Lampiran 1 Data Rendemen Pelet Kapang Endofit Xylaria psidii KT30. Berat sampel (pelet) setelah sentrifugase: 0,223 gram

Transkripsi

1 LAMPIRAN 29

2 30 Lampiran 1 Data Rendemen Pelet Kapang Endofit Xylaria psidii KT30 1) Kultur 1 Volume kultur awal : 350 ml Volume setelah penyaringan : 300 ml ph awal sebelum ekstraksi : 4,31 Berat sampel (pelet) setelah sentrifugase: 0,223 gram Rendemen : Berat pelet setelah disentrifuse Volume setelah penyaringan X 100% = 0, X 100% = 0,074% 2) Kultur 2 Volume kultur awal : 300 ml Volume setelah penyaringan : 290 ml ph awal sebelum ekstraksi : 4,42 Berat sampel (pelet) setelah sentrifugase: 0,237 gram Rendemen : Berat pelet setelah disentrifuse Volume setelah penyaringan X 100% = 0, X 100% = 0,088% 3) Kultur 3 Rendemen : 0,1850 % 4) Kultur 4 Rendemen : 0,0658 % 5) Kultur 5 Rendemen : 0,0390 %

3 31 Lampiran 2 Data Hasil Uji Senyawa Bioaktif pada Sel Chang Protein kasar % Inhibisi Protein Kasar df Square F Sig. Between Groups Within Groups Total Duncan % inhibisi protein kasar Perlakuan N DOXO ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm kontrol sel sig Fraksi F3.1 % Inhibisi F3.1 Df Square F Sig. Between Groups Within Groups Total

4 32 Duncan % inhibisi F3.1 Perlakuan N DOXO ppm ppm ppm ppm ppm kontrol sel ppm ppm ppm sig Fraksi F3.2 % Inhibisi F3.2 Square F Sig. df Between Groups Within Groups Total Duncan % inhibisi F3.2 Perlakuan N DOXO ppm ppm kontrol sel ppm ppm ppm ppm ppm ppm sig

5 33 Fraksi F4 % Inhibisi F4 df Square Between Groups Within Groups Total F Sig Duncan % inhibisi F4 Perlakuan N DOXO ppm ppm ppm kontrol sel ppm ppm ppm ppm ppm sig Kontrol Positif (Doxorubicin) OD 1 OD 2 OD 3 Rerata % Inhibisi DOXO 0, 045 0,037 0,048 0,04 72,52

6 34 Lampiran 3 Data Hasil Uji Senyawa Bioaktif pada Sel HeLa Data Hasil Uji Senyawa Bioaktif pada Sel HeLa Protein kasar % Inhibisi HeLa protein kasar Square F Sig. df Between Groups Within Groups Total Duncan % inhibisi protei kasar Perlakuan N ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm kontrol sel sig Fraksi F3.1 Square F Sig. df Between Groups Within Groups Total

7 35 Duncan % Inhibisi F3.1 Perlakuan N ppm ppm ppm ppm ppm ppm Kontrol sel ppm ppm sig. 3 Fraksi F3.2 % Inhibisi Fraksi F3.2 Square F Sig. df Between Groups Within Groups Total Duncan Fraksi F3.2 Perlakuan N ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm Kontrol sel ppm sig

8 36 Fraksi F4 % Inhibisi F4 Square F Sig. df Between Groups Within Groups Total Duncan % inhibisi F4 Perlakuan N ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm kontrol sel sig Lampiran 4 Contoh Perhitungan Penentuan LC 50 Konsentrasi (ppm) Jumlah larva yang mati

9 37 Konsentrasi Log Persen (ppm) konsentrasi mortalitas Probit LC ,69 40,00 4, ,00 46,66 4, ,39 66,66 5, ,69 73,33 5,61 104,95 ppm 750 2,87 80,00 5, ,00 90,00 6,28 Pada ekstrak dengan konsentrasi 1000 ppm Persen mortalitas = Jumlah Artemia yang mati Jumlah populasi Mortalitas Probit = 27/30 x 100 % = 90% y = 1.094x R² = Log Konsentrasi Dari grafik hubungan antara log konsentrasi (sumbu x) dengan nilai probit sumbu y didapatkan persamaan Y= 1,094X + 2,789 Penentuan LC50 (Konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian sebesar 50% 50% nilai probit (y) = 5 (dilihat dari table probit (lampiran 5) anti log dari x =2,021 LC 50 = 104,95 ppm X = log konsentrasi Y = 1,094X + 2,789 5 = 1,094X + 2,789 X= (5-2,789)/1,094 X= 2.021

10 38 Lampiran 5 Tabel Analisis Probit Lampiran 6 Morfologi sel Chang dan sel HeLa Sel Chang Sel HeLa 7 ppm 30 ppm

11 39 Sel Chang Sel HeLa 16 ppm 60 ppm 32 ppm 90 ppm 75 ppm 180 ppm 150 ppm 270 ppm

12 40 Sel Chang Sel HeLa 250 ppm 360 ppm 500 ppm 720 ppm 1000 ppm 1080 ppm Kontrol sel Kontrol sel

13 41 Lampiran 6 kurva standar marker elektroforesis LMW ( ) BM Log BM Jarak migrasi cm Band cm Rf Phosphorylase b ,9 0,5 0, Albumin ,9 1,0 0, Carbonic anhydrase ,9 2,7 0, Trypsin inhibitor ,9 3,6 0, α-lactalbumin ,9 4,4 0, Log BM y = -1,043x + 5,24 R² = 0, Rf Lampiran 7 Komposisi gel dan pereaksi untuk elektroforesis 1. Larutan A (30% (w/v) akrilamid; 8% (w/v) bis akrilamid) Sebanyak 14,6 gram akrilamid dan 0,4 gram bis akrilamid dilarutkan dalam50 ml, kemudian diaduk dengan pengaduk magnetik hingga larut homogen 2. Larutan B (bufer gel pemisah, Tris-HCl 2M, ph 7,4 Sebanyak 75 ml larutan TrisCl ph 7,4 dan 4 ml larutan SDS 10% (b/v) ditambahkan dengan akuades hingga volume total 100 ml 3. Larutan C (bufer gel penahan, TrisCl 1 M ph 7,4) Sebanyak 50 ml larutan TrisCl ph 7,4 dan 4 ml larutan SDS 10% w/vditambahkan dengan akuades hingga volume total 100 ml 4. Amonium persulfat 10% (b/v) Sebanyak 0.1 gram amonium persulfat dilarutkan dalam 1 ml akuades 5. Bufer elektroforesis Sebanyak 1,803 gr Trisbase ; 8,648 gr glisin dan 0,6 gr SDS dilarutkan dalam 600 ml akuades; lalu ditera hingga ph 7,4 dengan HCl.

14 42 6. Bufer sample SDS PAGE : 0,3 ml TrisCl 1 mm ph 7,4; 2,5 ml gliserol 50% (v/v); 1,0 ml SDS 10% (b/v); 0.25 ml 2-merchaptoethanol; 0.5 ml bromfenol biru 1% (b/v) dan 0,4 ml akuades.