HASIL Isolsi n Ientifiksi Cenwn Cenwn yng erhsil iisolsi ri lrv A. egypti instr III n IV yng ersl ri lpngn erjumlh 9 isolt. Kesemiln isolt terseut ilh Trihoerm sp., miseli sterili, 3 isolt Muor remosus, Emeriell niulns, Aspergillus sp., Aspergillus niger, n Peniillium sp. (Tel 1). Tel 1 Cenwn yng erhsil iisolsi ri lrv A. egypti p instr III n IV ri tig loksi i kot Bogor Koe Nomor isolt Isolt Cr/L 3 Isolt 1 Trihoerm sp. Cr/L 3 Isolt 2 Miseli sterili Cr/L 4 Isolt 3 Muor remosus Bs/L 3 Isolt 4 Muor remosus Bs/L 4 Isolt 5 Muor remosus Mt/L 3 Isolt 6 Emeriell niulns Mt/L 4 Isolt 7 Aspergillus sp. Mt/L 4 Isolt 8 Aspergillus niger Mt/L 4 Isolt 9 Peniillium sp. Keterngn: L 3 = instr III L 4 = instr IV Cr = Curug Bs = Brnngsing Mt = Menteng Isolt 1 (Cr/L 3 ) ilh Trihoerm sp. engn iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni hiju, tekstur seperti ulu; konii erwrn hiju tu, hilin; fili tersusun erkelompok; koniiofor hilin, n erng nyk (Gmr 2). um Gmr 2 Struktur mikroskopis Trihoerm sp.: () konii () fili () koniiofor Peresrn X. Isolt 2 (CR-1) ilh miseli sterili engn iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni putih engn tekstur hlus seperti kps; meium menji hitm p gin whny pil koloni suh memenuhi seluruh permukn gr yitu 7 hri setelh inokulsi (Gmr 3). Gmr 3 Struktur mikroskopis miseli sterili: () hif. Peesrn X. Tig isolt yitu isolt 3, 4 n 5 ilh Muor remosus. Koloni ketig isolt terseut p mei ADK memiliki iri-iri: wrn koloni putih, n tekstur hlus seperti kps; hif septt; kolumel terpt i ujung hif; n sporngiospor erentuk ult (Gmr 4). 5 um Gmr 4 Struktur mikroskopis Muor remosus: () spor () kolumel () sporngiofor. Peresrn X. Isolt 6 ilh Emeriell niulns engn iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni hiju gelp engn tekstur seperti eluru tu kps; konii hiju tersusun kolumner; iserit, fili memenuhi setengh permukn vesikel; vesikel hemisfer; koniiofor hlus, erlekuk-lekuk, n erwrn oklt. Kleistotesium erwrn merh keungun yng mempunyi skus erisi 4-8 skospor. Cenwn skomiset ini merupkn teleomorf ri Aspergillus niulns (Gmr 5). um Gmr 5 Struktur mikroskopis A. niulns (nmorf) : () konii () fili () vesikel () koniiofor (e) skus. Peresrn X. e
Isolt 7 ilh Aspergillus sp. Cenwn ini memiliki iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni hiju-kuning; tekstur seperti ulu; konii hiju; susunn konii rit; uniserit, fili hmpir memenuhi seluruh permukn vesikel; vesikel ult seperti ol; koniiofor ksr, erining tel, n erwrn hiju gelp (Gmr 6). um Isolt 8 ilh Aspergillus niger engn iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni hitm; tekstur koloni seperti ulu; konii hitm, susunn konii rit; iserit, fili memenuhi seluruh permukn vesikel; vesikel ult esr; koniiofor hlus, erining tel, erwrn oklt (Gmr 7). um Gmr 6 Struktur mikroskopis Aspergillus sp.: () konii () fili () vesikel () koniiofor. Peresrn X. Gmr 7 Struktur mikroskopis A. niger: () konii () fili () vesikel () koniiofor. Peresrn X. Isolt 9 ilh Peniillium sp. Cenwn ini memiliki iri-iri morfologi yng terentuk p mei ADK segi erikut: wrn koloni hiju, teksturny seperti ulu; konii hiju, rit; jrk ntr fili ukup rpt, erentuk seperti otol engn koniium i ujung-ujungny; koniofor esekt (Gmr 8). 