KONSENTRASI LIPID PEROKSIDA HATI KELINCI HIPERLIPIDEMIA YANG DIBERI SENYAWA HIPOLIPIDEMIK AULINE MULIASARI

Transkripsi

1 KONSENTRASI LIPID PEROKSIDA HATI KELINCI HIPERLIPIDEMIA YANG DIBERI SENYAWA HIPOLIPIDEMIK AULINE MULIASARI PROGRAM STUDI BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009

2 ii ABSTRAK AULINE MULIASARI. Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Hiperlipedimia yang Diberi Senyawa Hipolipidemik. Dibimbing oleh SULISTIYANI dan DIMAS ANDRIANTO. Penyakit degeneratif merupakan penyakit pembunuh manusia terbesar di dunia. Salah satu penyebab penyakit tersebut timbul adalah pola makan yang menyukai masakan cepat saji (fast food) dan mengkonsumsinya secara berlebihan sehingga terjadi hiperlipidemia. Hiperlipidemia dapat mengakibatkan peningkatan peroksidasi lipid yang disebabkan oleh radikal bebas di dalam tubuh, seperti organ hati. Penelitian bertujuan mengukur konsentrasi lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia dan menentukan pengaruh pemberian senyawa hipolipidemik terhadap lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia. Kelinci jantan galur New Zealand White sebanyak 24 ekor dibagi menjadi empat kelompok, yaitu kelompok I (normal), kelompok II (hiperlipidemia), kelompok III (ramuan daun jati belanda), dan kelompok IV (lovastatin). Pengukuran konsentrasi lipid peroksida hati kelinci menggunakan metode TBA (asam tiobarbiturat) yang mengukur malondialdehida (MDA) sebagai produk dari reaksi peroksidasi lipid dengan menggunakan spektrofotometer pada λ = 532 nm (Yagi et al. 1994). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian pakan 0.5% kolesterol dan 5% minyak kelapa dapat menimbulkan kondisi hiperlipidemia. Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia pada kelompok II meningkat dua kali lipat dibandingkan dengan kelompok I. Kelompok III dan IV memiliki konsentrasi lipid peroksida hati yang lebih rendah dibandingkan kelompok II, yaitu sebesar 58.83% dan 49.06%. Data tersebut menunjukkan bahwa ramuan daun jati belanda dan lovastatin dapat menurunkan peroksidasi lipid.

3 ABSTRACT AULINE MULIASARI. Lipid Peroxide Concentration in The Liver of Hyperlipidemic Rabbits Treated by Hypolipidemic Substance. Under the direction of SULISTIYANI and DIMAS ANDRIANTO. Degenerative disease has caused the highest mortality in the world. The disease may occur due to our life style which prefer fast food than traditional one and overeating resulted in hyperlipidemic. This condition will increase lipid peroxidation caused by free radicals in the body such as in the liver. The objective of this research is to determine the influence of hypolipidemic substance on lipid peroxide in the liver of hyperlipidemic rabbits. Twenty four male New Zealand White rabbits were divided into four group: group I (normal), group II (Hyperlipidemic), group III (mixture of Jati Belanda), and group IV (lovastatin). Lipid peroxide concentration was measured by TBA (thiobarbiturit acid) assay that measure malondyaldehida (MDA) as product of lipid peroxidation using spectrophotometer at λ = 532 nm (Yagi et al 1994). The result of the research showed that feeding rabbits with chow contains 0.5% cholesterol and 5% of palm oil caused hyperlipidemic. Lipid peroxide concentration of rabbit s liver in group II increased two times compared with group I. Group III and IV had lower lipid peroxide concentration of rabbit s liver compared with group II which is 58.83% and 49.06%. This data showed that Jati Belanda leave mixture and lovastatin decreased lipid peroxidation in the liver.

4 iv KONSENTRASI LIPID PEROKSIDA HATI KELINCI HIPERLIPIDEMIA YANG DIBERI SENYAWA HIPOLIPIDEMIK AULINE MULIASARI Skripsi sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Sains pada Program Studi Biokimia PROGRAM STUDI BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2009

5 v Judul Skripsi Nama NIM : Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Hiperlipidemia yang Diberi Senyawa Hipolipidemik : Auline Muliasari : G Disetujui Komisi Pembimbing drh. Sulistiyani, M.Sc, Ph.D Ketua Dimas Andrianto, M.Si Anggota Diketahui Dr. drh. Hasim, DEA. Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Tanggal Lulus:

