BAB 1 PENDAHULUAN. A. Latar Belakang Masalah. hiperlipidemia yang tidak larut dalam air, diabsorbsi pada saluran gastrointestinal

Transkripsi

1 BAB 1 PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah Fenofibrat adalah prodrug yang ada di pasaran untuk terapi hiperlipidemia yang tidak larut dalam air, diabsorbsi pada saluran gastrointestinal menjadi metabolit aktif asam fenofibrat karena dihidrolisis oleh enzim Sitokrom P3A4 (CYP3A4) (Shah dkk., 2014). Asam fenofibrat bersifat tidak larut dalam air, larut dalam kloroform, etanol p.a, metanol p.a, dan buffer fosfat, dan termasuk kelas II dalam Biopharmaceutical Classification System (BCS), sehingga perlu upaya meningkatkan kelarutan dan disolusinya. Bioavailabilitas asam fenofibrat sekitar 81 % diserap baik oleh tubuh dibandingkan dengan fenofibrat yaitu sebesar 69 %. Penyerapan asam fenofibrat dalam saluran pencernaan lebih baik, sehingga bioavailabilitas asam fenofibrat lebih tinggi dibandingkan fenofibrat (Zhu, 2010). Penelitian yang sudah dilakukan oleh Godfrey dkk (2011) juga menyatakan bahwa dosis tunggal fenofibrat 145 mg bioekivalensi dengan dosis tunggal asam fenofibrat 105 mg. Dispersi padat adalah suatu teknik untuk meningkatkan kelarutan dan disolusi bahan aktif yang tidak larut, yaitu dengan cara mendispersikan bahan aktif dalam polimer hidrofilik. Surfaktan dan superdisintegran dapat ditambahkan untuk meningkatkan waktu hancur dan disolusi bahan aktif yang tidak larut. Penelitian yang telah dilakukan oleh Waard dkk (2008) menyatakan bahwa dengan penambahan sodium lauril sulfat (SLS) dapat meningkatkan disolusi tablet 1

2 dispersi padat fenofibrat dan diazepam. Srinarong dkk (2009) menyatakan bahwa penambahan superdisintegran sodium starch glicolat (SSG) dan crosscarmellose sodium (CCS) dalam sistem dispersi padat fenofibrat dapat meningkatkan laju disolusi dan stabilitas yang baik. B. Perumusan Masalah Berdasarkan latar belakang masalah tersebut, maka perumusan masalahnya adalah bagaimana pengaruh inkorporasi sodium lauril sulfat dan crosscarmellose sodium terhadap kelarutan dan disolusi asam fenofibrat? C. Tujuan Penelitian Berdasarkan rumusan masalah di atas penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh inkorporasi sodium lauril sulfat dan crosscarmellose sodium terhadap kelarutan dan disolusi asam fenofibrat. D. Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat memberikan bukti ilmiah mengenai pengaruh inkorporasi sodium lauril sulfat dan crosscarmellose sodium terhadap kelarutan dan disolusi asam fenofibrat sehingga dapat dikembangkan sediaan padat asam fenofibrat dengan profil disolusi lebih baik. 2

3 E. Tinjauan Pustaka 1. Fenofibrat dan Asam Fenofibrat Fenofibrat adalah golongan fibrat yang digunakan untuk menurunkan kadar lipid di dalam darah (Nugroho., 2012). Fenofibrat adalah obat BCS kelas II, memiliki kelarutan rendah dan permeabilitas yang tinggi (Rao dkk., 2012). Struktur fenofibrat dapat dilihat pada gambar 1 di bawah ini. Gambar 1. Struktur kimia fenofibrat (Rowe dkk., 2009) Asam fenofibrat merupakan metabolit dari fenofibrat. Mekanisme kerja dari asam fenofibrat diyakini untuk meningkatkan very low density lipoprotein (VLDL) katabolisme dengan meningkatkan sintesis lipoprotein lipase, sebagai akibat dari penurunan kadar VLDL, jumlah trigliserid plasma berkurang 30 % menjadi 60%, peningkatan pada HDL terjadi pada beberapa pasien hipertrigliseridemia. Asam fenofibrat tidak larut dalam air. Struktur kimia asam fenofibrat dapat dilihat pada gambar 2 dan perbedaan fenofibrat dengan asam fenofibrat dapat dilihat pada tabel I di bawah ini. Gambar 2. Struktur kimia asam fenofibrat (USP, 2007) 3

4 Tabel 1. Struktur Fisikokimia Fenofibrat dan Asam Fenofibrat No. Fenofibrat Asam Fenofibrat BM = 360,83 Titik lebur = 79-82ºC Kelarutan dalam air 0.25 µ/ml (37ºC) Log ρ = 5,24 BM = 318,75 Titik lebur = ºC Kelarutan dalam air 60 µ/ml (37ºC) Log ρ = 3,9 Asam fenofibrat mempunyai rumus molekul C 17 H 15 C l O 4, berbentuk bubuk berwarna putih kristal yang hampir putih, asam fenofibrat tidak larut dalam air, namun kelarutannya meningkat pada media buffer ph 6,8, metanol p.a, dan kloroform (Rowe dkk., 2009). 2. Dispersi padat Dispersi padat adalah fase padat yang terdiri dari satu komponen dan sistem, dapat juga disebut sebagai campuran kristal dari satu komponen di dalam komponen lain. Bagian dari suatu dispersi padat adalah larutan padat, yaitu setiap fase padat berisi kedua komponen, yang terdiri dari zat terlarut padat dilarutkan pelarut padat untuk memberikan kristal campuran. Dispersi padat mencakup caracara untuk memudahkan pelarutan dan seringkali meningkatkan bioavailabilitas dari obat yang sukar larut bila dicampurkan dengan pembawa yang mudah larut (Martin dkk, 1990). Pembuatan dispersi padat dilakukan dengan beberapa metode, antara lain metode peleburan (melting method), metode pelarutan (solvent evaporation method), metode campuran (melting-solvent method), modifikasi metode pelarutan (Modified solvent evaporation method), kneading method, Co-grinding method, Co-precipitation method (Co-evaporates), Co-precipitation with supercritical fluid, Spray drying method, Dropping solution method, Direct 4

