OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT TESIS.

Transkripsi

1 OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT TESIS Oleh : SRI WIDIA NINGSIH /KM FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

2 OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT TESIS Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Magister Sains dalam Program Studi Ilmu Kimia pada Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Oleh SRI WIDIA NINGSIH /KM PROGRAM MAGISTER ILMU KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

3 LEMBAR PERSETUJUAN Judul Penelitian : OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT DENGAN MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT Nama : SRI WIDIA NINGSIH Nomor Pokok : Program Studi : ILMU KIMIA Menyetujui Komisi Pembimbing (Prof.Basuki Wirjosentono, M.S., Ph.D) Ketua (Dr. Ir. Tjahjono Herawan, M.Sc) Anggota Ketua Program Studi Dekan (Prof.Basuki Wirjosentono, M.S., Ph.D) (Prof.Dr.Eddy Marlianto, M.Sc) NIP NIP Telah diuji : 0 Juni 2010

4 OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT TESIS Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Magister Sains dalam Program Studi Ilmu Kimia pada Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Oleh SRI WIDIA NINGSIH /KM PROGRAM MAGISTER ILMU KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

5 Telah diuji pada Tanggal : 0 Juni 2010 PANITIA PENGUJI TESIS Ketua : Prof. Basuki Wirjosentono, MS, Ph.D Anggota : 1. Dr. Ir. Tjahjono Herawan, M.Sc 2. Dr. Thamrin, M.Sc. Prof. Dr. Harry Agusnar, M.Sc., M.Phil 4. Dr. Rumondang Bulan, M.S 5

6 PERNYATAAN OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT TESIS Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam tesis ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kemagisteran di suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya serta pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Medan, Juli 2010 Penulis Sri Widia Ningsih 6

7 OPTIMASI PEMBUATAN BIOPLASTIK POLIHIDROKSIALKANOAT DENGAN MENGGUNAKAN BAKTERI MESOFILIK DAN MEDIA LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT ABSTRAK Telah dilakukan optimasi pembuatan bioplastik polihidroksialkanoat (PHA) dengan menggunakan bakteri mesofilik dan media limbah cair pabrik kelapa sawit. Strain L 1 1 digunakan sebagai bakteri yang dibiakkan dalam media keluaran tangki reaktor anaerobik unggun tetap (RANUT). Optimasi dilakukan menggunakan metode tanggap permukaan dengan central composite design variabel. Parameter yang dioptimasi adalah konsentrasi glukosa (g/l), temperatur ( 0 C) dan waktu inkubasi (hari). Hasil optimum yang diperoleh dalam penelitian ini untuk berat sel kering (CDW) dan produksi PHA pada kondisi 5 g/l glukosa, 0 o C temperatur inkubasi dan 5 hari waktu inkubasi dengan level kepercayaan (p < 0,05). Hasil karakterisasi FT-IR diperoleh struktur bioplastik PHA panjang rantai pendek poli(-hidroksibutirat-co-- hidroksivalerat) atau (P(HB-co-HV) dengan berat molekul 1400,7941 g/mol dan nilai termal T m 154,72 dan 170,58 o C, T g 19 o C. Kata kunci: Bioplastik, limbah cair pabrik kelapa sawit, polihidroksialkanoat, poli(- hidroksibutirat-co--hidroksivalerat). i

8 OPTIMIZATION OF PRODUCTION OF POLYHYDROXYALKANOATES BIOPLASTIC USING MESOPHILIC BACTERIA AND CULTURE MEDIUM FROM PALM OIL MILL EFFLUENT ABSTRACT Optimization of production of polyhydroxyalkanoates (PHA) bioplastic using mesophilic bacteria and culture medium from palm oil mill effluent has been investigated. Strain L 1 1 was cultured in medium from outlet of anaerobic fixed bed reactor tank. Response surface methodology with central composite design (CCD) was used to optimize the parameter of PHA production. The variables used in this investigation were the concentration of glucose (g/l), temperature ( 0 C) and incubation times (days). The optimum condition of production of the cell dry weight (CDW) and PHA was obtained at 5 g/l glucose, the incubation temperature of 0 o C and 5 days of incubation time with p < FT-IR characterization of the bioplastic structure of the PHA obtained by a short chain length poly(-hydroxybutyrate-co-- hydroxyvalerate) or (P(HB-co-HV) with molecular weight g mol, and thermal value of and o C T m, 19 o C T g. Key Words: Bioplastic, palm oil mill effluent, polyhydroxyalkanoates, poly(- hydroybutyrate-co--hydroxyvalerate). ii

