KARAKTERISASI PRONIOSOM IBUPROFEN-SPAN 60-KOLESTEROL YANG DIBUAT DENGAN PELARUT PROPANOL DAN FASE AIR GLISEROL 0,1%

Transkripsi

1 KARAKTERISASI PRONIOSOM IBUPROFEN-SPAN 60-KOLESTEROL YANG DIBUAT DENGAN PELARUT PROPANOL DAN FASE AIR GLISEROL 0,1% Tutiek Purwanti 1*, Dewi Melani 1, Rio Pranata Hardjakusuma 1 1 Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Jl. Dharmawangsa Dalam Selatan, Surabaya *Corresponding author: tutiek_purwanti@yahoo.com ABSTRACT The aim of this study was to determine characteristic of ibuprofen which consist of ibuprofen - Span 60 - cholesterol with molar ratio 2:1:0,75, 2:1:1, and 2:1:1,25. There were three formula this study. Evaluation of each formula were included by organoleptics (odor, colour, and consistency), proniosome morphology using light microscope, niosome morphology using Scanning Electron Microscope (SEM), niosome size used Particle Analyzer, and drug entrapment. Results of organoleptic tests were formula had propanol odor, white colour, and solid consistency. Evaluation used light microscope at 1000x magnification showed spherical shapes that had light edges. The next observation was Scanning Electron Microscope (SEM) up to 40000x magnification. Niosome size resulted 692 nm (formula I), 957,6 nm (formula II), and 1152,3 nm (formula III), for % drug entrapment, the result was 91,91 ± 1,12 (formula I), 88,41 ± 3,10 (formula II), and 89,84 ± 1,71 (formula III). The best formula was formula I because of smallest size, biggest entrapment, and high homogenity than other formula. Keywords (s): Proniosome, Ibuprofen, Organoleptics, Drug Entrapment, Niosome Size. ABSTRAK Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik ibuprofen span 60 kolesterol dengan perbandingan molar 2:1:0,75, 2:1:1, dan 2:1:1,25. Ada tiga formula pada penelitian ini. Pada setiap formula dilakukan evaluasi, antara lain : organoleptis (bau, warna, dan konsistensi), morfologi proniosom dengan mikroskop cahaya, morfologi niosom dengan Particle Analyzer, dan uji efisiensi penjebakan. Hasil uji organoleptis adalah formula yang memiliki bau propanol, warna putih, dan konsistensi padat. Morfologi niosom dengan mikroskop (1000x) menunjukkan bentuk bulat. Pengamatan berikutnya dengan Scanning Electron Microscope (SEM) hingga 40000x pembesaran. Ukuran niosom menghasilkan 692 nm (formula I), 957,6 nm (formula II), dan 1152,3 nm (formula III), untuk % efisiensi penjebakan diperoleh hasil 91,91 ± 1,12 (formula I), 88,41 ± 3,10 (formula II), and 89,84 ± 1,71 (formula III). Formula terbaik adalah formula I karena memiliki ukuran terkecil, efisiensi penjebakan terbesar dibandingkan formula lainnya. Kata Kunci : Proniosom, Ibuprofen, Organoleptis, Efisiensi Penjebakan, Ukuran niosom