5 capsule filling, Lyophilization technique, Gel entrapment technique (Kumari dkk, 2013). a. Metode peleburan (melting method) Pembuatan dispersi padat dengan metode ini dilakukan dengan cara mencampurkan obat dan pembawa yang larut air dipanaskan sampai melebur dan terbentuk campuran fisik. Leburan yang terbentuk kemudian didinginkan dan dipadatkan secara cepat dengan es. Masa padat yang terbentuk kemudian dihaluskan dan diayak. Metode ini mempunyai beberapa keuntungan yaitu sederhana dan ekonomis. Sedangkan kelemahannya adalah pada obat-obatan dan pembawa yang tidak tahan panas pada suhu tinggi dapat mengalami peruraian selama proses peleburan (Siregar, 2010). b. Metode pelarutan (solvent method) Metode ini dilakukan dengan melarutkan campuran fisik dari dua komponen padat dalam pelarut kemudian dilanjutkan dengan penguapan pelarut. Campuran ini kemudian dihaluskan dan diayak. Metode ini mempunyai keuntungan yaitu dapat menghindari peruraian obat atau pembawa pada suhu tinggi, karena proses penguapan pelarut dilakukan pada suhu rendah. Kelemahan pada metode ini adalah kesulitan untuk menguapkan pelarut secara sempurna dan diperlukan waktu yang lama (Siregar, 2010). c. Metode campuran (melting-solvent method) Metode ini digunakan untuk mengatasi kelemahan pada metode pelarutan dan peleburan. Pada metode ini obat akan dilarutkan dalam pelarut yang sesuai sampai larut. Pembawa dilebur pada suhu leburnya, kemudian dicampur tanpa 5

6 menguapkan pelarutnya. Campuran yang terbentuk kemudian didinginkan, dihaluskan dan diayak (Siregar, 2010). 3. Kelarutan (Solubility) Larutan jenuh adalah suatu larutan dimana zat terlarut berada dalam kesetimbangan dengan fase padat (zat terlarut). Kelarutan didefinisikan dalam besaran kuantitatif sebagai konsentrasi zat terlarut dalam larutan jenuh pada temperature tertentu, dan secara kualitatif didefinisikan sebagai interaksi spontan dari dua atau lebih zat untuk membentuk dispersi molekuler homogen (Martin dkk., 1990). Kelarutan obat dapat dinyatakan dalam beberapa cara. Menurut U.S. Pharmacopeia dan National Formulary, definisi kelarutan obat adalah jumlah mili Liter pelarut akan larut 1 gram zat terlarut. Pada zat yang kelarutannya tidak diketahui pasti, harga kelarutannya digambarkan dalam Compendia farmasi dengan menggunakan istilah umum tertentu. Harga kelarutan suatu zat terlarut dapat di lihat pada tabel II seperti di bawah ini (Martin dkk., 1990). Istilah Sangat mudah larut Mudah larut Larut Agak sukar larut Sukar larut Sangat sukar larut Praktis tidak larut Tabel II. Harga Kelarutan suatu Zat Terlarut Bagian Pelarut yang Dibutuhkan untuk 1 Bagian Zat Terlarut Kurang dari 1 bagian 1 sampai 10 bagian 10 sampai 30 bagian 30 sampai bagian 100 sampai bagian sampai bagian Lebih dari bagian 6

7 4. Disolusi Disolusi adalah proses suatu zat solid memasuki pelarut untuk menghasilkan suatu larutan atau bisa juga didefinisikan sebagai proses suatu padatan melarut (Siregar, 2010). Fase biofarmasetik obat secara in vivo dalam sistem liberasi disolusi absorbsi (LDA) dapat di lihat pada gambar 3 di bawah ini. Obat = zat aktif+pembawa Dispersi padatan zat aktif Dispersi molekuler zat aktif Darah Liberasi Disolusi Absorbsi Gambar 3. Fase Biofarmasetik nasib obat in vivo dalam sistem LDA (Siregar, 2010) Laju disolusi adalah apabila suatu sediaan obat masuk ke dalam saluran cerna mengalami disintegrasi menjadi granul-granul, dan granul-granul ini mengalami pemecahan menjadi partikel-partikel halus. Setelah mengalami disintegrasi, partikel-partikel halus tersebut terdisolusi di saluran cerna di dalam tubuh. Tahap-tahap disintegrasi, deagregasi, serta disolusi suatu obat dapat di lihat pada gambar 4 di bawah ini. 7

8 Tablet atau Kapsul Disintegrasi Granul atau agregat Deagregasi Partikelpartikel halus Disolusi Disolusi Disolusi Obat dalam larutan ( in vitro atau in vivo) Absorbsi In vivo Obat dalam darah, cairan tubuh lainnya dan jaringan Gambar 4. Tahap-tahap disintegrasi, deagregasi dan disolusi obat (Martin dkk., 1993) Metode untuk menetapkan laju disolusi obat ada beberapa macam. Metode basket menunjukkan suatu upaya membatasi posisi bentuk sediaan dengan memberikan kemungkinan maksimum antar permukaan solid-cairan yang tetap. Namun, dalam metode basket zat cenderung bergerak menyumbat kasa basket, sangat peka terhadap gas terlarut dalam media disolusi, kecepatan aliran ketika partikel meninggalkan basket dan mengapung di media kurang memadai. Metode dayung menyempurnakan metode basket, terdiri dari batang dan daun pengaduk yang merupakan dayung berputar dengan dimensi tertentu sesuai radius bagian dalam labu yang bundar. Metode ini sangat baik untuk sistem otomatis (Siregar, 2010). Syarat penerimaan uji kelarutan suatu obat dapat dilihat pada tabel III di bawah ini. 8

9 Tahap Tabel III. Syarat Penerimaan Uji Kelarutan suatu Obat Jumlah yang diuji Kriteria penerimaan S 1 6 Masing-masing unit tidak kurang dari Q+15% S 2 6 S 3 12 Harga rata-rata dari 12 unit (S 1 + S 2 ) sama dengan atau lebih besar dari Q 1, dan tidak ada unit yang kurang dari Q-15% Harga rata-rata dari 24 unit (S 1 + S 2 + S 3 ) sama dengan atau lebih besar d ari Q, dan tidak lebih dari 2 unit yang kurang dari Q-15% Syarat tersebut dipakai untuk metode basket dan paddle. Beberapa produk dinyatakan lolos uji kelarutan dengan harga Q (jumlah obat yang larut dalam suatu waktu tertentu) ditetapkan 75% dalam waktu 45 menit. Suatu produk obat baru penetapan spesifikasi pelarutan memerlukan suatu pertimbangan dari sifat fisika kimia obat (Shargel dan Yu, 1985) Faktor-faktor yang mempengaruhi kecepatan disolusi: a. Sifat fisika kimia obat Pengaruh ukuran partikel sangat mempengaruhi kecepatan disolusi. Luas permukaan efektif obat dapat diperbesar dengan cara memperkecil ukuran partikel. Semakin besar luas permukaan obat maka semakin cepat laju pelarutan suatu obat (Shargel dan Yu, 1985). Derajat kelarutan obat dalam air juga mempengaruhi laju pelarutan. Secara umum, obat dalam bentuk garam yang terionisasi lebih larut dalam air daripada dalam bentuk asam atau basa bebas (Shargel dan Yu, 1985). b. Faktor formulasi Pengaruh bentuk sediaan pada laju disolusi tergantung pada kecepatan pelepasan bahan aktif yang terkandung di dalamnya (Shargel dan Yu, 1985). 9

