyi peredn yng signifikn stu dengn yng linny (Lmpirn 4d dn 4g). Peruhn ert kering dn ert orgnik Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered dpt diliht pd Gmr 9. (B)

6 31 Bert iomss (g/l) B kering (g/l) B orgnik (gr/l) Keterngn : = Bert kering dn orgnik (g/l) Chlorell vulgris umur pnen 9 hri = Bert kering dn orgnik (g/l) Chlorell vulgris umur pnen 18 hri = Bert kering dn orgnik (g/l) Chlorell vulgris umur pnen 27 hri Gmr 9 Bert kering dn ert orgnik (g/l) Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Produktivits dlh kemmpun sutu orgnisme untuk menghsilkn produk tu huungn ntr produk yng dihsilkn dengn jumlh wktu yng diutuhkn. Produktivits (g/l/hri) Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered dpt diliht pd Gmr 10. Produktivits (g/l/hri) Gmr Umur Pnen kultur Chlorell vulgris (Hri) Produktivits (g/l/hri) Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered c Produktivits Chlorell vulgris menurun dengn ertmhny umur pnen. Produktivits (g/l/hri) Chlorell vulgris pd umur pnen 9 hri, 8 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 0,076; 0,057; dn 0,041. Penurunn kdr nitrogen kn menurunkn produktivits sel lg. Ketertsn unsur nitrogen

7 32 memut sel mikrolg tidk mmpu melkukn proses iosintes dn metolisme secr mksiml (Michel 1980 dicu dlm Csvin 2008). Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen yng ered mempengruhi produktivits Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 5c). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri mempunyi peredn yng signifikn stu dengn yng linny (Lmpirn 5d). 4.2 Komposisi Kimi Biomss Chlorell vulgris pd Umur Pnen Bered Komposisi kimi mikrolg sngt tergntung pd ketersedin nutrien dn kondisi lingkungn seperti intensits chy, lm penchyn, suhu, dn lin-lin (Becker 1994). Kndungn protein, krohidrt dn lipid pd lg diukur pd ergi mcm fse pertumuhn untuk mengethui peredn produktivits komposisi kiminy. Kndungn protein, krohidrt, dn lipid pd umur pnen yng ered dpt diliht pd Gmr Komposisi kimi iomss (%) c protein krohidrt lipid Keterngn : = Kndungn protein, krohidrt, dn lipid (%) Chlorell vulgris umur pnen 9 hri = Kndungn protein, krohidrt, dn lipid (%) Chlorell vulgris umur pnen 18 hri = Kndungn protein, krohidrt, dn lipid (%) Chlorell vulgris umur pnen 27 hri Gmr 11 Kndungn protein, krohidrt, dn lipid Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Kndungn protein Chlorell vulgris menglmi penurunn dengn ertmhny umur pnen. Persentse kdr protein pd umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 39,02%; 31,01%; dn 21,97% ert

8 33 kering. Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen yng ered mempengruhi kndungn protein Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 6c). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw kndungn protein pd umur pnen 27 hri, 18 hri, dn 9 hri mempunyi peredn yng signifikn stu dengn yng linny (Lmpirn 6d). Kndungn krohidrt Chlorell vulgris meningkt pd umur pnen 18 hri dn menurun pd umur pnen 27 hri. Persentse kndungn krohidrt pd umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 23,05%; 26,13%; dn 22,56% ert kering. Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen yng ered mempengruhi kndungn krohidrt Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 7c). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw kndungn krohidrt pd umur pnen 9 hri tidk memiliki peredn signifikn stu dengn yng lin dn umur pnen 18 hri mempunyi peredn yng signifikn dengn umur pnen 27 hri (Lmpirn 7d). Kndungn lipid Chlorell vulgris menglmi peningktn dengn ertmhny umur pnen. Persentse kdr lipid pd umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 11,94%; 12,96%; dn 16,51% ert kering. Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen yng ered mempengruhi kndungn lipid Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 8c). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw kndungn lipid pd umur pnen 9 hri dn 18 hri tidk mempunyi peredn yng signifikn stu dengn yng linny, sedngkn umur pnen 27 hri mempunyi peredn yng signifikn dengn yng linny. Kndungn nitrogen di dlm medi erkurng sejln dengn khir fse pertumuhn (Siron et l. 1989). Mikrolg ketik erd pd kondisi stress seperti kekurngn nutrien kn meruh penggunn kron dri proses pertumuhn menjdi cdngn energi seperti lipid (Piorreck et l dicu dlm Csvin 2005). Totl lipid dn krohidrt meningkt sert kndungn protein menurun pd st mikrolg memsuki fse stsioner (Ogonn & Tnk 1996; Zhu et l. 1997; Lourenco et l dicu dlm Ctherine et l. 2003).