9 KATA PENGANTAR Dengan rendah hati penulis panjatkan puji dan syukur atas kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat serta karunia sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan tesis yang berjudul Optimasi Pembuatan Bioplastik Polihidroksialkanoat Menggunakan Bakteri Mesofilik dan Media Limbah Cair Pabrik Kelapa Sawit. Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada: Rektor, Prof. Dr. dr. Syahril Pasaribu, DTM & H. MSc (CTM). Sp.A(K) atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan untuk menyelesaikan pendidikan program magister. Dekan FMIPA Prof. Dr. Eddy Marlianto, M.Sc atas kesempatan menjadi mahasiswa Program Magister. Terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan yang setinggi-tingginya penulis ucapkan kepada: 1. Bapak Prof. Basuki Wirjosento, M.S., P.hD selaku Pembimbing Utama dan Bapak Dr. Tjahjono Herawan, M.Sc selaku Anggota Komisi Pembimbing yang telah mengorbankan waktu dan tenaga untuk memberikan pengetahuan dan bimbingannya yang sangat bermanfaat bagi penyusunan tesis ini. 2. Bapak Dr. Thamrin M.Sc., Bapak Prof. Dr. Harry Agusnar, M.Sc., M,Phil, Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst, M.S., selaku penguji yang banyak memberikan masukan dan saran untuk penyusunan tesis ini.. Bapak/Ibu staf pengajar pada Program Studi Ilmu Kimia yang telah memberikan pengetahuan dan motivasi selama di bangku perkuliahan sampai selesainya penyusunan tesis ini. 4. Kepada Bapak Direktur Pusat Penelitian Kelapa Sawit (PPKS), Dr. Witjaksana Darmosarkoro yang telah memberikan kesempatan dan segala fasilitas untuk melakukan penelitian yang menunjang penyusunan tesis. iii

10 5. Bapak Dr. Erwinsyah selaku kepala Laboratorium Bioproses yang telah memberikan kesempatan dan segala fasilitas untuk melakukan penelitian yang menunjang penyusunan tesis. 6. Bapak Dr. Tjahjono Herawan, M.Sc. Selaku kepala Laboratorium Oleokimia yang telah memberikan kesempatan dan segala fasilitas untuk melakukan penelitian yang menunjang penyusunan tesis. 7. Ibu Yepi, staf pelayanan Sentra Teknologi Polimer, Tangerang-Banten yang telah membantu dalam penganalisaan Differential Scanning Calorimetry (DSC). 8. Bapak Wikanda staf Laboratorium Geologi Kuarter (PPGL) Bandung yang telah membantu dalam penganalisaan Scanning Electron Microscopy (SEM). 9. Orang tua Papa Subandi dan Ibu Triansih, serta kepada kakanda Sri Wahyuni dan Sutedi Irawan yang tidak pernah lelah dan berhenti memberi perhatian, kasih sayang, dan motivasi baik dalam bentuk doa, tenaga, dan materil kepada penulis dalam penyelesaian penelitian dan penulisan tesis ini. 10. Rita Fitriani, Mbak Novri Darti, Bang Nasri, Bang Syafrial, Susi Handayani, untuk segala bantuan serta kemudahan yang telah diberikan dalam menyelesaikan penelitian tesis. 11. Dr. Darnoko dan Frisda Rimbun Panjaitan S.T., M.T., untuk waktu luang dan diskusi serta motivasi yang membuka cakrawala berpikir. 12. Teman-teman angkatan 2008 program reguler (Ibu Yun, Kak Ani, Melany, Andy, Edi, Bang Maniur), Pak Bagus dan Ibu Rahnita atas kebersamaan, perhatian dan dukungan yang telah diberikan, Kak Leli di Sekolah Pascasarjana Ilmu Kimia yang telah banyak memberikan bantuan moril dan motivasi kepada penulis. 1. Seluruh keluarga besar dan para sahabat yang tak dapat saya sebutkan satupersatu yang sudah mendoakan dan memberikan dukungan. Semoga Allah SWT melimpahkan segala rahmat, hidayah serta karunia atas kebaikan Bapak/Ibu dan Saudara-saudara sekalian. Penulis menyadari bahwa tesis ini jauh dari kesempurnaan oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun dari pihak pembaca sangat diharapkan penulis iv

11 demi kesempurnaan tesis ini. Akhir kata semoga tesis ini bermanfaat bagi penelitian dan kemajuan ilmu pengetahuan untuk masa yang akan datang. Hormat Penulis Sri Widia Ningsih v