10 Bahan tambahan dalam obat juga dapat mempengaruhi kinetika pelarutan obat dengan mengubah media tempat obat melarut atau bereaksi dengan obat itu sendiri (Shargel dan Yu, 1985). c. Pengadukan Kecepatan pengadukan pada uji disolusi ditetapkan dengan satuan rpm. Kecepatan 50 rpm untuk alat disolusi tipe 2 (metode dayung) dan 100 rpm untuk alat 1 (metode basket). Kecepatan pengadukan harus seragam selama pengujian. Kadang-kadang motor pemutar pengadukan secara berkala bias lambat atau cepat. Oleh karena itu pengecekan kecepatan harus selalu dilakukan di awal maupun di akhir pengujian (Shargel dan Yu, 1985). d. Suhu media pelarutan Suhu media pelarutan harus dikendalikan dan di hindarkan dari variasi suhu, sebagian besar suhu yang digunakan untuk uji pelarutan adalah 37ºC (Shargel dan Yu, 1985). e. Sifat media pelarutan Media pelarutan hendaknya tidak jenuh dengan obat. Dalam uji disolusi biasanya digunakan volume media yang lebih besar daripada jumlah pelarut yang diperlukan untuk melarutkan obat secara sempurna (Shargel dan Yu, 1985). f. Alat yang digunakan Ukuran dan bentuk wadah juga akan mempengaruhi laju dan tingkat pelarutan. Tidak satupun alat atau uji yang dapat digunakan untuk seluruh obat. Tiap produk obat harus diuji secara individu dengan uji pelarutan yang 10

11 memberikan korelasi yang paling baik dengan bioavailabilitas in vivo (Shargel dan Yu, 1985) 5. Spektrofotometri Ultraviolet Spektrofotometri serapan merupakan pengukuran suatu interaksi antara radiasi elektromagnetik dan molekul dari atom atau atom dari suatu zat kimia. Serapan cahaya oleh molekul dalam daerah sinar ultraviolet dan terlihat tergantung pada struktur elektronik dari molekul. Dalam meneliti serapan secara kuantitatif, berkas sinar radiasi dikenakan pada cuplikan dan intensitas radiasi yang ditransmisikan kemudian diukur. Sinar ultraviolet mempunyai panjang gelombang antara nm, sementara sinar tampak mempunyai panjang gelombang nm. Hukum Lambert-Beer menyatakan bahwa intensitas yang diteruskan oleh larutan zat yang penyerap berbanding lurus dengan tebal dan konsentrasi larutan (Gandjar dan Rohman, 2007) Metode spektrofotometri digunakan untuk menetapkan kadar senyawa obat dalam jumlah yang cukup banyak. Spektrofotometer yang digunakan harus terkalibrasi dengan benar. Cara lain yang digunakan untuk menetapkan kadar sampel adalah dengan menggunakan perbandingan absorbansi sampel dengan absorbansi baku, atau dengan menggunakan persamaan regresi linear yang menyatakan hubungan antara konsentrasi baku dengan absorbansinya. Persamaan kurva baku selanjutnya digunakan untuk menghitung kadar sampel (Gandjar dan Rohman, 2007). 11

12 Pemilihan panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kualitatif adalah panjang gelombang yang mempunyai absorbansi maksimal. Dalam pemilihan panjang gelombang maksimal dilakukan dengan cara membuat kurva baku hubungan antara absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan baku pada konsentrasi tertentu (Gandjar dan Rohman, 2007). Ada beberapa alasan mengapa harus menggunakan panjang gelombang maksimal, yaitu: a. Pada panjang gelombang maksimal, kepekaannya juga maksimal karena pada panjang gelombang maksimal tersebut, perubahan absorbansi untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar b. Disekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi datar dan pada kondisi tersebut hokum lambert-beer akan terpenuhi c. Jika dilakukan pengukuran ulang maka kesalahan yang disebabkan oleh pemasangan ulang panjang gelombang akan kecil sekali, ketika digunakan panjang gelombang maksimal. Kadang-kadang dijumpai keadaan yang mana pemakaian panjang gelombang maksimal kurang baik. Hal ini dikarenakan, selain zat yang dianalisis juga terdapat zat lain yang mempunyai absorbansi pada panjang gelombang tersebut. Ada beberapa variabel yang mempengaruhi absorbansi yaitu: jenis pelarut, ph larutan, suhu, konsentrasi tinggi dan zat-zat pengganggu (Gandjar dan Rohman, 2007). Pada pembuatan kurva baku dibuat seri larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai konsentrasi. Masing-masing absorbansi larutan pada 12

13 konsentrasi yang diukur dibuat kurva baku yang merupakan hubungan antara absorbansi (y) dengan konsentrasi (x) (Gandjar dan Rohman 2007). 6. Monografi Bahan a. Crosscarmellose Sodium (CCS) Crosscarmellose sodium merupakan superdisintegran yang berasal dari polimer carboxymethylcellulose sodium. Crosscarmellose sodium digunakan dalam formulasi farmasetikal oral sebagai disintegran tablet, kapsul dan granul. Konsentrasi crosscarmellose sodium yang digunakan untuk kempa langsung secara normal adalah 2%. Crosscarmellose sodium merupakan serbuk putih yang sifatnya tidak bisa dicairkan, hidrofilik, stabil, higroskopis, dan sangat suka terhadap bahan pelarut, sehingga sangat baik untuk pembengkakan. Crosscarmellose sodium memberikan keunggulan pemecahan dan kehancuran karakteristik, sehingga meningkatkan bioavailabilitas dari formulasi. Crosscarmellose sodium digunakan sebagai bahan penghancur dalam pembuatan tablet sebesar 0,5-5,0%, sedangkan pada kapsul sebesar 10-25%. Stabilitas bahannya higroskopis, bersifat praktis tidak larut dalam aseton, etanol dan toluene. Pemerian serbuk granul, putih sampai krem, dan higroskopis (Rowe dkk., 2009). Certificate Of Analysis crosscarmellose sodium dapat dilihat pada Lampiran 11. g. Sodium Lauril Sulfat (SLS) Sodium Lauril Sulfat adalah campuran garam natrium dari senyawa alkil sulfat primer, terdiri dari sodium dodekil sulfat (Depkes RI, 1979). SLS sebagai 13

14 surfaktan an-ionik, emulgator, zat pembasah, lubrikan pada tablet dan kapsule. SLS berbentuk kristal berwarna putih sampai kuning pucat, serbuk halus, berbusa, rasa pahit dan berbau menyengat seperti lemak (Rowe dkk., 2009). Struktur kimia SLS dapat dilihat pada gambar 5 di bawah ini. Gambar 5. Struktur kimia sodium lauril sulfat (Rowe dkk., 2009) F. Landasan Teori Asam fenofibrat tidak larut dalam air, sehingga disolusi sangat mempengaruhi kecepatan absorbsi di dalam tubuh. Salah satu upaya yang digunakan untuk meningkatkan kelarutan dan disolusi suatu obat adalah pembuatan dispersi padat. Penelitian Waard dkk (2008) menyatakan penambahan sodium lauril sulfat dapat meningkatkan laju disolusi dispersi padat fenofibrat dan diazepam. Selain itu, penambahan sodium starch glikolat dan crosscarmellose sodium tidak hanya meningkatkan laju disolusi fenofibrat dalam sistem dispersi padat tetapi juga memiliki stabilitas yang baik (Srinarong dkk., 2009). G. Hipotesis Inkorporasi surfaktan SLS dan superdisintegran CCS dapat meningkatkan kelarutan dan disolusi asam fenofibrat. 14