9 34 Kndungn lipid mikrolg meningkt pd kondisi nutrien yng terts. Penelitin yng dilkukn pd lim spesies Chlorell yng ditumuhkn pd medi yng kekurngn nitrogen menunjukkn dny peningktn kndungn lipid pd kelim spesies Chlorell terseut. Peningktn tertinggi ditunjukkn oleh Chlorell vulgris yng kndungn lipidny meningkt dri 18% menjdi 40% ert kering dn Chlorell Emersonii yng kndungn lipidny meningkt dri 29% menjdi 63% ert kering (Iiimn et l dicu dlm Csvin 2005). Penelitin ini menunjukkn hw kndungn lipid pd Chlorell meningkt pd kondisi nitrogen yng terts. 4.3 Kndungn Klorofil Chlorell vulgris pd Umur Pnen yng Bered Klorofil dlh pigmen utm yng erwrn hiju pd semu mkhluk hidup yng mmpu melkukn fotosintesis. Klorofil ersift lrut dlm lipid kren keerdn gugus fitolny (C 20 H 39 OH). Klorofil sngt pek terhdp chy dn pns. Pemnsn dpt mengkit dentursi protein sehingg klorofil yng eriktn kompleks dengn protein menjdi tidk terlindungi. Pengerjn klorofil dn penyimpnn klorofil hrus dilkukn dlm rung gelp tu rung redup dengn chy yng mn dn sejuk (Gross 1991). Kndungn klorofil- dn klorofil- Chlorell vulgris menglmi peruhn dengn ertmhny umur pnen. Persentse kdr klorofil- Chlorell vulgris pd umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 0,14%; 0,15%; dn 0,11% ert kering. Persentse kdr klorofil- Chlorell vulgris pd umur pnen 9 hri, 18 hri, dn 27 hri erturut-turut dlh 0,05%; 0,05%; dn 0,04% ert kering. Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen mempengruhi kndungn klorofil- Chlorell vulgris secr nyt (P < 0,05) (Lmpirn 9c). Uji lnjut Tukey menunjukkn hw kndungn klorofil- pd umur pnen 9 hri dn 18 hri tidk memiliki peredn yng signifikn stu dengn yng linny sedngkn umur pnen 27 hri memiliki peredn yng signifikn dengn yng linny (Lmpirn 9d). Anlis rgm menunjukkn hw umur pnen tidk mempengruhi kndungn klorofil- Chlorell vulgris secr nyt (P > 0,05) (Lmpirn 9f). Kndungn klorofil- dn klorofil- pd umur pnen yng ered dpt diliht pd Gmr 12.

10 35 Kndungn klorofil (%) klorofil- klorofil- Keterngn : = Kndungn klorofil- dn klorofil- (%) Chlorell vulgris umur pnen 9 hri = Kndungn klorofil- dn klorofil- (%) Chlorell vulgris umur pnen 18 hri = Kndungn klorofil- dn klorofil- (%) Chlorell vulgris umur pnen 27 hri Gmr 12 Kndungn klorofil- dn klorofil- Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Penurunn kndungn klorofil didug sngt erkitn dengn telh terserp hisny nutrien yng menjdi fktor pemts tumuh lg terseut. Nutrien essensil yng diutuhkn untuk mensintesis zt-zt orgnik termsuk klorofil pd st fotosintesis dlh nitrt. Medium yng menglmi defisiensi nitrogen kn menurunkn sintesis klorofil, kren kondisi sel yng muli menglmi kemundurn (Nykken 1988). Kekurngn Mg jug dpt mengkitkn rendhny kndungn klorofil, kren Mg merupkn hn dsr pementuk klorofil (Tjhjo et l. 2002). Perndingnn rsio klorofil- terhdp klorofil- pd Chlorell vulgris pd umur pnen 9 hri, 18 hri dn 27 hri secr erturut-turut yitu 2,7:1; 2,9:1; dn 2,7:1. Jumlh klorofil- leih nyk dindingkn klorofil-. Rsio klorofil- terhdp klorofil- umumny seesr 3:1 (Gross 1991). Rumus molekul klorofil- dlh C 55 H 72 N 4 O 5 Mg, sedngkn klorofil- dlh C 55 H 70 N 4 O 6 Mg. Klorofil- ered dengn klorofil- kren klorofil- mempunyi stu grup formil (-CHO-) pd cng ke tigny sedngkn klorofil- mempunyi grup metil (-CH 3 -) pd cng ke tigny. Klorofil- reltif leih polr dindingkn klorofil-, nmun demikin klorofil- termsuk senyw non polr. Klorofil erwrn hiju kren menyerp secr kut derh merh dn iru dri spektrum sinr tmpk. Peredn kecil dlm struktur dri du klorofil menghsilkn peredn dlm penyerpn spektrum, iru-hiju

