Lampiran 1: Skema Alur Pengujian Efek Antifungal

Transkripsi

1 Lampiran 1: Skema Alur Pengujian Efek Antifungal Pembuatan media Luria Berthani Agar 12 gr Aquadest 240 ml Dipanaskan hingga mendidih Dimasukkan ke dalam 10 tabung reaksi (20ml/tabung) Disterilkan di dalam autoklaf selama 2 jam Dipanaskan kembali Dituangkan ke dalam 10 petri (20 ml/petri) Ditunggu hingga dingin

2 Pengenceran bahan Kelompok I: kayu manis (kontrol) 4ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth 2ml m.atsiri + 100ml Luria Berthani Broth 1ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth 0,5ml m.atsiri+ 100 ml Luria Berthani Broth 0,25ml m.atsiri+ 100ml Luria Berthani Broth atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Kelompok II : 0,3 gr 0,3 ml air Kontrol ( 1:1) Kelompok III: minyak atsiri + 4% m.atsiri + 2%m.atsiri + 1% m.atsiri + 0,5% m.atsiri + 0,25% m.atsiri +

3 Pembiakan spesimen Biakan murni Candida albicans diencerkan dengan NaCl 0,9 % (MC 1 x 10 8 CFU/ml) Disebarkan pada media Luria Berthani Agar dengan menggunakan kapas lidi Dibiarkan selama 24 jam Peletakan masing-masing bahan coba pada petri yang berisi Candida albicans. Pengukuran diameter zona hambat pada masing-masing perlakuan dengan menggunakan kaliper setelah 24 jam pembiakan di inkubator

4 Lampiran 2: Skema Alur Pengukuran ph atsiri atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Beberapa tetes Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph

5 Kombinasi dengan 0,3 ml minyak atsiri 4%+ 0,3 gr 0,3 ml minyak 0,3 ml minyak atsiri 2%+ atsiri 1%+ 0,3 gr Beberapa 0,3 gr 0,3 ml minyak atsiri 0,5%+ 0,3 gr 0,3 ml minyak atsiri 0,25%+ 0,3 gr Beberapa mg Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph

6 0,3 gr 0,3 ml air Beberapa mg Perubahan warna kertas dibandingkan dengan warna indikator. Warna yang mendekati warna indikator dicatat sebagai nilai ph Lampiran 3 : Data hasil pengukuran zona hambat,. Dan kombinasinya atsiri Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata 4% % 41,4 46,2 45,26 44,28 1 % 44,6 40,04 42,83 42,49 0,5% 39,42 40,42 41,12 40,32 0,25 % 30,08 30,35 33,12 31,18 Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata 0,3 gr/ml 22,84 15,14 21,92 19,96

7 Kombinasi Konsentrasi Diameter Zona Hambat I II III Rata-rata atsiri4%+ca(o 16,74 19,18 17,52 17,81 H) 2 atsiri2%+ca(o 14,58 17,38 14,14 15,36 H) 2 atsiri1%+ca(o H) 2 atsiri0,5%+ca( OH) 2 atsiri0,25%+ca 13,64 15,28 13,78 14,23 16,6 16,06 14,02 15,5 16,34 16,8 15,26 16,13 (OH) 2 Lampiran 4 : : Data hasil pengukuran ph,. dan kombinasinya 4% 2% 1% 0,5% 0,25% 0,3gr/ml atsiri atsiri

8 Lampiran 5 :UJI STATISTIK Oneway [DataSet1] D:\skripsi\statistik gabungan nilai dan ph\konsentrasi dan kombinasi.sav Descriptives nilai hasil uji atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% Total 95% Confidence Interval for Me an N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum Test of Homogeneity of Variances nilai hasil uji Levene Statistic df1 df2 Sig ANOVA nilai hasil uji Between Groups W ithin Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig

9 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: nilai hasil uji LSD Me an Difference 95% Confidence Interval (I) atsiri (J) atsiri (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound atsiri 4% atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,5% * atsiri 0,25% * * atsiri 2% atsiri 4% atsiri 1% atsiri 0,5% atsiri 0,25% * * atsiri 1% atsiri 4% atsiri 2% atsiri 0,5% atsiri 0,25% * * atsiri 0,5% atsiri 4% * atsiri 2% atsiri 1% atsiri 0,25% * * atsiri 0,25% atsiri 4% * atsiri 2% * atsiri 1% * atsiri 0,5% * * atsiri 4% * atsiri 2% * atsiri 1% * atsiri 0,5% * atsiri 0,25% * *. The mean difference is significant at the.05 level.

10 Oneway [DataSet0] Descriptives nilai 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ Total 95% Confidence Interval for Me an N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Mi nimu m Maximum Test of Homogeneity of Variances nilai Levene Statistic df1 df2 Sig ANOVA nilai Between Groups W ithin Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig

11 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: nilai LSD (I) kons 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ (J) kons 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 0,5%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 1%+ 0,25%+ 4%+ 2%+ 1%+ 0,5%+ Me an Difference 95% Confidence Interval (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound * * * * %+ 2%+ 1%+ 0,5%+ 0,25%+ *. The mean difference is significant at the.05 level * * * *

12 Lampiran 6 : Alur pikir Alur pikir Mikrobiologi Endodontik C.albicans a salah satu mikroorganisme penyebab kegagalan endodonti Siquera dan Senn C.albicans prevalensi jamur yang paling banyak Candida albicans ditemukan 5-20% dari saluran akar yang terinfeksi. (Waltimo, 2003) C. albicans resisten terhadap. (Ballal et al 2007, Waltimo et al 1999) Kunci virulensi C. albicans sekresi enzim aspartil protease. (Waltimo, 2003) Faktor virulensi C.albicans Pembentukan hifa, tigmotropism, sekresi protease dan fenomena phenotypic switching (Waltimo, 2003) Antifungal sifat antimikrobial yang sangat baik,mengeliminasi mikroorganisme setelah cleaning dan shaping,menetralkan sisa2 toxin Antimikroba aksi OH - lingkungan alkalin tidak sesuai bagi perkembangan mikroorganisme. (Athanassiadis et al, 2007) ph>9 reversible maupun irreversible mo kehilangan aktivitas biologi astiri antifungal,antibakteri Komponen terbesar antifungal minyak atsiri sinamaldehid dan eugenol atsiri kayu manis efektif membunuh C.albicans Menurut Guenther bersifat asam lemah dan netral Dari uraian diatas terlihat bahwa kayu manis memiliki efek antimikroba dan bersifat asam lemah atau netral, tetapi sejauh ini belum ada penelitian mengenai efek antifungal dan ph kayu manis dan kombinasinya dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans.

13 Timbul permasalahan : 1) Apakah kayu manis memberikan perubahan ph terhadap kalsium hidroksida? 2) Apakah penambahan kayu manis akan menambah daya antifungal terhadap Candida albicans? Tujuan Penelitian : 1. Untuk mengetahui perubahan ph akibat penambahan kayu manis terhadap kalsium hidroksida. 2. Untuk mengetahui daya antifungal kayu manis ketika dikombinasikan dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans. Judul Penelitian : Efek antifungal dan ph kombinasi kayu manis dengan kalsium hidroksida terhadap Candida albicans secara in vitro