III. BAHAN DAN METODE. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Lapangan Terpadu Fakultas Pertanian

Transkripsi

1 25 III. BAHAN DAN METODE 3.1 Tempat da Waktu Peelitia Peelitia ii dilaksaaka di Laboratorium Lapaga Terpadu Fakultas Pertaia Uiversitas Lampug da Laboratorium Beih da Pemuliaa Taama Uiversitas Lampug pada bula September 2013 sampai dega Jauari Perbayaka virus dilakuka di Kampug Baru, Badar Lampug. 3.2 Baha da Alat Baha yag diguaka pada peelitia ii adalah alkohol 70%, zeolit, air, Furada 3 G, fugisida berbaha aktif macozeb 80%, isektisida berbaha aktif delhtametri 25 g/l, aquades, buffer fosfat, Urea 50 kg/ha, SP kg/ha, KCl 100 kg/ha, da pupuk kadag 10 to/ha. Beih yag diguaka yaitu 100 butir dari populasi F 2 geotipe omor lima hasil persilaga Taggamus x B 3570, da masig-masig 20 taama utuk tetua kedelai yag terdiri dari varietas Taggamus da galur B Alat yag diguaka pada peelitia ii yaitu mortal, alu, had sprayer, mistar, gutig, sugkup, cagkul, sabit, koret, golok, kapsack sprayer, polybag, cotto bud, botol aqua, gelas ukur, timbaga aalitik, sabit, jarig, bambu, gembor, katug, da tali rafia.

2 26 Taggamus x B 3570 merupaka hasil persilaga dega metode dialel setegah yag dilakuka oleh Maimu Barmawi dega megguaka lima tetua yaitu Taggamus, Taichug, Orba, B 5370, da Yellow Bea yag kemudia peelitia tersebut dilajutka oleh Putri (2013) da Jamil (2013) utuk megetahui tigkat ketahaa populasi F 1 terhadap ifeksi soybea mosaik virus. 3.3 Metode Peelitia Utuk mejawab pertayaa dalam perumusa masalah da utuk meguji hipotesis maka racaga perlakua yag diguaka yaitu racaga perlakua terstuktur bersarag da racaga percobaa tapa ulaga. 3.4 Aalisis Data Meurut Suharsoo dkk.,(2006 ), ragam feotipe ( ) ditetuka dega rumus : σ 2 f = keteraga: σ 2 f = varias feotipe Xi = ilai pegamata taama ke i µ = ilai tegah populasi N = jumlah taama yag diamati Ragam ligkuga ( ) ditetuka dega rumus : σ 2 e = Keteraga: σ p1 = simpaga baku tetua 1 σ p2 = simpaga baku tetua = jumlah taama tetua (Suharsoo dkk., 2006).

3 27 Populasi tetua secara geetik adalah seragam sehigga ragam geotipeya ol. Oleh karea itu, ragam feotipe yag diamati pada populasi tetua sama dega ragam ligkuga. Tetua da populasi keturuaya ditaam pada ligkuga yag sama maka ragam ligkuga tetua sama dega ragam ligkuga populasi keturua. Dega demikia ragam geetik (σ 2 g) dapat dihitug dega rumus : σ 2 g = σ 2 f - σ 2 e Keteraga : σ 2 p = ragam feotipe σ 2 e = ragam ligkuga (Suharsoo dkk., 2006) Meurut Aderso da Bacrof (1952) yag dikutip Wahdah (1996) keragama feotipe dikataka luas apabila keragama feotipeya lebih besar dua kali dari stadar deviasiya, sedagka keragama feotipe dikataka sempit apabila lebih kecil dua kali stadar deviasiya. Berdasarka kriteria keragama tersebut, diguaka rumus peghituga simpaga baku ( ) berdasarka Walpole (1992) : = Keteraga: = simpaga baku Xi = ilai pegamata ke i µ = ilai tegah populasi N = jumlah yag diamati

4 28 Aalisis korelasi dihitug megguaka rumus : r = 2 x i xiyi ( i 1 i 1 i 1 2 i 1 i 1 i 1 i 1 xi xi)( y 2 i yi) yi 2 Keteraga: r = ilai korelasi atara peubah x da y = jumlah pegamata xi = ilai variabel x pada taama ke-i yi = ilai variabel y pada taama ke-i Utuk meetuka ada atau tidakya korelasi, dilakuka dega megguaka rumus: t = r XY ( 2) (1 r 2 XY ) apabila t hit > t tabel terdapat korelasi, pada α = 0,05 Nilai tegah populasi Keteraga: NT Xi = ilai tegah = pegamata taama ke i = jumlah pegamata Pegamata dilakuka pada tiap idividu taama, karea beih yag diguaka merupaka beih F 2 yag masih megalami segregasi (Baihaki, 2000).

