PENENTUAN WAKTU OPTIMAL KOLEKSI DAN EVALUASI KAPASITAS SEMEN ULAT SUTERA LIAR Attacus atlas (LEPIDOPTERA: SATURNIIDAE) DIDIK PRAMONO

Transkripsi

1 PENENTUAN WAKTU OPTIMAL KOLEKSI DAN EVALUASI KAPASITAS SEMEN ULAT SUTERA LIAR Attacus atlas (LEPIDOPTERA: SATURNIIDAE) DIDIK PRAMONO FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2014

2

3 PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Penentuan Waktu Optimal Koleksi dan Evaluasi Kapasitas Semen Ulat Sutera Liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae) adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini. Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor. Bogor, Juli 2014 Didik Pramono NIM B

4 ABSTRAK DIDIK PRAMONO. Penentuan Waktu Optimal Koleksi dan Evaluasi Kapasitas Semen Ulat Sutera Liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae). Dibimbing oleh R IIS ARIFIANTINI dan DAMIANA RITA EKASTUTI. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk menentukan waktu optimal koleksi dan mengukur kapasitas semen imago A. atlas. Imago A. atlas jantan yang keluar dari kokon dicatat. Semen dikoleksi dari 15 imago menggunakan microtube. Koleksi semen dilakukan setiap dua jam setelah imago keluar dari kokon hingga tidak mengeluarkan semen lagi. Setelah itu, semen yang dikoleksi diukur volume dan kapasitas semen. Hasil penelitian menunjukkan bahwa waktu keluarnya imago A. atlas dari kokon dominan pada pukul WIB (67%), waktu optimum koleksi semen yaitu pada 4 jam setelah imago keluar dari kokon dengan volume rerata semen sebesar 0.57±0.38 ml dengan kisaran nilai ml, frekuensi ejakulasi semen yaitu sebanyak 3 sampai 5 kali per imago, volume total semen sebesar 1.27±0.50 ml dengan kisaran nilai ml, kapasitas semen rerata sebesar 1.433±2.569 x 10 9 sel dengan kisaran nilai x 10 9 sel. Kata kunci: imago A. atlas, konsentrasi, kapasitas semen, volume. ABSTRACT DIDIK PRAMONO. Determination of the Optimum Time for Semen Collection and to Evaluate Semen Capacity of Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae). Supervised by R IIS ARIFIANTINI and DAMIANA RITA EKASTUTI. The objectives of the research were to determine the optimum time for semen collection and to evaluate semen capacity of A. atlas imagoes. Semen were obtained from 15 imagoes every 2 hours after emerged from coccon using microtube until no more semen in ejaculate. Immediately after collection, the semen volume and spermatozoa concentration were evaluted. The results showed that A. atlas imagoes emerged mostly at to pm (67%), the optimal time for semen collection was 4 hours after imago had emerged from the coccon with volume was 0.57±0.38 ml ranging from 0.06 to 1.31 ml. Ejaculation frequency were 3 to 5 times per imago with the total semen volume were 1.27±0.50 ml ranging from 0.31 to 1.76 ml. The sperm concentration was 1141±1608 x 10 6 /ml ranging x 10 6 /ml. The average of semen capacity was 1.433±2.569 x 10 9 cells ranging x 10 9 cells. Keywords: imago A. atlas, concentration, semen capacity, volume.

5 PENENTUAN WAKTU OPTIMAL KOLEKSI DAN EVALUASI KAPASITAS SEMEN ULAT SUTERA LIAR Attacus atlas (LEPIDOPTERA: SATURNIIDAE) DIDIK PRAMONO Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2014

6

7 Judul Skripsi : Penentuan Waktu Optimal Koleksi dan Evaluasi Kapasitas Semen Ulat Sutera Liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae) Nama : Didik Pramono NIM : B Disetujui oleh Prof Dr Dra R Iis Arifiantini, MSi Pembimbing I Dr Drh Damiana Rita Ekastuti, MS, AIF Pembimbing II Diketahui oleh Drh Agus Setiyono, MS PhD APVet Wakil Dekan Tanggal Lulus:

8 PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah subhanahu wa ta ala atas segala karunia-nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Judul yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Januari 2014 ini ialah Penentuan Waktu Optimal Koleksi dan Evaluasi Kapasitas Semen Ulat Sutera Liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae) Terima kasih penulis ucapkan kepada Ibu Prof Dr Dra R Iis Arifiantini, MSi dan Ibu Dr Drh Damiana Rita Ekastuti, MS, AIF selaku pembimbing, serta segenap pihak yang telah membantu selama proses penelitian dan penyusunan skripsi. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada ayah, ibu, serta seluruh keluarga, atas segala doa dan kasih sayangnya. Semoga karya ilmiah ini bermanfaat. Bogor, Juli 2014 Didik Pramono

9 DAFTAR ISI DAFTAR TABEL vii DAFTAR GAMBAR vii DAFTAR LAMPIRAN vii PENDAHULUAN 1 Latar Belakang 1 Perumusan Masalah 2 Tujuan Penelitian 2 Manfaat Penelitian 2 TINJAUN PUSTAKA 3 Attacus atlas 3 Taksonomi dan Habitat 3 Siklus Hidup 4 Pakan 4 Penelitian Biologi Reproduksi A. atlas 5 Karakter Semen Attacus atlas 5 METODE 6 Waktu dan Tempat 6 Bahan dan Alat 6 Metode Penelitian 6 HASIL DAN PEMBAHASAN 8 SIMPULAN DAN SARAN 13 DAFTAR PUSTAKA 14 LAMPIRAN 16 RIWAYAT HIDUP 17

