BAB II KAJIAN PUSTAKA

Transkripsi

1 BAB II A. Kajian Teori KAJIAN PUSTAKA 1. Tanaman Kenari (Canarium indicum, L.) a. Tanaman Kenari Gambar 1. Tanaman Kenari (Dokumentasi Penelitian, 2016) Pohon kenari merupakan tanaman hutan dan belum banyak di budidayakan. Kenari merupakan tanaman asli Indonesia yang banyak tumbuh di daerah Indonesia bagian timur, seperti Sulawesi Utara, Maluku dan Pulau Seram. Tanaman ini diduga berasal dari Indonesia bagian timur. Beberapa sumber menyatakan bahwa tanaman kenari juga banyak dijumpai di beberapa negara seperti Afrika, Nigeria, Thailand, Filipina, Kepulauan Fiji, dan Papuaa Nugini. Penelitian intensif tentang asal-usul tanaman ini 8

2 yang sebenarnya masih perlu dilakukan. Tanaman ini berpotensi ekonomi, kenari diambil buahnya terutama bagian dalam bijinya untuk di makan dan bijinya diolah menjadi minyak. Tumbuhan ini berasal dari kawasan Malenesian (Lukmanto,2015:6) Di Indonesia bagian timur buah kenari ini penghasilan utama warga Pulau Makian di Halmahera Selatan, Maluku Utara. Banyaknya kenari menyebabkan pulau ini dikenal sebagai Pulau Kenari. Tanaman kenari memiliki beberapa sebutan nama. Penyebutan umum atau dalam bahasa inggris diantaranya Blume Galip, C. Almond, C. Nut, Galip, Galip Nut, Almond Java, Java Olive, Kenari, Nangai Nut, Nut Ali. Penyebutan dalam bahasa daerah di Indonesia diantaranya : Jal, Jar (Ambon), Kanari Bagea (Maluku), Kenari Ambon (Suku Sunda). Kenari merupakan tanaman vascular (mempunyai system jaringan pembuluh pada batangnya), berbunga dan berbiji dikotil (Lukmanto,2015:5). Genus Canarium L. Termasuk dalam famili Burseraceae. Genus Canarium L. terdiri dari 5 spesies utama yang ditemukan di daerah tropis Asia dan Pasifik dan beberapa spesies di daerah Afrika tropis (Orwa et al., 2009). Dari spesies yang ada, spesies yang terdapat di Pasifik Barat diklasifikasikan menjadi 2 group, yaitu : 1). Maluense (spesies canarium lamili, canarium salomonense, canarium harveyi) dan 2). Vulgare (canarium vulgare, canarium indicum, canarium ovatum). Ketiga spesies yang dominan tersebut berbeda-beda asalnya Canarium vulgare berasal dari 9

3 indonesia, Canarium ovatum berasal dari Filipina dan Canarium indicum berasal dari Indonesia (Lukmanto,2015:7).. Tempat tumbuh dari tanaman kenari yaitu di hutan primer. Tanaman kenari ini tumbuh dengan baik pada tanah-tanah kapur, tanah-tanah berpasir di pantai. Tetapi dapat juga tumbuh pada tanah-tanah podsolik yang kurang subur sampai yang subur dan pada tanah-tanah latosol. Tanaman kenari dapat tumbuh dan berproduksi baik pada ketinggian meter di atas permukaan laut, walaupun dibeberapa tempat dapat juga tumbuh pada ketingian 1500 meter dpl. Tanaman kenari ini juga dapat tumbuh pada lahan datar, bergelombang dan bertebing-tebing curam. Ditinjau dari kondisi iklimnya, tanaman kenari ini dapat tumbuh di daerah-daerah yang beriklim kering dan basah. Tanaman kenari dapat tumbuh di daerah dengan jumlah curah hujan mm per tahun dan suhu C (Donuata, 2014:12). 10

4 b. Morfologi Tanaman Kenari Secara morfologi tanaman ta memiliki ciri-ciri ciri sebagai berikut : 1) Batang Gambar 2. Batang Pohon Kenari (Dokumentasi Penelitian, 2016) Batangnya tegak dengan warna coklat tua. Jika kulit batang pohon diiris akan menegluarkan getah kenari yang memiliki tekstur lunak, berwarna keputih-putihan, putihan, berbau aromatik seperti terpentin, dan merupakan hasil eksudasi patologis dari tumbuhan kenari itu sendiri. Pohon kenari memproduksi getah pada saat daun mulai tumbuh. Selama musim kering, pohon kenari berada dalam masa dorman, tanpa daun, dan tidak memproduksi resin (Donuata,2014:6). 11

5 2) Akar Gambar 3. Akar Pohon Kenari (Dokumentasi Penelitian, 2016) Sistem perakaran pada tanaman kenari ini adalah sistem akar tunggang. Pada sistem akar tunggang, baik akar primer maupun satu atau lebih aka akar lateral yang menggantikan akar primer pada tahap awal perkembangan kecambah tumbuh lebih cepat dan menjadi lebih besar serta kuat daripada akar-akar akar lain, sehingga terbentuk satu satu atau lebih akar akar utama (Donuata,2014:7). 12

6 3) Daun Gambar 4. Daun Kenari (Dokumentasi Penelitian, 2016) Daunnya majemuk menyirip gasal dengan pasang pinak daun yang menjorong memanjang, dengan permukaan licin dan mengkilap. Da Daun tidak mempunyai daun penumpu (Donuata,2014:8). 4) Bunga Gambar 5. Bunga Kenari (Donuata, 2014:9) 13