2 PENDAHULUAN Ibuprofen merupakan salah satu obat golongan Non Steroidal Anti Inflammatory Drugs (NSAIDs) turunan asam propionat yang memiliki aktivitas poten sebagai antiinflamasi, antipiretik (Sweetman, 2009; Potthast et al., 2005). Obat ini banyak digunakan untuk mengatasi nyeri ringan sampai sedang, terutama yang berhubungan dengan sendi seperti osteoarthritis, rheumatoid arthritis (Sweetman, 2009; Potthast et al., 2005) Efek samping yang terjadi apabila dikonsumsi secara per oral yaitu nausea, vomiting, pendarahan saluran cerna, dan peptic ulcer. Untuk mengatasinya, maka dilakukan formulasi dalam bentuk sediaan topikal dengan rute transdermal. Rute transdermal diharapkan dapat meningkatkan kenyamanan, serta mempertahankan kadar obat dalam plasma (Kumar et al., 2012). Untuk membuat sediaan topikal yang optimal, bahan aktif harus mudah larut, sedangkan ibuprofen sendiri agak sukar larut (Potthast et al., 2005) sehingga efek terapi yang dihasilkan kurang optimal. Untuk mengoptimalkannya dapat diformulasi dengan sistem proniosom. Proniosom ini merupakan suatu sistem penghantaran berbasis surfaktan non ionik, yang bila dihidrasi akan segera membentuk sistem niosom (Kumar et al.,2012; Sudhamani et al., 2010). Sistem proniosom dalam bentuk semisolid (liquid crystal gel atau proniosomal gel) diperoleh dengan metode Coaservation Phase Separation (K.Sumit et al., 2012). mengurangi efek samping,

3 Karakteristik proniosom Penelitian ini dilakukan dengan dipengaruhi oleh surfaktan, pelarut, jumlah kolesterol, dan perbandingan molar. Jenis surfaktan yang digunakan adalah span 60 karena mempunyai efisiensi penjebakan terbesar dibandingkan span jenis lain (Mokhtar et al., 2008). Pelarut yang digunakan adalah propanol karena dapat membentuk ukuran vesikel niosom yang tidak terlalu besar. Penambahan kolesterol diperlukan pada penelitian ini karena dapat meningkatkan stabilitas sistem proniosom (Singla et al., 2012). Perbandingan molar yang digunakan adalah ibuprofen span 60 - kolesterol 2:1:0,75, 2:1:1 dan 2:1:1,25 dengan pelarut propanol dan fase air gliserol 0,1%, digunakan perbandingan molar di atas karena berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Kumar et al.,2012 mampu menghasilkan efisiensi penjebakan yang cukup besar. tujuan untuk mengetahui karakteristik proniosom yang meliputi organoleptis (warna, bau dan konsistensi), morfologi proniosom dengan mikroskop cahaya, morfologi niosom menggunakan mikroskop cahaya dan Scanning Electron Microscop (SEM), ukuran niosom dengan Particle Analyzer, serta efisiensi penjebakan. Melalui penelitian ini, diharapkan terbentuk proniosom dengan karakteristik yang baik, antara lain aseptabel, apabila dihidrasi akan terbentuk vesikel niosom yang sferis, kecil dan seragam, serta mempunyai efisiensi penjebakan yang besar. METODE PENELITIAN Bahan. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini apabila tidak disebutkan lain, memiliki derajat kemurnian pharmaceutical grade. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain Ibuprofen (Shasun Chemical and Drugs Ltd., India), Span 60 (Sigma),

4 kolesterol (Sigma), propanol p.a (Brataco) dan Aqua DM (Brataco). Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan larutan dapar fosfat antara lain Na 2 HPO 4 dan NaH 2 PO 4.1H 2 O dengan kualitas proanalisis. Alat. Alat-alat yang digunakan dalam sebanyak berat tertentu. Semua bahan yang telah ditimbang dimasukkan ke dalam vial yang bersih dan kering. Kemudian ditambahkan propanol ke dalam vial yang berisi campuran bahan, memasukkan magnetic stirrer. Vial ditutup, dipanaskan di atas hot plate penelitian ini antara lain: neraca pada suhu C lalu menyalakan analitik CHYO JP-160, alat uji suhu lebur Differential Thermal Analysis (DTA) SP 900 Thermal System Mettler Toledo SP 85, FT-IR Perkin Elmer Spectrum One, Ultrasonic LC60H Elma, Hotplate + Stirer Dragonlab MS- Pro, Sentifugasi, mikroskop cahaya Olympus BX41 dengan kamera stirer dengan kecepatan 300 rpm sehingga semua bahan terlarut sempurna (terbentuk larutan jernih). Selanjutnya ditambah gliserin 0,1% ke dalam larutan, mulai terbentuk larutan keruh sambil tetap dipanaskan hingga homogen (±5 menit). Selanjutnya campuran didiamkan pada suhu ruang Olympus DP12, Scanning Electron hingga terbentuk gel yang padat. Microscopy (SEM) FEI INSPECT S50, Double Beam Spectrophotometer UV Shimadzu, Delsa Nano C Particle Analyzer Beckman Coulter, dan alat-alat gelas. Pembuatan Proniosom. Ditimbang Tabel 1. Formula Proniosom Bahan Formula I Formula II Formula III Ibuprofen Span Kolesterol 0,75 1 1,25 Gliserol 0,1% 175 µl 200 µl 225 µl Propanol 140 µl 160 µl 180 µl ibuprofen, span 60, dan kolesterol

