Lampiran 1. Surat keterangan Hasil Determinasi Tanaman Jeruk Bali Putih. (Citrus grandis)

Transkripsi

1 Lampiran 1. Surat keterangan Hasil Determinasi Tanaman Jeruk Bali Putih (Citrus grandis) 52

2 Lampiran 1. Lanjutan... 53

3 Lampiran 1. Lanjutan... 54

4 55 Lampiran 2. Surat keterangan telah melakukan Penelitian di Laboratorium Biologi Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang

5 56 Lampiran 3. Surat keterangan telah melakukan Penelitian di Laboratorium Kimia Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang

6 57 Lampiran 4. Perhitungan Susut Pengeringan dan Randemen Ekstrak a. Perhitungan susut pengeringan = Bobot awal- Bobot akhir X 100% Bobot awal Susut Pengeringan = gram 2680 gram X 100% gram Susut Pengeringan = gram X 100% gram Susut Pengeringan = 80,86% b. Perhitungan Rendemen Ekstrak Rendemen Ekstrak = Bobot Ekstrak Kental X 100% Bobot Simplisia Kering Rendemen Ekstrak = 105 gram X 100% 300 gram Rendemen Ekstrak = 35%

7 58 Lampiran 5. Perhitungan Larutan Stok dan Seri Konsentrasi a. Data penimbangan DPPH Keterangan Berat botol timbang Berat botol timbang + DPPH Berat botol timbang + sisa Berat DPPH Hasil Penimbangan 15020,1 mg 15030,9 mg 15021,1,1 mg 9,8 mg b. Pembuatan larutan stok DPPH 0,1 mm sebanyak 250 ml (Mr DPPH = 394,32 g/mol) Konsentrasi = Berat DPPH X 1000 Mr Vol. Pembuatan Konsentrasi = 9,8 X 1000 Konsentrasi = 0,02485 X 4 394, Konsentrasi = 0,0994 mm ~ 0,1 mm Sebanyak 9,8 mg DPPH dilarutkan dalam etanol p.a ad 250 ml dalam labu takar c. Pembuatan larutan stok kuersetin 200 ppm sebanyak 50 ml Kuersetin 200 ppm = 0,2 gram / 1000 ml = 0,02 gram/ 100 ml = 20 mg/ 100 ml = 10 mg/50 ml Kuersetin sebanyak 10mg dilarutkan dalam etanol p.a ad 50 ml dalam labu takar.

8 59 Lampiran 5. Lanjutan... d. Penimbangan larutan stok kuersetin Keterangan Berat kertas Berat kertas + kuersetin Berat kertas + sisa Berat kuersetin Hail Penimbangan 336,1 mg 346,3 mg 336,2 mg 10,1 mg e. Pembuatan seri konsentrasi dari larutan stok kuersetin 200 ppm 1. Membuat larutan stok kuersetin 2 ppm sebanyak 10 ml 2 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 x 200 ppm = 10 ml x 2 ppm = V 1 = 0,1 ml ~ 100 µl Sebanyak 0,1 ml larutan stok kuersetin 200 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar. 2. Membuat larutan stok kuersetin 4 ppm sebanyak 10 ml 4 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 x 200 ppm = 10 ml x 4 ppm = V 1 = 0,2 ml ~ 200 µl Sebanyak 0,2 ml larutan stok kuersetin 200 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar.

9 60 Lampiran 5. Lanjutan Membuat larutan stok kuersetin 6 ppm sebanyak 10 ml 6 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 x 200 ppm = 10 ml x 6 ppm = V 1 = 0,3 ml ~ 300 µl Sebanyak 0,3 ml larutan stok kuersetin 200 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar 4. Membuat larutan stok kuersetin 8 ppm sebanyak 10 ml 8 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 x 200 ppm = 10 ml x 6 ppm = V 1 = 0,4 ml ~ 400 µl Sebanyak 0,4 ml larutan stok kuersetin 200 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar 5. Membuat larutan stok kuersetin 6 ppm sebanyak 10 ml 10 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 200 ppm = 10 ml x 10 ppm = V 1 = 0,5 ml ~ 500 µl Sebanyak 0,5 ml larutan stok kuersetin 200 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar.

10 61 Lampiran 5. Lanjutan... f. Pembuatan larutan uji fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih Keterangan Berat kaca arloji kosong Berat kaca arloji + zat Berat kaca arloji + sisa Berat zat Hasil Penimbangan 8237,9 mg 8437,9 mg 8237,9 mg 200 mg g. Pembuatan larutan stok Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih (FEAEEKJBP) 1. Membuat larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 12,5 ppm sebanyak 10 ml 12,5 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 8000 ppm = 10 ml x 12,5 ppm = V 1 = 0,016 ml ~ 16 µl Sebanyak 0,016 ml larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 8000 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar. 2. Membuat larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 25 ppm sebanyak 10 ml 25 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 8000 ppm = 10 ml x 25 ppm = V 1 = 0,031 ml ~ 31 µl Sebanyak 0,031 ml larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 8000 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar.

