MAKALAH PADA SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA 2012 Jurusan Kimia Universitas Jenderal Sudirman, 6 Oktober 2012

Transkripsi

1 MAKALAH PADA SEMINAR NASIONAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA 2012 Jurusan Kimia Universitas Jenderal Sudirman, 6 Oktober 2012 REAKSI BROMINASI ASETON SEBAGAI REAKSI MIRIP ENZIMATIS Patiha 1, Tri Martini 2, Edi Pramono 3 patiha31@yahoo.co.id 1,2,3 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret ABSTRAK Tujuan penelitian ini adalah untuk mempelajari kemungkinan penggunaan reaksi brominasi aseton sebagai model reaksi enzimatis Michaelis-Mentenis. Percobaan dilakukan dengan mengikuti perubahan absorbansi Br 2 (secara spektrofotometri pada panjang gelombang 400 nm) sebagai fungsi waktu pada kondisi konsentrasi awal aseton dan asam khlorida yang berlebihan dari bromium. Pada setiap lakuan, konsentrasi awal asam khlorida dibuat bervariasi sedang aseton dan bromium tetap. Pengamatan dilakukan hingga absorbansi bromium tersisa sekitar 10%. Data dibagi menjadi 2 bagian; masingmasing 7 di awal dan di akhir reaksi. Hukum laju, pada awal dan akhir reaksi, ditentukan dengan menggunakan persamaan integral untuk kemungkinan reaksi order ke nol, satu, satu setengah, dan dua. Hukum laju ditentukan dengan analisis regresi linear; hukum laju adalah yang memberikan koefiisien regresi yang paling mendekati ±1. Reaksi dikatakan mirip jika pada awal, reaksi mengikuti hukum laju order semu ke-nol dan pada akhir, ke-satu. Laju maksimum diperoleh dari lereng kurva hukum laju order ke-nol dan selanjutnya digunakan untuk menghitung tetapan Michaelis-Menten melalui substitusi pada lereng kurva hukum laju order ke-satu. Data juga dianalisis menggunakan persamaan (diferensial) Lineweaver-Burk dan Eadie-Hofste dan persamaan (integral) Espenson (1995) dan diperbandingkan. Hasil percobaan menunjukkan bahwa pada konsentrasi awal asam khorida 0,005 dan 0,010 M, bromium 0,010 M, dan aseton 0,800 M, reaksi ini mirip reaksi enzimatis Michaelis-Mentenis. Diperoleh pula bahwa, tetapan Michaelis-Menten tidak dapat diperoleh dari satu eksperimen dan bahwa, ketiga persamaan tidak memberikan hasil yang konsisten. Kata Kunci : brominasi aseton; persamaan Espenson. reaksi enzimatik; tetapan Michaelis-Menten 1

2 ABSTRACT The purpose of this research is to study of the possible use of bromination of acetone as a model of enzymatic reaction of Michaelis-Menten. The experiments are performed by following the bromium absorbance changes (using a spectrophotometer at wavelength 400 nm) as a function of time under conditions of initial concentrations of acetone and hydrochloric acid are in excess of bromium. At each experiment, the concentration of hydrochloric acid is varied while acetone and bromium are constant. Observations are made until bromium absorbance about 10%. Data are divided into two parts, each 7 at the beginning and at the end of the reaction. Rate laws (at the beginning and end of the reaction) are determined using the integral equation for the possible reaction order of zero, first, one and a half, and second. Rate law is determined by linear regression analysis; the rate law is that gives regression coefficient closest to ± 1. Said to be similar if, at the beginning, reaction is of the zero order, and at the end, is of the first order. The maximum velocity is obtained from the slope of the zero order rate law and then used to determine the Michaelis-Menten constant by substituting it into the slope of the first order rate law. Data are also analyzed using the (differential) equations of Lineweaver-Burk and Eadie-Hofstee and (integral) equation of Espenson (1995) and compared. The experimental results showed that at the initial concentration of hydro chloride acid 0,050 and 0,100 M, bromium 0,010 M, and acetone 0,800 M, this reaction is similar to enzymatic reaction of Michaelis-Menten. Also obtained that, Michaelis-Menten constant cannot be obtained from one experiment and all the three equations, do not give consistent result. Key words: bromination of aceton; enzymatic reaction; Espenson equation; Michaelis-Menten constant. 2