6 vi PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, nikmat, kekuatan, dan karunia-nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini dengan baik dan lancar. Tema yang dipilih dalam penelitian kali ini adalah lipid peroksida hati, dengan judul Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Hiperlipidemia yang Diberi Senyawa Hipolipidemik. Karya ilmiah ini disusun berdasarkan hasil penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Agustus hingga Desember 2008 di Laboratorium Biokimia, Departemen Biokimia FMIPA, IPB, Bogor. Penulis mengucapkan terimakasih kepada drh. Sulistiyani, M.Sc, Ph.D dan Dimas Andrianto, M.Si selaku pembimbing atas segala ilmu yang diberikan serta kesabaran dalam membimbing penulis. Pada kesempatan kali ini penulis juga mengucapkan terimakasih kepada seluruh staf Laboratorium Biokimia dan pusat studi Biofarmaka atas bantuan serta kemudahan dalam menjalankan penelitian ini. Selain itu penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibunda, Uda Uki, Ade Astri, Om Woto, Tante Saf, Om Yan, dan Tante Rina atas dukungan moril dan materil untuk penelitian ini. Serta ucapan terimakasih penulis sampaikan kepada Aswan, Iqbal, Udin, Rangga, Falakh, Tyas, Intan, Ela, Hanifah, Dewi, dan seluruh biokimia angkatan 41 atas dukungan morilnya. Bogor, September 2009 Auline Muliasari

7 RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 13 September 1985 dari pasangan Alfian Zein, B.A (alm) dan dr. Mulyani Noekman. Penulis merupakan anak ketiga dari empat bersaudara. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 42 Jakarta dan baru pada tahun 2004 penulis lulus seleksi masuk IPB melalui Jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa (SPMB) pada Program Studi Biokimia, yang saat itu masih tergabung dengan Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA). Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah menjadi asisten praktikum Biokimia Umum S1 Fakultas Kedokteran Hewan serta Struktur Fungsi dan Biomolekul S1 Biokimia pada tahun akademik 2008/2009. Penulis juga pernah melaksanakan Praktik Kerja Lapangan (PKL) di Laboratorium Mikrobiologi Kelompok Peneliti Biokimia Mikrob, Lembaga Ilmu Pengetahuan Alam (LIPI), Cibinong, Bogor, selama periode Juli sampai Agustus 2007 dan menulis laporan ilmiah yang berjudul Aktivitas Antibakteri Isolat Mikrob dari Maluku: Uji Fisik, Alkohol, dan Total Asam Susu Pasteurisasi. Selain itu penulis pernah aktif di organisasi kemahasiswaan, yaitu sebagai Sekertaris Departemen Sumber Daya Manusia Community of Research and Education in Biochemistry (CREBs) pada periode 2006/2007.

8 DAFTAR ISI Halaman DAFTAR GAMBAR... ix DAFTAR LAMPIRAN... ix PENDAHULUAN... 1 TINJAUAN PUSTAKA Peroksidasi Lipid... 1 Hati... 2 Hiperlipidemia... 2 Metabolisme Kolesterol... 3 Obat Penurun Kolesterol... 4 Hewan Coba... 6 BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat... 7 Metode Penelitian... 7 HASIL DAN PEMBAHASAN Masa Adaptasi dan Bobot Badan Hewan Coba... 8 Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Normal dengan Kelinci Hiperlipidemia... 9 Perbandingan Konsentrasi Lipid Peroksida Hati Kelinci Ramuan Jati Belanda dan Lovastatin dengan Hiperlipidemia SIMPULAN DAN SARAN DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN... 13

9 ix DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Reaksi peroksidasi Reaksi antara TBA dengan MDA Biosintesis kolesterol Struktur kimia lovastatin Jati Belanda Kelinci New Zealand White Bobot badan selama adaptasi dan perlakuan Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci normal dan kelinci hiperlipidemia Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia, ramuan & lovastatin. 10 DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Tahapan penelitian Komposisi pakan standar Bobot badan kelinci Hasil kurva standar TMP Konsentrasi lipid peroksida hati kelinci dan cara perhitungan Analisis statistik... 19