10 DAFTAR TABEL 1 Waktu ejakulasi semen imago A. atlas 10 2 Volume semen Imago A. atlas yang dikoleksi selang 2 jam 11 3 Volume kumulatif ejakulat semen yang dikoleksi setiap selang 2 jam 11 4 Karakteristik semen imago A. atlas 12 DAFTAR GAMBAR 1 Peta penyebaran populasi A. atlas 3 2 Antena pupa A. atlas jantan dan betina 6 3 Proses keluarnya imago jantan dari kokon 8 4 Waktu keluar imago jantan A. atlas dari kokon 9 5 Frekuensi ejakulasi semen A. atlas 10 DAFTAR LAMPIRAN 1 Waktu keluar ngengat pejantan A. atlas dari kokon 16 2 Volume semen A. atlas pada berbagai waktu koleksi setelah ngengat keluar dari kokon 16

11 PENDAHULUAN Latar Belakang Indonesia sebagai negara yang beriklim tropis dan tepat dilalui jalur khatulistiwa dengan curah hujan turun sepanjang tahun menjadikan Indonesia kaya akan flora dan fauna. Jenis tumbuhan dan hewan tersebut diantaranya yaitu serangga. Ulat sutera liar Attacus atlas (A. atlas) merupakan ulat sutera yang memiliki beberapa keistimewaan antara lain; serangga asli Indonesia, selalu ada sepanjang tahun tidak memiliki musim tertentu (Peigler 1989), dapat hidup dalam beberapa generasi dalam setahun (polivoltin) serta hidup dan makan pada pelbagai inang tanaman (polifagus) (Awan 2007; Mulyani 2008). Pertumbuhan ekonomi dunia satu dekade ini meningkat pesat, globalisasi terjadi di semua lapisan masyarakat. Masyarakat tidak hanya berpikir tentang pemenuhan kebutuhan makanan, namun sudah mengarah pada pemenuhan kebutuhan lain, diantaranya adalah sandang. Sandang tidak hanya digunakan sebagai kebutuhan pokok untuk perlindungan dari lingkungan tetapi menjadi satu gaya hidup (mode) yang tidak dapat dipisahkan dalam dunia globalisasi. Bahan sandang yang dinilai memiliki nilai jual tinggi yaitu sandang yang berasal dari bahan sutera. Sutera juga dapat digunakan sebagai bahan baku industri (karpet dan tali sepatu), bahan obat-obatan dan makanan, bahan kerajinan, serta seni (Moerdoko 2004). Permintaan pasar dunia terhadap sutera meningkat. Menurut data yang dikeluarkan International Silk Association, China merupakan konsumen terbesar sutera yaitu membutuhkan kokon dan benang sutera mentah mencapai ton, diikuti India sebanyak ton dan Nepal sebanyak 2 ton setiap tahun (ISA 2000). Benang sutera A. atlas di pasaran dijual dengan harga Rp per kilogram, sedangkan kokonnya dijual dengan harga Rp per kilogram. Pembelian benang sutera pun harus memesan terlebih dahulu karena persedian terbatas (Ekastuti 2012). Kondisi tersebut menyebabkan pengambilan dari alam meningkat yang dapat mengakibatkan kepunahan A. atlas di alam. Dengan perkembangan teknologi mulai dilakukan proses pembudidayaan A. atlas seperti meletakkan telur A. atlas di pohon inangnya yang dilakukan peternak di daerah Purwakarta dan Kaliurang. Menurut Nazar (1990), keberhasilan proses budidaya di alam hanya mencapai 11%. Permasalahan dalam budidaya menurut Awan (2007) dan Mulyani (2008) yaitu kemunculan imago jantan dan betina tidak bersamaan, umur imago jantan lebih pendek daripada imago betina dan sering kali imago jantan dan imago betina tidak bertemu sehingga tidak terjadi perkawinan. Permasalahan ini dapat diatasi dengan cara penyediaan bibit ulat sutera A. atlas dengan inseminasi buatan (IB) seperti yang telah diaplikasikan pada ulat sutera Bombyx mori (Tazima 1978). Untuk melakukan inseminasi buatan (IB) pada ulat sutera A. atlas diperlukan data penelitian pendukung seperti penelitian tentang karakteristik organ ulat sutera A. atlas jantan (Walidaini 2013) dan betina (Allex 2014), karakteristik semen A. atlas (Rabusin 2014) dan preservasi semen (Septiadi 2014). Rabusin (2014), melaporkan volume semen A. atlas sangat bervariasi yaitu sebesar 0.42±0.40 ml dengan kisaran antara ml. Mengingat, umur imago

12 2 jantan yang berumur lebih pendek dari pada betina (Awan 2007; Mulyani 2008) maka, penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk menentukan waktu optimal koleksi dan mengukur kapasitas semen A. atlas. Perumusan Masalah Inseminasi Buatan (IB) pada ulat sutera liar A. atlas membutuhkan kuantitas dan kualitas semen yang baik. Umur A. atlas sangat pendek, sehingga diperlukan informasi waktu koleksi semen yang tepat dan kapasitas semen ulat sutera A. atlas, agar pemanfaatannya lebih optimal. Tujuan Penelitian Tujuan penelitian yaitu menentukan waktu optimal koleksi dan mengukur kapasitas semen ulat sutera liar A. atlas. Manfaat Penelitian Hasil yang diperoleh dari penelitian ini dapat digunakan sebagai informasi yang berguna bagi penelitian selanjutnya dan upaya-upaya untuk meningkatkan produktivitas khususnya, untuk penyediaan bibit ulat sutera liar A. atlas melalui program budidaya menggunakan teknik inseminasi buatan (IB).

