EKSTRAK SENYAWA GOLONGAN FLAVONOID BUAH MAHKOTA DEWA ROLIF HARTIKA

AKTIVITAS INHIBISI α-glukosidase EKSTRAK SENYAWA GOLONGAN FLAVONOID BUAH MAHKOTA DEWA ROLIF HARTIKA DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009

ABSTRAK ROLIF HARTIKA. Aktivitas Inhibisi α-glukosidase Ekstrak Senyawa Golongan Flavonoid Buah Mahkota Dewa. Dibimbing oleh IRMA HERAWATI SUPARTO dan WULAN TRI WAHYUNI. Buah mahkota dewa secara empiris dapat mengobati diabetes melitus yang ditandai dengan peningkatan gula darah. Penelitian ini bertujuan mendapatkan ekstrak flavonoid dari buah mahkota dewa yang dapat menurunkan kadar glukosa darah dengan menghambat aktivitas α-glukosidase secara in vitro. Buah mahkota dewa berasal dari Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata, Fakultas Kehutanan, IPB. Tiga tingkat kematangan buah berdasarkan warna, yaitu merah sekali, merah kehijauan, dan hijau kemerahan digunakan untuk mendapatkan aktivitas inhibisi enzim tertinggi dibandingkan dengan akarbosa sebagai kontrol positif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak flavonoid dengan konsentrasi masing-masing 1% b/v dapat menghambat aktivitas α- glukosidase terbesar pada buah mahkota dewa merah sekali dibandingkan jenis buah lainnya (40.26%), tetapi aktivitas inhibisinya masih rendah dibandingkan dengan akarbosa (96.80%). Ekstraksi golongan senyawa flavonoid dilakukan terhadap buah mahkota dewa yang memberi inhibisi terbesar, untuk memperoleh senyawa flavonol dan flavon. Ekstrak flavonol memberikan inhibisi terhadap α- glukosidase lebih tinggi daripada flavon, yaitu sebesar 41.97% dibandingkan 8.81%. Fraksinasi dilakukan terhadap ekstrak flavonol menggunakan kromatografi kolom dengan perbandingan eluen kloroform:asam asetat:air (67.5:45:6). Hasil fraksinasi ini diperoleh 7 fraksi dan fraksi teraktif adalah fraksi 2 dengan aktivitas inhibisinya sebesar 80.80%. Hasil identifikasi spektrofotometer UV pada fraksi 2 terdapat serapan maksimum pada panjang gelombang 257 nm yang menunjukkan adanya senyawa flavonoid. Hasil spektrum inframerah menunjukkan terdapat gugus dugaan uluran -OH, C=O (keton), cincin heteroaromatik, dan benzena o- subsitusi, diduga fraksi teraktif mengandung senyawa golongan flavonoid juga.

ABSTRACT ROLIF HARTIKA. α-glucosidase Inhibitory Effect of Flavonoid Extracts from Crown of God Fruit. Under supervision of IRMA HERAWATI SUPARTO dan WULAN TRI WAHYUNI. Crown of God fruit ( Phaleria macrocarpa) empirically can treat diabetes mellitus, a disease with high concentration of blood glucose. The purpose of this study is to obtain flavonoid compound from the fruit that can reduce blood glucose through in vitro inhibition activity of α-glucosidase. The fruit were obtained from the Department of Forest Resources Conservation and Ecotourism, Faculty of Foresty, Bogor Agriculture University. Three maturity stages were used based on the fruit color, very red, greenish red, and reddish green and its enzyme activity compared to acarbose as positive control. The result indicated that flavonoid extracts with 1% w/v were highest (40.26%) in the very red fruit compared to the other two, but lower compared to acarbose (96.80%). Further extraction for flavonoid compound was performed on the fruit which has highest inhibition to obtain flavonol and flavon compound. Flavonol extract showed higher α-glucosidase inhibition, 41.97%, compared to flavon, 8.81%. Flavonol which has highest inhibition among flavonoid compound, was fractionated using column chromatography. Chloroform, acetic acid, and water used as eluent with ratio of 67.5:45:6. The result of chromatography gave 7 fractions and the most active fraction was fraction 2 with enzyme inhibition of 80.80%. Maximum absorption for fraction 2 was at 257 nm, which confirmed flavonoid compound. The result of infrared spectrum contained functional groups of -OH, C=O (keton), heteroaromatic ring, and benzene o-subsitution, also confirmed the presence of flavonoid compound.

AKTIVITAS INHIBISI α-glukosidase EKSTRAK SENYAWA GOLONGAN FLAVONOID BUAH MAHKOTA DEWA ROLIF HARTIKA Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada Departemen Kimia DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009

Judul : Aktivitas Inhibisi α-glukosidase Ekstrak Senyawa Golongan Flavonoid Buah Mahkota Dewa Nama : Rolif Hartika NIM : G44052057 Pembimbing I, Disetujui Pembimbing II, Dr. dr. Irma H. Suparto, MS NIP 19581123 198603 2 002 Wulan Tri Wahyuni, SSi Diketahui Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor, Dr. drh. Hasim, DEA NIP 19610328 198601 1 002 Tanggal Lulus :