5 Hasil Pemeriksaan Organoleptis. Hasil pemeriksaan organoleptis proniosom ibuprofen dapat dilihat pada tabel 2. Tabel 2. Pemeriksaan Organoleptis Proniosom Ibuprofen Formu Pengamatan la Konsistensi Warna Bau I Lunak, agak lembek Putih, agak bening II Lunak Putih III Lunak, agak lembek Putih, agak bening Bau propanol Bau propanol Bau propanol Pengamatan Morfologi Proniosom. Pengamatan morfologi proniosom menggunakan Particle Analyzer, dapat dilihat pada tabel 3. Tabel 3. Pemeriksaan Ukuran Niosom Formula Diameter (nm) Pengukuran Efisiensi Penjebakan Hasil uji efisiensi penjebakan dapat dilihat pada tabel 4. Polidispersity Index (PI) I 692 0,316 II 957,6 0,371 III 1152,3 0,413 Tabel 4. Hasil Pemeriksaan Efisiensi Penjebakan dilakukan dengan menggunakan mikroskop cahaya kemudian dilakukan pemotretan dan Scanning Electron Microscopy (SEM). Pemeriksaan Ukuran Niosom. Hasil pemeriksaan ukuran niosom dengan Formula I (2 : 1 : 0,75) II (2 : 1 : 1) III (2 : 1 : 1,25) Berat (mg) Jumlah ibuprofe n tidak terjebak (mg) 26,4475 1, ,20 25,3309 2, ,34 25,7730 2, ,18 23,2437 2, ,87 24,9939 3, ,85 23,1039 2, ,50 21,4303 2, ,90 20,2224 1, ,12 23,1116 2, ,51 EP % Rata - rata 91,91 ± 1,12 88,41 ± 3,10 89,84 ± 1,71 Formula 1

6 PEMBAHASAN Ibuprofen merupakan senyawa obat golongan NSAID yang digunakan untuk mengatasi nyeri. Jika dikonsumsi secara per oral, ibuprofen mempunyai efek samping, antara lain : nausea, vomiting, pendarahan saluran cerna, dan peptic Formula 2 ulcer. Untuk mengatasinya, maka dilakukan formulasi dalam bentuk sediaan topikal. Untuk membuat sediaan topikal yang optimal, bahan aktif harus mudah larut, sedangkan ibuprofen sendiri agak sukar larut Formula 3 sehingga efek terapi yang dihasilkan kurang optimal. Untuk mengoptimalkannya dapat diformulasi dengan sistem proniosom. Pada awal penelitian dilakukan pemeriksaan kualitatif bahan-bahan yang akan digunakan, antara lain ibuprofen, span 60, dan kolesterol. Pemeriksaan ini bertujuan untuk menjamin bahan yang digunakan telah sesuai dengan pustaka. Pemeriksaan

