LAPORAN PRAKTIKUM STRUKTUR DAN PERKEMBANGAN HEWAN II

Transkripsi

1 VAGINAL SMEAR Oleh : Nama : Nur Amalah NIM : B1J Rombongan : IV Kelompok : 2 Asisten : Andri Prajaka Santo LAPORAN PRAKTIKUM STRUKTUR DAN PERKEMBANGAN HEWAN II KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS BIOLOGI PURWOKERTO 2012

2 I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang Mamalia merupakan salah satu kelas yang bereproduksi secara seksual. Oleh karena itu, mamalia mempunyai aktivitas seksual yang menyertai sepanjang hidupnya. Aktivitas seksual tersebut selalu berubah-ubah, kadang tinggi dan kadang juga rendah. Siklus estrus merupakan salah satu penyebab perubahan aktivitas seksual tersebut. Vaginal smear merupakan metode yang digunakan untuk mengidentifikasi fase siklus estrus yang sedang dialami oleh individu betina dengan cara mengamati tipe sel dan proporsi masing-masing sel yang ditemukan pada apusan. Periode antara satu fase estrus dengan fase estrus berikutnya disebut siklus estrus. Setiap hewan memiliki siklus estrus yang berbeda-beda, ada golongan hewan monoestrus (estrus sekali dalam satu tahun), golongan poliestrus (estrus beberapa kali dalam setahun) dan hewan poliestrus bermusim (estrus hanya selama musim tertentu dalam satu tahun). Satu siklus estrus terdapat empat fase yaitu proestrus, estrus, metestrus/postestrus, dan diestrus. Masingmasing fase tersebut berkaitan dengan perubahan aktivitas seksual dan struktur pada ovarium, uterus, dan vagina. Mencit ( Mus musculus) digunakan dalam praktikum kali ini karena termasuk kelas mamalia yang bertubuh kecil, sehingga mudah diamati, dan mudah didapat. Mencit juga memiliki siklus estrus yang pendek. Metode vaginal smear dapat diaplikasikan dalam bidang kesehatan, salah satu contohnya yaitu untuk mendeteksi penyakit kanker mulut rahim yang disebabkan oleh Human Papilloma Virus atau HPV. Metode yang digunakan adalah pemeriksaan sel-sel yang diambil dari leher rahim dan kemudian diperiksa dibawah mikroskop.

3 B. Tujuan Tujuan dari praktikum kali ini adalah dapat melakukan prosedur pembuatan preparat apus vagina dan menentukan fase dalam siklus estrus berdasarkan hasil vaginal smear.

4 II. TINJAUAN PUSTAKA Vaginal smear merupakan metode yang digunakan untuk mengidentifikasi fase siklus estrus yang sedang dialami oleh individu betina dengan cara mengamati tipe sel dan proporsi masing-masing sel yang ditemukan pada apusan. Hewan yang dapat diamati siklus estrusnya melalui metode vaginal smear yaitu hewan betina yang masak kelamin dan tidak sedang hamil. Periode antara satu fase estrus dengan fase estrus berikutnya disebut siklus estrus. Satu siklus estrus terdapat empat fase yaitu proestrus, estrus, metestrus/postestrus, dan diestrus (Caligioni, 2010). 1. Fase proestrus Ditandai dengan adanya sel-sel epitel sel-sel epitel berbentuk oval atau poligonal berinti ( sel poligonal lebih banyak). Terjadi pembentukan folikel sampai tumbuh maksimum. Pertumbuahan folikel ini menghasilkan estrogen sehingga dinding uterus menjadi lebih tebal dan halus serta lebih bergranula. Selain itu digetahkan cairan yang agak pekat yang dinamakan cairan milk uteria. Struktur histologis epitel vagina pada fase proestrus adalah berlapis banyak (10-13), stratum korneum kornifikasi aktif, leukosit sedikit, dan mitosis aktif (Nalbandov, 1990). 2. Fase estrus Fase ini ditandai dengan adanya sel-sel epitel menanduk, produksi estrogen akan bertambah dan terjadi ovulasi sehingga dinding mukosa uterus akan menggembung dan mengandung sel-sel darah, pada fase ini folikel matang dan terjadi ovulasi dan betina siap menerima sperma dari jantan. Sel-sel epitel menanduk merupakan indikator terjadinya ovulasi, menjelang ovulasi leukosit makin banyak menerobos lapisan mukosa vagina kemudian ke lumen. Selama masa luteal pada ovarium dengan pengaruh hormon progesteron dapat menekan pertumbuhan sel epitel