13 3 TINJAUAN PUSTAKA Attacus atlas Menurut Kalshoven (1981) dan Peigler (1989), ulat sutera liar di Indonesia terdapat 15 Jenis yaitu dari Genus Attacus ada 8 spesies, A. atlas, A. cremeri, A. erebus, A. paraliae, A. dohertyi, A. inopinatus, A. aurentiacus, A. intermeditus. Dari genus Cricula terdapat 2 spesies yaitu: C. trifenesterata dan C. aleazea. Genus Philosamia terdapat satu spesies yaitu Philosamia cyntia ricini. Genus Antheraea terdapat 3 spesies yaitu Antheraea pernyi, Antheraea halferi, Antheraea roseeri. Genus Actias yaitu Actias maenus. Ulat sutera liar A. atlas merupakan ulat sutera asli Indonesia. A. atlas mengalami metamorfosis sempurna yaitu berturut-turut mulai dari telur, larva, pupa dan imago. Pada awal perkembangan A. atlas dianggap sebagai hama (Nazar 1990). Serangga A. atlas menurut Peigler (1989) dikenal sebagai hewan polifagus pada sekitar 90 genus tanaman dari 48 famili yang bisa menjadi tanaman inang larva A. atlas. Awan (2007) menyatakan bahwa ulat sutera liar A. atlas merupakan penghasil sutera yang sangat potensial. Bobot kulit kokon ulat sutera A. atlas dapat mencapai berat sebesar 1.74 g/butir (Mulyani 2008), jauh lebih berat bila dibandingkan dengan ulat sutera Bombyx mori yaitu 0.55 g/butir. Ulat sutera alam A. atlas merupakan ulat sutera alam asli Indonesia yang tersebar dari Sabang sampai Merauke dan juga dapat ditemukan di daerah di Jepang, seluruh dataran kawasan Asia Tenggara, Taiwan, Papua Nugini, China, India dan Srilanka (Peigler 1989) (Gambar 1). Gambar 1 Peta penyebaran populasi A. atlas (tanda bulat) (Peigler 1989), Taksonomi dan Habitat Taksonomi ulat sutera liar A. atlas yaitu: Kelas: Insekta, Ordo: Lepidoptera, Superfamili: Bombycoidea, Famili: Saturniidae, Sub Famili: Saturniinae, Genus: Attacus, dan spesies: A. atlas (Peigler 1989). Di setiap daerah di Indonesia ulat sutera A. atlas memiliki nama yang berbeda-beda seperti di Jawa Barat larvanya

14 4 dikenal sebagai Hieluod orok sedangkan imagonya dikenal sebagai kupu gajah atau kupu sirama-rama. A. atlas di Jawa Tengah dan Timur larvanya dikenal sebagai Ulat Keket atau Ulat Jedung (Indrawan 2007). Habitat asli ulat sutera ada di alam yaitu di daun-daun seperti tanaman sirsak, srikaya, teh, kina, dadap, mangga, jeruk, alpukat, dan lada. Ulat sutera dianggap sebagai hewan liar yang membuat pemeliharaannya harus sesuai dengan kondisi di alam (Solihin et al. 2010). Penelitian yang dilakukan Nazar (1990), Adria dan Idris (1997) dan Indrawan (2007) menyataan larva yang berhasil menjadi kokon hanya sebesar 11% dengan cara pemeliharaan di alam. Siklus Hidup A. atlas merupakan golongan serangga holometabola yaitu mengalami metamorfosis sempurna dalam siklus hidupnya. Siklus hidup A. atlas waktunya berbeda-beda tergantung pada tanaman inangnya. A. atlas yang hidup pada tanaman sirsak dalam satu siklus hidupnya memerlukan waktu hari yang dimulai dari fase telur selama 7-10 hari, lalu fase instar I selama 5-6 hari, fase instar II selama 4-5 hari, fase instar III selama 4-5 hari, fase instar IV selama 4-7 hari, fase instar V selama 4-8 hari, fase instar VI selama 8-12 hari, fase pupa selama hari, dan fase imago selama 3-8 hari. Fase telur dimulai setelah ada perkawinan antara imago jantan dan betina. Telur ditempelkan pada permukaan bagian bawah daun inangnya. Fase larva yaitu fase dari fase instar I hingga instar VI merupakan fase pertumbuhan yang memerlukan banyak makanan untuk memenuhi kebutuhan perkembangan larva. Pada fase larva ini A. atlas cenderung lebih menyukai tempat yang lebih terang sehingga sering pada fase ini A. atlas ditemukan pada pemukaan daun inangnya. Fase pupa merupakan fase perubahan A. atlas dari larva menjadi imago. Pada fase ini A. atlas sangat rentan dengan ganguan-ganguan baik dari alam atau parasitoid yang dapat membuat A. atlas mati sebelum berkembang. Selanjutnya yaitu fase imago merupakan fase dewasa dari A. atlas yang menyerupai kupu-kupu berwarna cokelat kemerahan dengan pola sayap seperti peta (Awan 2007). Fase pupa dapat digunakan untuk membedakan A. atlas betina dan jantan dengan cara melihat calon antena pupa. Calon antena pupa berukuran besar akan menjadi imago A. atlas jantan sedangkan antena yang berukuran kecil akan menjadi imago betina (Awan 2007; Mulyani 2008). Pada fase ini, pupa diselimuti kokon berupa serabut filamen yang berasal dari kelenjar sutera. Kokon inilah yang nantinya dipanen sebagai benang sutera. Pakan Salah satu yang menjadi kebutuhan utama dalam menjaga kelangsungan hidup ulat sutera A. atlas yaitu pemenuhan kebutuhan pakan. Pakan harus selalu tersedia setiap larva A. atlas membutuhkan pakan. Pertumbuhan perkembangan dan reproduksi larva A. atlas sangat bergantung pada kualitas pakan yang dikonsumsi (Indrawan 2007). Dalam satu siklus hidup satu ekor A. atlas dapat mengkonsumsi gram daun. Menurut Solihin et al. (2010) A. atlas