7 kualitatif ibuprofen dilakukan melalui tiga cara, antara lain organoleptis, penentuan suhu lebur dan spektra inframerah. Ibuprofen yang digunakan memiliki organoleptis sesuai dengan pustaka yaitu serbuk berwarna putih. Pada pemeriksaan dengan DTA diperoleh suhu lebur sebesar 79,7 C, mendekati suhu lebur yang tercantum dalam pustaka yaitu C. Hasil identifikasi spektra infra merah ibuprofen dengan teknik pellet KBr menunjukkan gambar spektra yang identik antara sampel dan pustaka (spektra dapat dilihat pada gambar 5.1 dan 5.2). Pemeriksaan span 60 secara kualitatif dilakukan melalui organoleptis dan penentuan suhu lebur. Span 60 memiliki organoleptis yang sesuai dengan pustaka, yaitu granul berwarna putih kekuningan dan berbau spesifik. Pemeriksaan dengan DTA diperoleh suhu lebur sebesar 59,3 C, mendekati suhu lebur yang tercantum dalam pustaka yaitu C. Begitu pula dengan pemeriksaan kualitatif terhadap kolesterol meliputi organoleptis dan suhu lebur. Kolesterol yang digunakan memiliki organoleptis sesuai dengan pustaka, antara lain serbuk berwarna putih dan hampir tidak berbau. Pemeriksaan dengan DTA diperoleh suhu lebur sebesar 149,0 C, masuk dalam rentang suhu lebur yang tercantum dalam pustaka yaitu C. Jadi dapat disimpulkan semua bahan yang digunakan untuk penelitian telah sesuai dengan pustaka. Tahap berikutnya adalah pembuatan larutan baku ibuprofen untuk menentukan kurva baku. Setelah larutan baku kerja ibuprofen siap, dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum ibuprofen menggunakan kadar 11,00 dan 33,00 µg/ml sehingga diperoleh panjang gelombang maksimum pada 222 nm. Selanjutnya

8 dilakukan pemeriksaan absorban bahan tambahan untuk mengetahui apakah bahan tambahan dapat mengganggu absorban ibuprofen saat pengukuran dengan spektrofotometer UV-Vis. Dari spektra (gambar 5.7), tampak bahwa bahan tambahan memberikan absorban yang relatif besar. Untuk meminimalkannya, dilakukan pengukuran absorban ibuprofen menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan metode tiga panjang gelombang. Panjang gelombang maksimum ibuprofen sebagai λ2, kemudian ditentukan λ1 dan λ3 pada panjang gelombang yang memberikan absorban ibuprofen yang besar namun memiliki absorban matriks yang rendah, minimal 10 nm di atas dan di bawah λ2. Dengan demikian, dipilih panjang gelombang 212 nm, 222 nm dan 232 nm sebagai tiga panjang gelombang analitik. Selanjutnya dilakukan penentuan kurva baku ibuprofen dalam larutan dapar fosfat ph 6,0 ± 0,05 sehingga diperoleh persamaan regresi y = 0,0157x + 2, , koefisien korelasi 0, Harga koefisien korelasi (r) hitung lebih besar dari r tabel (0,878) untuk n =5 dan derajat kepercayaan 95%, hal ini menunjukkan terdapat hubungan yang linier antara peningkatan kadar ibuprofen dengan serapan. Tahap selanjutnya adalah pembuatan proniosom dengan metode Coaservation Phase Separation, digunakan metode ini karena akan menghasilkan struktur liquid crystalline berbentuk gel sehingga tepat untuk sediaan topikal (Kumar et al., 2012). Dibuat tiga macam formula, antara lain proniosom ibuprofen dengan perbandingan molar ibuprofen : span 60 : kolesterol 2 : 1 : 0,75 dengan pelarut propanol dan fase air gliserol 0,1% (formula I), perbandingan molar 2 : 1 : 1 (formula II), dan perbandingan molar 2 : 1 : 1,25 (formula III). Perbandingan

