38 HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Pengamatan I: Pengaruh pemberian kombinasi minyak ikan dan vitamin E berbeda dalam pakan untuk memperbaiki kualitas telur, dan larva, serta kinerja reproduksi Penambahan kombinasi dosis minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) pada performans reproduksi hasil pengamatan I, yang terdiri dari indeks gonad somatik, diameter telur, fekunditas, jumlah induk yang memijah, derajat tetas telur, dan ketahanan hidup larva disajikan pada Tabel 8. Tabel 8. Nilai rataan indeks gonad somatik, diameter telur, fekunditas, jumlah induk yang memijah, derajat tetas telur, dan ketahanan hidup larva ikan nila (Oreochromis niloticus) Perlakuan (MI. g/kg;ve. mg/kg) Indeks Gonad Somatik (%) Diameter Telur (mm) Fekunditas Jumlah Induk Memijah Derajat Tetas Telur (%) Ketahanan Hidup Larva (Hari) A (1;5) 2.4±.33 ef 1.62±.43 a 343.±13.51 l 14.±.71 bc 7.±3.46 j 5.±.22 f B (1;1) 2.42±.32 de 1.6±.4 a 385.±7.42 k 1.8±.84 e 74.4±1.67 hi 5.1±.27 f C (1;15) 2.31±.27 ef 1.66±.4 a 39.±4.6 j 1.2±.45 e 78.2±3.3 gh 5.±.19 f D (1;2) 1.61±.47 g 1.53±.43 a 352.±6.4 l 1.4±.55 e 82.±3.81 efgh 5.2±.12 f E (2;5) 1.93±.58 ef 1.67±.39 a 366.2±3.51 kl 11.4±.89 cde 83.±4.3 g 5.4±.16 ef F (2;1) 2.47±.23 cde 1.72±.39 a 433.2±3.66 hi 11.4±.55 cde 82.±3.39 g 5.32±.24 f G (2;15) 1.91±.68 fg 1.69±.42 a 387.±16.55 jk 12.8±2.17 bcde 84.±3.81 g 5.6±.19 de H (2;2) 1.91±.65 f 1.72±.39 a 492. ± 9.87 d 12.±2. cde 86.±3.81 bcde 5.8±.19 d I (3;5) 3.17±.25 a 1.79±.41 a 453.6±18.53 g 14.±3.67 bcd 88.±2.24 bc 6.1±.16 d J (3;1) 3.7±.24 a 1.74±.4 a 5.±13.3 cd 16.4±1.52 a 89.±1.58 b 6.2±.39 cd K (3;15 ) 3.25±.3 a 1.91±.41 a 6.2 ± 7.66 a 17.2±1.3 ab 95.±2.35 a 6.8±.1 a L (3;2) 3.4±.26 ab 1.77±.22 a 56.4±25. b 15.6±1.34 ab 9.±3.54 b 6.6±.16 ab M (4;5) 2.58±.29 bc 1.79±.37 a 45.±22.64 g 12.4±2.7 cde 84.±3.39 defg 6.3±.32 bc N (4;1) 2.54±.26 bcde 1.72±.34 a 48.±11.92 def 14.±3.54 bcd 82.±3.16 efg 6.5±.27 b O (4;15) 2.21±.37 ef 1.68±.42 a 475.6± 6.8 defg 11.2±2.5 cde 86.±2.24 bcd 6.±.22 d P (4;2) 2.57±.29 bcd 1.69±.37 a 488.2±12.54 de 12.4±2.7 cde 84.±3.39 cdef 5.9±.32 d Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf superskript yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak ada perbedaan (P>.5).
39 Perkembangan Gonad Hasil pengamatan nilai indeks gonad somatik secara keseluruhan berkisar antara 1.61-3.25% (Gambar 5). Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa kombinasi minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) dalam pakan mempengaruhi nilai indeks gonad somatik (P<.5) (Lampiran 14). Nilai indeks gonad somatik tertinggi diperoleh ikan yang diberi pakan kombinasi perlakuan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg), yaitu sebesar (3.25%), diikuti oleh kombinasi perlakuan J (MI.3 g/kg; VE. 1 mg/kg) sebesar (3.7%), dan kombinasi perlakuan L (MI. 3 g/kg; VE. 2 mg/kg) sebesar (3.4%). 4 Indeks gonad somatik (%) 3 2 1 14 28 42 56 7 Pengamatan hari ke- A B C D E F G H I J K L M N O P Keterangan: : A (MI. 1; VE. 5), B (MI. 1; VE. 1), C (MI. 1; VE. 15), D (MI. 1; VE. 2) E (MI. 2; VE. 5), F (MI. 2; VE. 1), G (MI. 2; VE. 15), H (MI. 2; VE. 2) I (MI. 3; VE. 5), J (MI. 3; VE. 1), K (MI. 3; VE. 15), L (MI. 3; VE. 2) M (MI. 4; VE. 5), N (MI. 4; VE. 1), O (MI. 4; VE. 15), P (MI. 4; VE. 2) Gambar 5. Perkembangan indeks gonad somatik ikan nila Nilai rataan indeks gonad somatik ikan nila dari masing-masing perlakuan selama 7 hari percobaan memperlihatkan pola yang masih meningkat. Pada hari ke-14 dan hari ke-28 induk ikan mencapai fase persiapan dari tahapan siklus reproduksi yang dicirikan oleh komposisi oosit ovarium setiap perlakuan, yang
4 sebagian besar terdiri atas oosit stadium 2 dan 3 (pravitelogenesis). Pada fase ini terjadi proses peningkatan ukuran oosit yang disebabkan oleh peningkatan volume sitoplasma serta material yang disintesis hormon steroid reproduksi yang disintesis oleh ovarium (endogenous vitelogenesis). Selanjutnya, pada hari ke-42 sebagian besar induk ikan mencapai tingkat kematangan gonad (TKG IV), tetapi pada pertengahan percobaan ini tidak ditemui induk yang melepaskan telur. Kemudian pada hari ke-56 dan hari ke-7 mulai terlihat penurunan pada semua perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa induk ikan nila telah selesai melakukan ovulasi atau pelepasan telur pada tahap pertama proses reproduksinya. Hasil analisis polinomial ortogonal pengaruh penambahan minyak ikan pada indeks gonad somatik memberi kurva respons kuadratik mengikuti persamaan y = 2.39+.17x-.1x 2. Artinya, nilai indeks gonad somatik meningkat seiring dengan peningkatan dosis penambahan minyak ikan sebesar 3 g/kg pakan serta mencapai nilai indeks gonad somatik optimal 2.92%, dengan nilai r 2 =.61 (Gambar 6). 3.5 3 Indeks gonad somatik (%) 2.5 2 1.5 1.5 y = 2.39 +.17x-.1x 2 r 2 =.61 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 6. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan indeks gonad somatik pada ikan nila
41 Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan vitamin E pada indeks gonad somatik memberi kurva respons kuadratik y=1.47+.2x-.9x 2. Artinya, nilai indeks gonad somatik meningkat seiring dengan peningkatan dosis penambahan vitamin E sebesar 15 mg/kg pakan serta mencapai nilai indeks gonad somatik optimal sebesar 2.92%, dengan nilai r 2 =.61 (Gambar 7). 3.5 Indeks gonad somatik (%) 3 2.5 2 1.5 1.5 y = 1.47+.2x-.9x 2 r 2 =.61 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg) Gambar 7. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan indeks gonad somatik pada ikan nila Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa interaksi perlakuan kombinasi minyak ikan dosis 3 g/kg dan vitamin E dosis 15 mg/kg pakan terhadap indeks gonad somatik optimal 2.92% adalah sangat berbeda nyata (P<.5) (Lampiran 13). Pada uji kontras dinyatakan bahwa interaksi perlakuan kombinasi antara penambahan minyak ikan dan vitamin E terhadap indeks gonad somatik adalah berpolakan kuadratik. Agar lebih jelas, interaksi hubungan kombinasi penambahan minyak ikan dan vitamin E disajikan pada Gambar 8.