5 Pelaksaaa Peelitia Pembuata Laruta Buffer Fosfat Pembuata laruta buffer fosfat dilakuka deg meyiapka KH 2 PO 4 (laruta A: 1,36 g), Na 2 HPO 4.2H 2 O (laruta B: 1,78 g) da akuades sebayak 2 liter. Alat yag diguaka adalah timbaga elektrik, dua buah gelas ukur berukura 1000 ml da satu buah berukura 500 ml, pegaduk, da botol berukura 2 liter. Pembuata buffer fosfat dapat dilakuka dega meimbag 1,36 g KH 2 PO 4 da 1,78 g Na 2 HPO 4.2H 2 O. Pembuata laruta A dilakuka dega meimbag 1,36 g KH 2 PO 4 da dilarutka ke dalam satu liter akuades. Pembuata laruta B dilakuka dega meimbag 1,78 g Na 2 HPO 4.2H 2 O, kemudia dilarutka ke dalam satu liter akuades. Satu liter buffer fosfat diperoleh dega cara mecampur 510 ml laruta A da 490 ml laruta B, kemudia dimasukka ke dalam botol da da ditutup rapat Perbayaka Iokulum SMV Perbayaka iokulum megguaka beih kedelai varietas Orba karea merupaka beih yag agak reta terhadap virus. Kegiata pertama yag dilakuka utuk perbayaka iokulum SMV yaitu pembuata sap/ekstrak dau. Sap dibuat dega cara meggerus dau kedelai yag telah terifeksi sebayak 5 g dega megguaka mortal da alu yag diecerka dega buffer fosfat ph 7 sebayak 5 ml.. Selama peggerusa dau, berbagai metabolit da debris dari sel dau aka terlepas secara bersamaa dega virus. Beberapa seyawa tersebut dapat merusak virio atau dapat meghambat keifektifa virus. Oleh

6 30 sebab itu pegguaa laruta buffer fosfat ii bertujua utuk mejaga kestabila virus da keifektifa virus tersebut. Iokulasi secara mekaik dilakuka sesuai dega prosedur Aki (2006) yaitu setelah dau berjumlah lebih dari 4 helai atau berumur 10 hari. Selajutya, dau taama kedelaiditaburi zeolit agar terjadi luka mikro (sublethal woudig or abrasi). Lagkah berikutya sab dioleska pada permukaa dau da di lakuka pecucia dega aquades yag disemprotka megguaka had sprayer Persiapa Laha Persiapa laha dilakuka dega megguaka cagkul utuk memperbaiki sifat fisik taah da utuk membersihka gulma. Kemudia taah tersebut dicampur dega pupuk kadag secara merata utuk meigkatka kesubura taah Peaama Peelitia ii dilakuka dega meaam 100 beih F 2 hasil persilaga Taggamus x B 3570 pada petak percobaa berukura 3m x 4m. Taama tersebut ditaam dega jarak taam 20cm x 50cm. Jarak atarbaris 50 cm da jarak taama dalam baris 20 cm. Pada setiap baris ditaam 15 beih yag sama da tetua terdapat pada baris terluar.

7 31 4m 3m 2m F 2 P 1 P 2 Gambar 1. Tata letak peaama beih kedelai hasil persilaga Taggamus x B 3570 da kedua tetuaya Keteraga : P1 (tetua Taggamus), P2 (tetua galur B 3570 ), da F2 (populasi F 2 persilaga Taggamus x B 3570 ) Pemupuka Pemupuka Urea dilakuka dua kali yaitu pada awal taam da pada fase geeratif sedagka KCl da SP-36 dilakuka pada awal taam ketika taama berumur dua miggu setelah taam. Pupuk yag diaplikasika yaitu KCl 100 kg/ha, SP kg/ha, da Urea 50 kg/ha. Pupuk diaplikasika dega jarak 5 cm dari lubag taam taama kedelai.