PRAKATA Segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan segala rahmat-nya, sehingga penulis mampu menyelesaikan karya ilmiah ini yang dilaksanakan sejak bulan Februari hingga Juli 2009 di Laboratorium Kimia Analitik dan Pusat Studi Biofarmaka. Tema yang dipilih adalah antidiabetes, dengan judul Aktivitas Inhibisi α-glukosidase Ekstrak Senyawa Golongan Flavonoid Buah Mahkota Dewa Selama penelitian sampai penulisan karya ilmiah ini, penulis mendapatkan banyak bimbingan dan dorongan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. dr. Irma H. Suparto, MS. dan Ibu Wulan Tri Wahyuni, Ssi. selaku pembimbing penelitian ini. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada kedua orang tua, keluarga, seluruh staf laboratorium Kimia Analitik dan Pusat Studi Biofarmaka, serta teman-teman seperjuangan angkatan 42 yang selalu memberikan dorongan dan doa. Terima kasih atas bantuan dan semangat yang diberikan, semoga mendapat balasan pahala dari Allah SWT. Semoga laporan ini bermanfaat. Bogor, Oktober 2009 Rolif Hartika

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Bukittinggi pada tanggal 25 Juli 1987 dari pasangan Azhar dan Hikma Yenderi. Penulis merupakan anak kedua dari tiga bersaudara. Tahun 2005 penulis lulus dari SMAN 1 Bukittinggi dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Penulis memilih Program Studi Kimia, Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB. Selama mengikuti perkuliahan, penulis menjadi asisten praktikum Kimia Tingkat Persiapan Bersama (TPB) pada tahun ajaran 2006/2007; 2008/2009; Kimia Fisik Layanan 2007/2008; Pratikum Kimia Fisik 2008/2009; dan Kimia Analitik Layanan 2008/2009. Pada bulan Juli-Agustus 2008, penulis berkesempatan melaksanakan kegiatan praktik lapangan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Biologi bidang Botani.

DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL... viii DAFTAR GAMBAR... viii DAFTAR LAMPIRAN... PENDAHULUAN... 1 TINJAUAN PUSTAKA Mahkota Dewa... 1 Diabetes Melitus... 2 α-glukosidase... 2 Flavonoid dan Aktivitas Antidiabetes... 3 Ekstraksi dan Fraksinasi Senyawa Metabolit Sekunder... 4 BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat... 5 Lingkup Kerja... 5 HASIL DAN PEMBAHASAN Penetapan Kadar Air... 7 Isolat Flavonoid... 8 Isolat Senyawa Golongan Flavonoid... 9 Fraksinasi... 10 Identifikasi UV dan IR... 11 SIMPULAN DAN SARAN Simpulan... 12 Saran... 12 ix DAFTAR PUSTAKA... 12 LAMPIRAN... 14

DAFTAR TABEL Halaman 1 Uji kualitatif golongan flavonoid... 3 2 Hasil uji fitokimia simplisia buah mahkota dewa MS, MH, dan HM... 8 3 Hasil uji fitokimia ekstrak flavonoid buah mahkota dewa... 8 4 Hasil uji fitokimia ekstrak senyawa golongan flavonoid... 10 5 Absorpsi inframerah gugus-gugus fungsi fraksi teraktif hasil fraksinasi ekstrak pekat flavonoid MS... 12 DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Buah mahkota dewa... 2 2 Hidrolisis PNG oleh α-glukosidase... 3 3 Struktur kimia akarbosa.... 3 4 Struktur Umum Flavonoid... 3 5 Eksperimen dasar dari kromatografi kolom... 4 6 Kromatografi lapis tipis (KLT)... 4 7 Inhibisi aktivitas α-glukosidase dari akarbosa, ekstrak flavonoid buah mahkota dewa MS, MH, dan HM... 9 8 Inhibisi aktivitas α-glukosidase dari ekstrak flavonol dan flavon buah mahkota dewa MS... 10 9 Profil KLT eluen terbaik... 10 10 Inhibisi aktivitas α-glukosidase dari hasil fraksinasi ekstrak flavonol buah mahkota dewa MS... 11 11 Spektrum UV fraksi teraktif dengan serapan maksimum 257 nm.... 11

DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Bagan alir penelitian... 15 2 Bagan alir ekstraksi flavonoid... 16 3 Bagan alir uji fitokimia... 17 4 Prosedur sistem reaksi enzim untuk satu sampel... 18 5 Bagan alir isolasi golongan flavonoid... 19 6 Penetapan kadar air buah mahkota dewa MS, MH, dan HM... 20 7 Perolehan rendemen ekstrak kasar flavonoid... 21 8 Daya inhibisi α-glukosidase dari ekstrak buah mahkota dewa (MD) dengan konsentrasi 1%... 21 9 Hasil uji golongan flavonoid untuk buah mahkota dewa MS, MH, dan HM 22 10 Perolehan rendemen ekstrak buah mahkota dewa merah sekali (MS) pada isolasi golongan flavonoid... 23 11 Daya inhibisi α-glukosidase dari ekstrak buah mahkota dewa merah sekali (MS) pada isolasi golongan flavonoid dengan konsentrasi 1%... 23 12 Hasil fraksinasi dan profil KLT hasil fraksinasi buah mahkota dewa MS senyawa flavonol dengan eluen kloroform : asam asetat : air (67.5:45:6)... 24 13 Daya inhibisi α-glukosidase dari hasil fraksinasi ekstrak flavonol buah mahkota dewa MS dengan konsentrasi 1%... 26 14 Spektrum Inframerah fraksi teraktif... 27