42 4 3.5 Indeks gonad somatik (%) 3 2.5 2 1.5 1.5 1 minyak ikan (g/kg) 2 3 4 5 1 15 2 Vit. E (mg/kg) Gambar 8. Hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap indeks gonad somatik pada ikan nila Hasil pengamatan struktur histologis gonad disajikan pada Gambar 9. Perkembangan dan pertumbuhan sel telur dapat diketahui melalui struktur histologis gonad, dimana interaksi perlakuan kombinasi minyak ikan dan vitamin E memberi pengaruh pada perkembangan dan pertumbuhan sel telur. Sediaan histologis yang ditampilkan pada Gambar 9a adalah telur dengan kondisi TKG II sebelum induk ikan mulai diberi perlakuan. Pada gambar tersebut ovari terdiri atas oosit dan sel-sel yang berada di dalam folikel. Kondisi oosit tampak tidak seragam karena ikan nila termasuk partial spawner, yaitu mengeluarkan telur tidak sekaligus melainkan secara bertahap (Gambar 9a dan Gambar 9d).
43 l eu g oc g n oa ob oi n od g Gambar 9. Struktur histologi gonad pada perlakuan K (MI.3g/kg;VE.15mg/kg) (Pengamatan histologi dilakukan pada bagian tengah ovarium dengan Bouin s HE 56x) Keterangan : a. Oosit dalam lamela, Tingkat Kematangan Gonad I (TKG I) b. Oosit TKG II, euvitelin (eu) dengan granular kuning telur (g) c. Oosit TKG III, granular kuning telur (g) dan butir lemak (oi) mengisi sitoplasma, dan inti (n) mulai bergerak ke tepi sel d. Oosit dalam berbagai stadia oa: Oosit TKG I, ob: Oosit TKG II, oc: Oosit TKG III, od: Oosit TKG IV. Selanjutnya pada Gambar 9b ditunjukkan oosit stadium III yang mulai tumbuh, berkembang, dan tampak diameter telur mulai membesar serta butiran telur terlihat jelas. Pada tahap ini perkembangan gonad telah memasuki TKG III.
44 Pada TKG III mulai terjadi proses vitelogenesis sehingga tingkat ini disebut juga sebagai fase akumulasi kuning telur dan tahap pematangan gonad. Pada Gambar 9c terlihat telur memasuki tahap kematangan akhir yang ditandai dengan posisi inti sel yang berada di tepi atau berada di kutub anima (TKG IV). Artinya, ikan sudah siap dipijahkan. Hal ini sesuai dengan nilai indeks gonad somatik, ikan yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg) mencapai indeks gonad somatik paling tinggi, yaitu 3.25%. Hubungan antara indeks gonad somatik (IGS) dan tingkat kematangan gonad (TKG) dapat ditunjukkan dengan perkembangan garis tengah telur. Isi telur yang ditunjukkan dengan garis tengah telur merupakan hasil pengendapan kuning telur selama proses vitelogenesis. Dari hubungan ini didapatkan ukuran garis tengah telur yang terbesar pada waktu akan terjadi pemijahan sebagai ukuran telur yang masak dalam proses pemijahan. Penelusuran terhadap ukuran telur masak dalam komposisi ukuran telur secara keseluruhan dapat menjadi penuntun ke pendugaan pola pemijahan ikan. Hasil pengamatan histologis pada testis menunjukkan adanya perbedaan kepadatan sel-sel spermatozoa maupun spermatid dalam tubulus seminiferi setiap perlakuan. Kepadatan sel-sel spermatozoa (spermatid) dalam tubulus seminiferi merupakan hasil sperma terbaik (Gambar 1a). Pada tingkat perkembangan testis II (Tahap perkembangan) ukuran testis lebih besar dari tingkat perkembangan testis I. Secara histologis, pada tingkat perkembangan testis II ini kantong-kantong tubulus seminiferi mulai berisi spermatosit yang berasal dari perkembangan spermatogonium (Gambar 1b). Spermatozoa yang mempunyai ciri di atas memiliki motilitas dan viabilitas tinggi sehingga dapat meningkatkan nilai fertilitas. Selanjutnya, pada gonad jantan yang berada pada TKG III, testis berukuran lebih besar dari tingkat perkembangan II. Pada tingkat kematangan gonad ini, testis mengisi hampir setengah rongga perut, berwarna lebih putih, jaringan ikat gonad terlihat lebih sedikit, spermatid menyebar, tetapi sebagian masih terlindung oleh kista yang berbentuk kantong. Secara histologis, spermatid dan spermatozoa lebih dominan (Gambar 1c).
45 Gambar 1. Gambaran histologi testis ikan nila (Oreochromis niloticus) Keterangan : a: testis stadium I, b: testis stadium II, c: testis stadium III, d: testis stadium IV spt: spermatid, spg: spermatogonium, sps: spermatosid, spz: spermatozoa (Pengamatan histologi dilakukan pada bagian tengah testis dengan Bouin s HE 56 x)
46 Pembentukan spermatozoa telah berakhir kapan dan ikan siap untuk melakukan spermiasi. Dengan kata lain, perkembangan testis sudah masuk tahap TGK IV sehingga testis makin besar dan pejal mengisi sebagian besar rongga perut, dan induk ikan jantan sudah siap dipijahkan (Gambar 1d). Secara histologis, dalam testis masih terlihat sisa sel-sel spermatozoa dan spermatid yang belum dikeluarkan pada saat pemijahan. Pada tahap ini masih dijumpai spermatogonium yang akan berkembang menjadi spermatosit, spermatid, dan spermatozoa untuk pemijahan berikutnya. Selanjutnya, tingkat perkembangan ini dinamakan lepas salin (spent), yaitu testis terlihat mengempis dan pada bagian tertentu kosong karena semen telah dikeluarkan pada saat pemijahan, dan terdapat sisa spermatozoa dan spermatid yang belum dikeluarkan pada saat pemijahan. Diameter Telur Hasil pengamatan ukuran diameter telur menunjukkan bahwa ikan nila memiliki pola reproduksi tipe asinkronisasi. Berdasarkan 1 contoh oosit sample pada setiap stadium diperoleh data distribusi frekuensi diameter telur dan nilai rataan diameter telur disajikan pada Lampiran 8 dan Lampiran 9. Analisis statistik menunjukkan bahwa kombinasi penambahan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan tidak mempengaruhi terhadap diameter telur (P>.5) (Lampiran 13). Nilai indeks gonad somatik meningkat seiring dengan meningkatnya penambahan minyak ikan dosis 3 g/kg dan vitamin E dosis 15 mg/kg pakan serta mencapai nilai diameter telur optimal 1.84 mm, dengan r 2 =.58 disajikan pada Gambar 11 dan Gambar 12. Jumlah telur pada setiap selang diameter telur pada masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Lampiran 8 dan Lampiran 9. Diameter telur terbaik pada pakan K (minyak ikan 3 g/kg dan vitamin E 15 mg/kg pakan), yaitu rataan berukuran 1.91±.41 mm dan terbanyak pada ukuran 1.71-2. mm (1 butir). Diameter telur terendah pada pakan D (minyak ikan 1 g/kg; vitamin E 2 mg/kg pakan), yaitu rataan berukuran 1.53±.43 mm dan terbanyak pada ukuran 1.4-1.6 mm (1 butir).
