IDENTIFIKASI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK. (Mus musculus) (Pilot Study) SKRIPSI. Sarjana Kedokteran Gigi

Transkripsi

1 IDENTIFIKASI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ALGA COKLAT PADINA sp. TERHADAP MENCIT (Mus musculus) (Pilot Study) SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Kedokteran Gigi Dwi Fitrah Ariani B. J FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2015 i

2 IDENTIFIKASI EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ALGA COKLAT PADINA sp. TERHADAP MENCIT (Mus musculus) (Pilot Study) SKRIPSI Diajukan Kepada Universitas Hasanuddin Untuk Melengkapi Salah Satu Syarat Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Gigi Oleh : Dwi Fitrah Ariani B. J FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2015 ii

3 HALAMAN PENGESAHAN Judul : Identifikasi Efek Antiinflamasi Ekstrak Alga Coklat Padina sp. terhadap Mencit (Mus musculus) (Pilot Study) Oleh : Dwi Fitrah Ariani B. / J Telah Diperiksa dan Disahkan Pada Tanggal 03 September 2015 Oleh : Pembimbing Dr. drg. Asmawati, M. Kes. NIP Mengetahui, iii

4

5 Identifikasi Efek Antiinflamasi Ekstrak Alga Coklat Padina sp. terhadap Mencit (Mus musculus) (Pilot Study) ABSTRAK Latar belakang : Infeksi, rusaknya jaringan, ataupun gangguan respon imun merupakan faktor yang dapat menyebabkan terjadinya reaksi inflamasi pada gigi dan jaringan sekitarnya. Untuk mengurangi efek samping penggunaan obat farmasetik, maka diperlukan penelitian yang menggunakan prinsip back to nature untuk memanfaatkan potensi bahan alam sebagai sumber obat-obatan. Salah satu bahan alam yang memiliki aktivitas antiinflamasi yaitu alga coklat Padina sp. yang mengandung polisakarida, polyunsaturated fatty acid (PUFA), dan fukosantin. Tujuan : Untuk mengetahui efek antiinflamasi ekstrak alga coklat Padina sp. terhadap mencit. Metode : Penelitian merupakan penelitian eksperimental dengan metode Pretest and Post Test Control Group Design. Sampel penelitian adalah mencit jantan dengan berat g sebanyak 15 ekor. Pengujian efek antiinflamasi menggunakan metode uji hambat radang yang disebabkan oleh iritan pada kaki mencit. Mencit dibagi ke dalam tiga kelompok perlakuan (n=5). Kelompok 1 kontrol negatif yaitu NaCMC 1%, kelompok 2 kontrol positif yaitu sodium diklofenak 0,35mg/35g BB, dan kelompok 3 diekstrak dengan metanol dan Padina sp. dengan dosis 7mg/35g BB. Setelah 30 menit diinjeksikan bahan uji, pepton 1% sebanyak 0,05 ml diinjeksikan pada daerah subplantar kaki kiri masingmasing mencit. Setelah jam pertama, kedua, ketiga, dan keempat injeksi pepton dilakukan pengukuran kaki mencit menggunakan plethysmometer. Analisis data menggunakan uji Repeated ANOVA. Hasil: volume inflamasi pada ekstrak alga coklat Padina sp. pada pengamatan awal (V 0 = 0,170 ml) ke jam pertama (V 1 = 0,164 ml), jam kedua (V 2 = 0,120 ml), jam ketiga (V 3 = 0,108 ml), jam keempat (V 4 = 0,138 ml). Pada uji Repeated ANOVA diperoleh nilai P (0.025) < 0.05 menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara pengamatan yang satu dan yang lain pada waktu tertentu pada kelompok perlakuan bahan uji ekstrak alga coklat Padina sp. Kesimpulan: Ekstrak alga coklat Padina sp. memiliki efek antiinflamasi terhadap mencit. Kata kunci: alga coklat, Padina sp., antiinflamasi, volume inflamasi v

6 Identification of Anti-inflammatory Effects of Extract of Brown Algae Padina sp. in Mice (Mus musculus) (Pilot Study) ABSTRACT Background : Infection, tissue damage, or interference immune response is a factor that can cause inflammatory reactions in the teeth and surrounding tissues. To reduce the side effects of pharmaceutical drugs, it is necessary to research which uses the principle of back to nature to harness the potential of natural products as a source of medicines. One of the natural ingredients that have anti-inflammatory activity that brown algae Padina sp. containing polysaccharides, polyunsaturated fatty acid (PUFA), and fucoxanthin. Purpose : To determine the anti-inflammatory effects of extract of brown algae Padina sp. in mice. Method : Research is experimental research with Pretest and Post Test Control Group Design. The sample was 15 male mice weighing g. Testing anti-inflammatory effect using method caused by irritants in the legs of mice. Mice were divided into three treatment groups (n=5). Group 1 negative control is NaCMC 1%, group 2 positive control is sodium diclofenac 0,35mg/35g body weight, and group 3 was extracted with methanol and Padina sp. dose 7mg/35g body weight. After 30 minutes of testing material is injected, peptone 1% as much as 0,05 ml is injected at subplantar area of the left leg of each mice. After first, second, third, and fourth hour peptone injection, mice leg measurements were taken using plethysmometer. Data analysis using Repeated ANOVA test. Result : Volume inflammation of the extract of brown algae Padina sp. on initial observations (V 0 = 0,170 ml) to first hour (V 1 = 0,164 ml), to second hour (V 2 = 0,120 ml), to third hour (V 3 = 0,108 ml), to fourth hour (V 4 = 0,138 ml). The Repeated ANOVA test obtained P value (0.025) < 0.05 that there are significant differences between the observations at every hour in the group treated test material extract brown algae Padina sp. Conclusion : Extract of brown algae Padina sp. have anti-inflammatory effects in mice. Key words: brown algae, Padina sp. anti-inflammatory, inflammatory volume vi