11 36 untuk klorofil- dn kuning-hiju untuk klorofil-. Posisi penyerpn mksimum ervrisi sesui dengn pelrut yng digunkn. Klorofil merupkn ester dn lrut pd pelrut orgnik (Gross 1991). Klorofil mempunyi tig fungsi utm dlm proses fotosintesis yitu memnftkn energi mthri, memicu fikssi CO 2 menjdi krohidrt dn menyedikn dsr energetik gi ekosistem secr keseluruhn (Gross 1991). Klorofil nyk dimnftkn segi food suplement untuk memntu mengoptimlkn fungsi metolik, sistem imunits, detoksifiksi, dn meredkn rdng (inflmtorik). Klorofil jug dpt merngsng pementukn drh kren menyedikn hn dsr dri pementuk hemogloin. Pern ini disekn kren struktur klorofil yng menyerupi hemogloin drh dengn peredn pd tom penyusun inti dri cincin porfirinny (Limntr 2007). 4.4 Aktivits Antioksidn Biomss Chlorell vulgris pd Umur Pnen yng Bered Aktivits senyw rdikl es dpt diputuskn dn dihmt dengn senyw ntioksidn. Dy penghmtn iomss Chlorell vulgris terhdp oksidsi sm linolet dpt diliht pd Gmr 13. Dy Penghmtn (%) Lm Inkusi (Hri) Keterngn : = Biomss Chlorell vulgris yng dipnen pd umur 9 hri = Biomss Chlorell vulgris yng dipnen pd umur 18 hri = Biomss Chlorell vulgris yng dipnen pd umur 27 hri = Butil Hidroksi Toluen Gmr 13 Dy penghmtn iomss Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered

12 37 Biomss Chlorell vulgris yng dipnen pd umur 9 hri, 18 hri, dn 27 hri mmpu menghmt terjdiny oksidsi sm linolet seesr 68%; 67% dn 68%. Ekstrk ir pns Chlorell vulgris strin 072 menunjukn dy penghmtn seesr 88,54% dn 90,57% terhdp rdikl es DPPH pd konsentrsi 0,62 mg/ml dn 1,24 mg/ml (Mukti et l. 2009). Chlorell ik untuk kesehtn kren mengndung empt hl penting yitu, ky kn klorofil, Chlorell Growth Fctor (CGF), sert yng tinggi pd dinding sel, dn kndungn nutrien yng tinggi (Kntill 2006). Kndungn klorofil, β kroten, vitmin C, dn vitmin E pd Chlorell dpt melwn senyw rdikl es dn menghmt hy rdikl es seperti timulny penykit degenertif (Lee & Rosenum 2000). Chlorell Growth Fctor merupkn zt yng unik yng hny terdpt di Chlorell. Chlorell Growth Fctor ky kn kndungn sm nuklet (DNA dn RNA), sm mino, poliskrid, vitmin, minerl, glikoprotein dn β glukn. Chlorell Growth Fctor dpt memperiki keruskn sel dn jringn, memperlmt proses penun, dn merngsng pertumuhn sel ru yng seht (Kntill 2006). 4.5 Ekstrk Lipid Chlorell vulgris Ekstrk Chlorell vulgris dinlis secr grvimetri dengn prosedur yng didptsi dri Bligh dn Dyer (1959) dn dimodifiksi oleh Benemnn nd Tillett (1987) dicu dlm Woertz (2007). Metode ini menggunkn ekstrksi pelrut untuk mengekstrksi lipid dri sel iomss. Biomss yng digunkn dlm entuk kering. Hsil iomss kering Chlorell vulgris disjikn pd Gmr 14. Keterngn: A = Biomss kering Chlorell vulgris yng dipnen 9 hri B = Biomss kering Chlorell vulgris yng dipnen 18 hri C = Biomss kering Chlorell vulgris yng dipnen 27 hri Gmr 14 Biomss kering Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered

13 38 Biomss kering yng dihsilkn pd umur pnen 27 hri leih esr dindingkn iomss kering 18 hri dn 9 hri. Hl ini disekn oleh jumlh sel Chlorell vulgris pd fse umur pnen terseut leih tinggi dindingkn jumlh sel pd umur pnen linny. Rendemen ekstrk Chlorell vulgris disjikn pd Tel 3. Tel 3 Rendemen ekstrk Chlorell vulgris Umur Pnen Bert Biomss kering (g) Bert Ekstrk (g) Rendemen ekstrk pst (%) 9 Hri 2 0, Hri 2 0, Hri 3 0,64 21,33 Ekstrk yng diperoleh dri proses ekstrksi Chlorell vulgris erentuk pst pd suhu kmr dengn wrn yng hiju kekuningn. Chlorell vulgris yng diperoleh dpt diliht pd Gmr 15. Ekstrk A B C Keterngn : A = Biomss ekstrk umur pnen 9 hri B = Biomss ekstrk umur pnen 18 hri C = Biomss ekstrk umur pnen 27 hri Gmr 15 Ekstrk lipid Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Komponen lin yng mungkin terdpt pd st ekstrksi lipid pd tnmn, meliputi fosfolipid, sterol, vitmin dn zt wrn yng lrut dlm lipid seperti klorofil dn krotenoid (Buckle et l. 1987). Pelrut non polr mmpu mengekstrk hidrokron, sm lemk, setogenin, dn terpen (Hrorne 1987). Pelrut-pelrut yng digunkn dlm proses ekstrksi menghncurkn memrn sel dn melrutkn pigmen yng terkndung dlm hn sehingg menghsilkn wrn terseut (Shhidi & Nczk 1995). Ekstrk yng erwrn hiju kekuningn didug kren kndungn klorofil dn krotenoid. Hsil dri ekstrksi thp wl ini msih erup ekstrk ksr dn umumny ekstrksi

14 39 dengn pelrut tidk dpt menghsilkn komponen yng diinginkn secr sempurn keculi dilnjutkn dengn pemurnin Aktivits ntioksidn ekstrk lipid Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Pengukurn ktivits ntioksidn menggunkn metode FTC. Metode ini didsrkn pd kemmpun senyw ntioksidn dlm menghmt terentukny rdikl rdikl es yng disekn oleh oksidsi sm linolet. Aktivits ntioksidn ekstrk lipid Chlorell vulgris dpt diliht pd Gmr 16. Dy Penghmtn (%) Keterngn : Lm Inkusi (Hri) = Aktivits ntioksidn ekstrk lipid pd umur pnen 9 hri = Aktivits ntioksidn ekstrk lipid pd umur pnen 18 hri = Aktivits ntioksidn ekstrk lipid pd umur pnen 27 hri = Butil Hidroksi Toluen Gmr16 Dy penghmtn ekstrk lipid Chlorell vulgris pd umur pnen yng ered Ekstrk lipid Chlorell vulgris yng dipnen pd umur 9 hri, 18 hri, dn 27 hri secr erturut-turut mmpu menghmt terjdiny oksidsi sm linolet seesr 71,33%; 67% dn 70%. Kndungn klorofil dn pigmen linny didug merupkn penye ktivits ntioksidn pd ekstrk lipid Chlorell vulgris. Meknisme ntioksidtif klorofil- dn turunnny menunjukkn hw struktur porfirin penting untuk ksi ntioksidtif klorofil dn jug keerdn Mg meningktkn ktivits ntioksidn klorofil. Mgnesium (Mg) kn memeri pengruh terhdp ktivits ntioksidn klorofil jik terdpt dlm entuk

15 40 terkelt dlm struktur klorofil, ukn dlm entuk ionik (segi MgCl 2 ) (Endo et l. 1985). Aktivits ntioksidn ekstrk lipid pd Srgssum dentifolium seesr 83,44% dn Lurenci ppillos seesr 87,15%. Hl ini disekn kren kedu lg terseut mengndung klorofil khususny klorofil- dn turunnny (Shn 2007). Klorofil- memiliki kemmpun menghmt rdikl peroksid sepeti vitmin E (Le Tutor et l. 1996, Mendiol et l dicu dlm Shn 2007) dn dpt meningktkn ktivits ntioksidn dri α-tokoferol (Chyn et l dicu dlm Shn 2007). Hsil oksidsi sm linolet dlh senyw mlonldehid dn rdikl peroksid yng rektif. Rdikl es yng terentuk kn eruh menjdi senyw kronil, yitu ldehid dn keton. Oksidsi sm linolet mementuk mlonldehid merupkn indiksi dny oksidsi lemk. Asm linolet yng menglmi keruskn kn menghsilkn senyw peroksid yng sngt rektif dn ersift rdikl es. Penmhn ntioksidn menyekn oksidsi sm linolet terhenti (Schulz 1985). Aktivits ntioksidn yng ditentukn dengn metode FTC memutuhkn sutu kontrol positif, pemnding ini isny merupkn senyw yng telh dikethui sift ntioksidnny, yitu util hidroksi toluen (BHT). Sutu senyw ntioksidn kn mencegh terjdiny oksidsi senyw yng mudh sekli teroksidsi seperti lemk, minyk, sm lemk, dn nggot lipid linny (Schulz 1985). Rdikl es dpt terentuk dri oksidsi sm linolet kit proses inkusi pd suhu 37 o C. Hl ini memut sm lemk kn eruh menjdi lemk peroksid yng selnjutny mengoksidsi Fe 2+ menjdi Fe 3+. Ktion esi yng menglmi kenikn ilngn oksidsi kn ereksi spesifik dengn monium tiosint mementuk wrn merh drh. Kemmpun ntioksidn menghmt oksidsi ditunjukkn dengn sedikitny Fe 2+ yng teroksidsi oleh peroksid sm linolet menjdi Fe 3+.