9 molar di atas digunakan karena berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Kumar et al.,2012 mampu menghasilkan efisiensi penjebakan yang cukup besar. Perbedaan ketiga formula di atas adalah pada jumlah kolesterol yang digunakan. Masing-masing formula dibuat tiga kali replikasi kemudian dilakukan evaluasi karakteristik yang meliputi organoleptis (konsistensi, warna, dan bau), morfologi proniosom, bentuk dan ukuran niosom, dan efisiensi penjebakan Dari hasil pemeriksaan organoleptis, formula I memiliki konsistensi lunak, berwarna putih dan berbau propanol, formula II memiliki konsistensi lunak dan lebih cair, berwarna putih dan berbau propanol, formula III memiliki konsistensi lunak dan agak cair seperti formula II, berwarna putih dan berbau propanol. Pemeriksaan berikutnya adalah pengamatan morfologi proniosom dengan mikroskop cahaya perbesaran 1000x lalu dilakukan pemotretan dengan menggunakan kamera Olympus DP12, yang dapat dilihat pada gambar 5.9 (formula I), 5.10 (formula II), dan 5.11 (formula III). Pada hasil foto yang diperoleh, terlihat struktur liquid crystalline yang bervariasi dan berbentuk fase lamellar (berlapis-lapis), fase hexagonal, maupun fase cubic. Hal ini sesuai dengan teori yang terdapat dalam jurnal (Chavan et al., 2011). Variasi yang terbentuk kemungkinan dipengaruhi oleh kondisi pembuatan, jumlah kolesterol yang digunakan. Selanjutnya, dilakukan pemeriksaan morfologi niosom dengan mikroskop cahaya dan Scanning Electron Microscop (SEM). Sebelum melakukan pengamatan, terlebih dahulu dilakukan proses penghidrasian proniosom menjadi niosom dengan menambahkan larutan dapar fosfat. Pada pengamatan menggunakan mikroskop cahaya

10 Olympus BX41, preparasi penghidrasian dilakukan dengan mengoleskan sedikit proniosom pada gelas obyek, lalu ditetesi dengan dapar fosfat ph 6,0 ± 0,05. Pengamatan dilakukan pada perbesaran 1000x, kemudian dilakukan pemotretan dengan kamera Olympus DP12, hasil foto dapat dilihat pada gambar 5.13 (formula I), 5.14 (formula II), dan 5.15 (formula III). Terlihat vesikel niosom dalam jumlah cukup banyak dan sferis. Setelah mengamati vesikel niosom dengan mikroskop cahaya, tahap selanjutnya dilakukan pengamatan dengan Scanning Electron Microscop (SEM). Sebelum diamati, dilakukan proses penghidrasian proniosom terlebih dahulu dengan cara menimbang 0,05 gram proniosom dalam vial, lalu ditambah 5 ml dapar fosfat ph 6,0 dan disonikasi selama ± 20 menit. Niosom yang terbentuk didispersikan dalam HPC-M 5% dengan perbandingan 1:1, kemudian dioleskan tipis pada object glass dan dikeringkan. Sampel yang telah kering lalu dioleskan pada holder (stub). Selanjutnya holder tersebut dimasukkan ke dalam specimen chamber pada mesin SEM untuk dilakukan pengamatan dan pemotretan pada perbesaran 40000x. Hasil pemotretan dapat dilihat pada gambar 5.12, terlihat vesikel niosom yang berbentuk sferis. Tahap berikutnya, dilakukan pemeriksaan ukuran vesikel niosom dengan menggunakan Particle Analyzer. Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada gambar 5.16 (formula I), 5.17 (formula II), dan 5.18 (formula III), berdasarkan hasil pemeriksaan tersebut diperoleh ukuran niosom mulai dari formula I, II, dan III secara berturut-turut adalah 692 nm, 957,6 nm, dan 1152,3 nm. Formula I dengan jumlah kolesterol paling kecil ternyata memiliki ukuran yang paling kecil dibandingkan dengan formula II dan III

