Lampiran 1. Prosedur Analisis Kadar Protein Total Darah. a. Tabung reaksi disiapkan sebanyak 62 buah. 1 buah tabung reaksi blanko, 1

Transkripsi

1 LAMPIRAN

2 55 Lampiran 1. Prosedur Analisis Kadar Protein Total Darah a. Tabung reaksi disiapkan sebanyak 62 buah. 1 buah tabung reaksi blanko, 1 buah tabung reaksi standar dan 60 buah tabung reaksi sampel plasma darah. b. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, NaK tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan ditambahkan aquades sebanyak 20 µl pada tabung reaksi blanko. c. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, NaK tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan larutan standar (bovine albumin 6 g/dl) sebanyak 20 µl pada tabung reaksi standar. d. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, Na-K tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan sampel plasma darah sebanyak 20 µl pada 60 buah tabung reaksi sampel. e. Dihomogenkan semua tabung reaksi tersebut, kemudian didiamkan selama 10 menit dalam suhu ruangan. f. Dilakukan pengukuran absorbansi menggunakan panjang gelombang 550 nm atau sekitar nm pada tabung reaksi blanko dengan cara memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasilnya sampai menghasilkan serapan gelombang yang menunjukkan angka nol. g. Dilakukan pengukuran absorbansi standar (A st ) dan absorbansi sampel (A s ) dengan memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung kadar protein plasma total darah.

3 56 Lampiran 2. Prosedur Analisis Kadar Malondialdehid (MDA) Darah a. Disiapkan tabung sentrifugan sebanyak 61 buah. b. Tabung 1-60 (sampel) diisikan 0,25 ml hemolisat darah dan 0,5 larutan TCA (Trichloroacetic Acid) 10%. c. Tabung 61 (blanko) diisikan 0,25 ml aquades dan 0,50 ml larutan TCA 10%. d. Diaduk setiap tabung (di vorteks) selama 1 menit dan disentrifugasi dengan sentrifugan klinis dengan kecepatan 4000 rpm selama 1 menit. e. Lapisan supernatan tiap tabung diambil dan dimasukkan ke dalam tabung baru. f. Larutan TBA (Tiobarbiturat Acid) 0,67% sebanyak 0,75 ml diambil dengan menggunakan pipet tetes dan dimasukkan ke dalam masing-masing tabung. g. Dimasukkan tabung sentrifugan ke dalam penangas mendidih selama 10 menit, lalu didinginkan. h. Masing-masing tabung dibaca serapannya, yaitu sampel dan blanko pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 532 nm, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung profil MDA darah. Lampiran 3. Suhu Lingkungan Kandang Selama Penelitian Minggu ke- Suhu ( 0 C) I 29,6 II 31,2 III 30,1 IV 30,2 Rata-rata 30,275

4 57 Lampiran 4. Tata Letak Penelitian P1 P2 Lampiran 5. Karakteristik Kitosan Iradiasi NO Parameter Standart 1 Warna Putih kekuningan 2 Bau Tidak berbau 3 Bentuk Butiran / serbuk 4 Kadar air < 10% 5 Derajat deasetilasi % 6 Kelarutan ph 6-7 Sumber : Badan Tenaga Nuklir Nasional, 2013

5 Lampiran 6. Protein Total Darah Itik Cihateup Protein Total Darah (µl/dl) Sampel Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel Kitosan Iradiasi 1 8, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,71900 Rata-rata 10,12660 Rata-rata 12,49350

6 59 Lampiran 7. Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup MDA Darah (nmol/m -1 cm -1 ) (10-2 ) Sampel Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel Kitosan Iradiasi 1 2,67 1 1,58 2 2,64 2 2,13 3 2,89 3 1,84 4 2,15 4 1,74 5 2,63 5 2,01 6 2,50 6 2,04 7 2,50 7 1,67 8 2,35 8 2,04 9 3,01 9 1, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,03 Rata-rata 2,70 Rata-rata 1,79

7 Lampiran 8. Output Analisis Varians T-Test Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup 60 Protein Darah MDA Darah Irradiation Std. Error N Mean Std.Deviation Chitosan Mean 1, ,1266 1, , , ,4935 0, , , ,7003 0, , , ,7940 0, ,06315

8 Lampiran 9. Output Analisis Varians Sampel Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup 61 Protein Darah MDA Darah Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed Levene s Test for Equality of Variances F Sig. t Df Sig. (2-tailed) 0,519 0,474 t-test for Equality of Means Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper -9, ,000-2, , , , ,185 57,213 0,000-2, , , , ,879 0,176 11, ,000 0, , , , ,614 52,926 0,000 0, , , ,06286

9 62 Lampiran 10. Dokumentasi Penelitian Termometer Bola Basah dan Bola Kering Ransum Itik Cihateup Pengambilan Darah Itik Cihateup Itik Cihateup yang sedang Makan Alat Sentrifugasi Spektrofotometer

10 63 Larutan Uji Kadar Protein Larutan Uji Kadar Malondialdehid Sampel Darah Itik Cihateup Perhitungan Nilai Absorban Menggunakan Spektrofotometer Analisis Kadar Protein Darah Analisis Kadar Malondialdehid