7 KATA PENGANTAR Puji dan syukur senantiasa tercurahkan atas kehadirat Allah Subhanahu wa Ta ala, karena rahmat-nya maka penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul Identifikasi Efek Antiinflamasi Ekstrak Alga Coklat Padina sp. terhadap Mencit ( Mus musculus) ( Pilot Study). Penulisan skripsi ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam mencapai gelar Sarjana Kedokteran Gigi pada Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin Penulis menyadari bahwa tanpa adanya bantuan, dukungan, dan bimbingan dari berbagai pihak, mulai dari masa perkuliahan sampai pada masa penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit bagi penulis untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Dr. drg. Bahruddin Thalib, Sp.Pros., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin. 2. drg. Effendy S. Dangkeng, MS., selaku penasehat akademik yang senantiasa memberikan dukungan dan arahan kepada penulis dari awal sampai menyelesaikan jenjang studi. 3. Dr. drg. Asmawati, M. Kes., selaku pembimbing skripsi yang telah banyak meluangkan waktunya untuk memberikan saran dan bimbingan bagi penulisselama penyusunan skripsi ini. 4. Kedua orang tuaku, Bahar, SE., dan Hj. Rosmiani, S.Pd., M.Si., serta saudara-saudarakuku Fitriani Bahar, SE., Muh. Firman Al-Qautsar dan Fika Nurul Fadillah. Terima kasih yang sebesar-besarnya atas pengorbanan, vii

8 doa, dukungan, nasihat, motivasi, dan perhatian yang sangat besar. 5. Staf Dosen Bagian Oral Biologi dan seluruh Staf Dosen dan Pegawai Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin atas segala bantuan, ilmu dan didikannya selama ini. 6. Sahabat-sahabatku Siti Nur Asriani Zakaria, Siska Putri Utami Said, Sarah Eva Chalid, Dian Mustika Hamid, Andi Riska Ulfasari, Jung Zahra Ramlan, dan Citra Jasmin Cangara terima kasih atas segala bentuk dukungan, bantuan, dan kebersamaannya. 7. Sahabat seperjuangan Andi Istiayulianingsih terima kasih atas segala bentuk dukungan, bantuan, pengertian, dan kebersamaannya baik suka maupun duka. 8. Keluarga Besar MASTIKASI 2012, terima kasih atas segala perhatian dan kebersamaan yang kalian berikan selama ini. 9. Teman-teman seperjuangan yang menyusun Skripsi Bagian Oral Biologi dengan pohon penelitian mengenai Alga Coklat; Andi Istiayulianingsih, Andi Syamsul Alam, Aryan, Ikramullah Mahmuddin, Siti Nur Asriani Zakaria, Zulfitri Jahili, Rizki Amaliyah Roem, Nurwahida, Suci Amalia Rachman, Siti Mutmainnah Sunar. Semoga pengalaman dalam penelitian ini bisa kita jadikan pelajaran bersama. 10. Sahabat-sahabatku Mirandha Ariesca Riana, Andi Istimrar Ridjal, Ana Safitri, Winda Hardiyanti Putri, Nurmuawana, Nina Rizkita Amaliyah, Mulyati Mangoting, Pitsyah Alifiyanti, Amalia Nurul Hatina, Asmarany Suci Biantari, Najmatuzzahra, Nadia Almira Sagitta, Beatries Yunisari Bungadatu, Mutiara P. Assegaf, Yovanita Septiani Alamako, Devi viii

9 Magfira, Jeniati Tandi Seru terima kasih atas segala bentuk dukungan, bantuan, dan kebersamaannya. 11. Teman-temann KKN-PK Angkatan 50 Universitas Hasanuddin Kab. Bantaeng Desa Pabumbungan dan Pak Gassing, S. Sos. sekeluarga terima kasih atas segala bentuk dukungan, bantuan, doa, dan kebersamaannya selama ini. 12. Warga Desa Punaga dan PPLH Puntondo yang telah membantu dalam pengadaan sampel dalam penelitian ini. 13. Seluruh senior, junior, dan teman-teman FKG Universitas Hasanuddin yang telah membagikan ilmunya dan membantu dalam pelaksanaan penelitian ini. 14. Dan pihak-pihak lainnya yang tidak dapat disebutkan satu persatu. Dalam Penulisan skripsi ini penulis merasa masih banyak kekurangan-kekurangan baik pada teknis penulisan maupun materi, mengingat akan kemampuan yang dimiliki penulis. Untuk itu kritik dan saran dari semua pihak sangat penulis harapkan demi penyempurnaan pembuatan skripsi ini. Semoga karyaa kecil ini dapat bermanfaat. Aamiin. Makassar, 01 September 2015 Dwi Fitrah Ariani B. ix

10 DAFTAR ISI HALAMAN SAMPUL...i SAMPUL DALAM...ii HALAMAN PENGESAHAN...iii SURAT PERNYATAAN...iv ABSTRAK...v ABSTRACT...vi KATA PENGANTAR...vii DAFTAR ISI...x DAFTAR GAMBAR...xii DAFTAR TABEL...xiii DAFTAR LAMPIRAN...xiv BAB I PENDAHULUAN Latar belakang Rumusan masalah Tujuan Hipotesis...3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Rumput laut Rumput laut coklat Taksonomi Kandungan antiinflamasi Khasiat Simplisia dan ekstrak Metode ekstraksi Ekstrak methanol Padina sp Inflamasi Pengertian inflamasi Mekanisme inflamasi dan antiinflamasi Golongan obat antiinflamasi...18 x

11 2.6.4 Sodium diklofenak Metode uji efek antiinflamasi...20 BAB III KERANGKA PENELITIAN...21 BAB IV METODE PENELITIAN Jenis penelitian Rancangan penelitian Tempat dan waktu penelitian Variabel penelitian Definisi operasional variabel Sampel penelitian Kriteria sampel Prosedur penelitian Alat ukur dan pengukuran Alat dan bahan penelitian Analisis data Alur penelitian...28 BAB V HASIL PENELITIAN...29 BAB VI PEMBAHASAN...34 BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran...39 DAFTAR PUSTAKA...40 SURAT PERNYATAAN...43 LAMPIRAN...44 xi

