UJI IRITASI KRIM ANTIOKSIDAN EKSTRAK BIJI LENGKENG (Euphoria longana Stend) PADA KULIT KELINCI (Oryctolagus cuniculus)

Transkripsi

1 UJI IRITASI KRIM ANTIOKSIDAN EKSTRAK BIJI LENGKENG (Euphoria longana Stend) PADA KULIT KELINCI (Oryctolagus cuniculus) Irsan, Marianti A. Manggau, Ermina Pakki, dan Usmar Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar ABSTRAK Telah dilakukan penelitian uji iritasi krim antioksidan ekstrak biji lengkeng (Euphoria longana Stend) pada kulit kelinci (Oryctolagus cuniculus). Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk membuktikan apakah krim antioksidan ekstrak biji lengkeng dengan konsentrasi emulgator phytocream 5% yang digunakan menimbulkan iritasi pada kulit kelinci. Penelitian ini menggunakan 4 ekor kelinci yang dicukur punggungnya pada 4 tempat untuk masing-masing sampel iritan dan kontrol. Sampel iritan yang digunakan adalah formula krim; ekstrak biji lengkeng; dan basis formula krim tanpa ekstrak. Pengujian dilakukan dengan metode patch test sesuai metode Draize. Hasil penelitian menunjukkan formula krim dan basis formula krim tanpa ekstrak menghasilkan tingkat iritasi sedikit mengiritasi (indeks iritasi 0,04 0,99); sedangkan pembanding lain ekstrak biji lengkeng menghasilkan tingkat iritasi ringan (indeks iritasi 1,00 2,99). Kata kunci : iritasi, krim antioksidan, biji lengkeng, ekstrak PENDAHULUAN Tanaman lengkeng merupakan tanaman tahunan yang dapat hidup hingga mencapai lebih dari 50 tahun. Batang tanaman berkayu keras, tinggi pohon mencapai 15 meter atau lebih, memiliki banyak percabangan, dan membentuk tajuk (kanopi) tanaman yang rimbun mirip payung. Buah bulat bundar sampai bulat pesek, terdiri atas kulit buah, daging buah, dan biji (1). Biji lengkeng mengandung beberapa jenis polifenol dalam jumlah besar seperti korilagin (26,12 mg/g bobot kering), asam galat (23,04 mg/g bobot kering), dan asam elagat (12,65 mg/g bobot kering) (2). Suatu penelitian telah dilakukan untuk menguji aktivitas antioksidan buah dan biji lengkeng (Euphoria longana Stend) menggunakan pelarut air menunjukkan hasil paling baik pada ekstrak biji lengkeng yang kering dengan konsentrasi penghambatan adalah sebesar 11,6 µg/ml (2). Berdasarkan kandungan kimia dan tingginya aktivitas antioksidan pada ekstrak biji lengkeng, Muttaqin (3) telah memformulasi ekstrak biji lengkeng menjadi sediaan krim dengan menggunakan emulgator Phytocream 2,5; 5; dan 10% (b/b). Dari hasil uji kestabilan fisik didapatkan formula paling stabil pada konsentrasi 5% b/b (3). Krim sering menyebabkan efek samping pada kulit, antara lain terjadinya iritasi primer, reaksi sensitivitas, fotoalergi, dan fototoksisitas. Efek samping ini dapat berasal dari zat aktif ataupun bahan tambahan pada krim, seperti bahan emulgator. Evaluasi keamanan kosmetik, salah satunya adalah uji iritasi (4). 55 Iritasi adalah adalah gejala inflamasi yang terjadi pada kulit atau membran mukosa segera setelah perlakuan berkepanjangan atau berulang dengan menggunakan bahan kimia atau bahan lain. Iritasi kulit disebabkan oleh suatu bahan dapat terjadi pada setiap orang, tidak melibatkan sistem imun tubuh dan ada beberapa faktor-faktor yang memegang peranan seperti keadaan permukaan kulit, lamanya bahan bersentuhan dengan kulit, dan konsentrasi dari bahan (5). Iritasi adalah suatu kondisi pada kulit yang muncul akibat kontak berkepanjangan dengan zat kimia tertentu. Setelah beberapa waktu, kulit akan mengering terasa nyeri, mengalami perdarahan, dan pecah-pecah. Kondisi ini diakibatkan oleh solven, asam, alkali (basa), detergen. Begitu kontak dengan zat kimia yang menyebabkan kondisi tersebut dihentikan, kulit akan pulih seperti sedia kala. Gejala umum yang dapat terjadi jika terjadi iritasi seperti panas, disebabkan karena dilatasi pembuluh darah pada daerah yang terkena yang dapat dilihat dengan timbulnya kemerahan pada daerah kulit tersebut (eritema). Selain itu dapat juga menyebabkan terjadinya udema, yang dapat diamati dengan terjadinya perbesaran plasma yang membeku pada daerah yang terluka, dan dipercepat dengan adanya jaringan fibrosa yang menutupi daerah tersebut (6). Berdasarkan hal tersebut, maka harus dilakukan uji iritasi sebelum pemakaian pada manusia sehingga mencegah reaksi hipersensitivitas. Iritasi primer biasanya diukur dengan patch test pada kulit kelinci berdasarkan prosedur (7). Adanya tanda-tanda iritasi pada kulit hewan coba,