47 2.5 Dimaeter telur (mm) 2 1.5 1.5 y =1.58 +.7x -.4x 2 r 2 =.58 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 11. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan diameter telur pada ikan nila 2.5 Diameter telur (mm) 2 1.5 1.5 y = 1.22+.1x-.3x 2 r 2 =.58 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg) Gambar 12. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan diameter telur pada ikan nila
48 Hasil ini menunjukkan bahwa induk ikan memperoleh pakan dengan kualitas nutrien yang hampir sama setiap perlakuan sehingga unsur nutrien yang terkandung dalam telur juga tidak berbeda, walaupun dengan penambahan minyak ikan dan vitamin E ke dalam pakan untuk setiap perlakuan berbeda. Fungsi vitamin E sebagai antioksidan pada percobaan ini terlihat dari peningkatan kandungan lemak dalam telur, meskipun peningkatan tersebut untuk setiap perlakuan relatif hampir sama (Gambar 13). 2.5 2 Diameter telur (mm) 1.5 1.5 1 2 Miyak ikan(g/kg) 2 15 3 4 5 1 Vit. E (mg/kg) Gambar 13. Hubungan antara penambahan dosis kombinasi minyak ikan dan vitamin E terhadap diameter telur pada ikan nila
49 Fekunditas Fekunditas tertinggi ditemukan pada ikan yang mendapat pakan K (MI.3 g/kg; VE.15 mg/kg) yaitu sebesar (6.2±7.66) yang diikuti oleh ikan yang mendapat pakan L (MI. 3 g/kg; VE. 2 mg/kg), yaitu sebesar (56.4±25.), dan J (MI.3 g/kg; VE.1 mg/kg) sebesar (5.±13.3). Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian kombinasi minyak ikan dan vitamin E mempengaruhi fekunditas (P<.5) (Lampiran 15). Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan minyak ikan memberi pola respons kuadratik itu artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 1 sampai 3 g/kg meningkatkan fekunditas. Peningkatan penambahan dosis minyak ikan diatas 3 g/kg menyebabkan penurunanan fekunditas mengikuti persamaan y = 356.45+29.47x-1.54x 2. Nilai fekunditas optimal sebesar 497.77 pada pemberian minyak ikan 3 g/kg dengan nilai r 2 =.58 (Gambar 14). 7 6 Fekunditas (butir/ekr induk) 5 4 3 2 1 y = 356.45+29.47x -1.54x 2 r 2 =.58 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 14. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan fekunditas pada ikan nila Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan vitamin E memberi pola respons kuadratik itu artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 5 sampai 15 mg/kg meningkatkan fekunditas. Peningkatan dosis vitamin E diatas 2 mg/kg
5 menyebabkan penurunanan fekunditas persamaan y = 26.57+3.53x-.1x 2. Nilai fekunditas optimal sebesar 498 pada pemberian vitamin E 15 mg/kg dengan nilai r 2 =.58 (Gambar 15). 7 6 5 Fekunditas 4 3 2 1 y =26.57+3.53x -.1x 2 r 2 =.58 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg) Gambar 15. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan fekunditas pada ikan nila Hasil pengamatan menunjukkan bahwa nilai rataan fekunditas tertinggi ditemukan pada ikan yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg), yaitu sebesar 6.2 butir/ekor (Lampiran 9). Hasil ini membuktikan bahwa pemberian minyak ikan sebesar 3 g/kg dan vitamin E sebesar 15 mg/kg pakan dapat mempertahankan keberadaan asam lemak n-3 dan vitamin E dalam telur (Tabel 1). Analisis sidik ragam menunjukkan bahwa penambahan kombinasi minyak ikan dan vitamin E mempengaruhi fekunditas (P<.5) (Lampiran 15). Fekunditas telur meningkat sejalan dengan peningkatan kandungan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan. Hasil ini diduga karena induk ikan nila memperoleh pakan dengan kualitas yang sama sehingga unsur nutrien yang terkandung dalam telur juga hampir sama, meskipun penambahan minyak ikan dan vitamin E setiap perlakuan berbeda. Nilai fekunditas optimal sebesar 498 butir dengan nilai
51 tertinggi fekunditas diperoleh pada ikan yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg), yaitu sebesar 6 butir/ekor. Untuk memperjelas hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap fekunditas disajikan pada Gambar 16. Fekunditas (ekor) 7 6 5 4 3 2 1 1 Minyak ikan (g/kg) 2 3 4 5 1 2 15 Vit. E (mg/kg) Gambar 16. Hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap fekunditas pada ikan nila Jumlah Induk yang Memijah Berdasarkan hasil pengamatan jumlah kumulatif induk ikan matang gonad selama percobaan, ternyata jumlah induk memijah lebih tinggi pada induk nila yang diberi pakan K ( MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg), yaitu sebanyak 17 ekor, yang diikuti oleh ikan yang diberi pakan J (MI.3 g/kg; VE.1 mg/kg), yaitu sebanyak 16 ekor, dan pakan L (MI. 3 g/kg; VE. 2 mg/kg) sebanyak 15 ekor (Tabel 9).
52 Tabel 9. Jumlah kumulatif induk ikan nila yang memijah selama penelitian Induk nila yang memijah hari ke- Perlakuan (MI. ; Vit. E) 14 42 56 7 Tidak Memijah Mortalitas A (1;5) - - 1 8 14 4 2 B (1;1) - - 1 4 1 9 1 C (1;15) - - 1 3 1 8 2 D (1;2) - 1 2 6 1 9 1 E (2;5) - - 1 5 11 8 1 F (2;1) - 1 2 7 11 7 2 G (2;15) - - 1 8 12 6 2 H (2; 2) - - 1 7 12 7 1 I (3;5) - 1 2 9 14 5 1 J (3;1) - - 2 1 16 2 2 K (3;15) - 1 3 12 17 2 1 L (3;2) - - 2 11 15 4 1 M (4;5) - 1 3 9 12 6 2 N (4;1) - - 2 1 14 5 1 O (4;15) - - 2 8 11 7 2 P (4;2) - 1 3 9 12 6 2 Hasil pengamatan jumlah kumulatif induk ikan matang gonad selama percobaan menunjukkan bahwa kecepatan pematangan gonad dan jumlah induk memijah lebih tinggi pada induk nila yang diberi pakan formula K (MI.3g/kg; VE.15 mg/kg), yaitu sebanyak 17 ekor. Minyak ikan dan vitamin E yang optimal dalam pakan mampu menjaga ketersediaan HUFA dalam pakan sebagai unsur utama dalam proses pematangan gonad. Oleh karena itu, kecukupan minyak ikan dan vitamin E ini diperkirakan dapat melindungi sel ovarium dan menstimulasi perkembangan ovarium sehingga ikan dapat mencapai kematangan gonad yang lebih cepat dan produksi telur yang lebih tinggi. Kombinasi penambahan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan yang diberikan pada induk ikan nila mempengaruhi jumlah induk memijah (P<.5) (Lampiran 16). Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan minyak ikan memberi pola respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 1 sampai 3 g/kg meningkatkan jumlah induk memijah. Peningkatan dosis minyak
53 ikan diatas 3 g/kg menyebabkan penurunanan jumlah induk memijah mengikuti persamaan y = 1.43+1.54x-.12x 2. Nilai jumlah induk yang memijah optimal sebanyak 15.48 ekor induk pada pemberian minyak ikan 3 g/kg dengan nilai r 2 =.8 (Gambar 17). 2 18 Jumlah induk memijah (ekor) 16 14 12 1 8 6 4 y = 1.43 + 1.54x -.12x 2 r 2 =.8 2 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 17. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan jumlah induk yang memijah pada ikan nila Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan vitamin E memberi pola respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 5 sampai 15 mg/kg meningkatkan jumlah induk memijah. Peningkatan dosis vitamin E diatas 2 mg/kg menyebabkan penurunanan jumlah induk memijah mengikuti persamaan y = 1.96+.21x-.1x 2. Nilai jumlah induk yang memijah optimal sebanyak 15.48 ekor induk pada pemberian vitamin E 15 mg/kg dengan nilai r 2 =.8 (Gambar 18).
