III. METOD PENELITIN 3.1. Tempt dn Wktu Penelitin Penelitin ini dilkukn di Lortorium Teknologi Budidy Ikn, Fkults Periknn dn Ilmu Kelutn Universits Riu, yng erlngsung selm empl uln, dimuli dri uln Jnuri smpi pril 2002. 3.2. Mteri dn Perltn 3.2.1. Hormon Mormon yng digunkn dlm penelitin ini dlh hcg produksi "rgent Chemicl Lortories " dn ekstrk kelenjr hipofis ersl dri donor ikn ms jntn yng mtng gond 3.2.2. Ikn Uji Ikn uji yng digunkn dlm penelitin ini dlh 20 ekor induk ikn ung etin mtng gond dengn kisrn oot ntr 500-600 grm dn kisrn pnjng ntr 30,0-45,00 cm. Untuk proses fertilissi digunkn pul 15 ekor induk ikn ung jntn mtng gond dengn kisrn oot dn pnjng tuuh yng sm dengn induk ikn etin. Ikn-ikn terseut diperoleh dri perirn Sungi Kmpr, yitu dri Des Luuk Sim Tertk Buluh. 3.2.3. Lrutn Pemuhn Lrutn pemuhn yng digunkn terdiri dri 4 grm NCl + 3 grm ure ke dlm 1 liter ir suling (Woynrovich dn Horvth, 1980) yng ergun untuk meningktkn fertilissi (derjd pemuhn). 3.2.4. Wdh Percon Wdh tempt ikn diperlkukn terdiri ts 20 unit kurium dengn ukurn 60 X 40 X 40 cm dn dilengkpi dengn ersi. Sedngkn wdh tempt fertilissi
10 digunkn pul 20 unit kurium ukurn yng sm dengn wdh tempt ikn diperlkukn. 3.2.5. Perltn Perltn yng digunkn untuk hipofissi dlh lt edh (seksi), penggerus jringn, lt suntik, sentrifuge, tung reksi, ertor dn timngn. Untuk pemuhn dn penetsn digunkn sendok plstik kecil, ulu ym, mngkok plstik, ykn dn ersi. Sedngkn untuk pengukurn prmeter uji digunkn mikroskop yng dilengkpi dengn mikrometer okuler, pipet tetes, ojek gels, cover glss, eker glss, counter dn cwn petri. 3.3. Metode Penelitin 3.3.1. Seieksi Induk Ikn Uji Induk ikn yng dijdikn segi ikn uji terleih dhulu dilkukn pengukurn dimeter dn kemtngn telur. Pengukurn dimeter telur ditentukn dengn cr mengmil smpel telur dengn kteter knul polietilen, kemudin dri telur yng diperoleh dimil senyk 50 utir untuk diukur dimetemy di wh mikroskop yng telh dilengkpi dengn mikrometer okuler. Pengmtn kemtngn telur dilkukn dengn cr mengmil 50 utir telur hsil kteter yng lin, kemudin ditetesi lrutn trnsprn yng terdiri ts lrutn lkohol 95 % senyk 85 cc, formldehid 40 % senyk 10 cc dn sm sett 100 % senyk 5 cc (Woynrovich dn Horvth, 1980). Setelh 5-10 menit dimti di wh mikroskop telur-telur yng intiny telh erpindh ke pinggir. Ikn kn seger diperlkukn pil ukurn dimeter telur 1,00 mm tu leih dn kemtngn telur leih dri 80 %. Persentse kemtngn telur ditentukn dengn menggunkn rumus segi erikut: T K = X 100% M
dimn: K T M = Prosentse kemtngn telur = Jumlh telur yng intiny telh menepi = Jumlh keseluruhn telur contoh yng dimil dengn kteter knul polietilen 3.3.2. Penyuntikn dn Pengurutn Penyuntikn terhdp ikn yng telh diseleksi dilkukn du kli dengn selng wktu enr jm secr intrmuskuler (Woynrovich dn Horvth, 1980) dn kemiringn jrum suntik 45" C (Soeseno, 1977). Penyuntikn pertm dilkukn dengn menggunkn hormon hcg dn penyuntikn kedu dengn menggunkn ekstrk kelenjr hipofis ikn ms, sesui dengn dosis yng telh ditetpkn sedngkn untuk perlkun kontrol dierikn 2 ml NCl fisiologis 65 %/kg oot tuuh msing-msing setengh dosis pd suntikn