7 Tanaman ini adalah tumbuhan berumah dua, dengan bunganya yang tumbuh di pangkal daun yang masih muda. Seperti layaknya pada pepaya atau rambutan. Penyerbukan bunga tanaman ini dilakukan oleh serangga. Bunga tumbuhan ini muncul dalam waktu yang teratur, walaupun buahnya memerlukan waktu yang lama untuk masak. Ovarium berisi tiga locules, masing-masing dengan dua ovula, sebagian besar waktu hanya satu ovula mengembangkan. Perbungaannya berbentuk malai. Berkelamin tunggal, zigomorf, kelopak dan mahkota berbilangan 5, daun kelopak dan daun mahkota berbilangan 5, daun mahkota bebas. Benang sari 8. Tersusun dalam 2 lingkaran yang tidak lengkap (Donuata, 2014:9) 5) Buah Gambar 6. Buah Kenari (Dokumentasi Penelitian, 2016) Buahnya adalah buah berbiji, diameter 4 sampai 7 cm dan beratnya 15,7-45,7 g. Kulit (exocarp) adalah halus, tipis, mengkilap, dan berwarna hitam keunguan ketika buah matang; pulp (mesocarp) adalah kuning berserat, berdaging, dan kehijauan dalam warna, dan cangkang keras (endocarp) 14

8 dalam melindungi normal dicotyledonous embrio. Para basal akhir shell (endocarp) adalah menunjuk dan apikal akhir lebih atau kurang tumpul; antara benih dan cangkang keras (endocarp) adalah, tipis kecoklatan, berserat kulit biji dikembangkan dari lapisan bagian dalam endocarp tersebut. Ini lapisan tipis biasanya melekat erat pada dan shell / atau benih. Sebagian dari berat kernel terdiri dari kotiledons, yang sekitar 4,1-16,6% dari buah utuh. Bakal buah beruang 2-3, tiap ruang dengan 1-2 bakal biji yang apotrop atau epitrop. Berbiji, gepeng, panjang, terdapat 2-3 biji dalam satu buah (berbentuk sawo kecil). c. Taksonomi Tanaman Kenari Secara taksonomi, kenari memilki klasifikasi sebagai berikut : Kingdom Subkingdom Superdivisi Divisi Kelas Subkelas Ordo Famili Genus : Plantae : Tracheobionta : Spermatophyta : Magnoliopsida : Magnoliopsida : Rosidae : Sapindales : Burseraceae : Canarium Sumber : (Lukmanto, 2015:5). Nama binominal : Canarium indicum, L. 15

9 Canarium vulgare Leenh. d. Kandungan Kimia Daun Kenari Berdasarkan studi literatur, telah banyak dilaporkan tentang kandungan kimia dari daun spesies genus Canarium L. lainnya diantaranya C. Schweinfurthii (Atile) mengandung senyawa : 1. Flavonoid Flavonoid merupakan senyawa alami yang mengandung 15 atom karbon sebagai rangka dasarnya (William, 1955:104). Wurlina (2003:90) menyatakan flavonoid termasuk golongan fitoestrogen yaitu sumber estrogen yang berasal dari tanaman yang merupakan senyawa non steroidal dan memiliki aktivitas estogenik. 2. Saponin Senyawa saponin merupakan larutan berbuih dan merupakan steroid atau glikosida triterpenoid. Efek negatif dari saponin pada reproduksi hewan diketahui sebagai abortivum, menghambat pembentukan zigot dan anti implantasi. Saponin bersifat sitoksik terhadap sel terutama yang sedang mengalami perkembangan seperti pada saat oogenesis ( De Padua 1978 dalam Rusmiati, 2010:34). 3. Tanin Tanin merupakan senyawa yang termasuk ke dalam golongan polifenol yang dapat membentuk kompleks dengan protein. Tanin memiliki peranan biologis yang kompleks. Hal ini dikarenakan sifat tanin yang sangat kompleks mulai dari pengendap protein hingga pengkhelat 16

10 logam. Tanin juga dapa berfungsi sebagai antioksidan biologis. (Lukmanto, 2015:27). Pada C. Adontophyllum mengandung terpenoid, tanin, flavonoid, fenol dan saponin sedangkan alkaloid tidak ada (Lukmanto, 2015: 8). Pada C. Album mengandung flavonoid, triterpena dan seskuiterpena dan untuk C. Indicum mengandung : senyawa flavonoid, polifenol, tanin dan saponin tetapi tidak mengandung senyawa alkaloid dan steroid (Lukmanto, 2015: 8). Penggunaan kandungan zat kimia sebagai salah satu cara untuk menentukan hubungan kekerabatan jenis (inter specific) dan dibawah tingkat jenis (infra spesific) disebut dengan kemotaksonomi. McNair (1935 dalam Lukmanto,2015:8) menyatakan bahwa semakin dekat hubungan kekerabatannya (taxa) akan menghasilkan kandungan kimia yang lebih mirip. Berdasarakan kemotaksonominya kandungan kimia daun kenari memiliki kemiripan dengan spesies Canarium lainnya. 2. Fitoestrogen Fitoestrogen memiliki struktur yang mirip dengan 17ß estradiol, sehingga dapat berikatan dengan kedua reseptor estrogen yaitu Erɑ dan Erß. Fitoestrogen berpengaruh khusus terhadap prostat, ovarium, paru-paru, vesika urinaria, ginjal, uterus dan testis. Fitoestrogen kurang poten dibandingkan estrogen tetapi sirkulasi berulang dapat menyebabkan efek yang potensial (Permana, 2009; 11). Fitoestrogen dapat terserap dalam tubuh dan mengalami berbagai macam perubahan dengan cara dipecah menjadi komponen lain yang berbeda didalam tubuh tetapi masih mengandung khasiat yang sama seperti estrogen 17