12 DAFTAR RIWAYAT HIDUP Penulis lahir tanggal 17 September 1981 di Medan, Sumatera Utara, anak ketiga dari tiga bersaudara pasangan Haji Subandi dan Hajjah Triansih. Penulis menimba ilmu pada masa pendidikan di SD Swasta Bakti Medan tahun , SLTP Negeri 11 Medan tahun , SMU Negeri 7 Medan tahun , pada tahun 2000 diterima menjadi mahasiswa Jurusan Kimia FMIPA Universitas Sumatera Utara dan tamat tahun Kemudian tahun 2008 melanjutkan pendidikan ke Program Magister Sekolah Pascasarjana pada Program Studi Kimia dan menyelesaikan studinya pada tahun vi

13 DAFTAR ISI Halaman ABSTRAK i ABSTRACT ii KATA PENGANTAR iii DAFTAR RIWAYAT HIDUP vi DAFTAR ISI vii DAFTAR GAMBAR xi DAFTAR TABEL xiv DAFTAR LAMPIRAN xv DAFTAR ISTILAH/SINGKATAN xvii BAB I. PENDAHULUAN Latar Belakang Perumusan Masalah Pembatasan Masalah Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian Lokasi Penelitian Metodologi Penelitian 8 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA Plastik Pengertian Plastik Konvensional (non-biodegradabel) Bioplastik (Biodegradabel) Bioplastik (PHA) Sejarah Penggolongan PHA 19 vii

14 2.2. Biosintesis PHA Sifat Fisika dan Kimia PHA Degradasi 2 2. Faktor yang Mempengaruhi Sintesis PHA Mikroorganisme Biakan LCPKS Karakteristik LCPKS Proses Pengolahan LCPKS Substrat Teknik Fermentasi Kultivasi PHA Potensi Aplikasi Bioplastik PHA 4 BAB III. BAHAN DAN METODE PENELITIAN 6.1 Bahan 6.2 Alat 6. Metode Penelitian 7..1 Penelitian Pendahuluan Pengisolasian Bakteri Penyeleksian Bakteri 8..2 Penelitian Utama Pengukuran Kurva Pertumbuhan Bakteri Optimasi Media Biakan dan Kondisi 9.. Kultivasi Sel (Cell Dry Weight/ CDW) Pengekstraksian dan Purifikasi Polimer PHA Penentuan Kadar Total Suspended Solid (TSS) Penentuan Kadar Chemical Oxygen Demand (COD) Analisa Mikroskopis Granula PHA Penentuan Berat Molekul Analisis FT IR 4 viii

15 ..10 Analisa Termal Material dengan DSC Analisa Scanning Electron Microscope (SEM) 44.4 Rancangan Percobaan 44.5 Bagan Penelitian Pengisolasian Bakteri Penyeleksian Bakteri Pengukuran Kurva Pertumbuhan Bakteri Kurva Pertumbuhan Bakteri L 1 1 dalam Media Nutrient Broth Kurva Pertumbuhan Bakteri L 1 1 dalam Media Limbah Ranut Optimasi Media Biakan dan Kondisi Pemanenan Sel (Cell Dry Weight/ CDW) Pengekstraksian dan Purifikasi Polimer PHA Penentuan Kadar Total Suspended Solid (TSS) Penentuan Kadar Chemical Oxygen Demand (COD) Analisa Mikroskopis Granula PHA 55 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN Pengisolasian Bakteri Penyeleksian Bakteri Kemampuan Isolat Terpilih dalam menghasilkan PHA pada Media Sintetik Pseudomonas aeruginosa Kemampuan Pseudomonas aeruginosa (L 1 1 ) dalam menghasilkan Bioplastik PHA pada media RANUT Penelitian Utama Kurva Pertumbuhan Bakteri Optimasi Media Biakan dan Kondisi Hasil Pengamatan Optimasi 6 ix

16 A Berat Sel Kering atau CDW (%) 6 A.1 Interaksi Tanggap Permukaan Pertama 6 A.2 Interaksi Tanggap Permukaan Kedua 66 B. Bioplastik PHA (g/l) 70 B.1 Interaksi Tanggap Permukaan Pertama 70 B.2 Interaksi Tanggap Permukaan Kedua 72 C. Penentuan Kadar TSS 75 D. Penentuan Kadar Chemical Oxygen Demand (COD) 77 E. Hubungan Antara Pertumbuhan CDW dengan Produksi Bioplastik PHA Karakerisasi Bioplastik PHA Analisa Mikroskopis Granula PHA Penentuan Berat Molekul Bioplastik PHA Karakterisasi FT-IR Bioplastik PHA Analisa DSC Analisa SEM Bioplastik PHA 87 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran 89 DAFTAR PUSTAKA 90 LAMPIRAN 101 x