11 62 Lampiran 5. Lanjutan Membuat larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 50 ppm sebanyak 10 ml 50 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 8000 ppm = 10 ml x 50 ppm = V 1 = 0,063 ml ~ 63 µl Sebanyak 0,063 ml larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 8000 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar. 4. Membuat larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 100 ppm sebanyak 10 ml 100 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 8000 ppm = 10 ml x 100 ppm = V 1 = 0,125 ml ~ 125 µl Sebanyak 0,125 ml larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 8000 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar 5. Membuat larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 200 ppm sebanyak 10 ml 200 ppm = V 1 x C 1 = V 2 x C 2 = V 1 X 8000 ppm = 10 ml x 200 ppm = V 1 = 0,25 ml ~ 250 µl Sebanyak 0,25 ml larutan stok larutan uji FEAEEKJBP 8000 ppm diencerkan dalam etanol p.a ad 10 ml dalam labu takar.

12 63 Lampiran 6. Data Perhitungan Aktivitas Antioksidan 1. Perhitungan Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih (FEAEEKJBP) Replikasi 1 % Aktivitas Antioksidan = Abs kontrol Abs perlakuan x 100% Abs kontrol Sampel Seri Konsentrasi Absorbansi Aktivitas (µg/ml) sampel Antioksidan (%) (nm) Kuersetin Replikasi 1 2 0,612 30, ,571 41, ,431 50, ,322 63, ,231 73,690 FEAEEKJBP Replikasi 1 12,5 0,755 14, ,713 18, ,551 37, ,380 56, ,221 74,829 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0,878

13 64 Lampiran 6. Lanjutan Perhitungan Nilai IC 50 Replikasi 1 Nilai IC 50 diperoleh dari persamaan regresi linier Y = bx + a antara seri konsentrasi larutan uji dengan presentase aktivitas antioksidan. Sampel Kuersetin Replikasi 1 Seri Konsentrasi (µg/ml) Aktivitas Antioksidan (%) 2 30, , , , ,690 FEAEEKJBP Replikasi 1 12,5 14, , , , ,829 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0,878 Nilai IC 50 (µg/ml) 5, ,591 a. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Kuersetin Replikasi 1 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi kuersetin (X) dengan presentase aktivitas antioksidan kuersetin (Y) diperoleh nilai a = 19,168 b = 5,449 dan r = 0,999 Y = bx + a 50 = 5,449 x + 19, ,168 = 5,449x X = 5,658 µg/ml

14 65 Lampiran 6. Lanjutan... b. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih Replikasi 1 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (x) dengan presentase aktivitas antioksidan fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (y) diperoleh nilai a= 15,248 b = 0,323, dan r = 0,963 Y = bx + a 50 = 0,323 x + 15, ,248 = 0,323 x X = 107,591 µg/ml 3. Perhitungan Aktivitas Antioksidan Fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (FEAEEKJBP) Replikasi 2 % Aktivitas Antioksidan = Abs kontrol Abs perlakuan x 100% Abs kontrol

15 66 Lampiran 6. Lanjutan... Sampel Kuersetin Replikasi 2 FEAEEKJBP Replikasi 2 Seri Konsentrasi (µg/ml) Absorbansi sampel (nm) Aktivitas Antioksidan (%) 2 0,677 22, ,538 38, ,434 50, ,323 63, ,202 76,993 12,5 0,762 13, ,712 18, ,531 39, ,376 57, ,224 74,487 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0, Perhitungan Nilai IC 50 Replikasi 2 Nilai IC 50 diperoleh dari persamaan regresi linier Y = bx + a antara seri konsentrasi larutan uji dengan presentase aktivitas antioksidan. Sampel Kuersetin Replikasi 2 FEAEEKJBP Replikasi 2 Seri Konsentrasi (µg/ml) Aktivitas Antioksidan (%) 2 22, , , , ,993 12,5 13, , , , ,487 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0,878 Nilai IC 50 (µg/ml) 5, ,695

16 67 Lampiran 6. Lanjutan... a. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Kuersetin 2 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi kuersetin (X) dengan presentase aktivitas antioksidan kuersetin (Y) diperoleh nilai a = 10,672 b = 6,634 dan r = 0,998 Y = bx + a 50 = 6,634 x + 10, ,672 = 6,634 x X = 5,928 µg/ml b. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (FEAEEKJBP) Replikasi 2 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi Fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (x) dengan presentase aktivitas antioksidan Fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (y) diperoleh nilai a= 15,751, b = 0,321, dan r = 0,953 Y = bx + a 50 = 0,321 x + 15, ,751 = 0,321 x X = 106,695 µg/ml 5. Perhitungan Aktivitas Antioksidan Fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (FEAEEKJBP) Replikasi 3 % Aktivitas Antioksidan = Abs kontrol Abs perlakuan x 100% Abs kontrol