12 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Morfologi jenis rumput laut...7 Gambar 5.1 Grafik pengukuran rata-rata volume inflamasi kaki mencit...30 Gambar 5.2 Grafik persentase radang pada kaki mencit...33 xii

13 DAFTAR TABEL Tabel 5.1 Data pengukuran volume inflamasi...29 Tabel 5.2 Data persentase radang NaCMC 1%...30 Tabel 5.3 Data perbandingan volume radang selama 4 jam NaCMC 1%...31 Tabel 5.4 Data persentase radang sodium diklofenak...31 Tabel 5.5 Data perbandingan volume radang selama 4 jam sodium diklofenak...31 Tabel 5.6 Data persentase radang Padina sp Tabel 5.7 Data perbandingan volume radang selama 4 jam Padina sp xiii

14 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Gambar alat dan bahan penelitian...45 Lampiran 2 Kegiatan penelitian...49 Lampiran 3 Surat keterangan kelaikan etik (ethical clearance)...51 Lampiran 4 Surat penugasan dan izin penelitian...53 Lampiran 5 Surat penyelesaian penelitian...57 Lampiran 6 Surat penugasan seminar skripsi dan daftar hadir...60 Lampiran 7 Lembar kontrol skripsi...63 Lampiran 8 Data hasil penelitian...65 Lampiran 9 Analisis data...68 xiv

15 BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar belakang Luas wilayah Indonesia sebagian besar, yaitu dua per tiganya merupakan wilayah perairan. United Nation Convention on the Law of the Sea (UNCLOS) pada tahun 1982 melaporkan bahwa luas perairan Indonesia adalah 5,8 juta km 2 dan di dalamnya terdapat 27,2% dari seluruh spesies flora dan fauna di dunia. Rumput laut atau lebih dikenal dengan sebutan seaweed merupakan salah satu sumber daya hayati yang sangat melimpah di perairan Indonesia yaitu sekitar 8,6% dari total biota di laut. 1 Gupta dan Abu-Ghannam, 2011, menyatakan bahwa rumput laut dibagi menjadi tiga kelompok besar berdasarkan komposisi kimianya yaitu alga hijau (Chlorophyta), alga merah (Rhodophyta), dan alga coklat (Phaeophyta). 2 Phaeophyta, rumput laut coklat atau alga coklat, merupakan salah satu sumber daya alam laut yang keberadaannya sangat melimpah dan tumbuh secara alami di perairan pantai Indonesia. 3 Rumput laut coklat yang tersebar di seluruh perairan Indonesia yaitu sekitar 134 spesies. 1 Perairan Sulawesi Selatan yang cukup luas dengan panjang pantai kurang lebih 2500 km dapat dimanfaatkan bagi kepentingan budidaya rumput laut. 4 Perairan ini menyimpan potensi sumber daya kelautan baik hayati maupun non hayati yang cukup menjanjikan untuk dikelola. Salah satu komoditas yang sedang dikembangkan 1

16 dan merupakan salah satu program pengembangan ekonomi masyarakat pesisir di Sulawesi Selatan adalah rumput laut. 5 Kabupaten Takalar merupakan salah satu daerah yang sangat tepat dalam upaya budidaya rumput laut karena kondisi tanah yang rata di sepanjang pesisir pantai barat Selat Makassar sampai pesisir pantai selatan Laut Flores. Desa Punaga merupakan wilayah dengan sebagian besar dikelilingi pantai sehingga masyarakat di daerah tersebut rata-rata melakukan kegiatan budidaya rumput laut. 4 Dalam praktik Kedokteran Gigi, inflamasi dapat terjadi karena akibat adanya infeksi, rusaknya jaringan, ataupun gangguan respon imun. Proses inflamasi selalu diikuti oleh pelepasan mediator prostaglandin. Jika terjadi peningkatan prostaglandin pada jaringan akan menyebabkan timbulnya rasa nyeri. 6 Inflamasi yang disertai rasa nyeri dapat terjadi karena beberapa faktor seperti infeksi, trauma, dan pascaoperasi. Jika terjadi inflamasi disertai rasa nyeri yang disebabkan oleh infeksi, maka dapat dilakukan perawatan gigi lokal dengan/tanpa pemberian antibiotik. Jika masalah yang timbul murni dari reaksi inflamasi, maka diindikasikan pemberian antiinflamasi. 7 Untuk mengurangi efek samping penggunaan obat farmasetik, maka diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai tanaman herbal yang memiliki kemampuan untuk menurunkan volume inflamasi. Rumput laut coklat mengandung senyawa aktif dengan berbagai bioaktivitas sehingga memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai bahan nutraseutikal. 2 Beberapa penelitian telah membuktikan bahwa rumput laut coklat memiliki potensi sebagai bahan antikanker, antioksidan, antitrombotik, antikoagulan, antiproliferatif, 2

17 antivirus, antiobesitas, dan antiinflamasi. 1,3 Beberapa penelitian telah membuktikan bahwa rumput laut coklat memiliki potensi sebagai antiinflamasi karena memiliki kandungan berupa sulfat polisakarida, PUFA, dan fukosantin. 3,8 1.2 Rumusan masalah Berdasarkan latar belakang tersebut, dapat diperoleh rumusan masalah yaitu bagaimana efek antiinflamasi ekstrak alga coklat Padina sp. terhadap mencit? 1.3 Tujuan Tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi efek antiinflamasi ekstrak alga coklat Padina sp. terhadap mencit. 1.4 Hipotesis Hipotesis penelitian ini adalah terdapat efek antiinflamasi ekstrak alga coklat Padina sp. terhadap mencit. 3