54 Jumlah induk memijah (ekor) 2 18 16 14 12 1 8 6 4 2 y = 1.96+.21x-.1x 2 r 2 =.8 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg pakan) Gambar 18. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan jumlah induk yang memijah pada ikan nila Untuk memperjelas hubungan penambahan dosis kombinasi minyak ikan dan vitamin E terhadap jumlah induk memijah disajikan pada Gambar 19. Hasil analisis sidik ragam ditunjukkan bahwa interaksi perlakuan kombinasi antara minyak ikan dan vitamin E berbeda nyata terhadap jumlah induk yang memijah (P<.5) (Lampiran 15). Pada uji kontras didapatkan bahwa interaksi perlakuan kombinasi minyak ikan dan vitamin E terhadap jumlah induk memijah berpolakan kuadratik. Jumlah induk memijah meningkat sejalan dengan meningkatnya kandungan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan..
55 Jumlah induk memijah (ekr) 2 18 16 14 12 1 8 6 4 2 1 2 Minyak ikan (g/kg) 2 3 4 5 1 15 Vit. E (mg/kg) Gambar 19. Hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap jumlah induk yang memijah pada ikan nila Derajat Tetas Telur Derajat tetas telur secara nyata dipengaruhi oleh penambahan minyak ikan dan vitamin E pakan. Induk ikan nila yang diberi kombinasi pakan dengan komposisi optimal menghasilkan telur dengan derajat penetasan secara nyata lebih baik pada perlakuan K (MI.3 g/kg; VE.15 mg/kg) yaitu sebesar 95.±2.35 yang diikuti oleh perlakuan L (MI. 3 g/kg; VE. 2 mg/kg) yaitu sebesar 9.±3.54 (Lampiran 11). Penambahan kombinasi minyak ikan dan vitamin E dalam pakan induk ikan nila mempengaruhi derajat tetas telur (P<.5) (Lampiran 17). Hasil analisis
56 polinomial ortogonal penambahan minyak ikan memberi pola respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 1 sampai 3 g/kg meningkatkan derajat tetas telur. Peningkatan penambahan dosis minyak ikan diatas 3 g/kg menyebabkan penurunanan derajat tetas telur (DTT) mengikuti persamaan y = 75.53+3.26x-.2x 2. Nilai derajat tetas telur optimal sebesar 88.66% pada pemberian minyak ikan 3 g/kg dengan nilai r 2 =.71 (Gambar 2). 1 9 8 Derajat tetas telur 7 6 5 4 3 2 y = 75.53+3.26x -.2x 2 r 2 =.71 1 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 2. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan derajat tetas telur pada ikan nila Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan vitamin E memberi pola respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 5 sampai 15 mg/kg meningkatkan derajat tetas telur pada ikan nila. Peningkatan dosis vitamin E diatas 2 mg/kg menyebabkan penurunanan derajat tetas telur mengikuti persamaan y = 58.4+.41x-.1x 2. Nilai jumlah derajat tetas telur optimal sebesar 88.66% pada pemberian vitamin E 15 mg/kg dengan nilai r 2 =.71 (Gambar 21).
57 Derajat tetas telur (%) 1 9 8 7 6 5 4 3 2 1 y = 58.4+.4131x-.14x 2 r 2 =.71 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg) Gambar 21. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan derajat tetas telur pada ikan nila Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa interaksi perlakuan kombinasi antara vitamin E dan minyak ikan berbeda nyata terhadap derajat tetas telur (P<.5) (Lampiran 17). Pada uji kontras tampak bahwa interaksi perlakuan kombinasi minyak ikan dan vitamin E terhadap derajat tetas telur berpolakan kuadratik. Jumlah induk memijah meningkat sejalan dengan peningkatan kandungan vitamin E dan minyak ikan dalam pakan. Kualitas telur yang baik dapat juga dilihat dari derajat tetas telur. Pemberian kombinasi minyak ikan dan vitamin E yang optimal akan menghasilkan derajat tetas telur yang lebih tinggi. Hasil ini membuktikan bahwa induk ikan nila yang memperoleh pakan dengan kualitas yang sama sehingga unsur nutrien yang terkandung dalam telur juga hampir sama, meskipun penambahan minyak ikan dan vitamin E masingmasing perlakuan berbeda. Nilai derajat tetas telur optimal sebesar (88.569%) dengan nilai tertinggi derajat tetas telur pakan perlakuan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg) sebesar (95%). Untuk jelasnya hubungan antara penambahan dosis kombinasi minyak ikan dan vitamin E terhadap derajat tetas telur disajikan pada Gambar 22.
58 1 9 Derajat tetas telur (%) 8 7 6 5 4 3 2 1 1 2 2 Minyak ikan (g/kg) 3 4 5 1 15 Vit. E (mg/kg) Gambar 22. Hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap derajat tetas telur pada ikan nila Ketahanan Hidup Larva Ketahanan hidup larva perlakuan kombinasi pakan memberi pengaruh nyata antar perlakuan. Induk ikan nila yang diberi kombinasi pakan dengan komposisi optimal pakan perlakuan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg) dapat menghasilkan ketahanan hidup larva sebesar 6.8±.1 hari (Lampiran 12). Hasil ini menunjukkan bahwa larva hasil pemijahan dari induk-induk yang menerima asupan suplementasi yang optimal pada pakan perlakuan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg) memberi ketahanan hidup larva yang lebih baik dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Kombinasi minyak ikan dan vitamin E dalam pakan yang diberikan pada induk ikan nila mempengaruhi ketahanan hidup larva (P<.5) (Lampiran 18). Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan minyak ikan memberi pola
59 respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 1 sampai 3 g/kg meningkatkan ketahanan hidup larva. Peningkatan penambahan dosis minyak ikan diatas 3 g/kg menyebabkan penurunanan ketahanan hidup larva mengikuti persamaan y = 4.99+.23x-.1x 2. Nilai ketahanan hidup larva optimal sebesar 6.26 hari pada pemberian minyak ikan 3 g/kg dengan nilai r 2 =.76 (Gambar 23). 8 7 Ketahanan hidup larva (hari) 6 5 4 3 2 1 y =4.99 +.23x-.1x 2 r 2 =.76 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan (g/kg) Gambar 23. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan ketahanan hidup larva pada ikan nila Hasil analisis polinomial ortogonal penambahan vitamin E memberi pola respons kuadratik yang artinya peningkatan dosis minyak ikan dari 5 mg/kg sampai 15 mg/kg meningkatkan derajat tetas telur pada ikan nila. Peningkatan dosis vitamin E diatas 2 mg/kg menyebabkan penurunanan derajat tetas telur mengikuti persamaan y = 3.88+.3x-.7x 2. Nilai ketahanan hidup larva optimal sebesar 6.26 hari pada pemberian vitamin E 15 mg/kg dengan nilai r 2 =.76 (Gambar 24).
6 8 7 Ketahanan hidup larva (hari) 6 5 4 3 2 1 y = 3.88+.3x-.7x 2 r 2 =.76 5 1 15 2 Penambahan vitamin E (mg/kg) Gambar 24. Hubungan antara penambahan dosis vitamin E dan ketahanan hidup larva pada ikan nila Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa interaksi penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E berbeda nyata terhadap ketahanan hidup larva (P<.5) (Lampiran 18). Hasil ini membuktikan bahwa induk ikan nila yang memperoleh pakan dengan kualitas yang baik dengan jumlah komposisi optimal menghasilkan telur dengan ukuran diameter yang lebih besar. Hasil ketahanan hidup larva pada perlakuan pakan uji K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg pakan) lebih baik, yaitu mencapai nilai ketahanan hidup larva optimal sebesar 6.26 hari. Untuk lebih jelasnya hubungan antara kombinasi perlakuan minyak ikan dan vitamin E terhadap derajat tetas telur disajikan pada Gambar 25.