15 BAB II METODE PENELITIAN A. Bahan dan Alat 1. Bahan Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini kecuali dinyatakan lain mempunyai kualitas farmasi. Bahan-bahan tersebut diantaranya adalah: serbuk Asam fenofibrat (Shijiazuang, China), crosscarmellose sodium (PT.Zenith), dan Sodium Lauril Sulfat (Brataco), metanol p.a (Merck), aquadest (UD. Mitra Raya), alkohol 96 % (PT Multi Kimia Raya), Kalium fosfat monobasa p.a (Merck), Natrium hidroksida p.a (Merck). 2. Alat Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah: mortir, stamper, pipet mikro, neraca analitik (Ohaus), oven (xmtd-2001), stirrer (Scilogex ms7-h550-s) alat-alat gelas, shacker thermostatik waterbath dan alat disolusi tipe 1 basket (Elektrolab tdt-08l) dan spektrofotometer (Shimadzu). B. Jalannya Penelitian 1. Pembuatan dapar fosfat ph 6,8 NaOH ditimbang sebanyak 8,96g dan KH 2 PO 4 sebanyak 68,05g dengan seksama, kemudian dilarutkan dalam aqua bebas CO 2 sampai 10 L. Dicek ph menggunakan ph-meter digital sampai 6,8 (USP, 2007). 15

16 2. Pembuatan larutan stok Asam fenofibrat ditimbang seksama sebanyak 50,0 mg, kemudian dilarutkan dengan metanol p.a 10 ml diencerkan dalam dapar fosfat ph 6,8 ad 1000 ml. 3. Penentuan panjang gelombang maksimal Dari larutan stok yang sudah dibuat diambil 1,6 ml kemudian diencerkan dengan dapar fosfat ph 6,8 sampai 10 ml, diukur serapannya pada spektrofotometri UV dengan range λ 270 nm 320 nm, digunakan dapar fosfat ph 6,8 sebagai blangkonya. Panjang gelombang yang memiliki serapan tinggi dan stabil dari larutan yang diukur merupakan panjang gelombang maksimal. 4. Pembuatan kurva baku asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8 Sebanyak 0,4 ml, 0,8 ml, 1,2 ml, 1,6 ml, 2 ml dan 2,4 ml dari larutan stock, diencerkan sampai 10 ml dengan dapar phosphate. Masing masing seri kadar dibaca serapannya pada panjang gelombang yang sudah didapatkan, range absorbansi 0,2 sampai 0,8. Dibuat regresi linier antara kadar(x) absorbansi (y) sehingga dapat diperoleh persamaan kurva baku y=bx+a 5. Pembuatan dispersi padat asam fenofibrat Formula standar tablet asam fenofibrat dan formula dispersi padat asam fenofibrat dapat dilihat pada tabel IV dan tabel V di bawah ini : Tabel IV. Formula Standar Tablet Asam Fenofibrat (Arnold dkk., 2009) No. Komposisi Jumlah Bahan Asam Fenofibrat Avicel PH 101 Copovidone Crosspovidone Mg Stearate , ,4 6,9 Total

17 Tabel V. Formula Dispersi Padat Asam Fenofibrat No. Komposisi F Asam Fenofibrat Crosscarmellose Sodium (CCS) Na lauril sulfat Total 165 Pembuatan dispersi padat asam fenofibrat dengan beberapa metode (metode 1, metode 2, metode 3) yaitu : a. Metode 1 (M1) : Asam fenofibrat, SLS, dan CCS ditimbang secara seksama. SLS dilarutkan dalam etanol 96% secukupnya, kemudian dimasukkan asam fenofibrat dan CCS. Campuran dihomogenkan dan pelarut diuapkan kemudian dikeringkan di dalam oven dengan suhu 40ºC selama 2 jam. Setelah kering bahan diambil dari wadah sampai bersih.. b. Metode 2 (M2) : Asam fenofibrat, SLS dan CCS ditimbang secara seksama. SLS dan asam fenofibrat dilarutkan dalam etanol 96%, kemudian pelarut dibiarkan menguap, kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu 40ºC selama 2 jam. Bahan diambil dari wadah sampai bersih setelah itu ditambahkan CCS. c. Metode 3 (M3) : Asam fenofibrat, SLS, dan CCS ditimbang secara seksama. Semua bahan dicampur secara fisik tanpa adanya proses pelarutan. 6. Uji perolehan kembali dispersi padat asam fenofibrat Uji perolehan kembali dilakukan dengan menetapkan kadar cuplikan masing-masing campuran fisik dan dispersi padat asam fenofibrat-sls-ccs secara spektrofotometri UV. Sampel ditimbang 80 mg, kemudian dilarutkan dalam dapar fosfat ph 6,8 sampai 1000 ml. Diukur serapannya menggunakan 17

18 spektrofotometri UV pada panjang gelombang maksimal yang telah ditentukan. Larutan dapar fosfat ph 6,8 digunakan sebagai blanko dan pengujian dilakukan sebanyak 3 kali. 7. Uji kelarutan Serbuk asam fenofibrat dan dispersi padat asam fenofibrat dimasukkan ke dalam 3 tabung reaksi secara berlebih, dilarutkan dalam dapar fosfat ph 6,8 sebanyak 10 ml kemudian diaduk dengan pengaduk magnetik pada suhu 40ºC selama 15 menit, dimasukkan ke dalam alat shaking waterbath pada suhu 37ºC selama 2 jam. Larutan disaring dan dibaca serapannya pada panjang gelombang yang telah ditentukan. 8. Uji disolusi dispersi padat asam fenofibrat Uji ini dilakukan pada asam fenofibrat murni, dispersi padat asam fenofibrat dan campuran fisik masa serbuk asam fenofibrat yang dimasukkan ke dalam cangkang kapsul gelatin transparan. Alat disolusi yang digunakan adalah alat disolusi tipe I, yaitu model basket. Medium yang digunakan adalah 900 ml larutan dapar fosfat ph 6,8 pada suhu 37 C dengan kecepatan 50 rpm. Sampel diambil setelah 5; 15; 30; 45; 60 menit masing-masing sebanyak 5,0 ml dan segera diganti 5,0 ml media disolusi yang mempunyai suhu sama. Sampel yang sudah diambil diukur serapannya menggunakan spektofotometri UV pada panjang gelombang yang telah ditentukan dengan dapar fosfat ph 6,8 sebagai blanko. Kadar asam fenofibrat dihitung dan dianalisis jumlah asam fenofibrat yang terlarut. 18