11 yang memiliki jumlah kolesterol lebih besar. Dari hasil pengamatan ini, dapat disimpulkan bahwa jumlah kolesterol mempengaruhi ukuran vesikel niosom yang terbentuk. Semakin besar jumlah kolesterol yang digunakan, maka ukuran vesikel niosom akan semakin besar sampai batas penambahan tertentu. Diperoleh pula data mengenai Polidispersity Index (PI) secara berturut-turut mulai dari formula I-III adalah 0,316, 0, 371, dan 0,413. Data ini menunjukkan ukuran niosom tidak seragam karena PI yang diperoleh > 0,3, niosom dinyatakan seragam apabila mempunyai PI < 0,3 (H.M El-Laithy et al., 2010), lebih baik lagi jika PI yang diperoleh mendekati 0,0. Evaluasi karakteristik berikutnya adalah uji efisiensi penjebakan dengan metode sentrifugasi. Dipilih metode sentrifugasi karena memerlukan waktu relatif singkat (Sudhamani et al., 2010) dan mampu menghasilkan efisiensi penjebakan relatif lebih besar dibandingkan metode dialisis dan filtrasi gel (Mokhtar et al., 2008). Setelah dilakukan perhitungan, diperoleh efisiensi penjebakan sebesar 91,91 ± 1,12 (formula I), 88,41 ± 3,10 (formula II), dan 89,84 ± 1,71 (formula III). Lalu dilakukan uji statistik dengan SPSS, berdasarkan hasil Analysis of Varians (ANOVA) one way diperoleh nilai F hitung (2,023) < nilai F 2,6 tabel (5,14) pada derajat kepercayaan 95% (α = 0,05). Hal ini menunjukkan perbedaan efisiensi penjebakan formula I, II, dan III tidak bermakna, sehingga untuk pemilihan formula yang paling efisien adalah formula I karena mempunyai jumlah kolesterol paling kecil (2 :1 : 0,75) tetapi mempunyai efisiensi penjebakan yang besar. Proniosom ibuprofen dengan karakteristik terbaik adalah proniosom yang memiliki efisiensi penjebakan yang besar, apabila dihidrasi menjadi

12 niosom akan berbentuk sferis dan berukuran kecil. Hal ini berkaitan dengan tujuan terapi ibuprofen sebagai anti inflamasi yang diharapkan mampu memberikan mula kerja cepat dan durasi panjang. Dengan ukuran niosom yang kecil, akan memiliki luas permukaan yang besar sehingga dapat meningkatkan kontak dengan stratum korneum kulit maka penetrasi obat menjadi maksimal dan mempercepat mula kerja obat. Efisiensi penjebakan yang besar dapat memberikan efek depo sehingga durasi kerja menjadi panjang. Berdasarkan beberapa evaluasi yang dilakukan di atas, dapat disimpulkan formula I (ibuprofen : span 60 : kolesterol 2 : 1 : 0,75) memiliki karakteristik terbaik karena efisiensi penjebakan yang besar (91,91 ± 1,12 %), ukuran niosom yang kecil (692 nm) dan memilliki PI 0,316 yang mendekati standar ukuran dinyatakan seragam (PI < 0,3). Dari pemeriksaan organoleptis, juga memiliki konsistensi lunak dan tidak terlalu padat sehingga aseptabel sebagai sediaan topikal. KESIMPULAN Pada pemeriksaan organoleptis, ketiga formula memiliki warna putih dan berbau propanol, tetapi memiliki konsistensi yang agak berbeda. Pada formula I dan III memiliki konsistensi lunak dan agak lembek, sedangkan formula II konsistensinya lunak dan lebih padat. Peningkatan jumlah kolesterol, pada masing-masing formula dapat meningkatkan ukuran niosom. Peningkatan jumlah kolesterol tidak mempengaruhi efisiensi penjebakan. Karakteristik proniosom terbaik adalah proniosom formula I dengan komposisi ibuprofen-span 60-kolesterol (2:1:0,75). DAFTAR PUSTAKA Ansel, H.C., Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4 th edition. Philadelphia : Lea and Febiger.