18 BAB III KERANGKA PENELITIAN Alga Coklat (Phaeophyta) manfaat Pangan Farmasi Kosmetik Industri Analgesik Antioksidan Antiproliferasi Antikoagulan Antipiretik Anti-inflamasi Metode uji Antibakteri Metode hambat aktivitas COX oleh bromelain Karaginan Iritan radang Metode hambat radang oleh iritan pada kaki mencit Pepton Variabel yang diteliti Plethysmometer Variabel yang tidak diteliti Uji efek antiinflamasi 21

19 BAB IV METODE PENELITIAN 4.1 Jenis penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah eksperimental laboratoris. 4.2 Rancangan penelitian Penelitian ini menggunakan metode Pretest and Post Test Control Group Design. 4.3 Tempat dan waktu penelitian Tempat penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin dan Laboratorium Biofarmasi Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin. Waktu penelitian Penelitian ini dilakukan pada April-Mei Variabel penelitian Variabel menurut fungsinya: 1. Variabel Sebab (Independen Variabel): Ekstrak alga coklat Padina sp. 2. Variabel Akibat (Dependen Variabel): Efek antiinflamasi 22

20 4.5 Definisi operasional variabel 1. Ekstrak alga coklat Padina sp. adalah agen yang memiliki aktivitas antiinflamasi genus Padina dengan dosis 7 mg/35 kg berat badan. 2. Efek antiinflamasi adalah keadaan terjadinya perubahan ukuran pada kaki mencit setelah diaplikasikan ekstrak alga coklat Padina sp. yang diamati menggunakan plethysmometer. 4.6 Sampel penelitian Sampel penelitian ini adalah mencit jantan dengan berat g yang didapatkan di Amigos Pet Shop, Jalan Landak Lama, Makassar. Jumlah sampel dalam penelitian ini adalah 18 ekor mencit. 4.7 Kriteria Sampel Kriteria Inklusi: 1. Mencit jantan 2. Sehat 3. Umur 2-4 bulan 4. Berat badan g Kriteria Eksklusi: Kriteria eksklusi dalam penelitian ini adalah mencit yang tidak dapat beradaptasi dengan lingkungannya. 23

21 4.8 Prosedur penelitian Adapun prosedur penelitian ini adalah sebagai berikut: A. Persiapan hewan coba 1. Penimbangan berat badan hewan coba agar sesuai dengan kriteria sampel ( g). 2. Mencit diletakkan dalam kandang berukuran 45 x 35 x 17 cm dan ditempatkan di dalam ruangan yang cukup aliran udara dan cahaya. Alas kandang diberi sekam setebal 2 cm dan diganti setiap 2 hari sekali. 3. Seluruh sampel akan dibagi dalam 3 kelompok yang nantinya akan ditempatkan dalam 3 kandang. 4. Makanan diberikan secara ad libitum dengan menitikberatkan pada makanan yang banyak mengandung serat kasar, umbi-umbian, jagung, serta hijau-hijauan yang lain. Makanan diberikan dalam wadah kecil dan diberi 3 kali sehari yaitu pada setiap pagi, siang, dan malam. 5. Minuman diberikan dalam botol 300 ml yang dilengkapi pipa kecil diisi air matang. 6. Binatang percobaan diadaptasikan selama 1 minggu untuk mendapatkan kesehatan umum yang baik serta penyesuaian terhadap lingkungan. Sebelum hari uji, mencit dipuasakan semalam dengan tetap diberikan air. 7. Penempatan kandang: a. Kandang ditempatkan pada tempat yang teduh tapi cukup mendapatkan sinar matahari di waktu pagi hari. 24

22 b. Kandang ditempatkan agak jauh dari kebisingan sehingga binatang percobaan bisa lebih tenang. c. Kandang diusahakan pada tempat yang kering agar tidak menjadi sarang penyakit. B. Persiapan ekstraksi alga coklat Padina sp.: 1. Alga coklat Padina sp. didapatkan di Desa Punaga, Kabupaten Takalar, Provinsi Sulawesi Selatan. 2. Alga coklat dicuci menggunakan air laut dan air jernih untuk menghilangkan garam, epifit, dan bahan tersuspensi lainnya. 3. Alga yang sudah dibersihkan kemudian dikeringkan. 4. Sebanyak 150 g berat kering Padina sp. diekstraksi dengan 2,5 liter metanol secara maserasi selama 3 hari sambil sesekali diaduk. Wadah maserasi ditutup rapat dan disimpan di tempat yang sejuk dan tidak terkena sinar matahari langsung. Setelah 3 hari, hasil maserasi disaring dan filtratnya dikumpulkan. 5. Filtrat yang dikumpulkan, dipekatkan dengan alat rotary evaporator, hingga diperoleh ekstrak kental metanol. Ekstrak metanol yang diperoleh selanjutnya ditimbang bobotnya. C. Aktivitas antiinflamasi Mencit dibagi ke dalam tiga kelompok yaitu: 1. Kelompok 1 sebagai kontrol negatif yaitu NaCMC 1% 10 mg/35 g berat badan 2. Kelompok 2 sebagai kontrol positif yaitu sodium diklofenak 0,35 mg/35 g berat badan 25

23 3. Kelompok 3 diekstrak dengan metanol dan Padina sp. dengan dosis 7 mg/35 g berat badan. 4. Setelah 30 menit, pepton 1% sebanyak 0,05 ml diinjeksikan pada daerah subplantar kaki kiri masing-masing mencit. Setelah jam pertama, kedua, ketiga, dan keempat injeksi pepton dilakukan pengukuran kaki mencit menggunakan plethysmometer. D. Pengukuran volume radang untuk setiap kelompok dihitung dengan rumus (%): (%) = x 100 Keterangan: Vt = volume kaki hewan setelah waktu t Vo = volume kaki hewan sebelum diinjeksikan pepton 4.9 Alat ukur dan pengukuran Alat ukur yang digunakan dalam penelitian ini adalah plethysmometer. Plethysmometer merupakan instrumen yang dirancang untuk perubahan kecil dalam volume, biasanya melalui perpindahan air. Dalam penelitian ini, plethysmometer digunakan untuk melihat efektivitas antiinflamasi alga coklat Padina sp. dengan mengukur volume kaki pada mencit baik sebelum maupun setelah injeksi pepton. 26