19 C. Analisis Data Hasil uji kelarutan dan disolusi dianalisis menggunakan analisis Anova dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui bagaimana pengaruh penambahan surfaktan SLS dan superdisintegran CCS terhadap kelarutan dan disolusi asam fenofibrat. 19

20 D. Skema Jalannya Penelitian Skema jalannya penelitian pengaruh inkorporasi sodium lauril sulfat dan crosscarmellose sodium terhadap kelarutan dan disolusi asam fenofibrat dalam sistem dispersi padat dapat dilihat pada gambar 6 di bawah ini. Pembuatan dapar fosfat ph 6.8 Dispersi padat asam fenofibrat Pembuatan larutan stok Penentuan panjang gelombang maksimal Metode 1 Metode 2 Metode 3 Dilakukan Uji : Pembuatan kurva baku 1. Uji perolehan kembali 2. Uji kelarutan 3. Uji disolusi Analisa data Gambar 6. Skema jalannya penelitian 20

21 BAB III HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Penentuan panjang gelombang maksimal dimaksudkan agar serapan yang diperoleh adalah serapan yang sebenarnya. Dengan panjang gelombang maksimal kepekaannya juga maksimal karena pada panjang gelombang tersebut perubahan serapan untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar (Gandjar dan Rohman, 2011) Hasil penentuan panjang gelombang maksimum asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8 yaitu 298,7 nm dengan absorbansi 0,577. Hasil dari penentuan panjang gelombang maksimum asam fenofibrat dapat dilihat pada gambar 7 di bawah ini. Gambar 7. Hasil penentuan panjang gelombang maksimal asam fenofibrat 21

22 Absorbansi B. Pembuatan Kurva Baku Pembuatan kurva baku ditujukan untuk menetapkan kadar asam fenofibrat yang terlarut dalam uji kelarutan, uji disolusi dan uji perolehan kembali. Kurva baku dibuat dari pengukuran serapan seri kadar asam fenofibrat, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, 10 ppm, 12 ppm, dan 14 ppm dalam media dapar fosfat ph 6,8 pada panjang gelombang maksimum 298,7 nm kemudian dilakukan analisis regresi linier. Kurva baku yang diperoleh berdasarkan hasil penelitian menghasilkan absorbansi seperti terlihat di dalam tabel VI berikut ini : Tabel VI. Hasil Absorbansi Kurva Baku Asam Fenofibrat Konsentrasi kadar (ppm) Absorbansi (nm) 4 ppm 6 ppm 8 ppm 10 ppm 12 ppm 14 ppm 0,242 0,368 0,473 0,580 0,701 0,812 Dari tabel di atas dibuat kurva baku korelasi antara konsentrasi dengan absorbansi seperti terlihat pada gambar 7 di bawah ini. 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 y = x R² = Seri kadar (ppm) Gambar 8. Kurva baku asam fenofibrat pada spektrofotometri dengan λ 298,7 nm 22

23 Berdasarkan data tabel VI diatas diperoleh dihitung regreasi linearnya sehingga diperoleh slope (b) 0,0565, intercept (a) 0,0207, dan harga koefisien korelasi (r) yaitu 0,9997 sehingga diperoleh persamaan kurva baku y = 0,0565x + 0,0207, dimana y adalah absorbansi sedangkan x adalah konsentrasi obat (µg/ml). Persamaan kurva baku yang diperoleh untuk menghitung kadar asam fenofibrat yang terlarut dalam uji disolusi. C. Hasil Uji Perolehan Kembali Dispersi Padat Asam Fenofibrat Uji perolehan kembali di maksudkan untuk mengetahui kedekatan dari suatu pengukuran yang diperoleh dari sampel yang homogen. Persyaratan uji perolehan kembali adalah tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110%. Hasil uji perolehan kembali dispersi padat asam fenofibrat dapat dilihat pada tabel VII di bawah ini. Tabel VII. Hasil Uji Perolehan Kembali Dispersi Padat Asam Fenofibrat Sampel % Recovery Recovery ± SD CV M1 M2 M3 97,29 ± 4,53 97,19 ± 7,86 97,98 ± 3,15 ± 4,65 ± 8,09 ± 3,22 Keterangan : M1 : Metode 1 M2 : Metode 2 M3 : Metode 3 Hasil rata-rata uji perolehan kembali dispersi padat asam fenofibrat memenuhi persyaratan uji recovery yaitu ±10%, sehingga keefektifan metode spektrofotometri dapat digunakan lebih lanjut. 23

24 D. Hasil Uji Kelarutan Dispersi Padat Asam Fenofibrat Kelarutan merupakan proses suatu bahan kimia atau obat menjadi terlarut dalam suatu pelarut. Hasil uji kelarutan dispersi padat asam fenofibrat dapat dilihat pada tabel VIII di bawah ini : Tabel VIII. Hasil Uji Kelarutan Dispersi Padat Asam Fenofibrat Sampel Asam Fenofibrat M1 M2 M3 Keterangan: M1 : Metode 1 M2 : Metode 2 M3 : Metode 3 Kelarutan (µg/ml) 2,94 ± 0,36 3,52 ± 0,19 3,48 ± 1,05 3,34 ± 0,24 Dari hasil penelitian pada Tabel VIII dapat disimpulkan bahwa kelarutan asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8 pada masing-masing metode mengalami peningkatan. Hasil uji statistik menggunakan Anova dapat dilihat pada Lampiran 5. Setelah dilakukan analisis menggunakan uji statistik Anova dengan taraf kepercayaan 95 % tes homogenitas menunjukkan nilai signifikansi lebih dari 0,05 (P>0,05) namun pada tes normalitas nilai signifikansi kurang dari 0,05 (P<0,05) sehingga data tidak terdistribusi normal dan dilanjutkan dengan uji statistik non parametrik Kruskal wallis. Hasil yang diperoleh mempunyai nilai signifikansi lebih dari 0,05 (P>0,05) yang artinya bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna pada kelarutan asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8 antar semua metode inkorporasi dengan asam fenofibrat murni, hal ini dikarenakan penambahan SLS dan CCS pada konsentrasi yang rendah sehingga adanya perbedaan inkorporasi surfaktan dan superdisintegran tidak mempengaruhi kelarutan asam fenofibrat dalam medium dapar fosfat ph 6,8. 24