2 56 Majalah Farmasi dan Farmakologi, Vol. 17, No.2 Juli 2013, hlm (ISSN : ) maka ada kemungkinan terjadi iritasi pada kulit manusia. Pada penelitian ini, telah dilakukan uji iritasi krim ekstrak biji lengkeng (Euphoria longana Stend). Permasalahan yang timbul, apakah krim dari ekstrak biji lengkeng tersebut menimbulkan iritasi pada kulit hewan coba. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui krim dari ekstrak biji lengkeng menimbulkan atau tidak menimbulkan iritasi pada kulit hewan coba. METODE PENELITIAN Alat dan Bahan Alat-alat yang digunakan adalah alat cukur (Gillete ), cawan porselen, gelas piala (Pyrex ), gelas ukur (Pyrex ), lemari pendingin, labu erlenmeyer (Pyrex ), mortir dan stamfer, penangas air, pengaduk elektrik (Philips ), termometer, timbangan analitik (Sartorius ). Bahan-bahan yang digunakan antara lain α-tokoferol, air suling, ekstrak biji lengkeng, isopropil miristat, metil paraben, phytocream, propil paraben, dan propilenglikol. Pengambilan dan Pengolahan Sampel Sampel biji lengkeng (Euphoria longana Stend) yang digunakan berasal dari Makassar, Sulawesi Selatan. Sampel biji lengkeng dicuci dengan air mengalir hingga bersih kemudian ditumbuk dan dikeringkan tanpa terkena sinar matahari langsung. diaduk hingga homogen. Selanjutnya fase minyak dituang ke dalam fase air, diaduk dengan pengaduk elektrik hingga homogen. Krim yang terbentuk didiamkan hingga suhu 50 o C, kemudian ditambah α-tokoferol, ekstrak biji lengkeng dan pengaroma minyak melati, dan diaduk hingga homogen. Tabel 1. Komposisi Formula Krim Ekstrak Biji Lengkeng Konsentrasi Komposisi/Bahan Fungsi (% b / b) Ekstrak biji lengkeng Zat aktif 0,300 Fase Minyak : - Phytocream Emulgator 5,000 - Isopropil miristat Penetran 5,000 - Propil paraben Pengawet 0,020 - α-tokoferol Antioksidan 0,050 - Minyak melati Pengaroma 0,005 Fase Air : - Propilenglikol Humektan 10,000 - Metil Paraben Pengawet 0,020 - Aquadest Pelarut 79,605 Ekstraksi Sebanyak 500 g serbuk kasar biji lengkeng diseduh dengan 2 L air panas pada suhu 70 o C selama kurang lebih 1 jam. Ekstrak kemudian disaring dan dipisahkan. Residu diekstraksi kembali sebanyak dua kali dengan masing-masing 2 L air panas selama 1 jam. Ekstrak air dikumpul dan dibekukan, kemudian diliofilisasi dengan menggunakan freeze-dryer sehinga diperoleh ekstrak dalam bentuk kering. Formulasi Krim Krim diformulasi dengan tipe minyak dalam air (m/a) yang mengandung ekstrak biji lengkeng dengan emulgator Phytocream dengan konsentrasi 5%. Komposisi krim selengkapnya dapat dilihat pada tabel 1. Fase minyak dibuat dengan cara melebur isopropil miristat, propil paraben dan Phytocream secara berturut-turut dalam cawan porselen di atas penangas air hingga suhu 70 o C sambil diaduk hingga homogen. Fase air dibuat dengan cara memanaskan air hingga 70 o C dalam gelas piala. Metil paraben ditambahkan sambil diaduk hingga larut sempurna, lalu ditambah propilenglikol dan Uji Iritasi Pada Kulit Kelinci (8) Uji iritasi krim dilakukan pada 4 ekor kelinci (Oryctolagus cuniculus) dengan metode Draize (1959). Kelinci yang digunakan adalah kelinci albino dewasa, berbadan sehat, dengan bobot badan 1,5 2 kg, dengan perlakuan sebagai berikut: Kelinci dicukur bulu punggungnya pada 4 tempat yaitu 2 bagian di sebelah kanan dan 2 bagian di sebelah kiri untuk ekstrak biji lengkeng, basis, krim dari ekstrak biji lengkeng dan kontrol. Masingmasing sampel iritan sebanyak 0,5 gram dioleskan pada bagian punggung kelinci yang telah dicukur, lalu ditutup dengan kasa steril kemudian direkatkan dengan plester lalu dibungkus dengan perban, dan dibiarkan selama 24 jam. Setelah 24 jam, plester dan perban dibuka dan dibiarkan selama 1 jam, lalu diamati. Setelah diamati, bagian tersebut ditutup kembali dengan plester yang sama dan dilakukan pengamatan kembali setelah 72 jam. Selanjutnya untuk setiap keadaan kulit diberi nilai sebagai berikut (7): 1. Eritema a. Tidak ada eritema = 0 b. Eritema sangat ringan = 1