15 merupakan serangga yang memiliki daya adaptasi yang tinggi terhadap keanekaragaman jenis pakan. Pakan yang disukai A. atlas adalah pakan yang memiliki kadar air tinggi dan tekstur daun agak kaku. A. atlas menyukai inang utama seperti daun teh dan sirsak (Awan 2007), kaliki dan jarak pagar (Mulyani 2008), alpukat dan kayu manis (Dewi 2009), tanaman senggugu (Indrawan 2007), cengkeh (Nazar 1990) dan tanaman ylag-ylang (Adria dan Idris 1997). 5 Penelitian Biologi Reproduksi A. atlas Menurut Allex (2014), jumlah telur A. atlas betina berkisar antara butir dengan rerata 265 butir/induk. Pakan dapat memengaruhi jumlah telur yang dihasilkan. Telur ngengat A. atlas yang diberi pakan cengkeh adalah 286 butir/induk (Nazar 1990) jika diberi pakan daun kaliki dan jarak pagar menghasilkan telur antara butir telur infertil dan telur fertil berkisar antara butir (Mulyani 2008), jika diberi pakan jarak pagar dan sirsak, jumlah telur ulat sutera berkisar butir/induk (Desianda 2011). Saat imago betina mengeluarkan telur, tidak semua telur bisa dikeluarkan dari tubuhnya. Hal ini kemungkinan karena cadangan energi yang tidak cukup untuk mengeluarkan semua telur, karena pada saat fase imago, imago tidak makan, cadangan energi hanya diperoleh saat stadium larva (Allex 2014). Menurut Allex (2014), dari penelitian yang dilakukan pada 10 imago betina A. atlas didapat bahwa bobot badan berkorelasi sangat erat dengan jumlah telur yaitu 97.70% jumlah telur ditentukan oleh bobot badan. Bobot badan imago dipengaruhi oleh kualitas dan kuantitas pakan yang dimakan pada stadium larva karena pada fase imago tidak makan. Selain jenis pakan, kualitas daun juga perlu diperhatikan karena larva lebih menyukai pakan dalam kondisi segar seperti di alam (Nazar 1990; Ekastuti 1999; Awan 2007). Penelitian tentang semen A. atlas tentang preservasi semen berhasil dilakukan (Septiadi 2014). Menurut Septiadi (2014), jenis larutan fisiologis mamalia yaitu NaCl 0.9%, dextrose 5%, dextrose 10%, dan Ringer s laktat dapat digunakan untuk mempertahankan daya tahan hidup spermatozoa A. atlas. Suhu refrigerator dapat memperpanjang daya tahan hidup spermatozoa hingga jam lebih lama dibandingkan dengan suhu ruangan. Karakteristik semen Attacus atlas Semen A. atlas memiliki karakteristik yang khas dengan morfologi spermatozoa yang sangat kecil dan berbentuk bulat. Karakteristik makroskopis semen A. atlas yaitu: memiliki volume dengan rerata 0.42±0.47 ml dengan kisaran volume ml, nilai ph rerata 6.49±0.27 dengan kisaran , derajat kekentalan semen A. atlas sedang, warna semen kuning krem dan bau yang sangat khas. Karakteristik mikroskopis semen A. atlas, yaitu: morfometri spermatozoa A. atlas sangat kecil dengan ukuran hanya 1 μm, motilitas spermatozoa 80-90% dan konsentrasi semen sebesar 318.5± x 10 6 /ml (Rabusin 2014). Kapasitas semen adalah jumlah total volume semen hewan dikali dengan konsenterasi.