11 endogen (Biben, 2012:1-2). 2). Dalam daun kenari juga terdapat salah satu bentuk fitoestrogen, yaitu flavonoid. Nama flavonoida diberikan pada suatu golongan besar senyawa yang berasal dari kelompok senyawa yang paling umum, yaitu senyawa flavon, suatu jembatan oksigen terdapat diantara cincin A dalam kedudukan orto, dan atom karbon benzil yang terletak sebelah cincin B. Senyawa heterosiklik ini, pada tingkat oksidasi yang berbeda terdapat dalam kebanyakan tumbuhan. Flavon adalah alah bentuk yang mempunyai cincin C dengan tingkat oksidasi paling rendah dan dianggap sebagai struktur induk dalam nomenklatur kelompok senyawa-senyawa ini (Tampubolon, 2011 ; 10). Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit sekunder yang paling banyak ak ditemukan di dalam jaringan tanaman. Flavonoid termasuk dalam golongan senyawa phenolik dengan struktur kimia C6-C3-C6. Kerangka flavonoid terdiri atas satu cincin aromatik A, satu cincin aromatik B dan cincin tengah berupa heterosiklik yang mengandung oksigen dan bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan dasar pembagian flavonoid ke dalam sub-su kelompoknya (Redha, 2010 : 197). Gambar 7. Struktur Molekul Flavonoid (Redha, 2010 : 197) 18

12 Senyawa golongan flavonoid terbukti memilki efek hipoglikemik melalui mekanisme penghambatan aktivitas ɑ-glukosidae. Beberapa jenis senyawa golongan flavonoid yang sudah ditemukan sebelumnya dan diketahui memiliki efek penghambatan aktivitas ɑ-glukosidae antara lain 3-O-galaktosida, 3-Oglukosida, 3-O-arabinopyranoside, 3-Oramnosida dari mirisetin dan kuersetin (Fitriyandi, 2012:67). 3. Tikus Putih a. Karakteristik Tikus Putih Tabel 1. Dekskripsi Tikus Putih Berat dewasa Rata-rata rentang hidup Umur siap kawin Siklus estrus Estrus Masa Kehamilan Umur sapih Jumlah anak Berat lahir normal Berat sapih Konsumsi makanan Konsumsi air Mata terbuka Telinga terbuka Jantan : , betina : gram 2-3 tahun Jantan : 8-10 minggu, betina : 8-10 minggu 2-5 hari 9-20 jam hari hari 9-11 ekor 5-6 gram gram gram/hari (dewasa) ml/hari (dewasa) hari hari 19

13 Muncul rambut Jumlah puting 8-9 hari 3 pasang di thorax dan 2 pasang di abdomen (National Laboratory Animal Center, 2016) Tikus merupakan hewan laboratorium yang banyak digunakan dalam penelitian dan percobaan antara lain untuk mempelajari pengaruh obatobatan, toksisitas, metabolisme, embriologi maupun dalam mempelajari tingkah laku. Tikus putih (Rattus norvegicus) berasal dari Asia Tengah dan penggunaannya telah menyebar luas di seluruh dunia. Terdapat dua sifat yang membedakan tikus dengan hewan-hewan percobaan lain yaitu tikus tidak dapat muntah karena struktur anatomi tikus tidak lazim pada bagian esofagus yang langsung bermuara ke lambung dan tikus tidak mempunyai empedu. Selain itu juga tikus memiliki keunggulan lain diantaranya, yaitu : 1) Siklus reproduksinya sangat singkat sehingga hasil uji cepat diketahui. 2) Masa aktivasi reproduksi sangat panjang. 3) Mudah diperlakukan. 4) Reaksi-reaksi didalam tubuhnya lebih sesuai dengan manusia sehingga hasilnya akan lebih cocok daripada menggunakan spesies lain. 5) Ukuran tikus seragam dan mudah ditangkarkan. Tikus lebih cepat dewasa, tidak memperlihatkan fertilisasi musiman dan lebih mudah berkembang biak. Berat badan pada umur 4 minggu dapat mencapai gram dan setelah dewasa gram. Tikus putih galur wistar mudah didapatkan. Tikus memiliki ciri-ciri : 20

14 1) Kepala, badan dan ekor terlihat jelas, tertutup rambut, tetapi ekornya bersisik dan kadang-kadang berambut. 2) Memilki sepasang daun telinga, mata dengan membran nitikans, bibir kecil dan lentur. Di sekat hidung terdapat misae. 3) Badan tikus berukuran kecil (± 600mm) : mamalia kecil. 4) Ukuran panjang badan tikus lebih besar dari pada mencit. 5) Tikus betina memiliki kelenjar mamae berjumlah 4-6 pasang. 6) Kaki depan lebih kecil dari pada kaki belakang. Kaki depan memiliki 4 jari, sedangkan kaki belakang 5 jari. 7) Anus terdapat dibawah ekor dan organ reproduksi terletak di sebelah anterior anus. Reaksi metabolisme yang terjadi dalam tubuh tikus hampir mirip dengan metabolisme pada manusia, hasil pengamatan tehadap kondisi tikus setelah diujikan dapat digunakan sebagai salah satu acuan dosis untuk manusia (Martin dan De blalse, 2001:333). Reaksi metabolisme tubuh tikus putih dan manusia tidak jauh berbeda sehingga hasil yang akan diperoleh pada penelitian dengan menggunakan tikus putih sebagai hewan uji akan lebih cocok digunakan oleh manusia. Selain beberapa hal diatas data biologis dan angka konservasi tikus putih sudah banyak dipubllikasikan sehingga dosis bahan uji dapat diterapkan pada manusia (Smith and Mangkoedjiwo, 1998 dalam Ika, 2012:19) 21

15 b. Taksonomi Tikus Putih (Rattus norvegicus, L.) Tikus termasuk familia Muridae dari kelompok mamalia (hewan menyusui). Para ahli zoologi sepakat untuk menggolongkannya kedalam ordo rodensia (hewan yang mengerat), untuk lebih lanjut, tikus dapat diklasifikasikan sebagai berikut : Kingdom Filum Kelas Familia Genus Spesies : Animalia : Chordata : Mammalia : Muridae : Rattus : Rattus norvegicus, L. (Priyambodo, 1995:55) Gambar 8. Tikus Putih Betina (Dokumentasi Pribadi, 2016) 22