5 um Gmr 8 Struktur mikroskopis Peniillium sp.: () konii () fili () perngn () koniiofor. Peresrn X. Pemelihrn Nymuk untuk Prouksi Telur n Uji Efiksi Pemelihn nymuk ilkukn muli ri stium telur, lrv, pup, hingg nymuk ews. Jumlh telur yng iprouksi senyk ±4. utir. Telur-telur yng itetskn ersift es ri infeksi ptogen. Lrv instr III n IV yng terentuk ri telur yng es ptogen ipish-pishkn untuk uji efiksi isolt enwn. Uji Efiksi 1 Skl lortorium Dri uji efiksi p skl lortorium menunjukkn hw seluruh isolt enwn yng erhsil iisolsi mempunyi kemmpun memunuh lrv, ik lrv instr III mupun lrv instr IV lm wktu 12 jm setelh inokulsi. Kemtin lrv erning lurus engn konsentrsi enwn. Ptogenits setip isolt enwn menunjukkn hsil yng ere nyt ersrkn sttistik p trf uji 5% (Tel 2). Semkin tinggi konsentrsi enwn yng ierikn mk kn semkin nyk pul lrv yng mti (Tel 2). Isolt enwn yng igunkn untuk uji efiksi p skl lortorium memunuh lrv instr III leih nyk iningkn engn lrv instr IV. Dri semiln isolt yng iuji, ptogenits enwn pt ikelompokkn kelm tig kelompok. Kelompok I yitu A. niger, kelompok II yitu Trihoerm sp., Emeriell niulns, Aspergillus sp., Peniillium sp., n kelompok III yitu 3 isolt Muor remosus, n miseli sterili.
Tel 2 Persentse rt-rt kemtin lrv A. egypti instr III n IV kit infeksi 9 isolt enwn entomoptogen selm 12 jm setelh inokulsi Isolt Lrv instr n konsentrsi enwn III IV 1. mm 3 351.7 mm 3 2.4 mm 3 1. mm 3 351.7 mm 3 2.4 mm 3 Trihoerm sp.. 11.67e 16.67 8.33. 13.33 Miseli sterili 8.33.e 13.3e 6.67 8.33e.e Muor remosus 6.67 8.33ef 11.67e. 6.67e.e Muor remosus 3.33 3.33f 5.e. 1.67e 3.33e Muor remosus 5. 6.67ef.e. 5.e 8.33e Emeriell niulns 11.67 13.33 33.33 8.33 11.67 28.33 Aspergillus sp. 16.67 21.67 28.33 11.67 16.67 21.67 Aspergillus niger 95. 88.33 Peniillium sp. 21.67 45.. 16.67 38.33 55. Keterngn : Angk-ngk yng iikuti huruf yng sm tik ere nyt p trf uji 5% P konsentrsi enwn terenh yitu 1. mm 2 engn wktu inkusi 12 jm menunjukkn hw kelompok I yitu A. niger mmpu memunuh lrv instr III n IV pling tinggi engn nili msingmsing seesr 95% n 88.33%. Kelompok II yitu Peniillium sp. memiliki y unuh reltif renh terhp lrv instr III n IV engn nili msing-msing seesr 21.67% n 16.67%. Isolt yng memiliki y unuh pling renh p keu instr yng iuji yitu, Muor remosus isolt 4 yng termsuk ke lm kelompok III. Isolt terseut hny memunuh 3.33% lrv instr III n tik mmpu memunuh lrv instr IV (%) (Tel 2). P konsentrsi enwn 351.7 mm 2 engn wktu inkusi 12 jm menunjukkn pol yng sm engn konsentrsi 1. mm 2. Kelompok I, A. niger mmpu memunuh % lrv instr III n IV. Kelompok II, Peniillium sp. mmpu memunuh 45% lrv instr III n 38.33% lrv instr IV. Kelompok III, Muor remosus isolt 4 msing-msing mmpu memunuh lrv instr III n IV yitu seesr 3.33% n 1.67% (Tel 2). P konsentrsi enwn tertinggi yitu 2.4 mm 2 engn wktu inkusi 12 jm jug menunjukkn pol yng sm engn perlkun konsentrsi 1. mm 2. Kelompok I, A. niger mmpu memunuh % lrv instr III n IV. Kelompok II, Peniillium sp. mmpu memunuh % lrv instr III n 55% lrv instr IV. Kelompok III, Muor remosus isolt 4 msing-msing mmpu memunuh lrv instr III n IV yitu seesr 5% n 3.33% (Tel 2). 2 Skl semi lpng 2 Perlkun ergi mm inokulum Dri pengmtn kemtin lrv yng ilkukn smpi 15 hri setelh inokulsi menunjukkn hw ketig inokulum ri msing-msing isolt yitu isolt yng iuji n isolt pemning menunjukkn hsil yng ervrisi. Semu perlkun p ergi mm inokulum yitu inokulum spor, miseli, n mpurn pt memunuh lrv. Inokulum mpurn memiliki kemmpun memunuh lrv instr III pling tinggi. Sengkn inokulum spor mempunyi y unuh pling renh p keu isolt yng iuji (Gmr 9 n ). Kemmpun memunuh setip entuk inokulum enwn menunjukkn hsil yng ere nyt ersrkn sttistik p trf uji 5% (Gmr 9 n ). P