16 6 METODE Waktu dan Tempat Penelitian dilakukan pada bulan Januari sampai dengan April 2014 di Laboratorium Metabolisme Departemen Anatomi, Fisiologi dan Farmakologi dan Unit Rehabilitasi Reproduksi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor. Bahan dan Alat Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kokon berisi pupa jantan ulat sutera liar A. atlas, NaCl fisiologis, formosaline, dan alkohol 70%. Alat yang digunakan adalah kandang kain kasa ukuran 50 x 50 x 50 cm, microtube, pipet ukur, gelas objek dan cover glass, kamera, mikroskop, kamar hitung Neubauer, mikropipet dan tip, counter, tisu, dan bak pencuci. Metode Penelitian Pengambilan kokon di lapangan dan sexing Kokon ulat sutera A. atlas dikoleksi dari perkebunan teh di Purwakarta, Jawa Barat, kemudian kokon disimpan dalam kandang kain kasa berukuran 50 x 50 x 50 cm 3. Setelah itu, dilakukan proses sexing untuk mendapatkan imago A. atlas jantan dengan cara melihat bentuk calon antena pada fase pupa. Antena yang besar menjadi imago jantan dan yang kecil akan menjadi imago betina (Gambar 1). (a) (b) Gambar 2 Antena pupa A. atlas jantan (a) dan betina (b) Koleksi Semen Imago A. atlas Kokon yang didalammya terdapat imago jantan diamati setiap hari. Waktu keluarnya imago jantan dari kokon dicatat, kemudian dilakukan koleksi semen dengan cara memegang pangkal sayap imago dan bagian caudal dari abdomen dimasukkan ke dalam microtube. Koleksi semen A. atlas dilakukan setiap 2 jam dari pertama kali keluar sampai semen habis menggunakan tabung yang berbeda.

17 Semen dari masing-masing A. atlas yang sudah dikoleksi diukur volume, konsentrasi spermatozoa dan dihitung kapasitas semennya. 1. Volume semen. Volume dihitung menggunakan mikropipet (0-1 ml) dengan bantuan pipet filler. 2. Konsentrasi spermatozoa per ml. Penghitungan konsentrasi spermatozoa dilakukan dengan menggunakan kamar hitung Neubauer. Semen diencerkan dengan perbandingan 10 μl semen dengan 990 μl larutan formosaline (1 : 100) larutan dihomogenkan dan dimasukan pada kotak hitung Neubauer yang telah diberi gelas penutup, selanjutnya diamati di bawah mikroskop dengan pembesaran 400 X dan dihitung spermatozoa pada kotak hitung, 4 di sudut dan 1 kotak di bagian tengah kamar hitung Neubauer. Rumus menghitung jumlah sel spermatozoa per ml setiap ejakulasi: Jumlah spermatozoa/ml = N x 5 x DF x Keterangan: N = Jumlah rata-rata sel yang dihitung setiap kotak hitung. 5 = Faktor koreksi yang dibutuhkan karena hanya 5 dari 25 kotak dalam chamber yang dihitung (25/5). DF = Faktor pengenceran. Faktor pengenceran yang digunakan pada penghitungan konsentrasi semen imago adalah 100 dari pengernceran 10 μl semen dan 990 μl larutan formosaline = Faktor koreksi yang dibutuhkan karena volume setiap penghitungan di bawah cover slip adalah ml per chamber. Penghitungan dilakukan sebanyak dua kali, kemudian dirata-ratakan. 7 Prosedur Analisis Data (SD). Data diolah secara deskriptif disajikan dalam rerata dan standar deviasi

18 8 HASIL DAN PEMBAHASAN Proses dan Waktu Keluarnya Imago A. atlas dari Kokon Imago mengalami proses organogenesis termasuk pembentukan sayap di dalam kokon. Organogenesis A. atlas dimulai dari fase telur, tahap perkembangan embrio terjadi selama 7 hari dan terbagi menjadi 2 tahap. Tahap pertama adalah tahap pre-organogenesis terjadi pada hari kesatu sampai hari keempat. Tahap kedua adalah tahap organogenesis terjadi pada hari kelima sampai hari ketujuh. Pembentukan ruas (segmentasi) tubuh telah selesai pada hari kelima setelah peletakan telur (oviposisi) dan perkembangan bagian tambahan dari tubuh utama (embelan) serta proses segmentasi kepala telah selesai pada hari keenam setelah oviposisi (Yusuf 2009). Proses keluarnya imago dari kokon melalui beberapa tahapan. Imago ketika akan keluar ditandai dengan gerakan-gerakan kecil dari kokon. Pada saat keluar Imago masih dalam keadaan basah terutama pada bagian sayap (Gambar 3a), imago bergerak perlahan dibantu oleh kakinya. Imago memerlukan waktu sekitar 1.5 jam untuk melakukan adaptasi dengan lingkungan baru sambil menunggu sayapnya kering (Gambar 3b), dan memerlukan waktu 3 jam untuk mampu mengepakkan sayap dan terbang (Gambar 3c). Organogenesis A. atlas pada fase larva dan pupa belum ada yang mengamati. (a) (b) (c) Gambar 3 Proses keluarnya imago jantan dari kokon, saat 0 jam (a), 1.5 jam (b) dan 3 jam (c) Berdasarkan hasil pengamatan imago jantan pada umumnya keluar dari kokon terjadi pada pukul WIB sebesar 67% (10/15) sedangkan 33% terjadi pada pukul WIB (Gambar 3). Imago tidak keluar dari kokon pada siang hari. Hal ini disebabkan oleh faktor lingkungan yang memengaruhi proses keluarnya imago, diantaranya suhu pada siang hari yang panas. Menurut Sari (2010), A. atlas memerlukan kondisi ideal agar dapat keluar dari kokon yaitu pada kisaran suhu 24.93±2.34 o C dengan kelembaban sebesar 69.63±11.05%. Kondisi lingkungan yang memengaruhi keluarnya imago adalah suhu, kelembaban, udara dan pencahayaan. Suhu yang diperlukan untuk proses metabolisme A. atlas berkisar antara o C dengan kelembaban sebesar % (Awan 2007).