16 Pigmen pd ekstrk lipid Chlorell vulgris Identifiksi wl keerdn pigmen dilkukn dengn metode kromtogrfi lpis tipis (KLT). Hsil nlis menggunkn KLT menunjukkn hw di dlm ekstrk lipid Chlorell vulgris mengndung eerp jenis pigmen yng dpt diliht pd tel 4. Tel 4 Nili Rf dn wrn spot visul msing-msing frksi yng terentuk Frksi Rf Wrn visul Dugn Pigmen 1 0,20 u-u, hiju feoforid-(*) 2 0,31 kuning, hiju klorofil- (*) (**) 3 0,41 u-u, hiju Tidk teridentifiksi 4 0,60 iru, hiju klorofil- (**) 5 0,93 u-u feofitin- (**) 6 0,99 ornye, kuning β kroten (**) (***) (*) Bcon et l. (1967) dicu dlm Prngdimurti et l. (2006) (**)Sthl (1969) dicu dlm Prngdimurti et l. (2006) (***)Britton et l. (1995) dicu dlm Merdekwti et l. (2009) Msing-msing frksi mempunyi nili Rf yng ered-ed. Nili Rf ini digunkn segi dsr identifiksi senyw yng terdpt pd hn dn untuk memedkn wrn frksi yng stu dengn yng lin pengmtn frksi yng terentuk. pd st Peredn nili Rf (Retention fctor) menjelskn tentng peredn ert molekul senyw yng terkndung pd ekstrk Chlorell vulgris. Contoh perhitungn Rf dpt diliht pd Lmpirn 11. Senyw yng memiliki ert molekul rendh kn didsorsi terleih dhulu sehingg kn menghsilkn spot yng pling tinggi tu nili Rf yng dihsilkn pling esr. Klorofil dpt terdegrdsi secr kimi yng meliputi reksi feofitinsi, reksi pementukn klorofilid, dn reksi oksidsi. Reksi feofitinsi dlh reksi pementukn feofitin yng erwrn hiju kecokltn. Reksi ini terjdi kren ion Mg di pust molekul klorofil terleps dn dignti oleh ion H. Dentursi protein pelindung dlm kloropls kit proses pemnsn dn perlkun sm didug mengkitkn ion mgnesium mudh terleps dn digntikn oleh ion hidrogen mementuk feofitin (Gross 1991). Enzim klorofilse dpt menghidrolisis gugus fitol dri klorofil sehingg terleps mementuk klorofilid. Klorofilid merupkn senyw yng erwrn hiju dn leih lrut di dlm ir jik dindingkn dengn klorofil. Klorofilid

17 42 jug dpt kehilngn ion mgnesium yng dignti dengn ion hidrogen mementuk feoforid (Gross 1991). Klorofil- leih cept eruh menjdi feofitin- dn feoforid- seesr 5-10 kli dindingkn keceptn peruhn klorofil- menjdi feofitin- dn feoforid-. Peredn keceptn peruhn ini disekn oleh pengruh induktif dri gugus formil (pd klorofil-) yng mengkitkn iktn ion mgnesium menjdi leih kut (Gross 1991). β kroten memiliki kemmpun untuk melindungi dn memperiki sel dri hy rdikl es dn memntu meningktkn kemmpun sistem imunits (Lee & Rosenum 2000). Krotenoid dlh pigmen erwrn kuning, jingg, tu merh yng terdpt di ergi mcm plstid erwrn (kromopls) (Slisury dn Ross 1995 dicu dlm Prngdimurti et l. 2006). Krotenoid terdpt dlm kloropls dn kromopls yng terser dlm protoplsm. Molekul kroten ergung dengn lemk dn protein di dlm kloropls dn krompols (Gross 1991). Pigmen wrn ini mudh diekstrksi dlm pelrut lipid seperti heksn dn kloroform.