LAMPIRAN
55 Lampiran 1. Prosedur Analisis Kadar Protein Total Darah a. Tabung reaksi disiapkan sebanyak 62 buah. 1 buah tabung reaksi blanko, 1 buah tabung reaksi standar dan 60 buah tabung reaksi sampel plasma darah. b. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, NaK tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan ditambahkan aquades sebanyak 20 µl pada tabung reaksi blanko. c. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, NaK tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan larutan standar (bovine albumin 6 g/dl) sebanyak 20 µl pada tabung reaksi standar. d. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/l, Na-K tartarat 10 mmol/l, potasium iodin 3 mmol/l dan tembaga II sulfat 3 mmol/l) sebanyak 1 ml dan sampel plasma darah sebanyak 20 µl pada 60 buah tabung reaksi sampel. e. Dihomogenkan semua tabung reaksi tersebut, kemudian didiamkan selama 10 menit dalam suhu ruangan. f. Dilakukan pengukuran absorbansi menggunakan panjang gelombang 550 nm atau sekitar 530-570 nm pada tabung reaksi blanko dengan cara memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasilnya sampai menghasilkan serapan gelombang yang menunjukkan angka nol. g. Dilakukan pengukuran absorbansi standar (A st ) dan absorbansi sampel (A s ) dengan memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung kadar protein plasma total darah.
56 Lampiran 2. Prosedur Analisis Kadar Malondialdehid (MDA) Darah a. Disiapkan tabung sentrifugan sebanyak 61 buah. b. Tabung 1-60 (sampel) diisikan 0,25 ml hemolisat darah dan 0,5 larutan TCA (Trichloroacetic Acid) 10%. c. Tabung 61 (blanko) diisikan 0,25 ml aquades dan 0,50 ml larutan TCA 10%. d. Diaduk setiap tabung (di vorteks) selama 1 menit dan disentrifugasi dengan sentrifugan klinis dengan kecepatan 4000 rpm selama 1 menit. e. Lapisan supernatan tiap tabung diambil dan dimasukkan ke dalam tabung baru. f. Larutan TBA (Tiobarbiturat Acid) 0,67% sebanyak 0,75 ml diambil dengan menggunakan pipet tetes dan dimasukkan ke dalam masing-masing tabung. g. Dimasukkan tabung sentrifugan ke dalam penangas mendidih selama 10 menit, lalu didinginkan. h. Masing-masing tabung dibaca serapannya, yaitu sampel dan blanko pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 532 nm, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung profil MDA darah. Lampiran 3. Suhu Lingkungan Kandang Selama Penelitian Minggu ke- Suhu ( 0 C) I 29,6 II 31,2 III 30,1 IV 30,2 Rata-rata 30,275
57 Lampiran 4. Tata Letak Penelitian P1 P2 Lampiran 5. Karakteristik Kitosan Iradiasi NO Parameter Standart 1 Warna Putih kekuningan 2 Bau Tidak berbau 3 Bentuk Butiran / serbuk 4 Kadar air < 10% 5 Derajat deasetilasi 60-90 % 6 Kelarutan ph 6-7 Sumber : Badan Tenaga Nuklir Nasional, 2013
Lampiran 6. Protein Total Darah Itik Cihateup Protein Total Darah (µl/dl) Sampel Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel Kitosan Iradiasi 1 8,98800 1 12,78890 2 11,76520 2 12,34440 3 11,07630 3 11,99020 4 11,79700 4 13,10670 5 8,13800 5 12,94900 6 9,70860 6 11,05700 7 9,51800 7 13,18130 8 10,00800 8 12,99900 9 10,86820 9 11,98830 10 8,67100 10 13,35830 11 9,63300 11 14,12200 12 11,25000 12 12,98073 13 8,41330 13 12,63670 14 11,40900 14 11,72300 15 10,80000 15 13,75830 16 8,85720 16 12,67840 17 8,45500 17 11,18050 18 10,22100 18 12,38340 19 10,42000 19 12,10340 20 9,76890 20 13,75473 21 9,47300 21 12,23550 22 10,29100 22 13,91300 23 9,58800 23 11,02390 24 10,26350 24 10,93760 25 9,37745 25 12,03520 26 10,10200 26 12,06873 27 11,19900 27 13,25060 28 11,33500 28 10,88800 29 11,17700 29 13,64940 30 11,22600 30 11,71900 Rata-rata 10,12660 Rata-rata 12,49350
59 Lampiran 7. Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup MDA Darah (nmol/m -1 cm -1 ) (10-2 ) Sampel Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel Kitosan Iradiasi 1 2,67 1 1,58 2 2,64 2 2,13 3 2,89 3 1,84 4 2,15 4 1,74 5 2,63 5 2,01 6 2,50 6 2,04 7 2,50 7 1,67 8 2,35 8 2,04 9 3,01 9 1,29 10 2,80 10 2,01 11 2,52 11 1,84 12 2,80 12 1,74 13 2,50 13 2,18 14 3,04 14 2,21 15 2,45 15 1,03 16 2,96 16 1,04 17 2,20 17 2,10 18 2,75 18 1,06 19 2,80 19 1,56 20 3,04 20 2,01 21 2,57 21 1,84 22 2,85 22 1,65 23 2,57 23 1,29 24 3,03 24 2,04 25 2,72 25 1,93 26 2,39 26 2,15 27 3,01 27 1,91 28 2,89 28 2,03 29 2,89 29 1,83 30 2,89 30 2,03 Rata-rata 2,70 Rata-rata 1,79
Lampiran 8. Output Analisis Varians T-Test Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup 60 Protein Darah MDA Darah Irradiation Std. Error N Mean Std.Deviation Chitosan Mean 1,00 30 10,1266 1,05489 0,19260 2,00 30 12,4935 0,93767 0,17119 1,00 30 2,7003 0,25113 0,04585 2,00 30 1,7940 0,34588 0,06315
Lampiran 9. Output Analisis Varians Sampel Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup 61 Protein Darah MDA Darah Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed Levene s Test for Equality of Variances F Sig. t Df Sig. (2-tailed) 0,519 0,474 t-test for Equality of Means Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper -9,185 58 0,000-2,36692 0,25768-2,88273-1,85111-9,185 57,213 0,000-2,36692 0,25768-2,88288-1,85096 1,879 0,176 11,614 58 0,000 0,90633 0,07804 0,75012 1,06254 11,614 52,926 0,000 0,90633 0,07804 0,74980 1,06286
62 Lampiran 10. Dokumentasi Penelitian Termometer Bola Basah dan Bola Kering Ransum Itik Cihateup Pengambilan Darah Itik Cihateup Itik Cihateup yang sedang Makan Alat Sentrifugasi Spektrofotometer
63 Larutan Uji Kadar Protein Larutan Uji Kadar Malondialdehid Sampel Darah Itik Cihateup Perhitungan Nilai Absorban Menggunakan Spektrofotometer Analisis Kadar Protein Darah Analisis Kadar Malondialdehid