19 9 Gambar 4 Waktu keluar imago jantan A. Atlas dari kokon Waktu Ejakulasi Semen Imago A. atlas Semen tidak dapat langsung dikoleksi pada saat imago keluar dari kokon. Hal ini disebabkan imago membutuhkan waktu untuk beradaptasi dengan lingkungan dan juga memerlukan waktu untuk melakukan spermatogenesis. Berdasarkan hasil pengamatan sebanyak 13.33% (2/15) imago mengeluarkan semen 2 jam pertama setelah keluar dari kokon. Koleksi semen dapat dilakukan 100% (15/15) dari imago pada 4, 6, dan 8 jam setelah keluar dari kokon. Jumlah imago yang dapat dikoleksi semennya semakin lama semakin menurun. Pada jam ke-10 hanya 60% (9/15) yang dapat dikoleksi dan terakhir setelah 12 jam keluar dari kokon hanya ada 2 ekor (13.33%) yang masih dapat dikoleksi semennya (Tabel 1). Setelah 14 jam keluar dari kokon, imago sudah tidak dapat mengeluarkan semennya lagi. Hal tersebut kemungkinan karena cadangan semen yang terdapat di dalam imago sudah habis. Habisnya produksi semen di dalam imago tersebut disebabkan pada fase pupa dan imago tidak makan lagi sehingga nutrien terbatas. Nutrien hanya didapat pada fase larva, sedangkan nutrien diperlukan untuk menjalankan metabolisme selain untuk mengahasilkan spermatozoa. Waktu ejakulasi semen A. atlas disajikan pada Tabel 1.

20 10 Tabel 1 Waktu ejakulasi semen imago A. atlas Waktu* (jam) Jumlah individu (ekor) Persentase (%) Ket: *Waktu adalah mulai keluarnya imago dari kokon Frekuensi Ejakulasi Semen Imago A. atlas Berdasarkan hasil pengamatan yang dilakukan, frekuensi ejakulasi imago jantan bervariasi tergantung individu. Frekuensi ejakulasi semen imago jantan terjadi sebanyak 3 sampai 5 kali per individu. Frekuensi ejakulasi terbesar imago jantan yaitu 5 kali sebesar 20% (3/15). Persentase frekuensi ejakulasi terbesar imago jantan yaitu 4 kali sebesar 47% (7/15) dan sisanya sebanyak 3 kali (Gambar 4). Gambar 5 Frekuensi ejakulasi semen Imago A. atlas Volume Semen Imago A. atlas Volume semen yang dikoleksi 2 jam setelah imago keluar dari kokon didapat sebanyak 0.32±0.27 ml ( ml). Volume semen setelah empat jam meningkat menjadi 0.57±0.38 ml ( ml). Volume semen menurun pada koleksi berikutnya yaitu hanya 0.33±0.19 ml setelah 6 jam dan 0.24±0.14

21 ml setelah 8 jam keluar dari kokon. Volume semen menurun kembali pada koleksi setelah 10 jam yaitu 0.19±0.10 ml. Setelah 12 jam keluar dari kokon masih ada dua imago yang dapat mengeluarkan semen, tetapi volume semen tersebut sangat kecil hanya 0.06±0.01 ml dengan kisaran volume ml (Tabel 2). Berdasarkan hasil penelitian ini, maka volume semen tertinggi dapat diperoleh pada imago setelah empat jam keluar dari kokon (Tabel 2). Tabel 2 Volume semen Imago A. atlas yang dikoleksi selang 2 jam Waktu koleksi (jam) Rerata±SD (ml) Kisaran (ml) ± ± ± ± ± ± Volume kumulatif semen yaitu volume yang dijumlah tiap dua jam setelah dikoleksi per imago. Berdasarkan hasil penelitian pada Tabel (3) menunjukkan pada 2 jam pertama volume kumulatif rerata sebesar 0.32±0.27 ml dengan kisaran ml. Volume kumulatif rerata pada 2 jam kedua sebesar 0.61±0.39 ml dengan kisaran ml. Pada 2 jam ketiga volume kumulatif rerata semen sebesar 0.94±0.42 ml dengan kisaran antara ml. Pada 2 jam keempat volume kumulatif rerata semen sebesar 1.18±0.50 ml dengan kisaran ml. Volume kumulatif rerata semen imago A. atlas pada 2 jam kelima saat dikoleksi sebesar 1.259±0.50 ml dengan kisaran ml. Pada 2 jam keenam volume kumulatif rerata semen sebesar 1.267±0.50 ml dan kisaran ml. Tabel 3 Volume kumulatif ejakulat semen Imago A. atlas yang dikoleksi setiap selang 2 jam Waktu koleksi (2 jam) Rerata±SD (ml) Kisaran (ml) pertama 0.32± kedua 0.61± ketiga 0.94± keempat 1.18± kelima 1.259± keenam 1.267± Konsentrasi Spermatozoa Imago A. atlas Konsentrasi spermatozoa adalah jumlah sel per ml. Pada penelitian ini konsentrasi spermatozoa dihitung berdasarkan pool spermatozoa yang diperoleh dari beberapa ejakulat. Konsentrasi spermatozoa sangat bervariasi mulai 75 sampai dengan 5943x10 6 /ml sehingga rerata yang diperoleh adalah 1141±1608x10 6 /ml (Tabel 3), variasi individu tersebut menyebabkan standar deviasi yang tinggi. Hal ini diduga akibat pengaruh individu dari imago tersebut. Informasi mengenai konsentrasi spermatozoa dari imago lain masih terbatas.