8 Iokulasi Soybea Mosaic Virus di Lapaga Taama kedelai yag sudah memiliki dau terbuka sempura (7 10 HST) dapat diiokulasi dega sap yag megadug SMV. Pada dau sebelumya telah ditaburi zeolit. Setelah dau diokulasi, dau tersebut dicuci kembali dega aquades secukupya megguaka had sprayer. Gambar 2. Tahap-tahap iokulasi soybea mosaik virus di lapaga Pelabela Masig-masig taama diberi label seperti taggal iokulasi utuk mempermudah dalam pegamata Perawata da Pemeliharaa Taama Perawata da pemeliharaa taama meliputi peyulama taama yag mati, peyiaga gulma, peyirama, pegedalia hama da peyakit, memperbaiki

9 33 label yag rusak, da paraet yag rusak/bergeser. Peyiaga gulma dilakuka secara mekais yaitu megguaka koret. Peyemprota dega isektisida da fugisida dilakuka sesuai dega kebutuha. Isektisida yag diguaka yaitu Decis da fugisida yag diguaka yaitu Dithae. Peyirama dilakuka pada sore hari dega megguaka gembor da selag Pemaea Ciri-ciri umum taama kedelai yag siap pae yaitu polog berwara kuig kecoklata secara merata da matag. Pemaea dilakuka dega memae taama kedelai secara utuh dega mecabut satu per satu taama, kemudia dimasukka ke dalam katog pae yag telah diberi label Pegamata Pegamata yag dilakuka pada peelitia ii terdiri atas pegamata sebelum pae da pegamata setelah pae. Pegamata sebelum pae meliputi: a. Periode ikubasi, dihitug dari waktu iokulasi sampai dega timbulya gejala (Mulia, 2008). b. Keparaha peyakit, diamati miggu ke eam setelah taam da dilakuka pegamata pada dau trifoliat sebayak 10 dau pada batag utama. Hal ii dilakuka karea pada umur eam miggu setelah taam, jumlah dau trifoliat yag ada pada batag utama dau. Diharapka 10 dau yag diamati telah mewakili seluruh dau trifoliat yag terifeksi SMV da pegamata dilakuka pada setiap idividu taama Mulia (2008).

10 34 KP = x 100% Keteraga: KP : Keparaha peyakit N : Jumlah sampel yag diamati Z : Nilai skor tertiggi : Jumlah sampel utuk kategori seraga v : Nilai skor utuk kategori seraga Meurut Aki (2006), gejala seraga setiap jeis virus yag mucul memiliki ricia sebagai berikut: A B C D E Gambar 3. Skor gejala peyakit Keteraga : Tidak bergejala = 0 (A), klorosis da tulag dau memucat = 1 (B), mosaik dega klorosis pada tulag dau da permukaa dau = 2 (C), mosaik berat, klorosis da terjadi pembegkoka pada permukaa dau, dau melegkug ke bawah atau ke atas = 3 (D), da malformasi dau = 4 (E).

11 35 Kategori ketahaa keparaha peyakit (%): 1 10 = Sagat taha = Taha = Agak taha = Agak reta = Reta = Sagat reta (Aki, 2013 komuikasi pribadi). Pegamata yag dilakuka setelah pae meliputi: a. Tiggi taama, diukur dari pagkal batag sampai titik tumbuh taama. Pegukura dilakuka setelah pae. b. Jumlah cabag produktif, dihitug berdasarka jumlah cabag yag dapat meghasilka polog. c. Total jumlah polog, dihitug berdasarka jumlah polog yag mucul pada setiap taama. d. Jumlah polog beras, dihitug berdasarka jumlah polog beras per taama. e. Jumlah polog hampa, dihitug berdasarka jumlah polog hampa per taama. f. Total jumlah biji, dihitug berdasarka jumlah total biji per taama. g. Persetase biji sehat, (jumlah biji sehat/total biji) x 100%. h. Persetase biji sakit, (jumlah biji sakit/total biji) x 100%. i. Bobot 10 butir biji per taama, diamati setelah dikerigagika sekitar 3 miggu setelah pae (g) sampai bobot kosta. j. Bobot biji per taama, dega cara meimbag biji setiap taama. k. Umur berbuga, dihitug sejak taam sampai taama mucul buga pertama. l. Umur pae, dihitug sejak taam sampai taama siap utuk dipae.