17 DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Halaman 1 Proyeksi produksi plastik biodegradabel 16 2 Plastik biodegradabel dari golongan poliester alifatik 18 Struktur umum PHA 20 4 Jalur Biosintesa produksi PHA 21 5 Biodegradasi P(HB-co-HHX) film pada lingkungan tropis 2 mangrove selama minggu berturut-turut 6 Salah satu isolat dari 24 isolat yang berhasil diseleksi dan 57 dimurnikan dalam media nutrient agar L 4 5, L 1 6 (E-coli) ; L 1 1, L 1 1 (Pseudomonas aeruginosa); L 1 11, L 2, L 2 (Pseudomonas putida) 8 Isolat L 1 1 positif menyerap Sudan Black B dan mampu 58 membentuk PHA 9 Pseudomonas aeruginosa dalam cetrimide agar Nilai CDW (%) terhadap no. percobaan respon tanggap 6 permukaan pertama 11 Grafik pengamatan dan prediksi pemodelan terhadap nilai 64 CDW (%) respon tanggap permukaan pertama 12 Grafik interaksi tanggap permukaan pertama antara waktu 66 inkubasi (hari) terhadap konsentrasi glukosa (g/l) pada temperatur inkubasi 0 o C pada CDW (%) 1 Grafik nilai CDW (%) terhadap no. percobaan respon tanggap 67 permukaan kedua 14 Grafik pengamatan dan prediksi pemodelan terhadap nilai 68 CDW (%) respon tanggap permukaan kedua 15 Grafik interaksi tanggap permukaan kedua antara waktu inkubasi (hari) terhadap konsentrasi glukosa (g/l) pada 68 xi

18 temperatur inkubasi 0 o C pada CDW (%) 16 Grafik nilai PHA (g/l) terhadap no. Percobaan respon 70 tanggap permukaan pertama 17 Grafik pengamatan dan prediksi pemodelan terhadap nilai 71 PHA (g/l) respon tanggap permukaan pertama 18 Grafik interaksi tanggap permukaan pertama antara waktu 72 inkubasi (hari) terhadap konsentrasi glukosa (g/l) pada temperatur inkubasi 0 o C pada PHA (g/l) 19 Grafik nilai PHA (g/l) terhadap no. percobaan respon tanggap 7 permukaan kedua 20 Grafik pengamatan dan prediksi pemodelan terhadap nilai 7 PHA (g/l) respon tanggap permukaan kedua 21 Grafik Interaksi tanggap permukaan kedua antara waktu 74 inkubasi (hari) terhadap konsentrasi glukosa (g/l) pada temperatur inkubasi 0 o C pada PHA (g/l) 22 Grafik hubungan antara TSS dan CDW pada tiap percobaan 76 respon tanggap permukaan pertama 2 Grafik hubungan antara TSS dan CDW pada tiap percobaan 77 respon tanggap permukaan kedua 24 Grafik hubungan antara COD dan PHA pada tiap percobaan 78 respon tanggap permukaan pertama 25 Grafik hubungan antara COD dan PHA pada tiap Percobaan 79 Respon Tanggap Permukaan Kedua 26 Grafik hubungan antara COD dan PHA pada tiap percobaan 80 respon tanggap permukaan pertama 27 Grafik hubungan antara COD dan PHA pada tiap percobaan 81 respon tanggap permukaan kedua 28 Sel PHA dari RANUT tanpa nutrisi Spektrum FT-IR senyawa PHA hasil penelitian dan referensi 84 xii

19 DAFTAR TABEL Nomor Judul Halaman 1 Perbandingan PHA dan Polipropilen 2 2 Komposisi jumlah air limbah dalam 1 ton CPO 27 Kualitas limbah cair kelapa sawit di Indonesia 27 4 Produksi PHA oleh mikroorganisme sesuai kondisi 0 tumbuhnya 5 Perlakuan terkode untuk pengakumulasian PHA 45 6 Central Composite Design (CCD) untuk variabel 45 7 Karakterisitik morfologi dan biokimia isolat terpilih 56 8 PHA yang diakumulasikan oleh 7 isolat yang terseleksi 59 9 Analisis disain optimasi untuk produksi CDW (%) Analisis disain optimasi untuk produksi PHA (g/l) 74 xiii