3 Irsan, dkk, Uji Iritasi Krim Antioksidan Ekstrak Biji Lengkeng 57 c. Eritema ringan = 2 d. Eritema sedang = 3 e. Eritema berat = 4 2. Edema a. Tidak ada edema = 0 b. Edema sangat ringan = 1 c. Edema ringan = 2 d. Edema sedang = 3 e. Edema berat = 4 Indeks iritasi dihitung dengan cara menjumlahkan nilai dari setiap kelinci percobaan setelah 24 jam dan 72 jam pemberiaan sampel iritan, kemudian dibagi 4. Penilaian iritasinya sebagai berikut: 0,00 = Tidak mengiritasi 0,04-0,99 = Sedikit mengiritasi 1,00-2,99 = Iritasi ringan 3,00-5,99 = Iritasi sedang 6,00-8,00 = Iritasi berat HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil penelitian uji iritasi krim antioksidan dari ekstrak biji lengkeng menggunakan emulgator Phytocream dan dibandingkan dengan basis krim tanpa ekstrak, dan ekstrak biji lengkeng. Tabel 2. Hasil Pengamatan Iritasi Pada Kulit Kelinci Kelompok uji Tanpa pemberian Formula Basis tanpa ekstrak Ulangan Waktu pengamatan 24 Jam 72 Jam Eritema Udema Eritema Udema I II III Rata-rata I II III Rata-rata 1 0 0,67 0,67 I II III Rata-rata 0,33 0,33 0,67 0,33 Tabel 3. Hasil Perhitungan Indeks Iritasi Kelompok uji Indeks Iritasi Kontrol Negatif (tanpa pemberian) 0,00 Formula 0,58 Basis tanpa ekstrak 0,42 Krim antioksidan saat ini sedang banyak dikembangkan sebagai salah satu sediaan topikal untuk menghambat proses penuaan (aging) kulit. Dalam penelitian ini, telah dibuat krim antioksidan dari ekstrak biji lengkeng menggunakan emulgator Phytocream. Krim antioksidan yang dibuat menggunakan ekstrak biji lengkeng karena telah diketahui memiliki nilai antioksidan yang tinggi karena kandungan beberapa jenis polifenol seperti korilagin, asam galat, dan asam elagat. Ekstrak ini diperoleh dengan cara mengekstraksi biji lengkeng dengan menggunakan penyari air. Berdasarkan kandungan kimia dan tingginya aktivitas antioksidan pada ekstrak biji lengkeng, Muttaqin telah memformulasi ekstrak biji lengkeng menjadi bentuk sediaan krim dengan menggunakan emulgator Phytocream 2,5; 5; dan 10% ( b / b ). Dari hasil uji kestabilan fisik didapatkan formulasi paling stabil yaitu pada konsentrasi 5% b / b (3). Krim yang dibuat merupakan tipe emulsi minyak dalam air (m/a) menggunakan emulgator phytocream 5%. Sediaan krim yang stabil secara fisik merupakan salah satu syarat sebuah produk kosmetik. Syarat lain yang harus dipenuhi adalah keamanan produk kosmetik. Krim yang telah diuji kestabilan fisiknya, lalu diuji keamanannya melalui uji iritasi. Dalam penelitian ini ekstrak biji lengkeng digunakan sebagai kontrol positif sebagai bahan yang menimbulkan iritasi. Bahan tambahan lain di dalam krim juga memiliki sifat mengiritasi, karena itu selain formula krim dan ekstrak biji lengkeng digunakan pula sebagai pembanding basis krim dari formula. Dari masing-masing sampel iritan, diambil 0,5 g untuk dioleskan di atas kulit kelinci seluas 1 inchi persegi yang telah dicukur. Ada 4 bagian dari kulit kelinci yang dicukur, masingmasing untuk formula (B); basis formula tanpa ekstrak (C); ekstrak biji lengkeng (D); dan tanpa pemberian (A). Setelah diolesi masing-masing sampel, bagian punggung ditutupi dengan kasa steril dan dibalut dengan perban. Setelah 24 jam pemberian, perban dibuka lalu dibiarkan terbuka selama 1 jam untuk membiasakan kulit yang terbuka. Setelah itu, pengamatan dilakukan sesuai dengan metode scoring Draize. Kemudian, dengan perban yang sama punggung kelinci kembali diperban untuk pengamatan 72 jam setelah pemberian. Pengamatan uji iritasi dengna metode Draize dilakukan berdasarkan 2 hal, yaitu pada penampakan eritema dan bentuk luka, serta besarnya udema yang ditimbulkan. Dari hasil pengamatan dan penghitungan indeks iritasi diperoleh, untuk formula krim dan basis krim tanpa ekstrak, nilai indeks iritasi menunjukkan sedikit mengiritasi (rentang 0,04 0,99), sedangkan kontrol positif yaitu ekstrak biji lengkeng menunjukkan tingkat iritasi ringan (rentang 1,00-2,99), sedangkan kontrol negatif tanpa perlakuan tidak menunjukkan reaksi (0). Hasil ini ditunjukkan pada tabel 3. Nilai indeks iritasi yang ditunjukkan krim antioksidan ekstrak biji lengkeng adalah sedikit