16 c. Siklus Estrus Siklus reproduksi adalah proses berulang yang terjadi pada sistem reproduksi hewan betina dewasa yang meperlihatkan perubahan-perubahan orga reproduksi tertentu. Organ organ tersebut adalah organ-organ reproduksi seperti ovarium, oviduk, uterus dan vagina. Siklus reproduksi pada mamalia (primata) disebut dengan siklus menstruasi, sedangkan siklus reproduksi pada istilah yaitu satu non-primata disebut siklus estrus (Cambpell,dkk., 2004: 163) Siklus estruss adalah siklus reproduksi yang berlangsung pada hewan non primata betina dewasa seksual yang tidak hamil. Estrus dikenal dengan istilah- periode secara psikologis maupun fisiologis pada hewan betina yang bersedia menerima pejantan untuk kopulasi (Ketut, dkk., 2010: 56). Gambar 9. Mikrograf Epitel Vagina Tikus Putih Fase Estrus Perbesaran 40X (Dokumentasi Penelitian, 2016) 23

17 Siklus estrus mamalia dibedakan dalam 2 fase, yaitu fase folikular dan fase lueal. Fase folikular adalah pembentukan folikel sampai masak, sedangkan fase luteal adalah fase setelah ovulasi, kemuadian terbentuknya korpus luteum dan sampai mulainya siklus. Siklus estrus dibagi menjadi 4 fase, yaitu fase proestrus, estrus, melestrus dan diestrus. Setiap fase dalam siklus ditentukan berdasarkan bentuk sel epitel. Hal tersebut dapat dilihat dari tabel dibawah ini : Tabel 2. Fase estrus tikus putih (Putri, 2012: 10). No Fase Sel Epitel Bentuk Leukosit 1. Proestrus Sel intermediet Bulat,terdapat inti Ada dan terbentuk oval ditengah dan berada ditengah sel. 2. Estrus Sel superfisial Poligonal, pipih, Tidak ada sitoplasma luas, tidak berinti, pinggiran sel melipat. 3. Melestrus Sel prabasal Bulat inti relatif Ada besar dibandingkan sitoplasma. 4. Diestrus Sel prabasal - Ada Usapan vagina pada siklus estrus dapat dibedakan menjadi 4 fase yaitu : 1) Proestrus yang diamati dengan adanya sel epitel normal. 24

18 2) Estrus yang ditandai dengan sel epitel menanduk. 3) Diestrus ditandai dengan sel epitel normal dan leukosit 4) Melestrus yang ditandai dengan sel epitel normal, sel epitel menanduk dan leukosit (Sugiyanto, 1996:22) Manifestasi birahi ditimbulkan oleh hormon seks betina, yaitu estrogen yang dihasilkan oleh folikel-folikel ovarium. Pemberian estrogen secara eksogen pada hewan betina dapat menimbulkan birahi pada hampir setiap saat selama periode siklus estrus, bahkan pada hewan betina yang di ovariektomi. Banyak hewan ketika birahi menjadi sangat aktif. Babi dan sapi pada saat birahi berjalan empat atau lima kali leih banyak dibandingkan dengan sisa masa siklusnya. Aktivitas yang tinggi ini disebabkan oleh estrogen. Tikus yang berada di dalam kandang berlari secara spontan jauh lebih banyak ketika birahi dibandingkan selama diestrus (Nalbandov, 1990:141). d. Sistem Reproduksi Tikus Putih Fisiologi reproduksi pada tikus putih akan timbul apabila berat badannya mencapai kurang lebih setengah dari berat tubuh dewasa. Keadaan ini dicapai pada umur hari. Pembukaan vagina terjadi pada umur hari, birahi pertama muncul setelah 1-2 hari mulainya pembukaan vagina (Bennet dan Vickery dalam Nanda 2013:37). Tikus merupakan spesies poliestrus yang dalam satu tahun mengalami beberapa kali siklus birahi. Selama berlangsungnya siklus estrus terjadi perubahan berkala pada berbagai alat kelamin sehingga dibedakan dalam tahap proestrus, estrus, melestrus dan diestrus (Wildan, 194, 1984:29). 25

19 Periode estrus merupakan periode birahi dan kopulasi dimungkinkan hanya pada saat ini. Setiap siklusnya berlangsung selama 9-15 jam. Sel epitel menanduk banyak terdapat pada preparat ulas vagina. Periode melestrus berlangsung selama jam, pada umumnya tidak terjadi perkawinan. Banyak leukosit terlihat dalam ulas vagina bersama dengann sedikitnya sel menanduk. Periodee diestrus berlangsung selama jam. Pada masa tersebut terjadi regresi fungsional korpus luteum. Mukosa vagina tipis dan leukosit mendominasi hasil ulasan vagina. Apabila terjadi kebuntingan, siklus akan terganggu selama masa kebuntingan namun siklusnya tertunda lagi sampai akhir laktasi (Turner dan Bragna, 1988: ). 4. Ovarium a. Karakteristik Ovarium Ovarium Gambar 10. Ovarium Tikus Putih (Dokumentasi Penelitian, 2016) Ovarium adalah organ betina yang homolog dengan testes pada hewan jantan. Berbeda dengan testes, ovarium tertinggal dalam cavum abdominalis (Feradis, 2010: 35). Ovarium merupakan kelenjar ganda, sebagai kelenjar 26

20 eksorin dan kelenjar endokrin, yang mampu menghasilkan sel reta berupa ovum sekresi eksokrin dan menghasilkan hormon ovarium terutama estrogen dan progesteron (sekresi endokrin). Struktur ovarium sangat bervariasi tergantung pada spesies dan umur tahap siklus seksual. Ovarium merupakan bagian alat kelamin yang utama (Suhandoyo,1992:29). Pada semua mamalia terdapat sepasang ovarium. Ovarium tersebut terletak dekat ginjal, yaitu tempat ovarium pertama kali mengalami diferensiasi. Selama perkembangannya ovarium terletak pada tempat semula atau tetap tidak seperti halnya pada testis yang mengalami penurunan. Ukuran ovarium sangat tergantung pada umur dan status reproduksi betina. Pertumbuhan ovarium dan perkembangan komponen-komponen histologisnya dikontrol oleh hormon-hormon yang berasal dari kelenjar pituitari (Nalbandov, 1990: 21). Besar ovarium sangat tergantung pada umur dan status reproduksi hewan betina. Pada permukaan bebas, organ ini ditutupi oleh selapis sel kuboid yaitu epitel gonade (Brown dan Dellman, 1992:489) Jaringan dasar ovarium disebut stroma, mengandung serat jaringan ikat, otot polos dan pembuluh darah yang bergelung-gelung banyak sekali. Badan ovarium terbagi atas korteks yang langsung disebelah dalam tunika albuginea dan medula berada didalamnya (Wildan Yatim, 1990:70) Ovarium dikelilingi oleh Epithel germinal. Pada bagian bawah epithel terdapat tunika albugenia yang memiliki vaskularisasi sangat sedikit. Ovarium terdiri dari korteks dan medulla. Korteks merupakan bagian 27