25 E. Hasil Uji Disolusi Dispersi Padat Asam Fenofibrat Uji disolusi menggunakan alat dissolution tester dengan kapasitas 1000 ml dengan volume media sebanyak 900 ml. Volume yang 900 ml untuk mendapatkan media pelarutan yang tidak jenuh oleh obat. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode basket, karena bahan yang diuji dalam bentuk serbuk yang dimasukkan dalam cangkang kapsul transparan. Medium yang digunakan pada penelitian ini adalah dapar fosfat ph 6,8 (Stippler dkk, 2004), karena ph dalam usus antara 6,8-7,4. Suhu media dijaga konstan yaitu 37º ± 0.5ºC disesuaikan dengan suhu tubuh manusia adalah 37ºC. Kecepatan pengadukan alat disolusi adalah 50 rpm. Waktu pengambilan sampel adalah 60 menit, karena dalam waktu 1 jam diasumsikan obat telah melarut sempurna. Setiap pengambilan sampel pelarut ditambahkan pada suhu dan volume yang sama untuk mengkoreksi volume medium. Pengukuran absorbansi menggunakan spektrofotometer UV pada panjang gelombang nm. Keseluruhan hasil uji disolusi dispersi padat asam fenofibrat dapat dilihat pada Lampiran 4. Nilai absorbansi yang didapat digunakan untuk menghitung kadar asam fenofibrat yang terlarut setiap pengambilan sampel pada menit ke 5; 15; 30; 45; dan 60 menggunakan persamaan kurva baku y= 0,0565x + 0,0207. Hasilnya digunakan untuk menghitung jumlah obat yang terlarut setelah ditambah faktor koreksi. Keseluruhan profil disolusi dapat dilihat pada gambar 8 di bawah ini 25

26 Keterangan : m1 = Metode 1 m2 = Metode 2 m3 = Metode 3 Gambar 9. Kurva hasil disolusi dispersi padat asam fenofibrat Gambar di atas menunjukkan bahwa pada menit ke-5 menghasilkan kadar obat terlarut kecil dari masing-masing formula, hal ini dikarenakan perlu waktu agar supaya kapsul melarut dengan sempurna barulah zat aktif dalam kapsul terlepas dan terdisolusi. Pada gambar juga terlihat bahwa kadar obat terlarut paling tinggi terdapat pada menit ke-60, karena pada waktu tersebut semua bahan obat sudah terlarut dengan sempurna. Hasil penelitian menunjukkan bahwa metode 1, metode 2, dan metode 3 mengalami peningkatan disolusi dibandingkan dengan asam fenofibrat murni. Hal ini dapat disimpulkan bahwa inkorporasi SLS dan CCS dapat meningkatkan laju disolusi asam fenofibrat. Harga DE 60 asam fenofibrat dan dispersi padat asam fenofibrat dapat dilihat pada tabel IX di bawah ini. Asam Fenofibrat m1 m2 m3 26

27 Tabel IX. Harga DE 60 (%) Asam Fenofibrat dan Dispersi Padat Asam Fenofibrat DE 60 ( Asam fenofibrat M1 M2 M3 DE 60 (%) 47,04 ± 8,88 74,13 ± 2,15 64,58 ± 5,42 62,70 ± 7,65 Keterangan: M1 : Metode 1 M2 : Metode 2 M3 : Metode 3 Hasil perhitungan DE 60 (%) pada tabel IX digunakan untuk uji statistik Anova satu jalan dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil statistik menunjukkan bahwa pada metode 1 dan metode 2 dibandingkan dengan asam fenofibrat murni memiliki perbedaan bermakna dengan nilai signifikansi <0,05 (P<0,05), namun pada metode 3 dibandingkan dengan asam fenofibrat murni tidak ada perbedaan bermakna dengan nilai signifikansi >0,05 (P>0,05) hal ini dikarenakan pada metode 3 inkorporasi dilakukan secara fisik saja tanpa adanya proses pelarutan. Pengaruh inkorporasi SLS dan CCS dengan metode pelarutan dapat meningkatkan disolusi Asam fenofibrat dibandingkan dengan campuran secara fisik saja. 27

28 BAB IV KESIMPULAN A. Kesimpulan 1. Inkorporasi SLS dan CCS dalam sistem dispersi padat tidak mempengaruhi kelarutan asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8. 2. Inkorporasi SLS dan CCS pada metode 1 dan metode 2 mempengaruhi disolusi asam fenofibrat dalam dapar fosfat ph 6,8. B. Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang kelarutan dan disolusi Asam fenofibrat dengan variasi konsentrasi penambahan SLS dan CCS yang lebih tinggi. 28

29 DAFTAR PUSTAKA American Pharmaceutical Assosiation, 2007, United States Pharmacopeia and National Formulary, Edisi 30-NF25, United States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, MD, USA, 384. Arnold, K.A., dan Feng, H., 2009, Methods Of Use Of Fenofibric, United States Patent No. 7,569,612 B1, 6. Depkes RI., 1979, Farmakope indonesia, Edisi III, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 713. Depkes RI., 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 1061, Godfrey, A.R., Digiacinto, J., and Davis, M.W., 2011, Single-Dose Bioequivalence of 105-mg Fenofibric Acid Tablets Versus 145-mg Fenofibrate Tablets Under Fasting and Fed Conditions: A Report of Two Phase I, Open-Label, Single-Dose, Randomized, Crossover Clinical Trials,Clinical Therapeutics, 33(6), Gandjar, I.G., dan Rohman A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, , Kumari, R., Chandel, P., and Kapoor, A., 2013, Paramount Role of Solid Dispersion in Enhacement of Solubility, Indo Global Journal of Pharmaceutical Sciences, 3(1), Martin, A., Swarbick, J., and Cammarata, A., 1983, Farmasi Fisik, Edisi III, Jilid 1, diterjemahkan Oleh Yoshita, UI-Press Jakarta, 166. Martin, A., Swarbick, J., and Cammarata, A., 1983, Farmasi Fisik, Edisi III, Jilid 2, diterjemahkan Oleh Yoshita, UI-Press Jakarta, 845. Nugroho, A.E., 2012, Farmakologi : Obat-obat Penting dalam Pembelajaran Ilmu Farmasi dan Dunia Kesehatan, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, Rao, M.R.P., Gabhe, N., Gunjal, M., Supriyabhide, Harshadlunavat, and Khambete, M., 2012, Binary and Ternary Solid Dispersions of Fenofibrate for Solubility Enhancement, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science, 4(4), Rowe, R.C., Sheskey, P.J., and Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceuthical Excipients, 6 th Ed., Pharmaceutical Press, London, 129, 404, ,

30 Shah, I., Barker, J., Barton, S.J., and Naughton, D.P., 2014, A Novel Method for Determination of Fenofibric Acid in Human Plasma using HPLC-UV : Application to a Pharmacokinetic Study of New Formulations, Journal Analytical and Bioanalytical Techniques, 12(9), 1-4. Shargel, L., dan Yu, A.B.C., 1985, Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan, Airlangga University Press, Surabaya, Siregar, C. J.P., 2010, Teknologi Sediaan Tablet : Dasar-Dasar Praktis, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 54, 56, Srinarong, P., Faber, J.H,. Visser, M.R., Hinrichs, W.L.J., and Frijlink H.W., 2009, Strongly enhanced dissolution rate of fenofibrate solid dispersion tablets by incorporation of superdisintegrants, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 73, 160. Stippler, E., Kopp, S., Dressman, J.B., 2004, Comparison of US Pharmacopeia Simulated Intestinal Fluid TS (without pancreatin) and Phosphate Standard Buffer ph 6.8, TS of the International Pharmacopoeiamwith Respect to Their Use in In Vitro Dissolution Testing, Dissolution Technologies, 7. Sweetman, S.C., 2009, Martindale : The Complete Drug Reference, Pharmaceutical Press, London, Waard, H.D., Hinrichs, W.L.J., Visser, M.R., Bologna, C., and Frijlink, H.W., 2008, Unexpected Differences in Dissolution Behavior of Tablets Prepared from Solid Dispersion with a Surfactan Physically Mixed or Incorporated, International Journal of Pharmaceutics, 72. Zhu, T., Ansquer, J.C., Kelly, M.T., Sleep, D.J., and Pradhan, R.S., 2010, Comparison of the Gastrointestinal Absorption and Bioavailability of Fenofibrate and Fenifibric Acid in Humans, Journal of Clinical Pharmacology,