24 4.10Alat dan bahan penelitian Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah: 1. Mencit merupakan hewan coba dengan berat g yang akan diberikan antiinflamasi alga coklat Padina sp. untuk melihat keefektifan dalam menghambat inflamasi setelah injeksi pepton. 2. Kandang mencit merupakan tempat pemeliharaan mencit. 3. Alga coklat Padina sp. merupakan material biologi sebagai agen antiinflamasi pada mencit dengan dosis 7 mg/35 g berat badan. 4. Pepton merupakan agen inflamasi yang digunakan untuk melihat kemampuan alga coklat Padina sp. sebagai agen antiinflamasi. 5. Rotary evaporator merupakan alat yang digunakan untuk mengekstraksi alga coklat Padina sp. 6. Needle adalah alat yang digunakan untuk injeksi iritan inflamasi pada subplantar kaki kiri mencit dan agen antiinflamasi (Padina sp.) pada oral mencit. 7. Larutan NaCMC merupakan bahan yang digunakan sebagai kontrol negatif dengan konsentrasi 1% dan dosis 10 mg/35 g berat badan. 8. Sodium diklofenak merupakan bahan pembanding antiinflamasi standar dan sebagai kontrol positif dengan dosis 0,35 mg/35 g berat badan. 9. Plethysmometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur volume kaki mencit baik sebelum maupun setelah injeksi pepton. 4.11Analisis data Penelitian ini menggunakan analisis statistik yaitu uji Repeated Anova. 27

25 4.12Alur penelitian Alga Coklat (Phaeophyta) Padina sp. Ekstraksi metanol + Padina sp. menggunakan rotary evaporator Uji antiinflamasi K 1: larutan NaCMC 1% dosis 10mg/35g K 2: sodium diklofenak dosis 0,35mg/35g K 3: ekstrak metanol + Padina sp. dosis 7mg/35g Injeksi per oral pada mencit Setelah 30 menit, injeksi 1% pepton sebanyak 0,05 ml Pengukuran kaki mencit menggunakan plethysmometer setelah pengamatan jam pertama, kedua, ketiga, dan keempat Pengukuran persentase volume radang dimasukkan ke dalam rumus (%) = x 100 ANALISIS DATA HASIL PENELITIAN 28

26 BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN 7.1 Kesimpulan Dari penelitian yang telah dilakukan terhadap 15 ekor mencit yang diinjeksikan ekstrak alga coklat Padina sp. dapat diambil beberapa kesimpulan, yaitu: 1. Dosis ekstrak alga coklat Padina sp. yang memiliki efek sebagai antiinflamasi adalah 7 mg/35 g BB dengan menggunakan metode pengujian berdasarkan penghambatan radang yang ditimbulkan oleh iritan pada kaki mencit. 2. Pada uji Repeated ANOVA ekstrak alga coklat Padina sp. dengan dosis 7 mg/35 g BB didapatkan hasil yaitu terdapat perbedaan yang signifikan antara pengamatan satu dan yang lain pada waktu tertentu. Hal ini berarti bahwa ekstrak alga coklat Padina sp. memiliki aktivitas antiinflamasi yang berbeda jauh pada pengamatan jam pertama, jam kedua, jam ketiga, dan jam keempat. 7.2 Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada ekstrak alga coklat Padina sp. yang berkhasiat sebagai antiinflamasi dengan berbagai varian dosis untuk membandingkan dosis ekstrak alga coklat Padina sp. yang lebih efektif dalam menghambat radang. 39

27 DAFTAR PUSTAKA 1. Suparmi, Sahri A. Mengenal potensi rumput laut: kajian pemanfaatan sumber daya rumput laut dari aspek industri dan kesehatan. Sultan Agung; 2008; Vol. XLIV No. 118: Nursid M, Wikanta T, Susilowati R. Aktivitas antioksidan, sitotoksisitas, dan kandungan fukosantin ekstrak rumput laut coklat dari pantai binuangeun banten. JPB Kelautan dan Perikanan; 2013; Vol. 8 No. 1: Limantara L, Heriyanto. Optimasi proses ekstraksi fukosantin rumput laut coklat Padina australis hauck menggunakan pelarut organik polar. Ilmu Kelautan; 2011; Vol. 16(2): Selistiawati, Idris APS. Faktor-faktor yang mempengaruhi produksi rumput laut kappaphycus alvarezii (kasus di desa punaga binaan balai budidaya air payau takalar). Jurnal Vokasi; 2011; Vol.7 No.2: Harifuddin, Aisyah, Budiman. Analisis margin dan efisiensi pemasaran rumput laut di desa mandalle kecamatan mandalle kabupaten pangkep. Jurnal Agribisnis; 2011; Vol. X (3): Suniarti DF, Soekanto SA, Arif A. Farmakologi kedokteran gigi. Jakarta: Badan Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia; Hal , Hargreaves K, Abbott PV. Drugs for pain management in dentistry. Australian Dental Journal Medications Supplement; 2005; Vol. 50(4): S14-S Jaswir I, Monsur HA. Review anti-inflammatory compounds of macro algae origin: a review. Journal of Medicinal Plants Research; 2011; Vol. 5(33): Hidayat A. Budidaya rumput laut. Surabaya: Penerbit Usaha Nasional; Hal. 21, 25-6, Setyobudiandi I, Soekendarsi E, Juariah U, Bahtiar, Hari H. Seri biota rumput laut indonesia jenis dan upaya pemanfaatan. Kendari: Unhalu Press; Hal

