IDENTIFIKASI OLIGOSAKARIDA MADU HUTAN GUNUNG TAMBORA SUMBAWA YOGI NUR ANGGOWO

Transkripsi

1 ISOLASI DAN IDENTIFIKASI OLIGOSAKARIDA MADU HUTAN GUNUNG TAMBORA SUMBAWA YOGI NUR ANGGOWO DEPARTEMEN BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012

2 ABSTRAK YOGI NUR ANGGOWO. Isolasi dan Identifikasi Oligosakarida Madu Hutan Gunung Tambora Sumbawa. Dibimbing oleh SYAMSUL FALAH dan WARAS NURCHOLIS. Isolat oligosakarida madu hutan Gunung Tambora Sumbawa telah terbukti memiliki aktivitas prebiotik. Aktivitas prebiotik tersebut diyakini berasal dari oligosakarida dengan DP 3-4. Namun, kandungan oligosakarida madu hutan Gunung Tambora Sumbawa belum pernah diteliti sebelumnya. Tujuan penelitian ini adalah mengisolasi dan mengidentifikasi oligosakarida madu dengan DP 3-4 serta mendapatkan optimasi metode dalam prosesnya. Preparasi sampel dilakukan dengan adsorpsi arang aktif dan pengadukan dalam etanol 10% untuk menghilangkan monosakarida serta etanol 50% untuk pemulihan oligosakarida. Deteksi dan isolasi oligosakarida dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) menggunakan campuran eluen butanol: asam asetat: air (3:1:1 v/v) dengan glukosa (DP 1) serta maltosa (DP 2) sebagai standar. Identifikasi dilakukan menggunakan Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) dengan glukosa, maltotriosa (DP 3), dan maltotetraosa (DP 4) sebagai standar. Preparasi oligoskarida menghasilkan 2.09% rendemen. Isolasi oligosakarida menghasilkan 3 spot dengan Rf berturut-turut: 0.38 (DP 1), 0.31 (DP 2), dan 0.22 (DP>2). Hasil identifikasi menunjukkan bahwa madu murni mengandung karbohidrat DP 1, DP 3, dan DP 4 berturut-turut , , dan (µg/ml) sedangkan isolat oligosakarida mengandung karbohidrat DP 1, DP 3, dan DP 4 berturut-turut , 95.03, dan (µg/ml).

3 ABSTRACT YOGI NUR ANGGOWO. Isolation and Identification of Oligosaccharides from Forest Honey of Mount Tambora Sumbawa. Under the direction of SYAMSUL FALAH and WARAS NURCHOLIS. Prebiotic activity of oligosaccharides isolated from the honey of Mount Tambora s forests in Sumbawa has been studied. This activity were strongly believed occured because of the oligosaccharides with DP 3-4. However, the oligosaccharides compounds of Mount Tambora s forests in Sumbawa have never been studied yet. The objectives of this study are to isolate and identify oligosaccharides with DP 3 and 4, and to obtain the optimum method of the process. The preparation of sample has been carried out through the activated charcoal separation by stirring process within 10% ethanol solution to remove the monosaccharides, and 50% ethanol solution to recover the oligosaccharides compounds. Detection and isolation process of oligosaccharides were carried out by using Thin Layer Chromatography (TLC) with buthanol: acetic acid: water (3:1:1 v/v) as an eluen solvent. Glucose (DP 1) and maltose (DP 2) were used as standards. Honey and isolated oligosaccharides samples were identified by using Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) with glucose, maltotriose (DP 3), and maltotetraose (DP 4) as a standard. Preparation of samples resulted in 2.09 % yields. Isolated oligosaccharides resulted in 3 spots with retention factors of 0.38 (DP 1), 0.31 (DP 2), and 0.22 (DP>2) respectively. Identified oligosaccharides showed that carbohydrates with DP 1, DP 3, and DP 4 are present in honey and Isolated oligosaccharides samples, respectively , , dan (µg/ml) in honey, and , 95.03, and (µg/ml) in isolated oligosaccharides samples.

4 ISOLASI DAN IDENTIFIKASI OLIGOSAKARIDA MADU HUTAN GUNUNG TAMBORA SUMBAWA YOGI NUR ANGGOWO Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada Departemen Biokimia DEPARTEMEN BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012

5 Judul skripsi : Isolasi dan Identifikasi Oligosakarida Madu Hutan Gunung Tambora Sumbawa Nama : Yogi Nur Anggowo NIM : G Disetujui Komisi Pembimbing Dr. Syamsul Falah, S.Hut, M.Si. Ketua Waras Nurcholis, M.Si. Anggota Diketahui Dr. I Made Artika, M.App.Sc. Ketua Departemen Biokimia Tanggal lulus:

6 PRAKATA Alhamdulillah, puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat dan karunia-nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian ini. Penelitian ini berjudul Isolasi dan Identifikasi Oligosakarida Madu Hutan Gunung Tambora Sumbawa. Kegiatan ini merupakan bagian dari pelaksanaan Program Kreativitas Mahasiswa Bidang Penelitian (PKM-P) yang didanai oleh Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi (DIKTI). Kegiatan penelitian sudah dilaksanakan di Laboratorium Penelitian Departemen Biokimia, FMIPA, IPB, dari bulan Juli 2010 hingga Maret Penulis mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr. Syamsul Falah, S.Hut, M.Si. selaku pembimbing utama, dan Bapak Waras Nurcholis, M.Si. selaku anggota yang telah memberikan saran, kritik, dan bimbingannya. Terima kasih kepada keluarga besar Biokimia atas semua kerja samanya, serta teman-teman di Biokimia angkatan 43 yang selalu memotivasi penulis, khususnya kepada Umul Karimah sebagai rekan seperjuangan yang sangat luar biasa peranannya dalam proses perencanaan, pengerjaan di Lab, serta penyusunan karya ilmiah ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada orang tua, kakak penulis, serta Emmi Kustianti beserta keluarga untuk semua dukungan dan doanya yang sangat berarti bagi penulis. Semoga seluruh bagian penelitian ini dapat memberikan manfaat bagi semua orang yang membacanya. Bogor, Januari 2012 Yogi Nur Anggowo

7 RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 29 November 1988 dari Ayah Mukadji dan Ibu Maryatun. Penulis merupakan anak ke-4 dari 4 bersaudara. Tahun 2006 penulis lulus dari SMAN 89 Jakarta dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru (SPMB). Penulis memilih Mayor Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Selama mengikuti perkuliahan, penulis juga aktif dalam kegiatan-kegiatan organisasi kemahasiswaan selama beberapa periode (CREBs periode 2007/2008). Penulis juga aktif mengikuti beberapa acara kepanitiaan di IPB seperti masa pengenalan departemen Biokimia 2008/2009. Penulis melakukan Praktik Lapang di Laboratorium Fisiologi Stress Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, Jalan Raya Bogor Km 46 Cibinong Bogor dengan judul Analisis Pertumbuhan Batang dan Kadar Klorofil Daun Tiga Jenis Tanaman Penghijauan untuk Penyerap Karbondioksida.