21 fungsional ovarium yang terdiri dari jaringan konektif yang disebut stroma yang didalamanya terdapat folikel ovarium dalam berbagai tahap perkembangan, sedangkan medulla berada dibagian tengah ovarium, terdiri atas jaringan konektif yang kaya vaskularisasi, saraf, limfa, serta terdapat sel interestial (Rusmiatik, 2013: 12). Stroma korteks berupa jaringan ikat longgar. Tunika albuginea tebal dan merupakan lapisan yang langsung berada dibawah epitel permukaan. Tebal tunika albuginea dapat menipis dan bahkan menghilang karena terdesak oleh perkembangan folikel ovarium serta corpus luteum selama aktivitas ovarium meningkat (Dellman dan Brown, 1992: ) Dua komponen pada ovarium yang terpenting adalah folikel dan korpus luteum (Nalbandov, 1990: 22). Fisiologis ovarium sangat berkaitan dengan pembentukan dan perkembangan folikel (folikulogenesis). Folikulogenesis merupakan proses dimana sel-sel somatik serta menjadi matur dan mampu untuk di fertilisasi. Menurut sadler (2004), oosit primer yang bertahan hidup dikelilingi oleh sel epitel pipih yang disebut folikel primordial. Selama masa pubertas, setiap bulannya folikel primordial berkembang dan satu folikel diantaranya mengalami ovulasi setiap 28 hari. Hal ini terjadi selama tahun (Rusmiatik, 2013: 2012). b. Folikel Ovarium Ovum terbentuk karena adanya pembelahan meiosis yang sering disebut sebagai oogenesis. Sel telur berasal dari perkembangan epitel germinativum yang mengalami penggandaan yang hebat dan terdefersiansi menjadi oosit 28

22 primer (Mamet, 1978:23, Turner C.D dan J.T Bagnara 1988:461). Proses meiosis dihentikan pada stadium profase akhir, sedangkan folikel oosit itu sendiri ukurannya akan menjadi bertambah. Pada penyelesaian pembelahan meiosis pertama, selanjutnya oosit sekunder yang haploid akan mengalami pembelahan meiosis yang kedua, sel germinal akan menjadi suatu ovum yang masak setelah benda kutub kedua dilepaskan (Partowirohartono, S. 1987: 82). Gambar 11. Proses Folikulogenesis dan Ovulasi (Anwar, 2005:2) dalam ovarium Sel telur pada ovarium dikelilingi oleh sel folikel yang merupakan sel hasil deferesiansi ephitelium germinativum yang bersifat sebagai sel soma. Folikel ovarium mengalami tiga tahap perkembangan. Pada embrio betina pada pasca lahir juga sebagian besar folikel-folikelnya berupa folikel primer. Folikel-folikel tersebut membentuk lapisan tebal dibawah tunika albuginea dan memiliki ciri khusus, yaitu bahwa ovarium yang terdapat 29

23 didalamnya tidak memiliki membran vitelina. Ovarium dikelilingi oleh banyak lapisan granulosa pada folikel yang lebih masak (Dellman, H. D. dan Brown, E. M. 1992: ) Jumlah folikel yang tersedia sangat berbeda pada setiap perempuan. Oosit dan pertumbuhan folikel juga dipengaruhi oleh stress biologis seperti radikal bebas, kerusakan DNA dan menumpuknya bahan kimia yang dihasilkan oleh proses metabolisme tubuh. Folikel yang berada di korteks ovarium seluruhnya pada tahap folikel primordial sebelum mencapai masa pubertas. Oosit berhenti berkembang sampai berada pada stadium diploten. Oosit tersebut dikelilingi oleh selapis sel granulose pipih dan tidak memiliki suplai pembuluh darah. Folikel tidak dipengaruhi oleh gonadotropin. Tetapi diferensiasi dan proliferasinya dipicu oleh faktor lokal (Rusmiatik, 2013: 13). Morfologi dan ukuran folikel-folikel yang sedang tumbuh sangat berbeda-beda oleh karena folikel itu tergantung pada umurnya, dan folikel yang mulai tumbuh sampai ke folikel yang sangat besar hampir masak. Pada waktu oosit tumbuh, selapis sel folikular menjadi kuboid dan kemudian melalui pembelahan mitosis bertambah menjadi epitel berlapis. Oosit juga tumbuh menjadi lebih besar dan muncul lapisan non selular disekitar yang disebut zona pelusida (Sugiyanto, 1996:6-7). Stroma yang mengelilingi folikel membetuk teka folikuli. Lapisan tersebut selanjutnya berdiferensiansi menjadi teka interna dan teka eksterna. Batas antara kedua lapis teka ini tidak jelas, tetapi batas antara teka interna dengan lapisan 30