3 PENDAHULUAN Enzim adalah katalis pada proses kimia mahluk hidup. Ada beberapa tipe mekanisme reaksi enzimatis; yang paling sederhana, yaitu yang dikenal sebagai reaksi enzimatik Michaelis-Mentenis, dipercayai berlangsung menuruti mekanisme reaksi k 1 k 2 besar (dari K M ), hubungan ini berubah, dan [4] akan menjadi v k [E] [5] E + S ES E + P [1] atau [1] kat Pada kondisi ini, semua enzim yang ada, dianggap bereaksi dengan substrat, sehingga v mencapai harga maksimum (yang selanjutnya disebut v max ) dan reaksi menuruti mekanisme reaksi order ke-nol k 1 Briggs-Haldane (1925) membuktikan bahwa, dengan menggunakan Pendekatan Keadaan Mantap pada [ES], hukum lajunya dapat dinyatakan sebagai v ( k 1 k2[ E][ S] k ) / k [ S] 2 1 [2] Selanjutnya, jika (k -1 + k 2 )/k 1 = K M [3] maka [2] akan menjadi kkat[ E][ S] v [4] K [ S] M K M adalah tetapan Michaelis-Menten. Pola hubungan semacam [4] ini hiperbolik; reaksi belum mempunyai order reaksi yang pasti. Pada [S] yang cukup v maks kkat[e] [6] Tetapi, pada konsentrasi substrat [S] yang cukup kecil (dari K M ), reaksi akan berlangsung menuruti mekanisme reaksi order ke-satu terhadap S dan [4] akan menjadi v k [ E][ S] K kat [7] M Substitusi persamaan [6] ke dalam [7] akan menghasilkan v v [ S] K maks [8] M Fenomena di atas cukup menarik. Berbeda dengan reaksi yang biasanya diperkenalkan pada pemula, reaksi semacam ini mengikuti hukum laju yang berbeda pada awal dan akhir reaksi. Karena itu, adalah penting bagi mahasiswa untuk melakukan 3

4 percobaan kinetika reaksinya. Akan tetapi, k 3 karena harga enzim sangat mahal dan mudah [ CH 3 C( OH) CH] Br2 CH 3C( O) CH 2Br H rusak, tentulah agak sulit untuk E P mewujudkannya. Implikasinya, perlu untuk mencari reaksi yang mirip, dengan pereaksi yang murah, mudah diperoleh, dan relatif Berdasarkan Pendekatan Keadaan mudah percobaannya. Reaksi brominasi Mantap, hukum lajunya adalah aseton diharapkan akan dapat memenuhi d[ P] k3k2k1 / k 1[ A][ H ][ Br2 ] kriteria ini. Sebenarnya, studi kinetika dt k2[ H ] k3[ Br2 ] [11] reaksi ini telah dilakukan pada awal perkembangan ilmu kimia, dan sering kali digunakan sebagai model percobaan kinetika reaksi. Tetapi, hanya diperlakukan sebatas sebagai model reaksi sederhana. Karena Br 2 berwarna, studi kinetika reaksinya pada umumnya dilakukan dengan mengikuti perubahan [Br 2 ] sebagai fungsi waktu pada kondisi [H + ] dan [A] yang relatif berlebihan terhadap [Br 2 ]. Penentuan hukum Pada temperature kamar, reaksi lajunya biasanya menggunakan metode laju brominasi aseton menuruti persamaan reaksi awal dan didapati bahwa, reaksi masingmasing order ke-satu terhadap [A] dan [H + ] CH C O CH Br CH C O CH Br Br 3 ( ) ( ) 2 H A P dan ke-nol terhadap [Br 2 ]. Ini berarti, k 3 [Br 2 ] [9] jauh lebih besar dari k -2 [H + ]. Dilaporkan juga bahwa, pada kondisi [H + ] yang sangat dipercayai berlangsung melalui mekanisme tinggi, reaksi tingkat ke-satu terhadap [Br 2 ] reaksi (Zucker and Hammet, dalam Patiha, 2011). k 1 Namun yang terakhir ini diduga sulit CH 3 C( O) CH 3 H [ CH 3C( OH) CH 3] dilakukan karena, kenaikan [H + ] dua kali, A k 1 I akan menyebabkan reaksi menjadi dua kali lebih cepat. Tetapi, adalah mungkin terjadi k2 bahwa konsentrasi [H + ] tertentu, reaksi ini [ CH 3C( OH) CH 3] H 2O [ CH 3C( OH) CH ] H 3O akan berlangsung dengan mekanisme yang I k2 E berbeda pada awal dan akhir reaksi. Br [10] Persamaan [11] dapat diubah menjadi 4