61 1 Ketahanan hidup larva (hari) 9 8 7 6 5 4 3 2 1 1 2 2 Minyak ikan (g/kg) 3 4 5 1 15 Vit. E (mg/kg) Gambar 25. Hubungan antara penambahan kombinasi dosis minyak ikan dan vitamin E terhadap ketahanan hidup larva pada ikan nila Kandungan Asam Lemak n-3 dan Vitamin E dalam Telur dan Larva Pemberian minyak ikan dan vitamin E meningkatkan kandungan asam lemak n-3 dalam telur dan larva. Penurunan derajat ketahanan larva disebabkan larva ikan tidak diberi pakan (dipuasakan) dan pada akhirnya mati dan tersisa total larva 2%. Hasil analisis kandungan asam lemak n-3 dan vitamin E dalam telur, larva hari (L Hr) dan larva 2 hari (L 2 Hr) (Tabel 1).
62 Tabel 1. Kandungan asam lemak n-3 dan vitamin E (mg/kg) dalam telur, larva hari (LoHr) dan larva 2 hari (L 2 Hr) (% area) pada ikan nila Perlakuan (Minyak ikan g/kg dan Vit. E mg/kg) Kandungan vitamin E (mg/kg) dan asam lemak (% area) Bahan Telur Larva(L Hr) Larva(L 2 Hr) A (1;5) Asam Lemak n-3 5.68 3.48 2.65 Vitamin E 116.25 12.1 95.45 B (1;1) Asam Lemak n-3 6.46 4.14 3.48 Vitamin E 155.45 125.35 15.55 C (1;15) Asam Lemak n-3 6.89 4.68 3.84 Vitamin E 175.75 152.5 115.52 D (1; 2) Asam Lemak n-3 5.48 3.26 2.42 Vitamin E 225.45 173.15 125.55 E (2;5) Asam Lemak n-3 6.78 4.52 3.76 Vitamin E 16.45 89.4 75.49 F (2;1) Asam Lemak n-3 7.56 5.24 4.62 Vitamin E 145.45 112.37 15.35 G (2;15) Asam Lemak n-3 6.5 4.68 3.18 Vitamin E 265.35 252.2 232.32 H (2;2) Asam Lemak n-3 7.18 5.62 4.38 Vitamin E 295.15 273.5 255.35 I (3;5) Asam Lemak n-3 6.52 4.24 3.28 Vitamin E 16.65 92.3 75.85 J (3;1) Asam Lemak n-3 Vitamin E 7.86 131.45 5.28 12.35 4.64 12.55 K (3;15) Asam Lemak n-3 8.47 6.36 5.42 Vitamin E 185.5 172.15 162.25 L (3;2) Asam Lemak n-3 7.6 5.64 4.26 Vitamin E 294.4 283.85 271.15 M (4;5) Asam Lemak n-3 6.85 4.48 3.64 Vitamin E 136.47 124.25 15.45 N (4;1) Asam Lemak n-3 7.57 5.26 4.38 Vitamin E 156.94 143.65 125.3 O (4;15) Asam Lemak n-3 6.56 4.86 3.72 Vitamin E 295.87 282.51 262.34 P (4;2) Asam Lemak n-3 7.42 5.84 4.52 Vitamin E 35.42 293.14 275.51 Hubungan antara jumlah induk memijah, derajat tetas telur, dan ketahanan hidup larva dengan kadar minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) dalam pakan di uji secara deskriptif memperlihatkan pola kuadratik disajikan pada Gambar 26. Hal ini menunjukkan bahwa penambahan dosis minyak ikan dan vitamin E sampai batas tertentu atau optimal dapat meningkatkan nilai jumlah induk memijah, derajat tetas telur dan ketahanan hidup larva; tetapi akan menurun kembali apabila dosis minyak ikan dan vitamin E ditingkatkan. Berdasarkan uraian di atas dapat dikatakan bahwa kebutuhan optimal dosis minyak ikan sebesar 3 g/kg dan vitamin E 15 mg/kg dalam pakan induk ikan nila adalah pakan dengan perlakuan yang terbaik.
63 1 9 8 7 6 5 4 3 2 1 DTT (%) JIM (Ekor) KHL (Hari) A B C D E F G H I J Perlakuan K L M N O Keterangan: DTT : Derajat tetas telur JIM : Jumlah induk yang memijah KHL : Ketahanan hidup larva P Keterangan: : A (MI. 1; VE. 5), B (MI. 1; VE. 1), C (MI. 1; VE. 15), D (MI. 1; VE. 2) E (MI. 2; VE. 5), F (MI. 2; VE. 1), G (MI. 2; VE. 15), H (MI. 2; VE. 2) I (MI. 3; VE. 5), J (MI. 3; VE. 1), K (MI. 3; VE. 15), L (MI. 3; VE. 2) M (MI. 4; VE. 5), N (MI. 4; VE. 1), O (MI. 4; VE. 15), P (MI. 4; VE. 2) Gambar 26. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) terhadap jumlah induk memijah (JIM), derajat tetas telur (DTT), dan kelangsungan hidup larva (KHL) pada ikan nila Pembahasan Hasil pengamatan pada induk ikan nila yang diberi kombinasi penambahan dosis minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) dalam pakan menunjukkan bahwa hampir semua ikan dapat matang gonad, memijah, dan berhasil memproduksi larva. Waktu yang diperlukan dari proses pematangan gonad sampai dengan pemijahan berbeda-beda pada masing-masing kombinasi minyak ikan dan vitamin E. Hal ini menunjukkan bahwa perbedaan pemberian komposisi minyak ikan dan vitamin E dalam pakan dapat memperbaiki kinerja reproduksi ikan nila.
64 Kombinasi penambahan dosis minyak ikan (MI) dan vitamin E (VE) pada pakan induk nila memperbaiki kinerja reproduksi ikan uji. Pada percobaan ini induk yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg) menghasilkan indeks gonad somatik (3.25 ±.3), diameter telur (1.91±.41), fekunditas (6.2 ± 7.66), jumlah induk yang memijah (17.2 ±1.3), derajat tetas telur (95. ± 2.35), dan ketahanan hidup larva (6.8 ±.1) yang terbaik. Peningkatan nilai indeks gonad somatik dapat disebabkan oleh perkembangan oosit. Vitelogenin adalah bakal kuning telur yang merupakan komponen utama dari oosit yang sedang tumbuh (Tang dan Affandi 2). Pada saat proses vitelogenesis berlangsung, granula kuning telur bertambah dalam jumlah dan ukurannya sehingga volume oosit membesar (Yaron 1995). Selama proses tersebut berlangsung, sebagian besar hasil metabolisme tertuju pada perkembangan gonad (Yulfiperius 21). Selama proses produksi, sebagian besar hasil metabolisme tertuju pada perkembangan gonad. Hal ini menyebabkan perubahan dalam gonad itu sendiri. Umumnya pertambahan gonad pada ikan betina berkisar antara 1-25% dari bobot tubuh (Tang dan Affandi 2). Peningkatan kematangan telur dapat dilihat pada hasil histologis gonad setiap minggunya (Gambar 9). Hasil histologis ovari menunjukkan adanya sejumlah oosit pada minggu ke-1 (Gambar 9a), ovari mulai mengandung sel-sel yang berada pada folikel tahap TKG II. Hasil pengamatan histologis ovari minggu ke-4 (Gambar 9b) menunjukkan sejumlah oosit telah tumbuh dan memiliki satu nukleus besar tahap TKG III. Setelah itu adalah fase vitelogenesis, ketika ukuran oosit meningkat pesat yang diiringi dengan peningkatan akumulasi kuning telur minggu ke-6. Hasil pengamatan histologis ovari pada minggu ke-6 menunjukkan bahwa saat ini adalah fase pematangan oosit, yaitu nukleus mulai berimigrasi mendekati mikrofil (Gambar 9c). Nilai indeks gonad somatik awal reproduksi ini menunjukkan persentase gonad yang telah terbentuk dibandingkan dengan bobot tubuh selama masa pemeliharaan. Semakin tinggi persentase gonad berarti semakin banyak telur dan makin tinggi tingkat kematangan telur-telur tersebut. Pertambahan gonad pada induk betina dapat mencapai 1-25% dari bobot tubuh (Tang dan Affandi 2).