5 vagina. Struktur histologis epitel vagina pada fase estrus yaitu lapisan superficial berinti, struktur korneum sedikit dan melepas leukosit di bawah epitel, mitosis berkurang,dan leukosit tidak ada (Yatim, 1982). 3. Fase Metestrus Metestrus adalah fase setelah ovulasi dimana korpus luteum mulai berfungsi. Panjangnya metestrus dapat tergantung pada panjangnya waktu LTH ( Lutetropik Hormon) disekresi oleh adenohipofisis. Selama periode ini terdapat penurunan estrogen dan penaikan progesteron yang dibentuk oleh ovary (Guyton dan Hall, 1997). 4. Fase Diestrus Diestrus adalah periode quiescence yang relatif pendek antara siklus estrus pada hewan hewan yang tergolong poliestrus. Pada fase diestrus ditandai dengan adanya sel epitel normal dan banyak leukosit. Hormon tidak disekresikan dalam jumlah konstan sepanjang daur seksual, tetapi dengan kecepatan yang sangat berbeda dalam berbagai bagian dari daur tersebut. Sistem hormon yang berperan dalam daur pembiakkan adalah hormon yang dikeluarkan oleh hipotalamus yaitu GnRh, hormon yang dikeluarkan oleh hipofisis anterior yaitu FSH dan LH, dan hormon yang dikeluarkan oleh ovarium yaitu estrogen dan progesteron (Guyton dan Hall, 1997).

6 III. MATERI DAN METODE A. Materi Alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah cotton bud, object glass, cover glass, pipet tetes, mikroskop, dan tissue. Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah Mencit betina ( Mus musculus ) yang masak kelamin dan tidak sedang hamil, larutan NaCl fisiologis, larutan alkohol 70%, pewarna methylen blue, dan air kran. B. Metode Metode yang digunakan dalam praktikum ini adalah : 1. Object glass dibersihkan dengan alkohol 70% dan dikering udarakan. 2. Mencit betina ( Mus musculus ) yang akan diperiksa dipegang dengan tangan kanan, dengan cara menelentangkannya di atas telapak tangan sementara tengkuk dijepit oleh ibu jari dan telunjuk. Ekor dijepit diantara telapak tangan dan jari kelingking. 3. Ujung cotton bud dibasahi dengan larutan NaCl fisiologis kemudian secara perlahan dimasukkan ke dalam vagina mencit sedalam ± 5mm dan diputar searah secara perlahan-lahan dua hingga tiga kali. 4. Ujung cotton bud yang sudah dioleskan pada vagina tersebut dioleskan memanjang dua atau tiga baris olesan dengan arah yang sama pada object glass. 5. Olesan vagina tersebut ditetesi dengan larutan methylen blue sambil sesekali dimiringkan agar pewarna merata pada permukaan ulasan dan ditunggu selama ± 15 menit. Pewarna yang berlebihan dibersihkan dengan membilas menggunakan air kran yang mengalir kecil kemudian ditutup dengan cover glass.

7 6. Preparat diamati di bawah mikroskop. Tipe dan proporsi sel dalam preparat apusan diamati. Sel-sel yang ditemukan digambar dan ditentukan fasenya.

8 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil 1 2 (A) (B) (Nalbandov, 1990) Keterangan Gambar : A. Gambar mikroskopis siklus estrus fase proestrus Perbesaran 40 x1 0 B. Gambar skematis siklus estrus fase proestrus 1. Sel Epitel 2. Sel Leukosit

