PENETAPAN KADAR KLOPIDOGREL DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK SKRIPSI OLEH: MIMI WIKE NIM 091501039 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
PENETAPAN KADAR KLOPIDOGREL DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi OLEH: MIMI WIKE NIM 091501039 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
PENGESAHAN SKRIPSI PENETAPAN KADAR KLOPIDOGREL DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK OLEH: MIMI WIKE NIM 091501039 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal: 27 Agustus 2013 Pembimbing I, Panitia Penguji, Drs. Ismail, M.Si., Apt. Prof. Dr. rer.nat. Effendy De Lux Putra, S.U, Apt. NIP 195006141980031001 NIP 195306191983031001 Pembimbing II, Drs. Ismail, M.Si., Apt. NIP 195006141980031001 Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Drs. Syafruddin, M.S., Apt. NIP 195201041980031002 NIP 194811111976031003 Dra. Salbiah, M.Si., Apt. NIP 194810031987012001 Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
KATA PENGANTAR Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Kuasa yang hanya oleh karena berkat dan kasihnya yang berlimpah sehingga penulis dapat menjalani masa perkuliahan dan penelitian hingga akhirnya menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul Penetapan Kadar Klopidogrel dalam Sediaan Tablet secara Spektrofotometri Sinar Tampak. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Penulis menyampaikan rasa terima kasih yang tulus kepada Ayahanda Eddy Ngadiman dan Ibunda Ratnawati Suriawati, serta abang tersayang Hendra Darus dan adik tersayang Delfina yang telah sabar dan setia memberikan dukungan, doa, semangat, dan materil selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini. Pada kesempatan ini penulis juga menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang setulus-tulusnya kepada Bapak Drs. Ismail, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan dan motivasi dengan penuh kesabaran dan keikhlasan selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisaputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan dan penelitian, Ibu Marianne, S.Si., M.Si., Apt., selaku pembimbing akademik yang telah memberikan bimbingan kepada penulis selama perkuliahan, juga kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., Bapak Drs. Syafruddin, M.S., Apt., dan Ibu Dra. Salbiah, M.Si., Apt.,
selaku penguji yang telah memberikan kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Pada kesempatan ini juga penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih kepada teman-teman dari Sains dan Teknologi Farmasi 2009 yang telah banyak memberikan saran, dukungan, dan doa selama penelitian dan penyusunan skripsi ini berlangsung. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak kekurangan. Oleh sebab itu dengan segala kerendahan hati penulis bersedia menerima kritik dan saran yang membangun pada skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat menjadi sumbangan yang bermanfaat bagi ilmu pengetahuan. Medan, 15 Agustus 2013 Penulis, Mimi Wike NIM 091501039
PENETAPAN KADAR KLOPIDOGREL DALAM SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK ABSTRAK Klopidogrel merupakan obat antiplatelet oral yang sering digunakan dalam pengobatan arteri koroner, penyakit perifer dan penyakit serebrovaskular. Pemeriksaan kadar zat aktif merupakan persyaratan yang wajib dilaksanakan untuk menjamin kualitas obat, sehingga dapat tercapainya efek terapeutik yang diharapkan. Persyaratan kadar klopidogrel dalam tablet tidak tercantum dalam Farmakope Indonesia edisi ke IV, tetapi tercantum dalam United States Pharmacopeia. Pada penelitian sebelumnya, telah ditemukan metode alternatif untuk penetapan kadar klopidogrel, yaitu dengan metode spektrofotometri sinar tampak menggunakan tiga pereaksi warna, salah satunya adalah kalium permanganat sebagai oksidator dan pembentuk kompleks yang diukur pada panjang gelombang 410 nm. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan kadar klopidogrel dalam sediaan tablet generik dan nama dagang dengan metode spektrofotometri sinar tampak menggunakan pereaksi warna kalium permanganat. Prinsip dari metode spektrofotometri sinar tampak yang digunakan dalam penetapan kadar klopidogrel adalah pengukuran penurunan intensitas warna kalium permanganat dalam suasana asam dengan adanya klopidogrel. Penurunan intensitas warna kalium permanganat sebanding dengan konsentrasi klopidogrel dan diukur pada panjang gelombang 545 nm. Dari hasil penelitian diperoleh kadar untuk tablet klopidogrel generik dari Dexa Medica sebesar (98,57 ± 1,40)% dan PT Hexpharm Jaya sebesar (99,13 ± 0,41)%; tablet dengan nama dagang: Vaclo (Dexa Medica) sebesar (101,32 ± 0,78)%, Plavos (Soho) sebesar (101,30 ± 1,14)%, dan Pidovix (Lapi) sebesar (100,04 ± 1,88)%. Hal ini menunjukkan bahwa kadar klopidogrel dalam sediaan tablet generik dan tablet dengan nama dagang memenuhi syarat yang tertera pada United States Pharmacopeia (USP) edisi ke 32 tahun 2008 yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari yang tertera dalam etiket. Dari hasil uji validasi metode yang dilakukan terhadap tablet klopidogrel generik Dexa Medica diperoleh persen perolehan kembali sebesar 100,29%, dengan RSD sebesar 1,02%. Hal ini berarti metode yang digunakan mempunyai akurasi dan presisi yang baik. Batas deteksi (LOD) yang diperoleh adalah 0,842 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) yang diperoleh adalah 2,809 µg/ml. Kata Kunci: klopidogrel, spektrofotometri sinar tampak, kalium permanganat
DETERMINATION OF CLOPIDOGREL IN TABLETS USING VISIBLE SPECTROPHOTOMETRY ABSTRACT Clopidogrel is oral antiplatelete drugs that usually used to treat coronaryartery disease, peripheral disease, and cerebrovascular disease. Determination of drugs is the criteria that must done to prove the quality of the drugs, so the drugs can fulfill the therapeutic effect. The criteria of clopidogrel content in tablets is not written in Farmakope Indonesia, but it is written in United States Pharmacopeia. In the research before, the alternative method was found to determine the clopidogrel, it is visible spectrophotometry, using three colour reagents, one of them is potassium permanganate and it was determined at 410 nm. The purpose of this research is to determine clopidogrel in generic and branded clopidogrel tablets by visible spectrophotometry using potassium permanganate as the colour reagent. The principle of visible spectrophotometry method used to determine the clopidogrel was measurement of the decreasing of colour intesity of potassium permanganate by clopidogrel in acidic medium. The decreasing of colour intensity is equivalent to clopidogrel concentration and it was determined at 545 nm. From this research, it was obtained the content of generic clopidogrel tablets from Dexa Medica was (98.57 ± 1.40)%, and from PT Hexpharm Jaya was (99.13 ± 0.41)%; the branded clopidogrel tablets: Vaclo (Dexa Medica) was (101.32 ± 0.78)%, Plavos (Soho) was (101.30 ± 1.14)%, and Pidovix (Lapi) was (100.04 ± 1.88)%. This shows that the value of clopidogrel in generic and branded tablets fulfill the criteria that is written in United States Pharmacopeia (USP) 32 nd Edition year 2008, which is not less than 90.0% and not more than 110.0% from the labeled amount. Form the result of method validation test was done to generic clopidogrel tablets from Dexa Medica, it was obtained the % recovery was 100.29% with RSD was 1.02%. It means that this method has the good accuracy and precision. Limit of detection (LOD) was 0.842 µg/ml and limit of quantitation was 2.809 µg/ml. Keyword : clopidogrel, visible spectrophotometry, potassium permanganate
DAFTAR ISI JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... Halaman i iii iv vi vii viii xii xiii xiv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Perumusan Masalah... 3 1.3 Hipotesis... 3 1.4 Tujuan Penelitian... 3 1.5 Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5 2.1 Klopidogrel... 5 2.1.1 Uraian Bahan... 5 2.1.2 Indikasi... 5 2.1.3 Farmakokinetik... 6 2.1.4 Efek Samping... 7 2.1.5 Dosis... 7