inkusi 24 jm setelh inokulsi, ketig inokulum A. niger isolt 8 mmpu memunuh lrv instr III. Kemtin lrv yng tertinggi n terept terji p inokulum mpurn. P inokulum mpurn kemtin lrv terji senyk 95%. Inokulum miseli memunuh 64.67% sengkn inokulum spor hny memunuh 6% (Gmr 9). Hl yng sm jug terji p isolt pemning yitu A. niger isolt 17. Inokulum mpurn A. niger isolt 17 memunuh lrv 81%. Inokulum miseli memunuh.7% sengkn inokulum spor tik mmpu memunuh lrv instr III (Gmr ). P inkusi leih ri 24 jm setelh inokulsi, ketig inokulum A. niger isolt 8 menunjukkn kemtin lrv instr III yng semkin meningkt hingg menpi 77.33%- % p hri ke-4 setelh inokulsi (Gmr 9). Hl yng sm jug terji p A. niger isolt 17. Kemtin lrv instr III meningkt
1 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 Persentse kem tin ( % ) Wktu (hri ke-) Spor (8 spor/l) Miselium (47,5 gr) Cmpurn (8.68 m3) Kontrol ir Kontrol gr 1 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 Persentse kemtin ( % ) yitu seesr 2.67%-% p hri ke-4 setelh inokulsi (Gmr ). P perlkun kontrol yng menggunkn mei gr, tik terji kemtin lrv smpi p hri ke-5 setelh inokulsi. P perlkun kontrol ir tik terji kemtin lrv smpi p hri ke-3 setelh inokulsi. Nmun p hri ke-4 setelh inokulsi, p kontrol ir terpt kemtin seesr 1.33% (Gmr 9 n ). Oleh kren itu t kemtin p perlkun inokulum spor n miseli p gmr 9 n telh ikurngi engn jumlh kemtin lrv p kontrol. Gmr 9 Persentse kemtin lrv A. egypti instr III kit infeksi A. niger isolt 8 p 3 jenis inokulum ere. Wktu (hri ke-) Spor (8 spor/l) Miselium (47,5 gr) Cmpurn (8.68 m3) Kontrol ir Kontrol gr Gmr Persentse kemtin lrv A. egypti instr III kit infeksi A. niger isolt 17 p 3 jenis inokulum ere. 2 Perlkun ergi mm konsentrsi n mei ir Bersrkn pengmtn kemtin lrv yng ilkukn smpi 15 hri setelh inokulsi menunjukkn hw kemtin lrv terji p keu mei ir yitu mei ir krn steril mupun mei ir krn tik steril yng igunkn lm penelitin ini. P perlkun ergi konsentrsi yng igunkn menunjukkn hw semkin tinggi konsentrsi enwn yng ierikn mk kn semkin tinggi pul lrv yng mti (Gmr 11 n 12). Kemmpun memunuh setip entuk inokulum enwn p ergi mm konsentrsi menunjukkn hsil yng ere nyt ersrkn sttistik p trf uji 5% (Gmr 11 n 12). Tel 3 Persentse rt-rt kemtin lrv A. egypti instr III p konsentrsi n mei ir yng ere kit infeksi A. niger isolt 8 selm 24 jm setelh inokulsi Inokulum Mei ir steril nonsteril Spor ( 6 spor/l).. Spor ( 8 spor/l) 6.67 6. Spor ( spor/l) 72. 78.67 Spor ( 12 spor/l) 85.33 96. Cmpurn (127.17 m 3 ) 63.33 75.33 Cmpurn (254.34 m 3 ).67 83.33 Cmpurn (381.51 m 3 ) 87.33.67 Cmpurn (8.68 m 3 ) 94. 94.67 Kontrol.. Keterngn : Angk-ngk yng iikuti huruf yng sm tik ere nyt p trf uji 5% Dt uji efiksi p skl semi lpng p inkusi 24 jm setelh inokulsi menunjukkn hw kemtin lrv terenh yng terpt p mei ir krn steril n tik steril ilh msing-msing 63% n 75%. Dt terseut iperoleh p konsentrsi inokulum mpurn terenh yitu 127.17 m 3. Sengkn kemtin lrv tertinggi ijumpi p konsentrsi inokulum mpurn tertinggi (8.68 m 3 ) ik p mei ir krn steril mupun tik steril yitu seesr 94%. Inokulum mpurn engn konsentrsi 254.34 m 3 mmpu memunuh lrv instr III leih ri % ik lm mei ir krn steril mupun tik steril. P inokulum spor engn konsentrsi terenh yitu 6 spor/l ik p mei ir krn steril mupun tik steril ternyt tik memunuh lrv instr III. Sengkn kemtin lrv tertinggi p mei ir krn steril seesr 85.33% n p mei ir krn tik steril seesr 96% p konsentrsi inokulum spor tertinggi yitu 12 spor/l (Tel 3).