28 11. Selvi CG, Panneerselvam A, Santhanam A. Hepatoprotective effects of brown algae padina tetrastomatica against carbon tetrachloride induced hepatoxicity. Int J Pharm Bio Sci; 2014; 5(2): Kordi MGH. Kiat sukses budi daya rumput laut di laut & tambak. Yogyakarta: Lily Publisher; Hal Astuti KW. Kombinasi asetosal dan ekstrak buah mengkudu (morinda citrifolia l.) dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi pada mencit [Tesis]. Bali: Universitas Udayana; Hariyati S. Standardisasi ekstrak tumbuhan obat indonesia, salah satu tahapan penting dalam pengembangan obat asli indonesia. Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia; 2005; Vol. 6 No.4: Handa SS, Khanuja SPS, Longo G, Rakesh DD. Extraction technologies for medical and aromatic plants. Italy: ICS UNIDO; Pp Septiana AT, Asnani A. Kajian sifat fisikokimia ekstrak rumput laut coklat sargassum duplicatum menggunakan berbagai pelarut dan metode ekstraksi. Agrointek; 2012; Vol. 6 No. 1: Astarina NWG, Astuti KW, Warditiani NK. Skrining fitokimia ekstrak metanol rimpang bangle (zingiber purpureum roxb). Jurnal Farmasi Udayana; 2013: Simpi CC, Nagathan CV, Karajgi SR, Kalyane NV. Evaluation of marine brown algae sargassum ilicifolium extract for analgesic and anti-inflammatory activity. Pharmacognosy Res; 2013; 5(3): Hidayati NA, Listyawati S, Setyawan AD. Kandungan kimia dan uji antiinflamasi ekstrak etanol lantana camara l. pada tikus putih (rattus norvegicus l.) jantan. Bioteknologi; 2008; 5(1): Radhika D, Veerabahu C, Priya R. Anti-inflammatory activities of some seaweed collected from the gulf of mannar coast, tuticorin, south india. Int J Pharm Bio Sci; 2013; 4(1): Gunawan SG, Nafrialdi RS, Elysabeth. Farmakologi dan terapi. Jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia; Hal. 230, 232, 240.

29 22. Sudjarwo SA. Sinyal transduksi dari bromelain sebagai antiinflamasi pada udema telapak kaki tikus yang disebabkan oleh karagen. Jurnal Kedokteran Brawijaya; 2005; Vol. XXI No. 1: Muchtariadi, Levita J, Musfiroh I, Hariadi, Rustaman. Quantitative structure and activity relationship (qsar) of propionic acid derivatives as anti inflammatory non steroid using by mechanincal molecular (MM2). Symposium Molecular; March 26, Gadjah Mada University, Yogyakarta, Pp Grover VK, Babu R, Bedi SPS. Steroid theraphy-current indications in practice. Indian Journal of Anaesthesia; 2007; 51(5): Praveen NK, Chakraborty K. Antioxidant and anti-inflammatory potential of the aqueous extract and polysaccharide fraction from brown marine macroalgae padina sp. from gulf of mannar of peninsular india. Journal of Coastal Life Medicine; 2013; 1(1): Paul G, Rantapa S, Dahlqvist, Isenberg WM, Strausbaugh HJ, Frederick J, et al. Sex steroid regulation of the inflammatory response: sympathoadrenal dependence in the female rat. Journal of Neuroscience; 1999; 19(10):

30 PERNYATAAN Saya yang bertanda tangan di bawah ini : Nama : Dwi Fitrah Ariani B. NIM : J Adalah mahasiswa Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin Makassar yang telah melakukan penelitian dengan judul Identifikasi Efek Antiinflamasi Ekstrak Alga Coklat Padina sp. terhadap Mencit (Mus musculus) (Pilot Study) dalam rangka menyelesaikan studi Program Pendidikan Strata 1. Dengan ini menyatakan bahwa di dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis di acuan dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Makassar, 01 September 2015 Dwi Fitrah Ariani B.

31 LAMPIRAN

32 Lampiran 1. Gambar Alat dan Bahan Penelitian Gambar 1: Alga coklat Padina sp. Gambar 2: Rotary evaporator Gambar 3: Metanol Gambar 4: Hasil ekstraksi Padina sp.

33 Gambar 5: Mencit jantan Gambar 6: Timbangan Gambar 7: Spoit insulin Gambar 8: Spoit 1 cc

34 Gambar 9: Sediaan pepton Gambar 10: Sediaan NaCMC Gambar 11: Sediaan sodium diklofenak Gambar 12: Sediaan Padina sp. ekstrak

35 Gambar 13: Plethysmometer

36 Lampiran 2. Kegiatan penelitian Gambar 14: Pencariann sampel Padina sp. Gambar 15: Ekstraksi Padina sp. Gambar 16: Induksi zat uji Gambar 17: Injeksi pepton secara subplantar

37 Gambar 18: Radang pada kaki mencit Gambar 19: Pengukuran volume radang kaki mencit

38 Lampiran 3 Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance)

39

40 Lampiran 4 Surat Penugasan dan Izin Penelitian

41

42

43

44 Lampiran 5 Surat Penyelesaian Penelitian

45

46

47 Lampiran 6 Surat Penugasan Seminar Skripsi dan Daftar Hadir

48

49

50

51 Lampiran 7 Lembar control skripsi

52

53 Lampiran 8 Data Hasil Penelitian Kelompok kontrol negatif (NaCMC) HEWAN PENGAMATAN 1 DETIK SETELAH INDUKSI PEPTON (V 0 ) PENGAMATAN SETELAH INDUKSI PEPTON (V t ) 1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 1 (Kaki depan kanan) 0,2 ml 0,14 ml 0,14 ml 0,11 ml 0,11 ml 2 (Kaki depan kiri) 0,15 ml 0,12 ml 0,13 ml 0,13 ml 0,08 ml 3 (Punggung) 0,2 ml 0,19 ml 0,17 ml 0,16 ml 0,11 ml 4 (Ekor) 0,17 ml 0,14 ml 0,12 ml 0,12 ml 0,05 ml 5 (Kaki belakang kanan) 0,21 ml 0,12 ml 0,15 ml 0,14 ml 0,15 ml Rata-rata 0,188 ml 0,143 ml 0,138 ml 0,135 ml 0,110 ml