65 Hasil pengamatan diameter telur antarperlakuan tidak berbeda nyata. Hal ini terjadi karena pada saat ditebar induk ikan baru berumur 4 bulan dan belum pernah memijah. Hal ini berkaitan dengan ketepatan waktu dalam pemberian pakan dengan kualitas nutrien yang sudah ditingkatkan karena ketepatan waktu awal pemberian pakan akan berpengaruh pada keberhasilan repoduksi (Izquierdo et al. 21). Nilai fekunditas dari suatu spesies ikan dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain oleh pakan, ukuran ikan, diameter telur, dan faktor lingkungan. Selain itu, fekunditas merupakan suatu subjek yang dapat menyesuaikan dengan bermacam-macam kondisi terutama respons terhadap pakan (Effendie 22). Nilai rataan fekunditas tertinggi pada percobaan ditemukan pada ikan yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg), yaitu (6 butir/ekor) induk. Keberadaan asam lemak esensial pada membran sel dapat mempengaruhi sifat fluiditas membran sel serta berfungsi sebagai prekursor senyawa prostaglandin yang berperan sebagai hormon. Prostaglandin diketahui sebagai mediator kerja gonadotropin saat pecahnya folikel (ovulasi) pada ikan (Lam 1985). Prostaglandin juga terlibat dalam peningkatan c-amp yang dipicu oleh LH atau GTH-II. Dengan demikian, peningkatan fluiditas membran sel dan prostaglandin telur akan menyebabkan aksi gonadotropin dalam pembentukan telur meningkat dan fekunditas meningkat. Pemijahan merupakan proses yang meliputi percumbuan (kopulasi), ovulasi/spermiasi, dan fertilasi. Kopulasi merupakan perilaku ikan pada fase awal dari proses pemijahan. Selanjutnya, Watanabe (1988), melaporkan kadar vitamin E yang terbaik pada pakan ikan red seabream sebesar (.42 mg/g) pakan yang menghasilkan derajat tetas 95%, dan larva normal 97%. Selanjutnya Mokoginta (1991) melaporkan derajat tetas telur 82.3% pada ikan Lele yang diberi pakan yang mengandung.5% asam lemak. Induk ikan trout yang mendapat pakan yang mengandung asam lemak rendah akan menghasilkan telur dengan derajat tetas rendah (Leray et al. 1985). Seperti yang diungkapkan oleh Mokoginta et al. (2), penurunan atau peningkatan rasio asam lemak n-6/n-3 dalam telur akan menghambat keberhasilan proses embriogenesis. Asam lemak esensial yang terkandung dalam telur
66 berpengaruh pada stadia awal dan embriogenesis dan akan menentukan apakah embrio tersebut akan berkembang atau tidak (Mokoginta 1992). Asam lemak esensial berfungsi sebagai prekursor dari senyawa prostaglandin yang berperan sebagai hormon. Proses pengenalan antarsel dalam telur dipengaruhi oleh prostaglandin, jika telur kekurangan asam lemak esensial maka proses embriogenesis akan gagal (pada pembelahan sel ke-16, 32, dan organogenesis) dan akan menghasilkan derajat tetas telur yang rendah (Leray et al. 1985). Berdasarkan hasil penelitian Mokoginta et al. (2) diketahui bahwa penurunan atau peningkatan rasio asam lemak n-6/n-3 dalam telur akan menyebabkan derajat tetas telur rendah. Rasio asam lemak n-6/n-3 yang sesuai dengan kebutuhan embrio dalam telur akan mempengaruhi keberhasilan proses embriogenesis yang diperlihatkan oleh nilai derajat tetas telur yang tinggi. Kuning telur merupakan sumber nutrien dan energi utama bagi larva selama proses endogenous feeding, yang dimulai saat fertilisasi dan berakhir saat larva mulai memperoleh pakan dari luar (Kamler 1992). Asam lemak esensial yang terkandung dalam telur berpengaruh pada stadia awal embriogenesis dan akan menentukan apakah embrio tersebut dapat atau tidak berkembang. Laju penyerapan kuning telur pada penelitian ini tidak dipengaruhi oleh kadar asam lemak n-3 maupun n-6 yang ditambahkan pada pakan. Pada saat embriogenesis sumber energi utama adalah lemak. Protein, walaupun kadarnya terbesar dalam telur, lebih berperan dalam pembentukan jaringan. Namun demikian yang mempengaruhi laju penyerapan kuning telur pada saat embriogenesis terutama asam lemak jenuhnya. Asam lemak jenuh berperan sebagai sumber energi sedangkan sebagian besar asam lemak tak jenuh berperan dalam pengaturan permeabilitas membran. Tingkat kelangsungan hidup larva tidak dipengaruhi oleh penambahan minyak ikan dalam pakan. Pada saat belum mendapatkan pakan dari luar, larva masih mengandalkan kandungan kuning telur (terutama lemak) sebagai sumber energinya. Keberadaan lemak dalam telur penting untuk perkembangan selanjutnya (Tang dan Affandi 2). Bagian lemak yang digunakan sebagai sumber energi adalah sebagian besar asam lemak jenuhnya. Sebagian besar asam lemak tidak jenuh digunakan untuk pembentukan jaringan.
67 Ketika larva belum mendapat pakan dari luar, larva masih mengandalkan kandungan kuning telur sebagai sumber energi utama yang pada akhirnya akan mempengaruhi ketahanan hidup larva. Selanjutnya Alava et al. (1993) menyatakan bahwa asam lemak n-3 dan vitamin E yang diberikan dalam pakan induk mempunyai suatu peranan penting dalam proses reproduksi, yang pada akhirnya akan mempengaruhi kualitas telur, seperti derajat tetas telur dan kelangsungan hidup larva. Kebutuhan asam lemak esensial setiap spesies ikan berbeda-beda untuk ikan air tawar lebih membutuhkan asam lemak n-6 atau campuran dari asam lemak n-3 dan n-6. Kisaran kebutuhan asam lemak n-3 secara umum antara.5% - 2.5% (Furuichi 1988), serta kebutuhan asam lemak n-3 HUFA sebesar 2.4-3.7% dalam pakan induk Plectorhynchus cinctus (Yuan-you Li et al. 25). Pemberian vitamin E dan minyak ikan memperbaiki komposisi nutrisi dalam telur dan larva. Pemberian kombinasi minyak ikan dan vitamin E induk ikan nila akan meningkatkan kandungan asam lemak dalam telur dan larva, sejalan dengan peningkatan kandungan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan. Laju penyerapan kuning telur yang dihasilkan antarperlakuan adalah berbeda nyata antarperlakuan karena jumlah cadangan energi yang dibutuhkan pada proses pematangan gonad berbeda setiap perlakuan. Lemak merupakan sumber energi utama selama proses embriogenesis. Kandungan kadar lemak telur yang berbeda diduga adalah sisa lemak telur tertinggi setelah larva menetas, yaitu pada perlakuan K (MI. 3 g/kg; VE. 15 mg/kg) dalam pakan. Pada perkembangan awal larva selama pemeliharaan, larva yang baru menetas menggunakan kuning telur sebagai sumber energi karena belum tersedianya pakan tambahan dari luar. Selanjutnya, peningkatan dosis minyak ikan dan vitamin E dalam pakan induk juga akan meningkatkan kadar asam lemak n-3 dan vitamin E dalam telur. Pada masa embriogenesis dan perkembangan larva, tambahan asam lemak n-3 pada setiap perlakuan dapat dimanfaatkan, akan tetapi tingkat pemanfaatannya untuk setiap perlakuan berbeda-beda, dan ini terlihat dengan terjadinya penurunan kandungan asam lemak dari telur sampai dengan larva dua hari.