2.2 Kalium Permanganat... 7 2.3 Reaksi Klopidogrel dengan Kalium Permanganat... 8 2.3.1 Reaksi Klopidogrel dengan Kalium Permanganat dalam Suasana Asam... 8 2.3.2 Reaksi Klopidogrel dengan Kalium Permanganat dalam Suasana Basa... 9 2.4 Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel... 9 2.4.1 Aspek Kualitatif dan Kuantitatif Spektrofotometri UV- Visibel... 11 2.4.1.1 Aspek Kualitatif... 11 2.4.1.2 Aspek Kuantitatif... 11 2.4.2 Instrumen Spektrofotometer... 12 2.5. Validasi Metode Analisis... 13 2.5.1 Kecermatan (accuracy)... 14 2.5.2 Keseksamaan (precision)... 15 2.5.3 Spesifitas... 15 2.5.4 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi... 15 2.5.5 Linieritas dan Rentang... 15 2.5.6 Kekuatan (robustness)... 16 BAB III METODE PENELITIAN... 17 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian... 17 3.2 Alat dan Bahan... 17 3.2.1 Alat-Alat... 17 3.2.2 Bahan... 17 3.3 Pengambilan Sampel... 17
3.4 Pembuatan Pereaksi... 18 3.5 Prosedur Penelitian... 18 3.5.1 Pembuatan Pembuatan Larutan Induk Baku Klopidogrel Bisulfat... 18 3.5.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum... 19 3.5.3 Penentuan Operating Time... 19 3.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi... 19 3.5.5 Penentuan Kadar Klopidogrel dalam Sediaan Tablet... 19 3.5.6 Uji Validasi dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi, dan Batas Kuantitasi... 20 3.5.6.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (% recovery)... 20 3.5.6.2 Uji Presisi... 20 3.5.6.3 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)... 21 3.5.7 Analisis Data Secara Statistik... 21 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 23 4.1 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum... 23 4.2 Penentuan Operating Time... 25 4.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi... 25 4.4 Penentuan Kadar Klopidogrel dalam Sediaan Tablet... 27 4.5 Uji Validasi Metode... 27 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 29 5.1 Kesimpulan... 29 5.2 Saran... 29
DAFTAR PUSTAKA... 30 LAMPIRAN... 32
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Data Absorbansi dari Kurva Serapan Maksimum... 24 Tabel 2. Data Kurva Kalibrasi Kalium Permanganat dengan Penambahan Klopidogrel Bisulfat... 26 Tabel 3. Kadar Rata-Rata Klopidogrel dalam Sediaan Tablet... 27 Tabel 4. Data Hasil Uji Validasi Metode dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi (LOD), dan Batas Kuantitasi (LOQ) pada Tablet Klopidogrel Generik (PT Dexa Medica)... 28
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Metabolisme dari Klopidogrel... 6 Gambar 2. Diagram skematik Spektrofotometer UV-Visibel... 13 Gambar 3. Kurva Serapan Kalium Permanganat dengan Penambahan Klopidogrel Bisulfat BPFI konsentrasi 20 µg/ml... 24 Gambar 4. Kurva Kalibrasi Kalium Permanganat dengan Penambahan Klopidogrel Bisulfat... 25 Gambar 5. Tablet Klopidogrel Generik... 52 Gambar 6. Tablet Klopidogrel Merek Dagang... 52 Gambar 7. Spektrofotometer UV-Visibel... 54
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Data Pengukuran Operating Time Kalium Permanganat dengan Penambahan Klopidogrel Bisulfat... 32 Lampiran 2. Perhitungan Persamaan Regresi Kalium Permanganat dengan Penambahan Klopidogrel Bisulfat... 33 Lampiran 3. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel... 34 Lampiran 4. Perhitungan Statistik kadar Klopidogrel Bisulfat dalam Tablet Klopidogrel Generik Dexa Medica... 35 Lampiran 5. Perhitungan Statistik kadar Klopidogrel Bisulfat dalam Tablet Klopidogrel Generik PT Hexpharm Jaya... 36 Lampiran 6. Perhitungan Statistik kadar Klopidogrel Bisulfat dalam Tablet Vaclo (Dexa Medica)... 38 Lampiran 7. Perhitungan Statistik kadar Klopidogrel Bisulfat dalam Tablet Plavos (Soho)... 40 Lampiran 8. Perhitungan Statistik kadar Klopidogrel Bisulfat dalam Tablet Pidovix (Lapi)... 42 Lampiran 9. Data Kadar Klopidogrel dalam Sediaan Tablet... 43 Lampiran 10. Perhitungan Persentase (%) Perolehan Kembali... 44 Lampiran 11. Data Hasil Uji Validasi Metode dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi (LOD), dan Batas Kuantitasi (LOQ) pada Tablet Klopidogrel Generik (PT Dexa Medica)... 46 Lampiran 12. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)... 47 Lampiran 13. Nilai Distribusi t... 48 Lampiran 14. Surat Sertifikasi Bahan Baku POM... 49 Lampiran 15. Surat Sertifikasi Bahan Baku Pabrik Klopidogrel Bisulfat (PT Soho Industri Farmasi)... 50
Lampiran 16. Tablet Klopidogrel yang Digunakan... 52 Lampiran 17. Data Spesifikasi Sampel... 53 Lampiran 18. Alat Spektrofotometer UV-Visibel... 54