24 granulosa lebih jelas karena terdapat lamina basalis yang tebal. Pada waktu folikel tumbuh, terutama karena penambahan jumlah dan ukuran sel granulosa maka timbul penimbunan cairan. Beberapa ruangan yang mendukung cairan bersatu dan akhirnya membentuk satu rongga yang disebut antrum folikuli. Perkembangan folikel ovarium memiliki beberapa tahapan yang meliputi tahap pertama (pembentukan folikel primer), tahap kedua (pembentukan folikel sekunder), tahap ketiga (pembentukan folikel tersier) dan tahap keempat (pembentukan folikel de Graff) (Partodiharjdo, 1982: 45). Berikut ini merupakan tahap perkembangan folikel ovarium, yaitu : 1) Folikel Primer Folikel pada masa embrio berupa folikel primer. Folikel tersebut membentuk lapisan tebal dibagian bawah tunka albuginea dan berciri khusus yaitu bahwa ovarium yang terdapat didalamnya tidak empunyai membran vitelline (Nalbandov, 1990:22) Folikel primer (folikel unilaminar) terdiri dari oosit primer, berdiameter sekitar 20µm pada kebanyakan jenis hewan, dikelilingi oleh epitel pipih atau kubus selapis yang disebut sel-sel folikel. Folikel primer paling muda (awal) dikelilingi oleh epitel pipih selapis yang disebut dengan folikel primordia. Pada stadium lebih lanjut, epitel berubah menjadi kubus sebaris. Folikel primer, berdiameter sekitar 40µm, yang 31

25 dikelilingi membran basal dan terletak di bagian luar korteks dibawah epitel permukaan (Dellman and Brown, 1992: 491) Folikel primer berasal dari satu epitel benih yang membelah diri. Sel tersebut nantinya menjadi ovum dengan posisi berada ditengah dan dikelilingi oleh sel-sel hasil pembelahan sebelumya. Sel-sel tersebut merupakan lapisan sel yang isebut membran granulosa. Folikel primer terletak dekat atau menempel pada permukaan ovarium dan ovanya tidak terbungkus oleh membran viteline (Partodiharjdo, 1982: 45-46). 2) Folikel Sekunder Ovarium pada folikel sekunder dikelilingi oleh banyak lapisan selsel folikel, kemudian akan membentuk sel granulose pada folikel yang telah masak. Bila sebuah ovum sudah dilengkapi dengan sebuah membran (zona pelucida) dan bila folikel sudah tumbuh, maka disebut folikel sekunder (Nalbandov, 1990:22) Folikel sekunder (folikel multilaminar atau folikel tumbuh) terdiri dari epitel banyak lapis dari sel-sel granulosa yang berbentuk polihedral dan mengitari oosit primer. Folikel sekunder ditandai oleh berkembangnya 3 sampai 5 µm lapis glikoprotein tebal disebut zona pellucida, mengitari membran plasma oosit. Zona pellucida dihasilkan oleh sel-sel granulosa yang langsung mengitari oosit dan sebagian oosit itu sendiri (Dellman and Brown, 1992: ). Folikel sekunder kearah pusat stroma cortex sewaktu sel-sel folikuler memperbanyak diri membentuk suatu lapisan multiseluler 32

26 disekeliling vittelus. Pada stadium ini terbentuk suatu lapisan membran, zona pellucida, antara oogonium dan sel-sel folikuler (Feradis,2010: 37). Pada perkembangan akhir folikel sekunder terjadi pemisahan teka folikuli menjadi teka interna dan teka eksterna. Folikel sekunder memiliki ukuran yang lebih besar ari folikel primer, hal ini dikarenakan oleh jumlah sel-sel granulosanya yang lebih banyak dari sebelumnya. Pada tahap ini, folikel berbentuk oval dan sudah bergerak menjauhi korteks menuju medulla ovarium. Letak folikel sekunder agak jauh dari permukaan ovarium (Partodiharjo, 1982: 46) 3) Folikel Tersier Foliker tersier merupakan tahap perkembangan folikel yang ketiga. Folikel tersier ditandai dengan perkembangan rongga sentral yang disebut antrum. Antrum terbentuk apabila cairan pengisi celah antara selsel granulosa pada folikel sekunder bergabung untuk membentuk satu rongga besar yang Folikel tersier yaitu tahapan dari folikel sekunder menjadi folikel tersier. Folikel tersier ditandai dengan ukuran lebih besar dari folikel sekunder maupun folikel primer dan letaknya lebih jauh dari korteks. Selain itu folikel tersier ditandai dengan terbentuknya atrum menyimpan cairan folikel (Dellman and Brown, 1992: 492). Folikel tersier merupakan folikel sekunder yang telah tumbuh lebih dewasa, dimana jumlah sl-sel granulosa lebih banyak dari fase sebelumnya sehingga ukuran folikel menjadi lebih besar dari 33

27 sebelumnya. Letak folikel tersier lebih jauh dibanding letak folikel sekuder dari korteks ovarium (Partodiharjo, 1982:46). 4) Folikel de Graff Folikel de Graff merupakan tahapan keempat pembentukan folikel de Graaf. Diameter folikel de Graaf berbeda-beda menurut jenis hewan. Karena ukurannya yang selalu bertambah, folikel de Graff. Karena ukuran yang selalu bertambah, folikel de Graff yang matang menonjol keluar melalui korteks ke permukaan ovarium. Pertumbuhan meliputi dua lapis sel stroma korteks yang mengelilingi sel-sel folikuler (Feradis, 2010:37-38). Folikel de Graff merupakan folikel yang sudah masak. Folikel de Graff menghasilkan estrogen tempat pembuatan hormon ini teka interna (Syaifuddin,2009:336). Menurut Dellman and Brown (1992:496) tahapan folikel de Graff merupakan tahapan beberapa hari sebelum estrus. Dalam folikel de Graff ovum terbungkus oleh masa sel yang disebut dengan kumulus oosporus. Telur bersama dengan masa sel yang membungkus menonjol ke dalam ruang antrum yang penuh dengan cairan folikel semakin menepi menjelang ovulasi. Perkembangan folikel ovarium akan mengalami proses kematian sel (apoptosis) dalam hal ini menyebabkan folikel menjadi atresia. Apoptosis merupakan kematian sel yang terprogram secara genetik. Apoptosis merupakan proses penting dalam pengaturan homeostasis 34