5 d[ P] ( k2k dt ( k 1 2 / k 1 / k 3 )[ A][ H )[ H ][ Br ] [ Br 2 2 ] ] [12] Selanjutnya, (karena [A] sangat berlebihan dan [H + ] relatif tetap) maka jika k 2 k 1 [A][H + ] / k -1 = k * [13] dan (k -2 / k 3 )[H + ]= κ [14] maka [12] akan menjadi * d[ P] k [ Br2 ] [15] dt [ Br ] 2 Jika k * dianggap sebagai υ maks dan κ sama dengan K M, maka [15] menjadi mirip dengan [4]. Pada prinsipnya harga K M dapat ditentukan langsung dari [4], Tetapi yang paling umum adalah dengan mengunakan model linear. Lineweaver-Burk (1934; 658) membalik persamaan [4] dan memperoleh 1 1 K M [16] v v v [ S] maks maks Harga v maks dapat dihitung dari intersep sedang K M dari lereng kurva linear 1/v lawan 1/[S]. Untuk keperluan ini umumnya digunakan metode laju awal. Cara yang lain adalah dengan menggunakan persamaan Eadie (1942) - Hofstee (1959) -yang juga merupakan modifikasi dari [4]- yaitu K v v M v maks [S] [17] Harga v maks dapat dihitung dari intersep sedang K M dari lereng kurva linear v lawan v/[s]. Untuk keperluan ini juga umumnya digunakan metode laju awal. Dowed dan Riggs ((1965: 863) dan Atkins dan Nimmo (1975) menyatakan bahwa persamaan [17] lebih tepat dan superior dari yang [16]. Espenson (1995: 34-35) menyatakan bahwa kinetika reaksi enzimatis, dan secara umum, reaksi yang mempunyai hukum laju yang mirip dengannya ([15]), dapat dipelajari dengan menggunakan persamaan tenggang-tetap (time-lag) [ A] t [ A] t [ A] t k A ln [18] [ ] t Persamaan [18] diturunkan dengan mengintegralkan persamaan [15]. Dalam praktek, reaksi diamati pada tiap tenggang waktu tetap hingga reaksi berlangsung kirakra 90%. Data kemudian dipasangkan dengan tenggang waktu σ yang sama. Harga κ dapat dihitung dari lereng kurva linier [A t ]- [A t+σ ] lawan ln{[a t] /[ A t+σ ]}. 5