9 B. Pembahasan Percobaan vaginal smear pada mencit betina yang telah dilakukan menunjukkan mencit tersebut sedang mengalami fase proestrus. Fase proestrus merupakan fase dalam siklus estrus yang ditandai dengan adanya sel-sel epitel berbentuk oval atau poligonal berinti (sel poligonal lebih banyak). Terjadi pembentukan folikel sampai tumbuh maksimum. Pertumbuahan folikel ini menghasilkan estrogen sehingga dinding uterus menjadi lebih tebal dan halus serta lebih bergranula. Selain itu digetahkan cairan yang agak pekat yang dinamakan cairan milk uteria. Struktur histologis epitel vagina pada fase proestrus adalah berlapis banyak (10-13), stratum korneum kornifikasi aktif, leukosit sedikit, dan mitosis aktif (Amaya, 2011). Sel epitel merupakan sel yang terletak di permukan vagina, sehingga apabila terjadi perubahan kadar estrogen maka sel epitel merupakan sel yang paling awal terkena akibat dari perubahan tersebut. Sel leukosit merupakan sel antibodi yang terdapat di seluruh bagian individu. Sel leukosit di vagina berfungsi membunuh bakteri dan kuman yang dapat merusak ovum. Sel epitel berbentuk oval atau poligonal berinti sedangkan sel leukosit berbentuk bulat berinti (Soeminto, 2000). Hasil percobaan menunjukkan adanya sel epitel muda yang berbentuk oval berinti, sel epitel poligonal berinti yang lebih banyak dibandingkan epitel muda,dan sedikit sel leukosit pada preparat apus vagina mencit. Berdasarkan hal tersebut, menurut Yatim (1982) mencit tersebut sedang mengalami fase proestrus.

10 Siklus estrus memiliki perbedaan dengan siklus menstruasi. Perbedaan tersebut menurut Guyton dan Hall (1997) antara lain : No Siklus estrus Siklus menstruasi 1 Terdapat beberapa tahapan seperti Terjadi jika ovum tidak dibuahi proestrus, estrus, metestrus dan diestrus 2 Endometrium tidak mengalami peluruhan Endometrium penyusutan dan hancur mengalami 3 Saat sel telur tidak dibuahi tidak terjadi pendarahan tetapi akan terjadi penebalan Saat sel telur tidak dibuahi akan terjadi pendarahan endometrium Menstruasi disebabkan oleh berkurangnya estrogen dan progesteron secara tibatiba, terutama progesteron pada akhir siklus ovarium bulanan. Efek pertama adalah penurunan rangsangan terhadap sel-sel endometrium oleh kedua hormon ini, yang diikuti dengan cepat endometrium sendiri menjadi kira-kira 65 % dari ketebalan semula. Selama menstruasi normal, 40 mm darah dan tambahan 35 ml cairan serus dikeluarkan dalam waktu 4 sampai 7 hari sesudah dimulainya menstruasi, pengeluaran darah akan berhenti, karena pada saat ini endometrium mengalami epitelisasi kembali (Guyton dan Hall, 1997).

11 V. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Berdasarkan hasil dan pembahasan sebelumnya dapat diambil kesimpulan sebagai berikut : 1. Siklus estrus pada mamalia dapat diidentifikasi dengan membuat preparat apus vagina yang disebut dengan metode vaginal smear, yaitu dengan mengamati tipe sel dan proporsi masing-masing sel yang ditemukan pada apusan. Prosedur pembuatan preparat apus vagina secara singkat yaitu dengan cara memasukkan cotton bud yang telah dibasahi dengan NaCl fisiologis ke dalam vagina mencit yang telah masak kelamin, kemudian mengoleskannya pada gelas objek yang telah dibersihkan dengan alkohol 70 % dan mengamatinya di bawah mikroskop. 2. Hasil percobaan menunjukkan bahwa mencit yang diamati sedang mengalami fase proestrus, yang ditandai dengan adanya sel epitel muda yang berbentuk oval berinti, sel epitel poligonal berinti yang lebih banyak dibandingkan epitel muda,dan sedikit sel leukosit pada preparat apus vagina. B. Saran Sebaiknya saat praktikum, disediakan preparat apus vagina yang sudah jadi yang terdiri dari fase proestrus, estrus, metestrus atau postestrus, dan diestrus, sehingga dapat membantu kelompok yang belum berhasil membuat apus vagina.

12 DAFTAR REFERENSI Amaya Metode Vaginal Smear. Diakses pada tanggal 4 Oktober Caligioni Assessing Reproductive Status/Stages in Mice. Curr Protoc Neurosci. Author Manuscript: available in PMC (2010) : 1-11 Guyton, A. C and Hall, J. E Textbook Medical Physiologi. Wb Saunders Company, Philadelphia. Nalbandov, A. V Reproductive Physiology of Mammals and Birds. W. H. Freeman and Company, San Fransisco. Soeminto Embriologi Vertebrata. Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. Yatim, W Reproduksi dan Embriologi. Tarsito, Bandung.