68 Asam lemak n-3 dan vitamin E dibutuhkan secara bersamaan untuk pematangan gonad ikan dan dosis vitamin E dalam pakan akan bergantung pada kandungan asam lemak yang ada dalam pakan tersebut. Semakin tinggi kandungan asam lemak pakan maka kebutuhan vitamin E meningkat pula (Watanabe et al. 1991). Induk ikan trout yang mendapat pakan yang mengandung asam lemak rendah akan menghasilkan telur dengan derajat tetas rendah (Leray et al. 1985). Dilaporkan bahwa induk ikan yang diberi pakan yang kurang asam lemak esensialnya akan menghasilkan telur yang rendah daya tetasnya dan sebagian besar dari larva yang dihasilkan adalah abnormal (Watanabe et al. 1984).
69 Hasil Pengamatan II: Pengaruh Konsentrasi Estradiol-17ß Plasma Darah dalam Proses Pematangan Gonad Hasil pengamatan terhadap konsentrasi estradiol-17ß dalam plasma darah ikan nila pada pengamatan II disajikan pada Tabel 11 dan Gambar 27. Hasil percobaan menunjukkan bahwa konsentrasi estradiol-17ß plasma darah pada awal percobaan berkisar antara.85-1.89 ng/ml, dan terus meningkat pada hari ke-28 mencapai puncak pada hari ke-42 yang berkisar antara 3.62-7.84 ng/ml. Pada fase ini terlihat bahwa kadar estradiol-17ß pada ikan nila berada pada fase persiapan awal perkembangan ovarium. Kadar estradiol-17 ß plasma darah induk ikan nila pada fase persiapan aktivitas reproduksi mencapai nilai antara.85-3.98 ng/ml. Kadar rataan estradiol-17ß plasma darah ikan nila masing-masing perlakuan memperlihatkan pola berbeda. Tabel 11. Nilai rataan kadar estradiol-17ß (ng/ml) ikan nila Pengamatan hari ke- Perlakuan (MI. ; Vit. E) 14 28 42 56 7 A (1;5).92 2.59 3.45 5.25 6.3 5.2 B (1;1).85 2.56 4.36 5.28 5.42 4.85 C (1;15).98 2.26 3.62 5.65 6.28 5.38 D (1;2).91 2.9 3.64 5.64 5.84 4.74 E (2;5).95 2.59 4.82 5.24 6.42 5.72 F (2;1) 1.36 2.46 4.23 6.32 5.62 4.52 G (2;15) 1.48 2.36 4.81 6.74 4.92 3.68 H (2;2) 1.57 3.7 4.56 5.34 6.82 5.61 I (3;5) 1.49 2.74 4.58 6.15 5.72 4.58 J (3;1) 1.64 3.82 5.47 6.25 5.84 4.37 K (3;15 ) 1.78 3.98 6.62 7.84 6.85 5.68 L (3;2) 1.72 3.72 5.64 6.75 5.23 3.65 M (4;5) 1.86 3.62 5.89 6.92 5.38 3.54 N (4;1) 1.89 3.58 5.74 6.25 5.23 4.34 O (4;15) 1.85 3.41 5.64 6.15 5.82 4.48 P (4;2) 1.87 3.6 5.64 6.84 5.92 4.78
7 8 Nilai rataan kadar estradiol-17ß (ng/ml) 7 6 5 4 3 2 1 14 28 42 56 7 Pengamatan hari ke- A B C D E F G H I J K L M N O P Keterangan: : A (MI. 1; VE. 5), B (MI. 1; VE. 1), C (MI. 1; VE. 15), D (MI. 1; VE. 2) E (MI. 2; VE. 5), F (MI. 2; VE. 1), G (MI. 2; VE. 15), H (MI. 2; VE. 2) I (MI. 3; VE. 5), J (MI. 3; VE. 1), K (MI. 3; VE. 15), L (MI. 3; VE. 2) M (MI. 4; VE. 5), N (MI. 4; VE. 1), O (MI. 4; VE. 15), P (MI. 4; VE. 2) Gambar 27. Kadar estradiol-17ß plasma darah ikan nila Induk ikan yang mendapatkan pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg) memperlihatkan konsentrasi estradiol-17ß yang meningkat pada akhir percobaan yang mencapai nilai maksimum pada hari ke-42 serta turun pada hari ke-54 dan hari ke-7 (Gambar 27). Penurunan ini disebabkan karena sebagian besar induk telah mencapai TKG IV. Artinya, kadar estradiol-17ß menurun menjelang ovulasi pada TKG IV. Sebaliknya pada kelompok ikan yang mendapat pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg) terlihat bahwa sebagian besar induk ikan telah mencapai TKG III pada hari ke-42 ketika proses vitologenesis masih berlangsung. Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa pemberian minyak ikan dan vitamin E mempengaruhi nilai rataan kadar konsentrasi estradiol-17ß pada hari ke-28, ke-42, dan ke-56. Hasil pengamatan pada hari ke-7 memperlihatkan bahwa konsentrasi estradiol-17ß plasma darah menurun pada saat ovarium mencapai TKG IV. Penurunan ini merupakan efek umpan balik estrogen pada
71 hormon yang menstimulasi sintesis estrogen. Sesuai pendapat Singh dan Singh (199) bahwa pada saat ovarium mencapai TKG IV sintesis estradiol-17ß akan menurun. Konsentrasi estradiol-17ß yang tinggi dalam plasma darah merupakan umpan balik yang positif terhadap hipotalamus. Hasil analisis sidik ragam pada hari ke-56 memperlihatkan bahwa pemberian pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg pakan) mempengaruhi nilai rataan kandungan estradiol-17ß dengan kecendrungan respons kuadratik (Gambar 28). Artinya, dengan peningkatan minyak ikan dan vitamin E dalam pakan diikuti oleh peningkatan kadar estradiol-17ß plasma darah. 6 Kadar estradiol darah (ng/ml) 5 4 3 2 1 y =3.24+.8x -.1x 2 r 2 =.62 1 2 3 4 Penambahan minyak ikan dalam pakan (g/kg) Gambar 28. Hubungan antara penambahan dosis minyak ikan dan estradiol-17ß pada ikan nila Hasil pengamatan menunjukkan bahwa nilai rataan konsentrasi estradiol plasma darah meningkat dari (6.62 ng/ml 7.84 ng/ml) pada kelompok ikan yang diberi pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg). Selanjutnya, pada hari ke-56 dan hari ke-7, konsentrasi estradiol-17ß menurun mencapai nilai antara 6.85 ng/ml- 5.68 ng/ml (Tabel 11). Penurunan konsentrasi estradiol-17ß plasma darah pada dosis ini tampaknya lebih berkaitan dengan tingkat kematangan gonad ikan nila yang diamati karena pada hari ke-56 semua induk ikan pada setiap perlakuan telah mencapai TKG IV.