pertm dn setengh dosis pd suntikn kedu. Pengurutn telur dri induk ikn etin dilkukn enm jm setelh penyuntikn kedu dengn cr pengurutn. Nmun il pengurutn yng dilkukn elum menunjukkn tnd-tnd untuk ovulsi mk pengurutn erikutny dilkukn setip setengh jm sekli. Untuk memperoleh semen dri induk ikn ung jntn yng diperlukn dlm menguji fertilits telur dilkukn dengn memerikn rngsngn penyuntikn 0,5 ml ovprim/kg oot tuuh (Sukendi, 2001) dengn cr penyuntikn yng sm seperti yng dilkukn pd induk ikn etin. Pengmiln semen dilkukn dengn pencchn gond dengn tujun gr volume semen diperoleh secr mksiml. 3.3.3. nlis Dt nlis dt dlm penelitin ini dilkukn secr deskriptif, yitu dengn pengmtn lngsung terhdp prmeter yng diukur dn memndingkn prmeter hsil pengmtn dri msing-msing perlkun yng dierikn. Penelitin menggunkn enm mcm perlkun dengn lim kli ulngn. dpun perlkun yng digunkn dlh segi erikut:
12 P1 ; Kontrol (2 ml NCl fisiologis 0,65 %/kg oot tuuh) P2 : 100 luhcg/kg oot tuuh + CPE 2 dosis P3 : 300 lu hcg/kg oot tuuh + CPE 2 dosis P4 : 500 lu hcg/kg oot tuuh + CPE 2 dosis P5 : 700 lu hcg/kg oot tuuh + CPE 2 dosis 3.3.4. Fertilissi dn Penetsn Telur Telur hsil pengurutn dri msing-msing perlkun dimil senyk 500 utir dengn menggunkn sendok kecil ukurn 1 ml. Telur terseut dicmpur dengn semen senyk 1 ml dri induk ikn jntn yng telh disuntik dengn perlkun ovprim Seelum fertilissi, semen diencerkn senyk 100 kli (1 ml semen + 99 ml lrutn NCl fisiologis 0,65 %), dengn tujun untuk mempernyk volume semen. Untuk meningktkn nili pemuhn, ke dlm telur yng telh dicmpur dengn semen ditmhkn 2 ml lrutn pemuhn (4 grm NCl + 3 grm ure/liter kuides). Telur diterkn ke dlm kurium yng telh disipkn dlm proses penetsn. 3.4. Peuh yng Diukur 3.4.1. Wktu lten Wktu lten ditentukn dengn cr menghitung selisih ntr wktu penyuntikn terkhir dengn st terjdi ovulsi yng dinytkn dengn stun jm. 3.4.2. Jumlh telur yng diovulsikn Perhitungn jumlh telur yng diovulsikn dilkukn dengn menggunkn rumus segi erikut: X n dimn: n = Jumlh telur (utir) yng erhsil diovulsikn = Bert (grm) semu telur yng diovulsikn = Bert (grm) su smpel telur = Jumlh rt-rt (utir) su smpel telur
13 dimn: n 3.4.3. Kemfltngn tdhir = Jumlh telur (utir) yng erhsil diovulsikn ^ Bei-t (grm) semu telur yng diovulsikn = Bert (grm) su smpel telur = Jumlh rt-rt (utir) su smpel telur Pengukurn kemtngn telur jug dilkukn dengn metod yng sm seperti pengukurn kemtngn telur pd wktu penyeleksin induk ikn uji, tetpi kemtngn telur yng diukur dlm hl ini dlh ersl dri induk ikn uji yng telh dieri perlkun. 3.4.4. Dimet- tdur Pengukurn dimeter telur dilkukn dengn metode yng sm seperti pengukuin dimeter telur pd wktu penyeleksin induk ikn uji, tetpi dimeter telur yng diukur dlm hl ini dlh ersl dri induk ikn uji yng telh dieri perlkun. 3.4.5. Fertilits Nili fertilits ditentukn dengn menggunkn rumus yng dikemukkn oleh Suseno dn Cholik (1982) yitu : Fertilits = Jumlh telur yng diuhi Jumlh telur smpel xioo% 3.4.6. Dytets Dy tets telur ditentukn dengn menggunkn rumus yng dikemukkn oleh Suseno dn Cholik (1982) yitu; Jumlh telur yng menets Dytets = xloo% Jumlh telur diuhi