Setelh 24 jm inkusi, p mei ir krn steril kemtin lrv menpi miniml 76% n p mei ir krn tik steril menpi 89.33% p hri ke-5 setelh inokulsi. Keuli p perlkun inokulum spor engn konsentrsi 6 spor/l, yng hny memunuh lrv seesr 1.33% p mei ir krn steril mupun tik steril. P konsentrsi 8 spor/l n spor/l, kemtin lrv seesr 76%-% p mei ir krn steril n tik steril p hri ke-5 setelh inokulsi. P perlkun kontrol ir mupun kontrol gr, tik terji kemtin lrv smpi p hri ke-5 setelh inokulsi ik p mei ir krn steril mupun tik steril (Gmr 11 n 12). Persentse kem tin ( % ) 1 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 spor (6 spor/l) spor ( spor/l) Cmpurn (127.17 m3) Cmpurn (381.51 m3) Kontrol ir Wktu (hri ke-) spor (8 spor/l) spor (12 spor/l) Cmpurn (254.34 m3) Cmpurn (8.68 m3) Kontrol gr 1 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 P e r sen tse k e m ti n (% ) Gmr 11 Persentse kemtin lrv A. egypti instr III kit infeksi A. niger isolt 8 p mei ir krn steril. Wktu (hri ke-) spor (6 spor/l) spor ( spor/l) Cmpurn (127.17 m3) Cmpurn (381.51 m3) Kontrol ir spor (8 spor/l) spor (12 spor/l) Cmpurn (254.34 m3) Cmpurn (8.68 m3) Kontrol gr Gmr 12 Persentse kemtin lrv A. egypti instr III kit infeksi A. niger isolt 8 p mei ir krn tik steril. Postult Koh Cenwn yng tumuh p lrv yng mti p seluruh uji efiksi menunjukkn iriiri yng sm engn isolt yng seelumny iinokulsi ke lm populsi lrv. Hl ini menunjukkn hw kemtin lrv isekn oleh enwn yng iinokulsikn ke lm populsi lrv. Kolonissi Cenwn Entomoptogen p Lrv Nymuk A. egypti Cenwn entomoptogen yng igunkn untuk mempeljri proses kolonissi p lrv A. egypti instr III ilh A. niger isolt 8. Proses kolonissi enwn imuli ri ny kontk ntr hif tu konii engn lrv mellui lung spirkel/perispirkel p kutikul (Gmr 13). Dri proses penempeln konii, selnjutny terentuk hif kemh yng melkukn penetrsi p kutikul lrv n mementuk presorium i lm tuuh lrv A. egypti. Selin itu, terpt spor lm jumlh ukup tinggi p gin lm tuuh lrv yng iug ersl ri proses penelnn spor (Gmr 14). tuuh lrv tuuh lrv tuuh lrv Gmr 13 Kolonissi A. niger ke lm tuuh lrv A. egypti instr III p pengmtn 12-48 jm: () spor erkemh () hif eksternl () presorium () hif internl. Peresrn x.