6 Paling tidak, ada 5 hal yang berkaitan dengan ketiga persamaan di atas yang menarik untuk dikaji lebih lanjut. Pertama, ketiganya merupakan persamaan linier tetapi tidak mempersyaratkan uji linieritas. Kedua, laju maksimum hanya bisa tercapai jika [S] o (jauh) lebih besar dari K M, tetapi ketiganya tidak mempersyaratkan kondisi awal reaksi. Patiha (2009) menyatakan bahwa persamaan Lineweaver-Burk dan Eadie-Hofstee sebenarnya tidak berlaku jika v = v maks karena pada kondisi ini harga K M akan sama dengan 0. Selain dari itu, persamaan Lineweaver-Burk akan tampak bersanggah dengan persamaan Patiha (2009) -yang dikembangkan dari hasil membalik persamaan [8]. Persamaan ini menghasilkan harga yang pada dasarnya sama dengan yang diperoleh dari persamaan Lineweaver-Burk, tetapi tetap berlaku pada v = v maks dan menghasilkan harga yang sama dengan yang diperoleh dari persamaan integral. Ketiga, berdasarkan [5], reaksi order ke-satu terhadap enzim, tetapi harga K M cukup ditentukan dari 1 data. Keempat, Espenson mengklaim bahwa hasil yang diperoleh bila menggunakan persamaannya, relatif sama dengan yang mengunakan persamaan diferensial (1995) tetapi Patiha (2006) menyatakan bahwa, kecuali untuk reaksi order ke-nol, tetapan (laju) yang diperoleh dari persamaan diferensial tidak akan sama dengan yang dari persamaan integral. Kelima, harga tetapan yang pasti adalah yang dari persamaan integral (Laidler, 1987). Berangkat dari hal-hal yang telah dibicarakan di atas, rumusan penelitian ini adalah: 1.Apakah reaksi brominasi aseton dapat merupakan model bagi reaksi enzimatis Michaelis-Mentenis? 2.Tepatkah harga tetapan Michaelis- Menten yang diperoleh dari satu percobaan? 3.Apakah ketiga persamaan yang ada selalu memberikan harga K M yang konsisten? METODE Penelitian merupakan eksperimen laboratorium. Variabel penelitian adalah konsentrasi dan waktu. Percobaan dilakukan dengan mengikuti perubahan absorbansi Br 2 secara spektrofotometri pada panjang gelombang 400 nm sebagai fungsi waktu. Bahan Larutan Br 2 0,05 M., larutan HCl 0,100, 0,150, dan 0,200 M, Aseton 4,000 M Alat Utama 6

7 Spektrofotometer uv-visible; stop-watch; pengaduk magnit Cara Kerja 1. Spektrofotometer dihidupkan dan kemudian ditentukan titik 0-nya dengan menggunakan aquades sebagai blanko. 2. Ke dalam labu 100 ml dimasukkan secara berurutan, 10 ml Aseton 4 M, 2,5 ml HCl 0,100 M, 27,5 ml Akuades, dan 10 ml larutan Br 2 0,05 M, serentak dengan menghidupkan stop-watch; digojog dan ditentukan absorbansinya pada = 400 nm pada detik ke 10 dan setiap 10 detik berikutnya hingga tersisa 10% (Ingat: semua labu dan pereaksi harus ditempatkan dalam termostat pada temperatur pengukuran dan kuvet harus segera dikembalikan ke termostat segera setelah pengukuran.) 3. Dilakukan 2 kali ulangan. 4. Dilakukan hal yang sama untuk HCl dengan volum 5,0; 7,5; 10,0; dan 12,5 ml HCL 0,100 M dan air yang bersesuaian hingga volum total 50 ml. 5. Digunakan 7 data pada awal reaksi dan 7 pada akhir reaksi untuk menentukan kondisi dimana reaksi mirip reaksi enzimatis. 6. Ditentukan harga κ menggunakan persamaan. 7. Ditentukan harga κ menggunakan persamaan-persamaan [16], [17], dan [18], 8. Diperbandingkan hasil yang diperoleh. 9. Digunakan data pada awal reaksi pada setiap [HCl] 0,005, 0,010, 0,015, dan 0,020 M untuk menentukan harga κ menggunakan persamaan integral untuk order kenol, nol, setengah, pertama, satusetengah, dan dua dan persamaan [16], [17], dan [18]. Rerata hasil pengamatan, disajikan dalam Tabel 1A, Tabel IB., Tabel 1C., dan Tabel 1C. Teknik Analisis Data dan Penyimpulan Data yang diperoleh dibagi menjadi 2 bagian; masing-masing diambil 7 di awal dan akhir reaksi. Selanjutnya, masingmasing di analisis menggunakan persamaan integral untuk kemungkinan reaksi order kenol, setengah, pertama, satu-setengah, dan 7