72 Pembahasan Hasil pengamatan pada ikan yang diberi pakan K yang ditambahkan minyak ikan sebesar 3 g/kg dan vitamin E sebesar 15 mg/kg pakan menunjukkan kadar hormon estradiol-17ß masih meningkat sampai pada akhir percobaan. Pada kombinasi pakan K (MI. 3 g/kg; VE.15 mg/kg) nilai estradiol-17ß mencapai maksimum pada hari ke-42 dan kemudian diikuti penurunan kadar estradiol-17ß pada hari ke-54 dan seterusnya hari ke-7 (Gambar 27). Penurunan ini terjadi karena sebagian besar induk telah mencapai TKG IV. Artinya kadar estradiol-17ß menurun menjelang ovulasi pada TKG IV. Pada awal percobaan rataan kadar estradiol (E2) plasma darah adalah.85-1.89 ng/ml, dan terus meningkat mulai pada hari ke-28 sampai pada puncak antara 3.62-7.84 ng/ml pada hari ke-42. Pada minggu ke-4 pengumpulan data, mulai terjadi kenaikan nilai indeks gonad somatik secara cepat. Hal itu terjadi karena terdapat peningkatan kadar estradioi-17ß yang tinggi sehingga memicu pembentukan vitelogenin yang lebih cepat. Vitelogenesis adalah proses induksi dan sintesis vitelogenin di hati oleh hormon estradiol-17ß, serta penyerapan vitelogenin yang terbawa dalam aliran darah ke dalam oosit. Aktivitas vitelogenesis ini menyebabkan nilai indeks gonad somatik ikan meningkat (Yaron 1995). Fase sebelum vitelogenesis adalah fase previtelogenesis. Selama fase ini, ukuran oosit primer bertambah tanpa akumulasi material kuning telur (Tang dan Affandi 2). Pada ikan dikenal dua jenis hormon gonadotropin, yaitu gonadotropin I dan gonadotropin II. Gonadotropin I merupakan hormon yang akan merangsang sekresi testosteron dan selanjutnya akan diikuti dengan sekresi estradiol-17ß. Sedangkan gonadotropin II akan merangsang sekresi 17a 2ß-dihidroksi progesteron yang akan berfungsi dalam proses pematangan akhir (Swanson 1991). Estradiol-17ß berperan dalam proses vitelogenesis ikan. Hal ini sesuai dengan pendapat Sundararaj and Nath (1981) menyatakan bahwa estradiol-17ß dapat merangsang vitelogenesis ikan Lele India Heteropneustes fossilis. Menurut Nagahama (1987) vitelogenesis pada ikan diawali oleh rangsangan hormon estradiol-17ß yang dihasilkan dari lapisan granulosa folikel. Di bawah pengaruh hormon-hormon hipofisis (gonadotropin) selsel folikel akan melepaskan estrogen ke dalam darah dan selanjutnya akan masuk
73 ke organ sasaran hati dengan cara difusi. Dalam hati, estrogen berikatan dengan reseptor estrogen sehingga membentuk kompleks reseptor estradiol. Pada beberapa spesies ikan, estradiol-17ß dapat meningkatkan vitelogenin plasma, yang ditandai dengan produksi protein kuning telur oleh hati, tapi tidak menggabungkan vitelogenin dengan butir-butir telur. Dengan kata lain, proses penggabungan tersebut masih bergantung pada faktor yang lain, yaitu faktor hipofisis. Menurut Halver (1989), selama perkembangan ovarium pada ikan, estrogen akan merangsang peningkatan kadar lipida plasma. Hal ini sesuai dengan pendapat Singh dan Singh (199) yang menyatakan bahwa peningkatan hormon gonadotropin dan hormon steroid reproduksi pada stadia persiapan perkembangan gonad ikan akan meningkatkan kecepatan lipogenesis. Konsentrasi estradiol-17ß selama siklus reproduksi ikan nila betina adalah rendah pada fase pravitelogenesis dan meningkat secara cepat pada fase vitelogenik dan mencapai puncaknya pada akhir fase vitelogenesis.
74 Hasil Pengamatan III: Kinerja reproduksi perbaikan kualitas telur, dan larva ikan nila yang dipelihara pada salinitas media berbeda Pengaruh perlakuan salinitas berbeda pada penampilan kinerja reproduksi hasil pengamatan III yang meliputi indeks gonad somatik, diameter telur, fekunditas, jumlah induk yang memijah, derajat tetas telur, dan ketahanan hidup larva disajikan pada Tabel 12. Tabel 12. Nilai rataan indeks gonad somatik (%), diameter telur (mm), fekunditas (butir/induk), jumlah induk memijah (ekor), derajat tetas telur (%), dan ketahanan hidup larva (hari) pada ikan nila Parameter Salinitas Media A ( o / oo ) B (1 o / oo ) C (2 o / oo ) D (3 o / oo ) Indeks gonad somatik (%) 2.46 ±.21 a 2.92 ±.18 b 1.94 ±.2 c 1.79 ± 9.72 c Diameter telur (mm) 1.46 ±.21 a 2.39 ±.18 b 1.89 ±.27 c 1.34 ±.15 a Fekunditas (butir/ekor) 385.5±24.66 a 47.±31.9 b 45.55±15.42 a 344.55±39.72 a Jumlah induk memijah (ekor) 8.88 ±.85 a 11.13 ±.85 b 8.13 ±.85 a 4.5 ± 1.29 c Derajat tetas telur (%) 87.5 ± 2.8 a 89.75 ± 2.5 a 82.52 ± 4.86 a 5.5 ± 4.2 b Ketahanan hidup larva (hari) 5.8 ±.22 a 6.1 ±.4 a 4.65 ±.31 b 3.28 ±.22 c Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf superskript yang sama pada baris yang sama menunjukkan tidak ada perbedaan (P>.5) Induk ikan nila yang diberi perlakuan salinitas media berbeda ternyata hampir semua dapat matang gonad, memijah, dan berhasil memproduksi larva. Waktu yang diperlukan dari proses pematangan gonad sampai dengan pemijahan berbeda-beda pada masing-masing perlakuan. Hal ini menunjukkan bahwa perbedaan salinitas media mempengaruhi reproduksi ikan nila. Pematangan Gonad Secara keseluruhan selama pengamatan III nilai indeks gonad somatik (IGS) adalah 1.79-2.92%. Hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa salinitas media mempengaruhi nilai indeks gonad somatik (P<.5) (Lampiran 19). Nilai indeks gonad somatik tertinggi diperoleh pada ikan yang dipelihara pada media
75 B (1 o / oo ), yaitu sebesar 2.92%, yang selanjutnya secara berturut-turut diikuti oleh ikan yang dipelihara pada media A ( o / oo ) sebesar 2.46% dan C (2 o / oo ), yaitu sebesar 1.94% (Gambar 29). 4 Indeks gonad somatik (%) 3 2 1 A ( o/oo) B (1 o/oo) C (2 o/oo) D (3 o/oo) 14 7 56 42 28 Pengamatan hari ke- Gambar 29. Perkembangan indeks gonad somatik pada ikan nila Selama 7 hari percobaan terlihat bahwa pola nilai rataan indeks gonad somatik ikan nila masih meningkat. Pada hari ke-14 dan hari ke-28 induk ikan mencapai fase persiapan dari tahapan siklus reproduksi yang dicirikan oleh komposisi oosit ovarium setiap perlakuan, yang sebagian besar terdiri atas oosit stadium 2 dan 3 (previtelogenesis). Pada fase ini terjadi proses peningkatan ukuran oosit yang disebabkan oleh peningkatan volume sitoplasma, serta material akibat kerja hormon steroid reproduksi yang disintesis oleh ovarium (endogenous vitelogenesis). Selanjutnya pada hari ke-42 dan hari ke-56, sebagian besar induk ikan mencapai tingkat kematangan gonad (TKG IV), yaitu pada pertengahan percobaan dan tidak ditemui induk yang melepaskan telur. Kemudian pada hari ke-7, nilai indeks gonad somatik (IGS) mulai menurun pada semua perlakuan. Penurunan ini menunjukkan bahwa induk ikan telah selesai melakukan ovulasi atau pelepasan telur pada tahap pertama proses reproduksinya.