31 LAMPIRAN Lampiran 1. Penentuan panjang gelombang asam fenofibrat 31

32 Lampiran 2. Data uji perolehan kembali dispersi padat asam fenofibrat Replikasi Penimbangan Abs Recovery Metode 1 Pengenceran Kadar (µg/ml) Kadar Sesungguhnya % Recovery x x x RATA-RATA SD CV Replikasi Penimbangan Abs Recovery Metode 2 Pengenceran Kadar (µg/ml) Kadar Sesungguhnya % Recovery ,325 10x 53,86 50,91 105, ,1 0,294 10x 48,37 53,52 90, ,8 0,291 10x 47,84 50,14 95,41 RATA-RATA 50,02 51,52 97,19 SD 3,33 7,86 CV 6,66 8,09 Replikasi Penimbangan Abs Recovery Metode 3 Pengenceran Kadar (µg/ml) Kadar Sesungguhnya % Recovery 1 77,3 0,283 10x 46,42 49,19 94, ,5 0,289 10x 47,49 47,4 100, ,7 0,309 10x 51,03 51,35 99,38 RATA-RATA 48,31 49,31 97,98 SD 2,41 3,15 CV 4,99 3,22 32

33 Lampiran 3. Data kelarutan Asfeno Abs pengenceran Kadar (mg/ml) Rep 1 0, x 3,24 Rep 2 0, x 3,25 Rep 3 0, x 2,62 Rata-rata 3,04 SD 0,36 CV 11,88 Metode 1 Abs pengenceran Kadar (mg/ml) Rep 1 0, x 3,64 Rep 2 0,4 500x 3,34 Rep 3 0, x 3,7 Rata-rata 3,56 SD 0,19 CV 5,42 Metode 2 Abs pengenceran Kadar (mg/ml) Rep 1 0, x 4,59 Rep 2 0, x 3,34 Rep 3 0, x 2,5 Rata-rata 3,48 SD 1,05 CV 30,25 Metode 3 Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Rep 1 0, x 4 Rep 2 0, x 3,51 Rep 3 0, x 3,17 Rata-rata 3,56 SD 0,42 CV 11,72 33

34 Lampiran 4. Statistik hasil kelarutan Kadar Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic df1 df2 Sig. 9, ,005 Kadar ANOVA Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2,815 3,938,555,659 Within Groups 13, ,689 Total 16, Tests of Normality Inkorporasi Kolmogorov-Smirnov a Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Statistic df Sig. asam fenofibrat,380 3.,762 3,026 kadar metode 1,324 3.,878 3,317 metode 2,327 3.,871 3,299 metode 3,214 3.,989 3,801 a. Lilliefors Significance Correction Ranks Inkorporasi N Mean Rank asam fenofibrat 3 3,67 metode 1 3 8,67 kadar metode 2 3 6,33 metode 3 3 7,33 Total 12 34

35 Test Statistics a,b Kadar Chi-Square 3,103 df 3 Asymp. Sig.,376 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: inkorporasi 35

36 Lampiran 5. Hasil Disolusi Asam Fenofibrat Replikasi 1 Menit ke- Abs Pengence ran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,783 0, , ,15 11,54 30, ,467 5x 0, ,55 0, ,62 33,84 238, ,601 5x 0, ,17 0,265 46,44 44,12 615, ,355 10x 0, ,28 0, ,80 51,12 751, ,401 10x 0, ,57 0, ,39 58,33 863,92 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6504,55 38,44 Asam Fenofibrat Replikasi 2 Menit ke- Abs Pengenc eran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A Luas A+B (mg.menit) DE60 (%) 5 0,31 5x 0, , ,04 21,89 57, ,579 5x 0, ,46 0,128 44,59 42,36 338, ,334 10x 0, ,86 0,375 50,24 47,73 711, ,394 10x 0, ,49 0,652 60,14 57,14 827, ,426 10x 0, ,53 0, ,51 62,24 942, ,43 46,49 36

37 Asam Fenofibrat Replikasi 3 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,203 10x 0, , ,07 27,62 72, ,325 10x 0, ,42 0, ,58 46,16 38, ,444 10x 0, ,41 0,305 67,84 64,46 87, ,492 10x 0, ,06 0,805 75,87 72, , ,533 10x 0, ,63 1,222 82,85 78, ,38 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6411,57 56,18 37

38 Metode 1 Replikasi 1 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,479 10x 0, , ,99 69,30 173, ,506 10x 0, ,31 0,405 77,72 73,79 733, ,535 10x 0,091 81,9 0,835 82,74 78, , ,546 10x 0,093 83,7 1,29 84,99 80, , ,561 10x 0, ,04 1,755 87,80 83, ,63 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6350,11 71,93 Metode 1 Replikasi 2 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 5 0,237 10x 0, , ,47 32,73 81, ,554 10x 0, ,96 0, ,15 80,85 576, ,563 10x 0,096 86,4 0, ,06 82, , ,589 10x 0, ,54 1, ,68 87, , ,606 10x 0, ,24 1, ,89 90, , ,51 74,24 38

39 Metode 1 Replikasi 3 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut luas A 5 0,397 10x 0, , ,94 56,91 142, ,542 10x 0, ,07 0,333 83,40 79,19 695, ,559 10x 0, ,77 0, ,56 82, , ,605 10x 0, ,06 1,271 94,33 89, , ,612 10x 0, ,23 1,788 96,02 91, ,24 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6286,08 76,23 39

40 Metode 2 Replikasi 1 Menit ke- Abs Pengencera n Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,251 0,0041 3,69 0,0000 3,69 3,54 8, ,739 5x 0, ,24 0, ,26 54,87 292, ,494 10x 0, ,42 0, ,76 72,59 973, ,562 10x 0, ,22 0, ,98 83, , ,624 10x 0, ,12 1, ,36 93, ,00 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6397,49 59,72 Metode 2 Replikasi 2 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,170 0, ,76 0, ,76 22,77 56, ,342 10x 0, ,21 0, ,34 49,20 364, ,545 10x 0, ,52 0, ,94 80,43 988, ,597 10x 0, ,8 0, ,68 88, , ,598 10x 0, ,98 1, ,37 89, ,13 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6403,11 63,59 40