22 12 Informasi konsentrasi spermatozoa baru dilaporkan oleh Rabusin (2014). Dalam penelitiannya konsentrasi spermatozoa imago hanya ± x 10 6 /ml dengan kisaran x10 6 /ml, nilai ini lebih kecil dibandingkan hasil penelitian yang dilakukan. Konsentrasi semen imago A. atlas pada penelitian ini lebih rendah dibandingkan hewan lain seperti ikan batak sebesar x 10 9 sel/ml (Zairin et al. 2005), semen ayam lokal x 10 9 /ml (Hanum 2001) dan kambing x 10 6 /ml (Yusuf et al. 2005), namun lebih tinggi dibandingkan dengan konsentrasi spermatozoa kelinci Rex hanya x 10 6 /ml (Maulidya 2014). Kapasitas Semen Imago A. atlas Kapasitas semen dihitung dengan cara mengalikan volume semen dengan konsentrasi spermatozoa. Pada penelitian ini kapasitas semen imago A. atlas rerata 1433±2569 x 10 6 dengan kisaran x 10 6 sel (Tabel 4). Tabel 4 Karakteristik semen imago A. atlas Parameter Rerata±SD Kisaran Volume total ejakulat (ml) 1.27± Konsentrasi spermatozoa (10 6 /ml) 1141± Kapasitas spermatozoa (10 6 ) 1433± Rujukan data penelitian tentang kapasitas semen imago A. atlas belum didapatkan, tetapi jumlah spermatozoa hasil penelitian cukup tinggi. Alex (2014), melaporkan jumlah telur A. atlas betina adalah butir dengan rerata 265 butir/induk. Kapasitas spermatozoa imago A. atlas pada penelitian ini berlipat ganda dari jumlah telur tersebut sehingga menjamin keberhasilan fertilisasi meskipun pada saat kopulasi sebagian semen akan terbuang. Tingginya perbandingan konsentrasi spermatozoa dengan jumlah telur, memungkinkan dilakukannya pengenceran semen imago A. atlas untuk tujuan inseminasi agar bisa melayani lebih banyak betina. Berdasarkan hasil penelitian, untuk tujuan tersebut maka koleksi semen dapat dilakukan antara pukul , dimana saat tersebut imago A. atlas banyak keluar dari kokon sebesar 67% (10/15). Koleksi semen untuk tujuan inseminasi dapat dilakukan paling cepat empat sampai dengan delapan jam setelah imago keluar dari kokon. Koleksi semen sebaiknya dilakukan pada waktu 4 jam setelah imago keluar dari kokon untuk mendapatkan semen dengan volume terbesar.

23 13 SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Kesimpulan dari penelitian ini adalah waktu optimal koleksi semen A. atlas yaitu empat jam setelah imago keluar dari kokon dan kapasitas rerata semen imago A. atlas sebesar 1433±2569 x10 6 sel. Saran Untuk tujuan preservasi semen pada Inseminasi Buatan (IB), koleksi semen imago A. atlas dilakukan pada empat jam setelah imago keluar dari kokon.