8 dua. Order reaksi yang dipakai adalah yang memberikan koefisien regresi paling mendekati ± 1,0000. Reaksi disimpulkan mirip reaksi enzimatis Michaelis-Mentenis jika pada awal, reaksi order ke-nol dan akhir order pertama. Laju maksimum diperoleh dari lereng kurva hukum laju order ke-nol dan selanjutnya digunakan untuk menghitung tetapan Michaelis-Menten melalui substitusi pada lereng kurva hukum laju order ke-satu. Tetapan Michaelis- Menten disimpulkan dapat ditentukan dari satu ekserimen jika, pada setiap eksperimen diperoleh harga v maks yang sama. Data juga dianalisis dengan persamaan Espenson, dan persamaan Lineweaver-Burk, dan Eadie-Hofstee, menggunakan data pada awal dan akhir, secara terpisah maupun gabungan, baik yang memenuhi kriteria maupun tidak. Ketiga persamaan dinyatakan sahih jika memberikan tetapan Michaelis-Menten yang sama (dengan toleransi perbedaan maksimal 5%) dengan yang dari persamaan integral. Tetap 10 Detik, dan Temperatur Kamar [10 ml Aseton 4,0 M, 2,5 ml HCl 1,0 M, 27,5 ml H 2 O, dan 10 ml Br 2 0,015M], No ,493 0, ,483 0, ,473 0, ,464 0, ,454 0, ,445 0, ,436 0, Tabel 1B. Rerata Absorbansi Br 2 pada Reaksi Brominasi Aseton: =400 nm, Rentang Waktu, t, Tetap 10 Detik, dan Temperatur Kamar [10 ml Aseton 4,0 M, 5,0 ml HCl 1,0 M, 25 ml H 2 O, dan 10 ml Br 2 0,015M], No ,488 0, ,483 0, ,473 0, ,463 0, HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil ,454 0, ,444 0, Tabel 1A. Rerata Absorbansi Br 2 pada Reaksi Brominasi Aseton: =400 nm, Rentang Waktu, t, 8

9 Tabel 1C. Rerata Absorbansi Br 2 pada Reaksi Brominasi Aseton: =400 nm, Rentang Waktu, t, Tetap 10 Detik, dan Temperatur Kamar [10 ml Aseton 4,0 M, 7,5 ml HCl 1,0 M, 22,5 ml H 2 O, dan 10 ml Br 2 0,015M], No ,493 0, ,483 0, ,473 0, ,464 0, ,454 0, ,445 0, Tabel 1D. Rerata Absorbansi Br 2 pada Reaksi Brominasi Aseton: =400 nm, Rentang Waktu, t, Tetap 10 Detik, dan Temperatur Kamar [10 ml Aseton 4,0 M,, 10 ml HCl 1,0 M, 27,5 ml H 2 O, dan 10 ml Br 2 0,015M], No ,468 0, ,455 0, ,437 0, ,420 0, ,403 0, ,387 0, Pembahasan Seperti telah diutarakan, data dianalisis terhadap kemungkinan reaksi order ke-nol, setengah, pertama, -satu setengah, dan -dua. Ini karena percobaan dilakukan dengan metode isolasi pada kondisi [Aseton] berlebihan, HCl yang dibuat bervariasi, dan Br 2 yang dibuat tetap relatif kecil. Data juga dianalisis terhadap order setengah dan satu setengah karena, berdasarkan mekanisme, terjadi pelepasan proton dari Aseton. Seperti terlihat pada Tabel 2, pada saat [HCl] o 0,005 dan 0,010 M, pada awal, reaksi mengikuti mekanisme reaksi order (semu) ke-nol dan, pada akhir-akhir reaksi, ke-satu terhadap Br 2 Pada [HCl] yang lebih besar, reaksi selalu order ke-satu Ini, sedikit sebanyak, sejalan dengan kajian pustaka. Pada saat [HCl] relatif kecil, k 3 [Br 2 ] (pada persamaan [11]) akan lebih besar dari k - 2[H + ] sehingga reaksi order ke-nol terhadap Br 2. Tetapi, karena selama reaksi konsentrasi Br 2 terus berkurang, sedang [H + ] tetap (karena adanya donasi dari aseton) maka pada akhir reaksi, justru k 3 [Br 2 ] yang akan menjadi lebih kecil dari k - 2[H + ] dan reaksi menjadi order ke-satu (semu) terhadap Br 2. Hal ini diperkuat oleh 9