10 PENDAHULUAN Penyakit degeneratif menjadi penyakit pembunuh manusia terbesar di dunia. Menurut hasil survei kesehatan rumah tangga (SKRT) menyatakan bahwa penyakit jantung koroner telah menjadi penyebab kematian paling tinggi di tahun 1992, 1995, dan 2001, sedangkan menurut WHO (World Health Organization) hingga akhir tahun 2005 penyakit degeneratif telah menyebabkan kematian hampir 17 juta orang di seluruh dunia. Penyakit degeneratif antara lain PJK (penyakit jantung koroner), diabetes melitus, kanker, obesitas, dislipidemia, dan stroke. Faktor yang menyebabkannya adalah pola makan yang menyukai masakan cepat saji (fast food) dan mengkonsumsinya secara berlebihan sehingga terjadi hiperlipidemia. Hiperlipidemia merupakan suatu keadaan tingginya konsentrasi lipid yang ditandai dengan meningkatnya konsentrasi trigliserida, LDL (low density lipoprotein), dan kolesterol darah melebihi batas normal (pada manusia > 200 mg/dl) (Ganong 2001). Faktor-faktor yang menyebabkan hiperlipidemia adalah obesitas, usia, kurang olahraga, stres, gangguan metabolisme, gangguan genetik, dan pola konsumsi makanan sehari-hari yang dapat meningkatkan konsentrasi lipid. Keadaan ini dapat ditimbulkan karena meningkatnya peroksidasi lipid yang disebabkan oleh radikal bebas di dalam tubuh, seperti organ hati. Yagi et al. (1994) menyatakan bahwa peningkatan konsentrasi lipid peroksida di hati dapat merusak sel hati sehingga peroksida akan keluar dari hati menuju pembuluh darah dan dapat merusak organ atau jaringan lain. Alviani (2007) yang menyatakan bahwa konsentrasi lipid peroksida hati tikus normal dan hiperlipidemia berturutturut sebesar nmol/g bobot hati dan nmol/g bobot hati. Selain itu, pemberian pakan kolesterol sebesar 0.25% mengakibatkan konsentrasi lipid peroksida hati tikus kelompok hiperlipidemia lebih besar lima kali dari pada kelompok normal (Alviani 2007). Oleh karena itu, terdapat hubungan antara kondisi hiperlipidemia dengan konsentarsi lipid peroksida hati pada tikus (Alviani 2007). Kondisi hiperlipidemia yang akan menyebabkan aterosklerosis ini membuat para peneliti mencari obat yang ampuh untuk menurunkan kadar lipid plasma. Oleh karena itu, banyak obat-obatan paten maupun dari tumbuhan yang digunakan sebagai penurun lipid. Obatobatan paten tersebut antara lain golongan asam fibrat, resin, penghambat HMG-KoA reduktase (statin), dan asam nikotinat (niasin) sedangkan obat-obatan dari tumbuhan antara lain jati belanda, temulawak, daun jambu biji, kunyit, dan mahkota dewa (Dalimartha 2002). Penelitian tentang obat penurun lipid plasma telah dilakukan sebelumnya, sehingga penelitian ini merupakan penelitian lanjutan. Alviani (2007) menyatakan bahwa kelompok hewan coba tikus yang diberi ramuan ekstrak daun jati belanda mampu menurunkan kolesterol sebesar 27.56% secara nyata dibandingkan kelompok hiperlipidemia. Rahayu (2007) menunjukkan bahwa ekstrak ramuan daun jati belanda, temulawak, dan daun jambu biji pada komposisi tertentu mampu menurunkan konsentrasi kolesterol hati pada tikus yang hiperlipidemia. Tombilangi (2004) menyatakan bahwa pemberian pakan kolesterol pada hewan coba kelinci dapat menaikkan konsentrasi lipid peroksida. Berdasarkan penelitian tersebut obatobatan dari tumbuhan mampu menurunkan kolesterol pada tikus dan kelinci yang diberi pakan kolesterol. Penelitian sebelumnya menggunakan plasma darah hewan coba kelinci, sedangkan pada organ hati kelinci belum diteliti. Berdasarkan hal tersebut, konsentrasi lipid peroksida hati pada hewan coba kelinci hiperlipidemia yang diberi senyawa hipolipidemik belum diteliti lebih lanjut. Penelitian bertujuan mengukur konsentrasi lipid peroksida hati kelinci hiperlipidemia dan menentukan pengaruh pemberian senyawa hipolipidemik terhadap lipid peroksida hati kelinci hipierlipidemia. Hipotesis dari penelitian ini adalah pemberian senyawa hipolipidemik dapat menurunkan konsentrasi lipid peroksida hati kelinci yang hiperlipidemia. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi lebih lanjut tentang korelasi antara meningkatnya konsentrasi lipid pada hati kelinci terhadap konsentrasi lipid peroksida dalam hatinya yang diberi senyawa hipolipidemik. TINJAUAN PUSTAKA Peroksidasi Lipid Lipid merupakan salah satu molekul yang paling sensitif terhadap serangan radikal bebas sehingga terbentuk lipid peroksida. Peroksidasi lipid adalah reaksi yang terjadi antara radikal bebas dengan asam lemak tak jenuh majemuk (Polyunsaturated fatty acid, PUFA) yang sedikitnya memiliki tiga ikatan rangkap (Halliwel dan Gutteridge 1999). Peroksidasi lipid terjadi diakibatkan oleh radikal bebas. Radikal bebas sangat labil dan reaktif sehingga mudah bereaksi dengan setiap zat disekitarnya. Peroksidasi lipid merupakan rantai reaksi yang berlangsung terus menerus, sebab reaksi ini membentuk radikal lipid bebas (R ) yang lain sehingga peroksidasi berlangsung lebih lanjut (Halliwel dan Gutteridge 1999). Umumnya peroksidasi lipid dapat melalui tiga tahap reaksi,