24 14 DAFTAR PUSTAKA Adria, Idris H Aspek biologis hama daun Attacus atlas pada tanaman ylang-ylang. JPTI. 3 (2): Allex M Karakteristik imago betina ulat sutera liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae). Prosiding Seminar Nasional Peran Reproduksi dalam Penyelamatan dan Pengembangan Plasma Nutfah Hewan di Indonesia. Seminar Nasional Asosiasi Reproduksi Hewan Indonesia (ARHI); 2013 Desember 18-19; Bogor, Indonesia. Awan A Domestikasi ulat sutera liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae) dalam usaha meningkatkan persuteraan nasional [disertasi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Desianda R Domestikasi ulat sutera liar (A. atlas) dengan pakan daun jarak (Jatropa curca L.) dan daun sirsak (Annona muricata L.) [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Dewi S Pertumbuhan larva dan produktivitas kokon Attacus atlas L. pada jenis pakan dan kepadatan yang berbeda [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Ekastuti DR Tinjauan fisiologi domestikasi ulat sutera liar (Lepidoptera: Saturniidae). Berita Biologi. 11(2): Hanum M Efektifitas berbagai jenis pengencer terhadap kualitas semen cair ayam lokal [skripsi] Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Indrawan M Karakter sutera dari ulat jedung (Attacus atlas L.) yang dipelihara pada tanaman pakan senggugu (Cierodendon serratum Spreng). J Bio 8: [ISA] International Silk Association Sericologia (40). Japan International Coorperation Agency. Kalshoven LGE The Pest Crop in Indonesia. Reviced and Translated by P.A. Van Der Laan. Jakarta (ID): Ichtiar Baru Van Hoeve. Moerdoko W Sutera alam pengembangan terakhir dan prospeknya di indonesia. Disampaikan Pada Konferensi Internasional Tentang Sutera Alam yang Dihasilkan oleh Sutera Liar. Yogyakarta. Maulidya I Karakteristik semen segar dan morfologi spermatozoa kelinci lop dan rex. Prosiding Seminar Nasional Peran Reproduksi dalam Penyelamatan dan Pengembangan Plasma Nutfah Hewan di Indonesia. Seminar Nasional Asosiasi Reproduksi Hewan Indonesia (ARHI); 2013 Desember 18-19; Bogor, Indonesia. Mulyani N Biologi Attacus atlas L. (Lepidoptera: Saturniidae) dengan pakan daun kaliki (Ricini communis L.) dan pagar jarak (Jatropa curcas L.) di Laboratorium [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Nazar A Beberapa aspek biologi ulat perusak daun (Attacus atlas Linn) pada tanaman cengkeh. PPTI. 16(1): Peigler SR A Revision of the Indo Australian Genus Attacus. The Lepidoptera Research Fondation. California (US): Inc. Beverly Hills. Rabusin M Karakteristik semen imago Attacus atlas. Prosiding Seminar Nasional Peran Reproduksi dalam Penyelamatan dan Pengembangan Plasma

25 Nutfah Hewan di Indonesia. Seminar Nasional Asosiasi Reproduksi Hewan Indonesia (ARHI); 2013 Desember 18-19; Bogor, Indonesia. Sari FK Pengamatan keluarnya ngengat Attacus atlas berdasarkan bobot kokon pada berbagai kondisi lingkungan [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Septiadi R Penggunaan larutan fisiologis mamalia untuk preservasi semen ulat sutera liar (Attacus atlas) (Lepidoptera: Saturniidae). Prosiding Seminar Nasional Peran Reproduksi dalam Penyelamatan dan Pengembangan Plasma Nutfah Hewan di Indonesia. Seminar Nasional Asosiasi Reproduksi Hewan Indonesia (ARHI); 2013 Desember 18-19; Bogor, Indonesia. Solihin DD, Fuah AM, Mansjoer SS, Wiryawan KG, Ekastuti DR, Siregar HCH, Setyono DJ, Polii BNN Budidaya Ulat Sutera Alam Attacus atlas. Jakarta (ID) : Penebar Swadaya. Tazima Y The Silkworm an Important Laboratory Tool. Tokyo (JP): Kodansha. Walidaini R Karakteristik imago jantan ulat sutera liar Attacus atlas (Lepidoptera: Saturniidae) [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Yusuf TL, Arifiantini RI, Rahmiwati N Daya tahan semen cair kambing peranakan etawah dalam pengencer kuning telur dengan kemasan dan konsentrasi spermatozoatozoa yang berbeda. J Indo Trop Anim Agric 30(4): Yusuf Y Embryonic development of Attacus atlas L. (Lepidoptera: Saturniidae) [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Zairin M, Handayani S, Supriatna I Kualitas spermatozoa ikan batak (Tor soro) hasil kriopreservasi semen menggunakan dimetilsulfoksida dan gliserol 5, 10 dan 15%. J Akuakultur Indonesia 4 (2):

26 16 LAMPIRAN Lampiran 1 Waktu keluar Imago Jantan A. atlas dari kokon Jantan Tanggal keluar Waktu keluar Lampiran 2 Volume semen A. atlas pada berbagai waktu koleksi setelah ngengat keluar dari kokon Jam ke- (ml) Total Jantan (ml) Total rerata 1.27

27 17 RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan pada tanggal 4 Mei 1993 di Wonosobo, Jawa Tengah. Penuis adalah anak kedua dari tiga bersaudara dari pasangan Bapak Marsono dan Ibu Wasikem. Penulis besar dan tinggal di Kotabaru, Kalimantan Selatan. Penulis menyelesaikan pendidikn sekolah dasar pada tahun 2001 di SDN Bakau kemudian melanjutkan pendidikan ke jenjang menengah pertama di SMPN 1 Pamukan Utara, Kotabaru, Kalimantan Selatan hingga lulus pada tahun Pada tahun yang sama, penulis melanjutkan ke jenjang pendidikan menengah atas di SMAN 1 Kotabaru, Kalimantan Selatan hingga lulus pada tahun Pada tahun yang sama penulis melanjutkan pendidikan ke jenjang perguruan tinggi setelah diterima di Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor melalui Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Selama perkuliahan penulis aktif di berbagai organisasi kemahasiswaan di Himpunan Ruminansia FKH IPB ( ), di Ikatan Mahasiswa Kedokteran Hewan Indonesia ( ) di Badan Eksekutif Mahasiswa ( ). Penulis juga sempat mengikuti beberapa pelatihan kepemimpinan seperti Pelatihan Veterinary Leaderships 2012 di FKH IPB, pelatihan One Health Concept dalam kegiatan Asean Series Global Health True Leaders 2014 di Makassar, Pelatihan kepemimpinan MDG s Award 2013 oleh Kantor Utusan Khusus Presiden RI di Jakarta.