10 fakta bahwa, pada konsentrasi HCl yang lebih besar, reaksi selalu order ke-satu (semu) terhadap Br 2, baik pada awal maupun pada awal reaksi. Ada 2 hal yang penting berkaitan dengan uraian di atas. Pertama, ialah bahwa, pada saat konsntrasi awal HCl 0,005 dan 0,010 M, Aseton 0,800 M, dan Br 2 0,010 M, reaksi brominasi aseton mirip dengan reaksi enzimatis. Kedua, ini sekaligus menjadi petunjuk bahwa metode laju awal hanya tepat digunakan jika, dari awal dan akhir, reaksi berlangsung dengan mekanisme reaksi yang sama. Berdasarkan Tabel 3., perubahan konsentrasi HCl (yang dianggap bertindak sebagai enzim) cenderung memberikan harga v maks yang berbeda pula. Fakta ini sangat menarik karena hingga saat ini, diyakini bahwa harga K M dapat diperoleh langsung dari satu percobaan, Kelihatannya tidak ada alasan untuk menyatakan bahwa hasil percobaan ini salah. Sesuai dengan teori, reaksi enzimatis adalah order ke-satu terhadap konsentrasi enzim. Artinya, bila konsentrasi enzim di dua-kalikan maka laju akan menjadi 2 kali lebih cepat (dan tentunya juga demikian dengan v maks ). Masalahnya sekarang tinggal pada harga lereng dari kurva pada saat reaksi order kesatu, yaitu yang akan digunakan untuk menghitung K M. Secara teoritis, karena pada kondisi ini reaksi tidak tergantung pada konsentrasi enzim (HCl), seharusnya lereng kurva tidak dipengaruhi oleh perubahan [HCl]. Pada saat reaksi order (semu) ke-satu, reaksi hanya dipengaruhi oleh konsen-trasi substrat Br 2. Tetapi, fakta menunjukkan bahwa, lereng berubah dengan perubahan [HCl]. Ini mungkin disebabkan karena pengamatan dilakukan pada saat terjadi transisi dari reaksi order ke-nol ke ke-satu. Masalahnya, perubahannya tidak linear terhadap [HCl]. Implikasinya, harga K M terhitung akan berbeda. Andaikatapun harga lereng tidak terpengaruh, harga K M tetap akan berbeda karena harga v maks berbeda. Berdasar Tabel 4., kedua persamaan (diferensial) ternyata tidak selalu dapat memberikan harga K M (yang positif), khususnya jika data yang dipakai masingmasing hanya data pada awal atau akhir reaksi. Kalaupun dapat, keduanya selalu memberikan harga yang berbeda pada [HCl] o yang berbeda. Ada 3 hal yang menarik di sini. Pertama, berdasarkan keterangan di atas, kedua persamaan pada dasarnya hanya bisa dipakai jika data berasal dari kondisi reaksi yang mempunyai hukum laju yang berbeda di awal dan akhir reaksi. Tetapi, keduanya tidak mempersyaratkan hal tersebut. Kedua, 10