13 Biju, S.S., Talegaonkar, S., Mishra, P.R., and Khar, R.K., Vesicular systems : An overview. Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 68 pp Bodmeier. R., C.M Chang., Organic Solvent-free Polymeric Microspheres Prepared from Aqueous Colloidal Polymer Dispersion by W/O Emulsion Technique. International Journal of Pharmaceutics, 130, Chavan, P., Proniosomal Gel : A novel Approach for Transdermal Drug Delivery. International Journal of Pharmaceutical Research and Development (IJPRD). Vol 4(03). Maharashtra, India. Departemen Kesehatan RI, Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta : Departemen Kesehatan RI. Fessenden and Fessenden., Kimia Organik Edisi Ketiga. Jakarta : Erlangga. H.M. El-Laithy, Omar Shoukry, and Laila G., Novel Sufar esters proniosomes for transdermal delivery of vinpocetine: Preclinical and clinical studies. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. Cairo : Elsevier Hommoss, A., Nanostructured lipid carrier (NLC) in dermal and personal care formulations. Department of Biology, Chemistry, and Pharmacy of the Freie Universitat Berlin, Japanese Pharmacopoeia 16 th., Japan Kumar, G. P.,and Rajeshwarrao, P., Nonionic surfactant vesicular systems for effective drug delivery - an overview. Acta Pharmaceutica Sinica B, Vol 1. Issue 4, pp Kumar, S., Prajapati, S.K., Sahu, V.K., and Prakash, G., Proniosomal gel of flurbiprofen : Formulation and evaluation. Journal of Drug Delivery & Therapeutics, 2(1). Lachman, L., Lieberman, H.A., and Kanig J.L., Teori dan Praktek Farmasi Industri, Edisiketiga, Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia. Lieberman, H.A., Rieger, M.M., Banker, and Gilbert, S.B., Pharmaceutical Dosage Form : Disperse Systems.Vol. 3, 2 nd ed., New York :Marcell Dekker Inc., pp Lund, W. Eds., 1994.The Pharmaceutical Codex Principles and Practice of Pharmaceutics. 12 th Ed. London : The Pharmaceutical Press. Mishra, A., Kapoor, A., and Bhargava, S., 2011.Proniosomal gel as a carrier for improved transdermal drug-delivery.asian Journal of Pharmacy and Life Science, Vol. 1(4). Mokhtar, M., Sammour, O.A., Hammad, M.A., and Megraba, N.A., Effect of some formulation parameters on flurbiprofen encapsulationand release rates of niosomes prepared from proniosomes. International Journal of Pharmaceutics, 361 (2008) Muller, R.H., Hommos, and Pardeike, J Solid Lipid Nanoparticles (SLN, NLC) in Cosmetics and Pharmaceutical Dermal Products. International Journal of Pharmaceutics 366, p Rajput, S., Agrawal, P., Pathak, A., Shrivasatava, N., Baghel, S.S., and Baghel, R.S., Review on

14 microspheres : Methods of preparation and evaluation. World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Vol. 1 No.1, pp Rowe, R.C., Sheskey, P.J., and Quinn, M.E., Handbook of Pharmaceutical Excipients.6 th Ed. London : Pharmaceutical Press (PhP). Sankar, V., Ruckmani, K., Durga, S., and Jailani, S., Proniosomes as Drug Carriers.Pak. J. Pharm. Sci., Vol. 23, No. 1, pp Singla, S., Kumar, S.L.H., and Aggarwal, G., Proniosomes for penetration enhancement in transdermal system.international Journal of Drug Development and Research, 4(2) : Sudhamani, T., Priyadarisini, N., and Radhakrishnan, M., 2010.Proniosomes A promising drug carriers. International Journal of Pharm Tech Research, Vol.2, No.2, pp Sweetman, S.C., Martindale The Complete Drug Reference. 36 th Ed. London : Pharmaceutical Press (PhP). Tangri, P., and Khurana, S., Niosomes : formulation and evaluation. International Journal of Biopharmaceutic, Vol. 2(1), pp The Department of Health, British Pharmacopoeia. London Vora B, Ajay, Khopade., Proniosome based transdermal delivery of levonogestrel for effective contraception. Journal of Controlled Release 54,