28 normal untuk menghasilkan keseimbangan sel yang ditandai oleh kondensasi kromatin, fragmentasi sel dan fagositosis sel (Fitriyah, 2009: 34) 5) Corpus Luteum Corpus luteum adalah masa jaringan kuning didalam ovarium yang dibentuk oleh sebuah folikel yang telah masak dan mengeluarkan ovumnya. Dalam uteri, corpus luteum akan menghasilkan hormon progesteron yang berguna untuk mengatur siklus menstruasi, mengembangkan jaringan glandul mamae, menyiapkan uteri pada waktu kelahiran dan melindungi dari kanker endometrium. Corpus luteum akan berhenti memproduksi progesteron pada saat ovum tidak dibuahi dan berkembang menjadi corpus albican. Pada saat ini, lapisan uterus akan meluruh keluar dari uterus. c. Fungsi Ovarium Ovarium memiliki fungsi sebagai kelenjar eksokrin dan endokrin selain sebagai penghasil oosit. Ukuran ovarium secara umum tergantung pada umur, spesies dan tahap siklus seksual (Dellman and Brown, 1992: 489). Kelenjar eksokrin adalah ovarium mampu menghasilkan ovum dan sebagai kelenjar endokrin adalah ovarium mampu menghasilkan hormon estrogen dan progesteron. Estrogen terutama dihasilkan oleh sel-sel granulosa yang mengubah androgen, yang dihasilkan oleh sel-sel teka interna menjadi estrogen. Progesteron terutama dihasilkan oleh sel-sel lutein besar selama melestrus, diestrus dan kebuntingan, disamping itu dihasilkan 35

29 pula oleh placenta. Pertumbuhan dan pemasakan folikel ovarium dan sekresi estrogen dikendalikan oleh hormon gonadotropin hipofise yaitu FSH (folicle stimulsting hormone) dan LH (Luteinizing hormone). Sekresi estrogen oleh ovarium memicu pelepasan LH yang digunakan untuk ovulasi pada masa birahi (Dellman and Brown, 1992:489) Pada beberapa spesies, seperti tikus dan mencit, hormon luteotropik (LTH) diperlukan untuk mempertahankan korpus luteum agar terus mensekresikan progesteron. Surutnya (regresi) korpus luteum dapat diikuti dengan penarikan LH, LTH atau keduanya (Dellman, H. D. dan Brown, E. M. 1992:506). Saat kebuntingan, korpus luteum tetap dipertahankan, karena korpus luteum pada saat kebuntingan berbeda dengan korpus luteum periode lain pada berbagai spesies. Pada stadium lanjut kebuntingan pada kebanyakan spesies, korpus luteum tidak penting, sebab plasenta mampu menghasilkan hormon progesteron yang diperlukan untuk memertahankan kebuntingan secara berhasil. Hormon steroid ovarium dan plasenta mempengaruhi sekresi hormon gonadotropin dari hipofise memalui efek umpan balik pada hipotalamus yang terutama mengatur pelepasan hormon pelepas hipotalamik gonadotropin. Organ diensefalon lain, seperti epifise (pinal gland), juga mempengaruhi fungsi gonadotropin (Dellman, H. D. dan Brown, E. M. 1992: ). 36

30 d. Peran Hormon Reproduksi Betina Kegiatan fisiologis dari ovarium tidak terlepas dari peranan hormon, termasuk aktifitas folikulogenesis. Ovarium menghasilkan gamet dan merangsang sekresi estrogen yang mana membutuhkan LH dan FSH merupakan hormon yang dilepas dari hipofisis anterior. Pelepasan LH dan FSH selanjutnya dikendalikan oleh hipotalamus (Neal, 2005:74) 1. Hormon Estrogen Estrogen sebagian besar dibentuk oleh folikel yang berkembang. Estrogen merangsang tumbuh kembangnya alat reproduksi wanita dan kelenjar mammae. Estrogen disintesis dari kolesterol terutaa diovarium, dan di kelenjar lain misalnya korteks adrenal, testiss dan plasenta. Kemudian melalui beberapa reaksi enzimatik dalam biosintesis steroid terbentuklah hormon steroid. Estrogen dibentuk dari aldostenedion maupun testoteron yang mempunyai 4 cincin siklik dengann 19 atom C. Gambar 12. Struktur kimia estrogen (Guyton, 1995) 37

31 Hormon estrogen berperan sebagai hormon pertumbuhan folikel ovarium dan meningkatkan pertumbuhan tuba uterus, jumlah otot uterus, kadar protein kontraktil uterus. Estrogen juga dapat mempengaruhi organ endokrin dengan menurunkan sekresi LH dan meningkatkan sekresi LH (Syaifuddin, 2009: 338) Esrogen terutama estradiol, sebagaian besar dibentuk oleh folikel yang berkembang. Estrogen merangsang tumbuh kembang alat reproduksi wanita dan kelenjar mammae. Estrogen disintesis dari kolesterol terutama ovarium dan dikelenjar lain misalnya korteks adrenal, testis dan plasenta. Pada wanita estrogen secara langsung mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan organ kelamin primer yaitu vagina, servik, uterus dan tuba falopi (Suherman, 1995:11). 2. Hormon Progesteron Menurut Turner (1998). Progesteron memiliki aksi yang bervariasi terhadap organ reproduksi betina, dibawah kondisi fisiologis sering bekerja secara sinergik dengan estrogen. Progesteron terdapat pada ovarium, testis, korteks adrenal dan plasenta. Hormon progesteron sebagian besar dihasilkan oleh korpus luteum dan plasenta. Hormon progesteron bertanggung jawab atas perubahan endometrium dan perubahan siklik dalam serviks serta vagina. Progesteron berpengaruh anti estrogenik pada sel-sel myometrium terhadap oksitosin dan aktivitas listrik spontan (Syaifuddin,2009:338). 38