54 Kelompok kontrol positif (Sodium diklofenak) HEWAN PENGAMATAN 1 DETIK SETELAH INDUKSI PEPTON (V 0 ) PENGAMATAN SETELAH INDUKSI PEPTON (V t ) 1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 1 (Kaki depan kanan) 0,06 ml 0,16 ml 0,08 ml 0,14 ml 0,09 ml 2 (Kaki depan kiri) 0,18 ml 0,10 ml 0,12 ml 0,11 ml 0,12 ml 3 (Punggung) 0,12 ml 0,13 ml 0,08 ml 0,10 ml 0,09 ml 4 (Ekor) 0,16 ml 0,07 ml 0,11 ml 0,10 ml 0,12 ml 5 (Kaki belakang kanan) 0,13 ml 0,05 ml 0,10 ml 0,08 ml 0,09 ml Rata-rata 0,118 ml 0,107 ml 0,105 ml 0,103 ml 0,093 ml

55 Kelompok bahan uji (Padina sp. 200 mg/kg BB) HEWAN PENGAMATAN 1 DETIK SETELAH INDUKSI PEPTON (V 0 ) PENGAMATAN SETELAH INDUKSI PEPTON (V t ) 1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 1 (Kaki depan kanan) 0,18 ml 0,17 ml 0,13 ml 0,10 ml 0,16 ml 2 (Kaki depan kiri) 0,18 ml 0,16 ml 0,13 ml 0,11 ml 0,13 ml 3 (Punggung) 0,19 ml 0,17 ml 0,14 ml 0,11 ml 0,15 ml 4 (Ekor) 0,15 ml 0,16 ml 0,10 ml 0,12 ml 0,14 ml 5 (Kaki belakang kanan) 0,15 ml 0,16 ml 0,10 ml 0,10 ml 0,11 ml Rata-rata 0,170 ml 0,164 ml 0,120 ml 0,108 ml 0,138 ml

56 Lampiran 9 Analisis Data

57 GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. General Linear Model Notes Output Created 04-MAY :45:22 Comments Input Data C:\Users\Blvcklist09\Documents\Anti InflamasiSargassum.sav Active Dataset DataSet3 Filter <none> Weight <none> Split File <none> N of Rows in Working Data File 17

58 Missing Value Handling Definition of Missing User-defined missing values are treated as missing. Cases Used Statistics are based on all cases with valid data for all variables in the model. Syntax GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. Resources Processor Time 00:00:00.05 Elapsed Time 00:00:00.16 Within-Subjects Factors Measure: Inflamasi Waktu Dependent Variable 1 V1 2 V2 3 V3 4 V4

59 Descriptive Statistics Mean Std. Deviation N V V V V Multivariate Tests a Effect Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Waktu Pillai's Trace b Wilks' Lambda b Hotelling's Trace b Roy's Largest Root b a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. Exact statistic Measure: Inflamasi Mauchly's Test of Sphericity a Within Subjects Effect Mauchly's W Approx. Chi- df Sig. Epsilon b

60 Square Greenhouse- Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Waktu Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. Measure: Inflamasi Source Type III Sum of Tests of Within-Subjects Effects Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Waktu Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Error(Waktu) Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Tests of Within-Subjects Contrasts

61 Measure: Inflamasi Type III Sum of Partial Eta Source Waktu Squares df Mean Square F Sig. Squared Waktu Linear Quadratic Cubic Error(Waktu) Linear Quadratic Cubic Measure: Inflamasi Transformed Variable: Average Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Intercept Error Estimated Marginal Means

62 Waktu Measure: Inflamasi Estimates 95% Confidence Interval Waktu Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound Measure: Inflamasi Pairwise Comparisons 95% Confidence Interval for Mean Difference Difference b (I) Waktu (J) Waktu (I-J) Std. Error Sig. b Lower Bound Upper Bound *

63 * Based on estimated marginal means *. The mean difference is significant at the.05 level. b. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments). Multivariate Tests Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Pillai's trace a Wilks' lambda a Hotelling's trace a Roy's largest root a Each F tests the multivariate effect of Waktu. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic USE ALL. COMPUTE filter_$=(kelompok = 1). VARIABLE LABELS filter_$ 'Kelompok = 1 (FILTER)'.

64 VALUE LABELS filter_$ 0 'Not Selected' 1 'Selected'. FORMATS filter_$ (f1.0). FILTER BY filter_$. EXECUTE. GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. General Linear Model Notes Output Created 04-MAY :45:35 Comments Input Data C:\Users\Blvcklist09\Documents\Anti InflamasiSargassum.sav Active Dataset DataSet3 Filter Kelompok = 1 (FILTER) Weight <none> Split File <none> N of Rows in Working Data File 6

65 Missing Value Handling Definition of Missing User-defined missing values are treated as missing. Cases Used Statistics are based on all cases with valid data for all variables in the model. Syntax GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. Resources Processor Time 00:00:00.03 Elapsed Time 00:00:00.07 Within-Subjects Factors Measure: Inflamasi Waktu Dependent Variable 1 V1 2 V2 3 V3 4 V4

66 Descriptive Statistics Mean Std. Deviation N V V V V Multivariate Tests a Effect Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Waktu Pillai's Trace b Wilks' Lambda b Hotelling's Trace b Roy's Largest Root b a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. Exact statistic Measure: Inflamasi Mauchly's Test of Sphericity a Within Subjects Effect Mauchly's W Approx. Chi- df Sig. Epsilon b

67 Square Greenhouse- Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Waktu Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. Measure: Inflamasi Source Type III Sum of Tests of Within-Subjects Effects Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Waktu Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Error(Waktu) Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Tests of Within-Subjects Contrasts

68 Measure: Inflamasi Type III Sum of Partial Eta Source Waktu Squares df Mean Square F Sig. Squared Waktu Linear Quadratic Cubic Error(Waktu) Linear Quadratic Cubic Measure: Inflamasi Transformed Variable: Average Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Intercept Error Estimated Marginal Means

69 Waktu Measure: Inflamasi Estimates 95% Confidence Interval Waktu Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound Measure: Inflamasi Pairwise Comparisons 95% Confidence Interval for Mean Difference Difference a (I) Waktu (J) Waktu (I-J) Std. Error Sig. a Lower Bound Upper Bound

70 Based on estimated marginal means a. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments). Multivariate Tests Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Pillai's trace a Wilks' lambda a Hotelling's trace a Roy's largest root a Each F tests the multivariate effect of Waktu. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic USE ALL. COMPUTE filter_$=(kelompok = 2). VARIABLE LABELS filter_$ 'Kelompok = 2 (FILTER)'. VALUE LABELS filter_$ 0 'Not Selected' 1 'Selected'. FORMATS filter_$ (f1.0).