11 jika dipersyaratkan, masing-masing ada 2 harga yang memenuhi. Mestinya dipilih dari kurva yang lebih mendekati linier, tetapi keduanya juga tidak mempersyaratkan itu. Ketiga, harga yang diberikan oleh kedua persamaan pada penerapan pada data yang sama, ternyata selalu berbeda. Seharusnya harganya sama karena kedua persamaan diturunkan dari persamaan [4]. Memang ada pendapat bahwa salah satu lebih baik dari yang lain tetapi dirasa kurang meyakinkan. Lagi pula, keduanya merupakan persamaan diferensial. Menurut Patiha (2006) pada metode diferensial, harga tetapan yang diperoleh hanya akan sama jika laju v dihitung menggunakan fraksi bereaksi yang sama. Dan, harganya berbeda dengan yang dari integral; yang diyakini lebih pasti. Bahasan selanjutnya adalah yang berkaitan dengan persamaan Espenson. Karena persamaan ini merupakan persamaan integral, untuk data yang sama, diharapkan harga K M yang diperoleh sama dengan yang dari persamaan integral. Masih berdasar Tabel 4., ternyata persamaan Espenson (1995) selalu memberikan harga K M, terlepas dari pada apakah kondisi reaksi mengikuti mekanisme reaksi enzimatis atau tidak. Tetapi, hargaharga tersebut tidak sama. Ini tentu menimbulkan pertanyaan, hasil mana yang seharusnya dipakai. Tentunya yang lebih tepat adalah yang mengikuti mekanisme reaksi enzimatis. Tetapi persamaan Espenson juga tidak mempersyaratkan hal itu. Andaikatapun itu dipakai, masih ada 2 harga. Tentunya harus dipilih yang koefisien regresinya paling mendekati ±1,000. Tetapi, sekali lagi, persamaan ini juga tidak mempersyaratkan uji linearitas. nya, patut dikemukakan 2 hal yang merupakan implikasi penelitian ini. Pertama, bahwa harga v maks dipengaruhi oleh konsentrasi enzim. Karena itu, bagi pemperoleh harga K M, yang relatif konstan, seharusnya konsentrasi enzim diperhitungkan. Dan, karena pengaruhnya tidak berbanding lurus pada saat reaksi mengikuti mekanisme reaksi order kesatu, harga yang lebih baik hanya akan diperoleh dari beberapa percobaan. Kedua, kelemahan model ini adalah karena pereaksi Br 2 relatif berbahaya. Reaksi hidrogen-peroksida dengan iom iodida memberikan hasil yang berbeda dalam suasana asam dan basa. Reaksi dalam suasana alam akan bisa menimbulkan kontroversi; dikatakan H + bertindak sebagai katalis (Cooper dan Koubeck, 1998) tetapi tidak dihasilkan sebagai produk. Terlepas dari itu, semua pereaksinya relatif lebih aman; dan diduga, 11

12 pada kondisi tertentu, dapat mirip reaksi enzimatis. sebagai suatu model untuk reaksi mirip enzimatis. SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Berdasarkan hal-hal yang telah dibicarakan dan sebatas kesalahan percobaan, dapat disimpulkan 3 hal berikut. Saran 1. Reaksi brominasi Aseton mirip reaksi enzimatis pada kondisi konsentrasi awal HCl 0,005 dan 0,010 M, Aseton 0,800 M, dan Br 2 0,010 M. 2. Tetapan Michaelis-Menten tidak dapat diperoleh dari satu eksperimen. 3. Ketiga persamaan, Lineweaver- Burk, Eadie-Hofstee, dan Espenson tidak memberikan hasil yang konsisten. Sejalan dengan pembahasan dan kesimpulan, disarankan 2 hal berikut. 1. Penentuan K M sebaiknya tidak dilakukan dari satu percobaan. 2. Perlu penelitian untuk kemungkinan penggunaan reaksi hidrogenperoksida dengan iodide dalam suasana asam dan atau basa DAFTAR PUSTAKA Atkins, G. L. and I. A. Nimmo Biochem. J. 149, 775. Briggs, G. E. and J. B. S. Haldane Biochem. J. 19, 338. Copper, C. L. And E. Koubek J. Chem. Educ., Dowd, J. E. and D. S. Riggs Biochem. J. 249, 8635 Eadie, E. A J. Biol. Chem Espenson, J. H Chemical Kinetics and Reaction Mechanisms, 2 nd Ed. New York: McGraw-Hill, Inc. Hofstee, B. H. J Nature, Lond Laidler, K. J Chemical Kinetics, 3 rd Edition. New York: Harper Collins Publisher, Inc. Lineweaver, H. and D. Burk J. Am. Chem. Sos Patiha, Persamaan Kinetika Kimia Tunggal Hibrida Diferensial dan Integral dan Implementasinya. Laporan Penelitian Fundamental Tak Terpublikasi. Surakarta: FMIPA UNS Patiha, Persamaan Kinetika Kimia Terpadu untuk Reaksi Enzimatis Michaelis-Mentenis dan yang Mirip 12

13 Laporan Penelitian Fundamental Tak Terpublikasi. Surakarta: FMIPA UNS Patiha, Teknik dan Persamaan Baru yang Efektif untuk penentuan Tetapan Michaelis-Menten dan yang Mirip. Laporan Penelitian Fundamental Tak Terpublikasi. Surakarta: FMIPA UNS. 13

14 14