32 Progesteron merupakan substansi intermedia dari sintesa androgen, estrogen dan kortisol. Dalam cairan folikel diketahui banyak mengandung estrogen dan sedikit progesteron merupakan keterangan bahwa pembentukan progesteron telah dimulai sebelum folikel pecah dan korpus luteum dibentuk (Fitriyah, 2009: 40). 3. Folicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH) Folicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone(LH) keduanya merupakan glikoprotein kecil dengan berat molekul kira-kira baik FSH maupun LH merangsang sel target ovarium dengan cara kombinasi dengan reseptor FSH dan LH yang sangat spesifik pada membran sel. Reseptor kemudian diaktifkan selanjutnya akan meningkatkan laju kecepatan sekresi dari sel-sel sekaligus pertumbuhan dan proliferasi sel. Hampir semua efek perangsangan ini dihasilkan dari pengaktifan sistem second messenger siklus adenosin monofosfat dalam sitoplasma sel, yang selanjutnya menyebabkan pembentukan protein kinase dan kemudian berbagai fosforilasi dari enzim-enzim kunci dan membangkitkan banyak fungsi intrseluler (Guyto dan Hall, 2007: 1285) FSH memiliki fungsi utama untuk merangsang pertumbuhan folikel pada ovarium, namun tidak menyebabkan ovulasi. Sel-sel basophil membentuk FSH dari lobus anterior hipofisa, pembentukan FSH akan berkurang pada pembentukan estrogen dalam jumlah yang cukup, suatu keadaan yang dapat dikatakan sebagai umpan balik negatif (Partodiharjdo, 1992: 107). 39

33 LH berperan merangsang sel-sel teka pada folikel yang masak untuk memproduksi estrogen, selanjutnya oleh karena kadar estrogen yang tinggi produksi LH menjadi semakin tinggi dan ketinggian kadar LH menyebabkan terjadinya ovulasi (Partodiharjdo, 1992: 107). B. Kerangka Berfikir Perkembangan ovum dan folikel ovarium dipengaruhi oleh produksi Follicle Stimulating Hormone (FSH). Produksi FSH pada pituitari menyebabkan folikel menjadi berongga dan menghasilkan hormon estrogen. Sekresi estrogen ke dalam folikel menyebabkan sel-sel granulosa membentuk reseptor FSH semakin banyak sehinga menyebabkan suatu efek umpan balik positif terhadap FSH yang disekresikan oleh kelenjar hipofisis anterior. FSH dari hipofisis dan estrogen bergabung untuk memacu reseptor LH untuk dapat merangsang sel granulosa sehingga LH dapat merangsang sel-sel granulosa sebagai tambahan terhadap rangsangan oleh FSH dan membentuk peningkatan sekresi folikular yang cepat. Peningkatan jumlah estrogen dan folikel serta peningkatan LH dari kelenjar hipofisis anterior bekerja sama untuk menyebabkan proliferasi sel-sel teka folikular dan juga mningkatkan sekresi folikular (Guyton and Hall, 1286). Untuk meningkatkan kadar estrogen dapat dilakukan dengan pemberian fitoestrogen, fitoestrogen merupakan dekomposisi alami yang ditemukan pada tumbuhan yang memiliki banyak kesamaan dengan estradiol, bentuk alami estrogen yang paling poten. Penggunaan fitoestrogen memiliki efek keamanan yang lebih baik dibandingkan dengan estrogen sintesis atau 40

34 obat-obat hormonal pengganti (hormonal replacement therapy/hrt). Oleh karena itu penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun kenari terhadap perkembangan folikel ovarium tikus putih. Pada tanaman dikenal beberapa kelompok fitoestrogen yaitu : isoflavon, lignan, kumestan, triterpen, glikosida, dan senyawa lain yang berefek estrogenik seperti flavones, chalconcs, diterpenoids, triterpenoids, coumarins dan acyclics (Ika,2013:34). Pada kelompok isoflavon merupakan senyawa yang banyak dimanfaatkan, dikarenakan kandungan fitoestrogen yang cukup tinggi. Senyawa isoflavon merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak disintesa oleh tanaman. Salah satu tanaman yang mengandung fitoestrogen adalah tanaman kenari (Canarium indicum, L.). Daun kenari mengandung : senyawa flavonoid, polifenol, tanin dan saponin tetapi tidak mengandung senyawa alkaloid dan steroid (Lukmanto, 2015: 49). Pemberian ekstrak daun kenari tersebut diduga dapat meningkatkan perkembangan folikel karena sifat estrogeniknya yang dimiliki oleh daun kenari tersebut. Fitoestrogen berperan dalam menjaga keseimbangan estrogen endogen dalam jumlah yang sedikit. Fitoestrogen memiliki dua gugus hidroksil (OH) yang berjarak 11,0-11,5. Struktur kimia fitoestrogen memiliki kemiripan dengan struktur kimia estrogen pada mammalia. Fitoestrogen merupakan kompetitor aktif untuk reseptor estrogen terutama reseptor β (Alif, Trisnani; 2015:2). Mekanisme kerja fitoestrogen dalam tubuh khususnya dalam jaringan adalah dengan berikatan pada reseptor estrogen dan mencegah pengikatan oleh estrogen alami, namun fitoestrogen memiliki potensi yang jauh lebih kecil 41

35 (0,01-0,001) dari kekuatan estrogen alami (Muflichatun, 2008;55). Mekanisme tersebut juga terjadi dalam penghambatan fitoestrogen terhadap siklus sel. Fitoestrogen merupakan inhibitor bagi aromatase yang berperan dalam pembentukan estradiol (Alif, Trisnani;2015:2). Daun Kenari Fitoestrogen Jenis : Flavonoid Estrogen Organ Reproduksi Betina Ovarium Berpengaruh terhadap perkembangan folikel ovarium Gambar 13. Bagan Kerangka Berpikir Pengaruh Fitoestrogen terhadap Ovarium C. Hipotesis Pemberian ekstrak daun kenari (Canarium indicum, L.) mempengaruhi perkembangan folikel ovarium tikus putih betina (Rattus norvegicus, L.). 42