41 Metode 2 Replikasi 3 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,251 5x 0, ,36 0, ,36 17,59 43, ,890 5x 0, ,21 0, ,31 66,42 423, ,565 10x 0, ,67 0, ,16 83, , ,586 10x 0, , ,97 87, , ,595 10x 0, ,53 1, ,00 89, ,61 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6065,96 70,43 41

42 Metode 3 Replikasi 1 Menit ke- Abs Pengencer an Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,331 0,0055 4,95 0 4,95 4,76 11, ,559 5x 0, ,84 0, ,87 41,22 230, ,900 5x 0, ,02 0, ,29 67,58 828, ,499 10x 0, ,14 0, ,79 73, , ,510 10x 0, ,51 1, ,59 82, ,18 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6371,66 52,50 Metode 3 Replikasi 2 Menit ke- Abs Pengencer an Kadar (mg/ml) Jumlah terlarut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut Luas A 5 0,238 5x 0, , ,28 16,62 41, ,454 5x 0, ,47 0,096 34,57 33,24 252, ,425 10x 0, ,44 0, ,73 62,24 726, ,533 10x 0, ,63 0, ,28 79, , ,581 10x 0, ,28 1,099 90,38 86, ,84 Luas A+B (mg.menit) DE 60 (%) 6251,76 53,87 42

43 Metode 3 Replikasi 3 Menit ke- Abs Pengenceran Kadar (mg/ml) Jumla h terlar ut Koreksi jumlah terlarut setelah dikoreksi % Terlarut luas area A 5 0,506 5x 0, , ,61 37,13 92, ,741 5x 0, ,33 0, ,54 55,33 469, ,547 10x 0, ,79 0,533 84,32 81, , ,562 10x 0, ,22 0, ,22 83, , ,565 10x 0, ,67 1, ,15 84, ,82 Luas A+B DE ,62 67,12 43

44 Lampiran 6. Contoh perhitungan DE 60 Contoh perhitungan DE 60 (%) pada formula I replikasi 1 A. Perhitungan kadar zat aktif terdisolusi dalam media disolusi 900 ml dengan berat Asam Fenofibrat 169,4 mg yang diuji disolusi pada waktu 5 menit diperoleh absorbansi 0,353, kemudian nilai absorbansi dimasukkan pada kurva baku dengan persamaan y = 0,052x + 3, , diperoleh kadar 6,711 g/ml y = bx + a y = 0,0565 x + 0,0207 0,353 = 0,0565 x x = 0,0059 mg/ml mg zat terlarut = 0,0059 x vol.disolusi = 0,0059 x 900 = 5,31 mg B. Perhitungan kadar hasil disolusi dari Kapsul asam fenofibrat dengan berat 169,4 Waktu Jumlah obat Faktor koreksi Jumlah obat terkoreksi 5 5,31 0 5, = 5, ,7 { x 5,31} + 0 = 0,128 56,7 + 0,128 = 56, ,36 { x 56,7} + 0,128 = 0,375 72,36 + 0,375 = 72, ,75 { x 72,36} + 0,375 = 0,652 78,75 + 0,652 = 79, ,26 { x 78,75} + 0,652 = 0, ,26 + 0,9825 = 83,44 44

45 C. Persentase DE 60 Untuk menghitung efisiensi disolusi pada 60 menit, digunakan persamaan : DE 60 = luas bidang luas bidang B 100 Luas bidang A = { x ( 5 0 ) } { x ( 15 5 ) } { x ( ) } { x ( ) } { x ( ) } 2 = 13,28 mg = 310,20 mg = 970,76 mg = 1141,51 mg = 1222,05 mg Jumlah Luas bidang A = mg. menit Bila berat rata-rata kapsul Asam Fenofibrat adalah 169,4 mg dengan kandungan Asam Fenofibrat 105 mg. Jika yang diuji disolusi untuk kapsul Asam Fenofibrat replikasi I memiliki berat mg : mg x 105 mg = 104,38 mg mg Luas A+B = 104,38 mg x 60 menit = 6262,8 mg. menit. DE = x 100% DE = x 100% = 58,40 % 45

46 Lampiran 7. Harga DE 60 (%) Disolusi Asam fenofibrat dan Dispersi Padat Asam Fenofibrat Formula DE 60 (%) X ± SD Asfeno 38,44 46,49 56,18 47,04 + 8,88 M 1 71,93 74,24 76,23 74,13 ± 2,15 M 2 59,72 63,59 70,43 64,58 ± 5,42 M 3 49,60 53,87 67,12 62,70 ± 7,65 46

47 Lampiran 8. Uji Statistik DE 60 (%) Disolusi Asam Fenofibrat dan Dispersi Padat Asam fenofibrat DE Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic df1 df2 Sig. 1, ,278 DE ANOVA Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 1170, ,280 8,763,007 Within Groups 356, ,535 Total 1527, Tests of Normality Inkorporasi Kolmogorov-Smirnov a Shapiro-Wilk Statistic Df Sig. Statistic df Sig. Asfeno,191 3.,997 3,898 DE Metode 1,186 3.,998 3,918 Metode 2,239 3.,975 3,697 Metode 3,355 3.,820 3,162 a. Lilliefors Significance Correction DE Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic df1 df2 Sig. 1, ,278 47

48 DE ANOVA Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 1170, ,280 8,763,007 Within Groups 356, ,535 Total 1527, Dependent Variable: DE Tukey HSD Multiple Comparisons (I) Inkorporasi (J) Inkorporasi Mean Difference (I-J) Std. Error Sig. 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Metode 1-27,09667 * 5,44886,005-44,5458-9,6475 Asfeno Metode 1 Metode 2 Metode 3 Metode 2-17,54333 * 5,44886,049-34,9925 -,0942 Metode 3-10, ,44886,271-28,2425 6,6558 Asfeno 27,09667 * 5,44886,005 9, ,5458 Metode 2 9, ,44886,359-7, ,0025 Metode 3 16, ,44886,067-1, ,7525 Asfeno 17,54333 * 5,44886,049, ,9925 Metode 1-9, ,44886,359-27,0025 7,8958 Metode 3 6, ,44886,622-10, ,1992 Asfeno 10, ,44886,271-6, ,2425 Metode 1-16, ,44886,067-33,7525 1,1458 Metode 2-6, ,44886,622-24, ,6992 *. The mean difference is significant at the 0.05 level. 48

49 Lampiran 9. Serbuk asam fenofibrat 49

50 Lampiran 10. Dispersi padat asam fenofibrat Serbuk dispersi padat Asam fenofibrat metode 1 Serbuk dispersi padat Asam fenofibrat metode 2 50

51 Serbuk dispersi padat Asam fenofibrat metode 3 51

52 Lampiran 11. Alat Penelitian Spektrofotometer UV Pengaduk Magnetik ph meter Timbangan Analitik termostatik water bath 52

53 Alat Disolusi Alat Pemanas Oven 53

54 Lampiran 12. COA Asam Fenofibrat 54

55 Lampiran 13. COA Crosscarmellose sodium 55