17 68 Lampiran 6. Lanjutan... Sampel Seri Konsentrasi Absorbansi Aktivitas (µg/ml) sampel (nm) Antioksidan (%) Kuersetin Replikasi 3 2 0,698 20, ,586 33, ,448 48, ,382 56, ,242 72,437 FEAEEKJBP Replikasi 3 12,5 0,770 12, ,727 17, ,542 38, ,349 60, ,220 74,943 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0, Perhitungan Nilai IC 50 Replikasi 3 Nilai IC 50 diperoleh dari persamaan regresi linier Y = bx + a antara seri konsentrasi larutan uji dengan presentase aktivitas antioksidan.

18 69 Lampiran 6. Lanjutan... Sampel Kuersetin Replikasi 3 FEAEEKJBP Replikasi 3 Seri Konsentrasi (µg/ml) Aktivitas Antioksidan (%) 2 20, , , , ,437 12,5 12, , , , ,943 Nilai IC 50 (µg/ml) 6, ,507 Absorbansi kontrol (Larutan DPPH 0,1 mm) = 0,878 a. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Kuersetin Replikasi 3 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi kuersetin (X) dengan presentase aktivitas antioksidan kuersetin (Y) diperoleh nilai a = 8,200 b = 6,355 dan r = 0,995 Y = bx + a 50 = 6,355x + 8, ,200 = x + 6,355 X = 6,577 µg/ml b. Hasil Perhitungan Nilai IC 50 Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih Replikasi 3 Persamaan regresi linier Y= bx + a antara seri konsentrasi fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (x) dengan presentase aktivitas

19 70 Lampiran 6. Lanjutan... antioksidan fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih (y) diperoleh nilai a= 14,655, b = 0335, dan r = 0,944 Y = bx + a 50 = 0,335 x + 14, ,655 = 0,335 x X = 105,507 µg/ml b. Hasil rerata dan standar deviasi uji aktivitas antioksidan fraksi etil asetat ekstrak etanol kulit jeruk bali putih Sampel Replikasi Persamaan Regresi Linier y = bx + a 1 50 = 0,323 x + 15,248 r 2 = 0,927 r = 0,963 IC 50 (µg/ml) 107,591 IC 50 (µg/ml) ± SD Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih 2 3 y = bx + a 50 = 0,321 x + 15,751 r 2 = 0,908 r = 0,953 y = bx + a 50 = 0,335 x + 14,655 r 2 = 0,891 r = 0, , , ,597 ± 1,045 1 y = bx + a 50 = 5,449 x + 19,168 r 2 = 0,998 r = 0,999 5,658 Kuersetin 2 y = bx + a 50 = 6,634 x + 10,672 r 2 = 0,996 r = 0,998 5,928 6,054 ± 0,472 3 y = bx + a y= 6,355 x + 8,200 r 2 = 0,990 r = 0,995 6,577

20 71 Lampiran 6. Lanjutan... c. Hasil Perhitungan Penetapan Kadar Flavonoid Total Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih Replikasi Absorbansi Flavonoid Total (mgeq/gram) ekstrak Replikasi I 0,420 60,20 Replikasi II 0,415 59,22 Replikasi III 0,404 57,06 Rata- rata kadar 58,83 flavonoid total

21 Lampiran 7. Panjang Gelombang DPPH 72

22 Lampiran 8. Penentuan Panjang Gelombang Kuersetin 73

23 Lampiran 9. Penentuan Operating Time Kuersetin 74

24 Lampiran 10. Penentuan Operating Time DPPH 75

25 76 Lampiran 11. Penentuan Persentase Aktivitas Antioksidan Kuersetin a. Replikasi 1

26 77 Lampiran 11. Lanjutan b. Replikasi 2

27 78 Lampiran 11. Lanjutan c. Replikasi 3

28 Lampiran 12. Penentuan Persentase Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih 79

29 80 Lampiran 13. Penentuan Kurva Baku Kuersetin a. Replikasi 1

30 81 Lampiran 13. Lanjutan b. Replikasi 2

31 82 Lampiran 13. Lanjutan c. Replikasi 3

32 Lampiran 14. Penetapan Kadar Flavonoid Total 83

33 84 Lampiran 15. Dokumentasi Penelitian Penimbangan Kulit Jeruk Bali Putih Pengovenan Kulit Jeruk Bali Putih pada suhu 50 0 C Pengecekan Kadar Air Perkolasi Fraksinasi Larutan Stok Kuersetin

34 85 Lampiran 15. Lanjutan Larutan Uji Fraksi Etil Asetat Larutan DPPH dan Kuersetin Ekstrak Etanol Kulit Jeruk Bali Putih dan DPPH