20 DAFTAR LAMPIRAN Nomor Judul Halaman 1 Tabel hasil analisa dan hasil PHA run I (tanpa penyaringan) pada 101 suhu 41 o C, 7 hari Waktu inkubasi 2 Data analisa dan hasil PHA Run II (dilakukan penyaringan) 102 temperatur inkubasi 7 0 C untuk waktu inkubasi 5,6 hari Data absorbansi pada berbagai panjang gelombang 10 4 Kurva absorbansi larutan Nutrient Broth dan limbah RANUT 104 pada berbagai panjang gelombang 5 Data absorbansi pertumbuhan bakteri L 1 1 dalam Nutrient Broth 105 pada panjang gelombang 486 nm 6 Kurva absorbansi pertumbuhan bakteri L 1 1 dalam Nutrient 106 Broth pada panjang gelombang 486 nm 7 Data absorbansi pertumbuhan bakteri L 1 1 dalam limbah 107 RANUT pada panjang gelombang 646 nm 8 Kurva absorbansi pertumbuhan bakteri L 1 1 dalam limbah 108 RANUT pada panjang gelombang 646 nm 9 Data pertumbuhan bakteri L 1 1 berdasarkan sel kering (CDW) Kurva pertumbuhan bakteri L 1 1 dalam Nutrient Broth dan 110 limbah RANUT berdasarkan sel kering (CDW) 11 Data respon tanggap permukaan pertama Data respon tanggap permukaan kedua Data pengamatan dan prediksi pemodelan CDW (%) tanggap 11 permukaan pertama berdasarkan analisa statistik (STATSOFT 6.0) 14 Data ANOVA dan grafik Pareto untuk CDW (%) tanggap 114 permukaa pertama 15 Grafik tanggap permukaan pertama CDW (%) 115 xiv

21 16 Data pengamatan dan prediksi pemodelan CDW (%) tanggap 116 permukaan kedua berdasarkan analisa statistik (STATSOFT 6.0) 17 Data ANOVA dan grafik Pareto untuk CDW (%) tanggap 117 permukaa kedua 18 Grafik tanggap permukaan kedua CDW (%) Data pengamatan dan prediksi pemodelan PHA (g/l) tanggap 119 permukaan pertama berdasarkan analisa statistik (STATSOFT 6.0) 20 Data ANOVA dan grafik Pareto untuk PHA (g/l) tanggap 120 permukaa pertama 21 Grafik tanggap permukaan pertama PHA (g/l) Data pengamatan dan prediksi pemodelan PHA (g/l) tanggap 122 permukaan kedua berdasarkan analisa statistik (STATSOFT 6.0) 2 Data ANOVA dan grafik Pareto untuk PHA (g/l) tanggap 12 permukaa kedua 24 Grafik tanggap permukaan kedua PHA (g/l) Analisa mikroskopis granula PHA Penentuan nilai COD, TSS, CDW, PHA Penentuan berat molekul PHA Spektrum FT-IR bioplastik PHA Hasil uji sifat termal material dengan DSC untuk perlakuan 1 nutrisi 5 g/l glukosa, temperatur inkubasi 0 o C, dan waktu inkubasi 5 hari 0 Analisa SEM bioplastik PHA untuk perlakuan nutrisi 5 g/l 15 glukosa, temperatur inkubasi 0 o C, dan waktu inkubasi 5 hari 1 Dokumentasi rute penelitian 16 xv

22 DAFTAR ISTILAH/SINGKATAN ANOVA BOD CCD CDW COD CPO DEHP DSC FT-IR HA LCPKS LCL MCL MR OF PBS PCL PET PHA PHB PHB4B PHBHx PHBV PKS PLA PV RANUT RSM : analysis of variance : biological oxygen demand : central composite design : cell dry weight (berat sel kering) : chemical oxygen demand : crude palm oil : di(ethylhexyl) phthalate : differential scanning calorimetry : fourier transfer-infra red : hidroksialkanoat : limbah cair pabrik kelapa sawit : long chain length : medium chain length (panjang rantai sedang) : metil red : oksidase/fermentase : poli (butilena suksinat) : poli (ε-kaprolakton) : polyethylenterephthalate : polihidroksialkanoat : poli (ß-hidroksi butirat) : polihidroksi(butirat-co-4 butirat) : polihidroksi(butirat-co-heksanoat) : polihidroksi(butirat-co-valerate) : pabrik kelapa sawit : poly(lactic acid) : voges proskauer : reaktor anaerobik unggun tetap : response surface methodology (metodologi tanggap permukaan) xvi

23 Saddle point : tidak terdapat titik optimum SCA : simon citrate agar SCL : short chain length (panjang rantai pendek) SEM : scanning electron microscopy SIM : sulfite indol motility STATSOFT : statistica software TSIA : triple medium sugar iron agar TSS : total suspended solid xvii