tuuh lrv k Gmr 14 Konii (k) A. niger yng terkumpul p gin slurn penernn lrv A. egypti instr III p pengmtn 48 jm. Peresrn x. PEMBAHASAN Isolt enwn yng iperoleh ri tig loksi i kot Bogor p penelitin ini leih seikit il iningkn engn isolt yng erhsil iisolsi oleh Ntli () ri loksi yng sm. Ntli () erhsil mengisolsi 24 isolt enwn. Hl ini mungkin isekn kren sumer lrv yng igunkn p penelitin ini leih seikit yitu hny 2 mm instr (instr III n IV) sengkn Ntli () mengisolsi enwn entomoptogen ri 4 mm instr lrv yitu instr I, II, III, n IV. Menurut Ppp n Drvs () seluruh stium lm siklus hiup nymuk pt iserng oleh enwn entomoptogen. Lrv merupkn stium yng pling rentn terinfeksi enwn iningkn engn stium linny. Oleh se itu lm penelitin ini igunkn nymuk p stium lrv. Kerentnn setip jenis lrv jug ere-e. Lrv instr II leih rentn terhp serngn enwn entomoptogen iningkn engn lrv instr III n IV (Ntli ). Hl ini iug kren sistem kekeln tuuh lrv instr II elum sempurn iningkn engn lrv instr III n IV. Lrv instr I n II tik igunkn lm penelitin ini kren ukurnny terllu keil sehingg menyulitkn lm pengmtn. Menurut hsil nlisis postult Koh, lrv yng mti p uji efiksi ik p skl lortorium mupun semi lpng isekn oleh enwn entomoptogen yng iinokulsikn. Hl ini itunjukkn engn iri-iri isolt yng erhsil iisolsi ri lrv yng mti sm engn iri-iri isolt yng iinokulsikn p lrv seht. Bersrkn hsil uji efiksi yng ilkukn terhp semiln isolt enwn entomoptogen yng erhsil iisolsi lm penelitin ini menunjukkn hw semkin tinggi konsentrsi enwn yng igunkn semkin tinggi pul tingkt kemtin lrv. Dri 9 isolt yng iperoleh, A. niger ilh isolt yng pling efektif memunuh lrv p semu tingkt konsentrsi yng igunkn p instr III mupun IV. Hsil ini sesui engn yng ilporkn Ntli () hw A. niger merupkn isolt terik ri isolt yng erhsil iisolsi engn kemtin lrv instr III n IV sekitr 85% p konsentrsi enwn terenh yitu 1. mm 3 lm wktu 12 jm setelh inokulsi. Kemmpun memunuh yng ik isolt A. niger kemungkinn esr kren isolt ini ukn merupkn kelompok ri enwn oportunis yng hny mmpu memunuh lrv ketik tuuh lrv lm ken lemh. Hsil ri pengujin efiksi p skl semi lpng engn perlkun ergi mm inokulum menggunkn u isolt A. niger, menunjukkn hl yng sm engn hsil uji skl lortorium. Semkin tinggi konsentrsi inokulum enwn n semkin lm wktu inkusi yng igunkn mk semkin tinggi pul kemtin lrv (Gmr 8 n 9). Pengujin engn menggunkn isolt A. niger (isolt 8 ri penelitin ini) n A. niger (isolt 17, koleksi Bgin Mikologi) menunjukkn hw isolt 8 mempunyi y unuh yng leih ik terhp lrv instr III p semu jenis inokulum. Inokulum miseli tik igunkn p uji efiksi skl semi lpng engn perlkun ergi mm konsentrsi n mei tumuh lrv kren eerp hri setelh inokulsi, mei tumuh menji eru usuk. Hl ini mungkin terji kren ny proses fermentsi ri mikro lin. Perlkun engn inokulum mpurn, menunjukkn inokulum ini mmpu memunuh populsi lrv instr III its % lm wktu 24 jm setelh inokulsi. Sengkn efek pemerin inokulum spor ru pt terliht setelh 3-4 hri setelh inokulsi. Bersrkn uji efiksi yng ilkukn p skl semi lpng engn perlkun ergi konsentrsi menunjukkn hw semkin tinggi konsentrsi enwn n semkin lm wktu inkusi, tingkt kemtin lrv p keu mm mei ir krn steril mupun tik steril semkin tinggi (Gmr n 11). Inokulum mpurn memiliki y unuh yng leih ik rip inokulum spor. Hl ini mungkin isekn kren inokulum mpurn mengnung leih nyk jenis propgul yitu