4 58 Majalah Farmasi dan Farmakologi, Vol. 17, No.2 Juli 2013, hlm (ISSN : ) mengiritasi. Hasil ini tidak tergolong membahayakan, karena pada dasarnya sensitivitas kulit hewan coba sedikit berbeda dengan kulit manusia. Untuk nilai indeks iritasi yang ditunjukkan ekstrak adalah iritasi ringan disebabkan karena struktur ekstrak yang tersuspensi dalam globul yang lebih besar, sehingga menimbulkan iritasi kulit. KESIMPULAN Dari hasil penelitian dan pembahasan, maka dapat ditarik kesimpulan bahwa, krim antioksidan ekstrak biji lengkeng menunjukkan indeks sedikit mengiritasi (rentang 0,04 0,99). DAFTAR PUSTAKA 1. Rukmana, R Prospek Agrobisnis dan Teknik Budaya Lengkeng. Penerbit Kanisius. Hal Rangkadilok, N., Sitthimonchai, S., Worasuttayangkurn, L., Mahidol, C., Ruchirawat, M., and Satayavivad, J Evaluation of Free Radical Scavenging and Antityrosinase Activities of Standardized Longan Fruit Extract, Department of Pharmacology, Mahidol University, Bangkok. 3. Muttaqin, M.K., Studi Formulasi dan Evaluasi Krim Ekstrak Biji Lengkeng (Euphoria longana (Lour.) Stend). Skripsi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin. Makassar. Hal Lu, F.C., Lu s Basic Toxicology: Fundamentals, Target Organs and Risk Assessment. 4 th ed. Taylor & Francis, New Fetter Lane, London. pp Available as PDF file 5. Nasution. Alergi dan Iritasi Kulit pada Keadaan sehari-hari. Cermin Dunia Kedokteran. No.80, hal Diunduh dari id/files/cdk/files/38_alergidaniritasikulitpadakea daanseharihari.pdf/38_alergidaniritasikulitpada KeadaanSeharihari.pdf pada 27 Februari World Health Organization Bahaya Bahan Kimia pada Kesehatan Manusia dan Lingkungan. Jakarta: EGC. 7. Draize, J.H Dermal Toxicity. The Association of Food and Drug Officials of the United States, Bureau of Food and Drugs, Austin, TX. pp Available as PDF file. 8. Sunarjono, H Jenis Tanaman Buah. Perpustakaan Pusat : Bogor. Hal Amiruddin, M.D Ilmu Penyakit Kulit. Bagian Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin. Lembaga Penerbitan UNHAS. Makassar. hal 133, Adris, A. Pengetahuan Dasar Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin. Universitas Indonesia : Jakarta Hal Maton, A., Jean, H., Charles, W., McLaughlin., Susan, J., Maryanna, Q., David, L., Jill, D Human Biology and Health. Englewood Cliffs, New Jersey, USA. 12. Kartadisastra, R Ternak Kelinci. Kanisius. Yogyakarta. Hal Suryanto, L.W Luka dan Perawatannya. RSUD Ngudi Waluyo Wlingi. Buton. Hal Deputi Bidang Pengawasan Obat Tradisional, Kosmetik dan Produk Komplemen Peraturan Perundang-Undangan di Bidang Kosmetik. Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI. Jakarta. hal Burges, C.M Cosmetic Dermatology. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. Germany. pp. 18. Available as PDF file. 16. Triayu, S.I Krim Obat Jerawat Minyak Atsiri. Universitas Muhammadiyah Surakarta. Hal 9-10.

5 Irsan, dkk, Uji Iritasi Krim Antioksidan Ekstrak Biji Lengkeng 59

6 60 Majalah Farmasi dan Farmakologi, Vol. 17, No.2 Juli 2013, hlm (ISSN : )