71 FILTER BY filter_$. EXECUTE. GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. General Linear Model Notes Output Created 04-MAY :45:46 Comments Input Data C:\Users\Blvcklist09\Documents\Anti InflamasiSargassum.sav Active Dataset DataSet3 Filter Kelompok = 2 (FILTER) Weight <none> Split File <none> N of Rows in Working Data File 6 Missing Value Handling Definition of Missing User-defined missing values are treated as missing.

72 Cases Used Statistics are based on all cases with valid data for all variables in the model. Syntax GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. Resources Processor Time 00:00:00.03 Elapsed Time 00:00:00.10 Within-Subjects Factors Measure: Inflamasi Waktu Dependent Variable 1 V1 2 V2 3 V3 4 V4 Descriptive Statistics

73 Mean Std. Deviation N V V V V Multivariate Tests a Effect Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Waktu Pillai's Trace b Wilks' Lambda b Hotelling's Trace b Roy's Largest Root b a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. Exact statistic Mauchly's Test of Sphericity a Measure: Inflamasi Epsilon b Approx. Chi- Greenhouse- Within Subjects Effect Mauchly's W Square df Sig. Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Waktu

74 Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. Measure: Inflamasi Source Type III Sum of Tests of Within-Subjects Effects Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Waktu Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Error(Waktu) Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Measure: Inflamasi Tests of Within-Subjects Contrasts Type III Sum of Partial Eta Source Waktu Squares df Mean Square F Sig. Squared

75 Waktu Linear Quadratic Cubic Error(Waktu) Linear Quadratic Cubic Measure: Inflamasi Transformed Variable: Average Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Intercept Error Estimated Marginal Means Waktu

76 Measure: Inflamasi Estimates 95% Confidence Interval Waktu Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound Measure: Inflamasi Pairwise Comparisons 95% Confidence Interval for Mean Difference Difference a (I) Waktu (J) Waktu (I-J) Std. Error Sig. a Lower Bound Upper Bound

77 Based on estimated marginal means a. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments). Multivariate Tests Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Pillai's trace a Wilks' lambda a Hotelling's trace a Roy's largest root a Each F tests the multivariate effect of Waktu. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic USE ALL. COMPUTE filter_$=(kelompok = 3). VARIABLE LABELS filter_$ 'Kelompok = 3 (FILTER)'. VALUE LABELS filter_$ 0 'Not Selected' 1 'Selected'. FORMATS filter_$ (f1.0). FILTER BY filter_$. EXECUTE. GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial

78 /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. General Linear Model Notes Output Created 04-MAY :45:59 Comments Input Data C:\Users\Blvcklist09\Documents\Anti InflamasiSargassum.sav Active Dataset DataSet3 Filter Kelompok = 3 (FILTER) Weight <none> Split File <none> N of Rows in Working Data File 5 Missing Value Handling Definition of Missing User-defined missing values are treated as missing. Cases Used Statistics are based on all cases with valid data for all variables in the model.

79 Syntax GLM V1 V2 V3 V4 /WSFACTOR=Waktu 4 Polynomial /MEASURE=Inflamasi /METHOD=SSTYPE(3) /EMMEANS=TABLES(Waktu) COMPARE ADJ(LSD) /PRINT=DESCRIPTIVE ETASQ /CRITERIA=ALPHA(.05) /WSDESIGN=Waktu. Resources Processor Time 00:00:00.00 Elapsed Time 00:00:00.05 Within-Subjects Factors Measure: Inflamasi Waktu Dependent Variable 1 V1 2 V2 3 V3 4 V4 Descriptive Statistics Mean Std. Deviation N V

80 V V V Multivariate Tests a Effect Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Waktu Pillai's Trace b Wilks' Lambda b Hotelling's Trace b Roy's Largest Root b a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. Exact statistic Mauchly's Test of Sphericity a Measure: Inflamasi Epsilon b Approx. Chi- Greenhouse- Within Subjects Effect Mauchly's W Square df Sig. Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Waktu Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix.

81 a. Design: Intercept Within Subjects Design: Waktu b. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. Measure: Inflamasi Source Type III Sum of Tests of Within-Subjects Effects Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Waktu Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Error(Waktu) Sphericity Assumed Greenhouse-Geisser Huynh-Feldt Lower-bound Measure: Inflamasi Tests of Within-Subjects Contrasts Type III Sum of Partial Eta Source Waktu Squares df Mean Square F Sig. Squared Waktu Linear

82 Quadratic Cubic Error(Waktu) Linear Quadratic Cubic Measure: Inflamasi Transformed Variable: Average Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Partial Eta Squared Intercept Error Estimated Marginal Means Waktu

83 Measure: Inflamasi Estimates 95% Confidence Interval Waktu Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound Measure: Inflamasi Pairwise Comparisons 95% Confidence Interval for Mean Difference Difference b (I) Waktu (J) Waktu (I-J) Std. Error Sig. b Lower Bound Upper Bound * * * *

84 Based on estimated marginal means *. The mean difference is significant at the.05 level. b. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments). Multivariate Tests Value F Hypothesis df Error df Sig. Partial Eta Squared Pillai's trace a Wilks' lambda a Hotelling's trace a Roy's largest root a Each F tests the multivariate effect of Waktu. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic