JURNAL FARMASI UDAYANA

Transkripsi

1 JURNAL FARMASI UDAYANA VOLUME IV, NOMOR 2, DESEMBER 2015 VOLUME IV NOMOR 2 HALAMAN EDISI DESEMBER 2015 PENERBIT JURUSAN FARMASI FMIPA UNIVERSITAS UDAYANA BUKIT JIMBARAN - BALI

2 JURNAL FARMASI UDAYANA DAFTAR ISI INFORMASI BAGI PENULIS Deskripsi Pembaca Editor Petunjuk Penulisan DESKRIPSI Jurnal Farmasi Udayana merupakan jurnal elektronik yang dikelola oleh jurusan Farmasi FMIPA Udayana. Jurnal ini yang merupakan media publikasi penelitian dan review article pada semua aspek ilmu farmasi yang bersifat inovatif, kreatif, original dan didasarkan pada scientific. Artikel yang dimuat dalam jurnal ini meliputi penemuan obat, sistem penghantaran obat serta pengembangan obat. Jurnal ini memuat bidang khusus di farmasi seperti kimia medisinal, farmakologi, farmakokinetika, farmakodinamika, analisis farmasi, sistem penghantaran obat, teknologi farmasi, bioteknolofi farmasi, obat herbal dan komponen aktif tanaman serta evaluasi klinik obat. PEMBACA Ilmuwan di bidang kimia medisinal, farmasetika dan biofarmasetika, farmakologi, kimia analisis, farmakologi klinik, mikrobiologi, bioteknologi, kimia dan statistika EDITOR Penanggung jawab : Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si Pengarah : Drs. I Made Satriya Wibawa, M.Si Anak Agung Bawa Putra, S.Si., M.Si Dr.rer.nat. IMAG. Wirasauta, M.Si., Apt Editor : Ketua Dewan Redaksi : Cokorda Istri Sri Arisanti, S.Farm., M.Si., Apt Wakil Dewan Redaksi : Ni Kadek Warditiani, S.Farm., M.Sc., Apt Mitra Bestari: Ketua : Luh Putu Febryana Larasanty, S.Farm.,M.Sc., Apt Anggota: a. Ni PutuAriantari, S.Farm., M.Farm., Apt (Biologi Farmasi) b. I G. N. Agung Dewantara, S.Farm., M.Sc., Apt (Teknologi Farmasi) c. Ni Made Pitri Susanti, S.Farm., M.Si. Apt (Kimia Farmasi) jurnalfarmasiudayana@gmail.com INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 i

3 PETUNJUK PENULISAN PENDAHULUAN Naskah yang diajukan ke jurnal harus memenuhi persyaratan sebagai berikut: (1) topik artikel akan melewati proses review terlebih dahulu oleh editor, dan (2) artikel belum dipublikasikan atau akan dipublikasikan seluruhnya atau sebagian di jurnal lain atau media publikasi yang lain. Tipe artikel Artikel hasil penelitian Review article Naskah review article harus memuat: judul, abstrak dan kata kunci (3-6 kata), pendahuluan, pembahasan khusus oleh penulis, kesimpulan, ucapan terima kasih, daftar pustaka, gambar dan tabel. Tiap pokok bahasan dari pendahuluan sampai kesimpulan harus diberi nomor. Sub pokok bahasan juga harus dinomori dengan 1.1., 1.2., 1.3., dan seterusnya. Setiap halaman harus diberi nomor dan judul harus diberi halaman 1. FAKTOR YANG HARUS DIPERHATIKAN Conflict of interest Semua penulis wajib menghindari terjadinya Conflict of interest yang meliputi pembiayaan atau hubungan dengan orang lain atau badan paling lama tiga tahun sebelum pengajuan artikel ke jurnal yang dapat mempengaruhi secara langsung maupun tidak langsung penelitian yang bersangkutan Contoh hal yang potensial menyebabkan Conflict of interest antara lain pekerja, konsultan, kepemilikan bahan, honor, pengajuan registrasi/paten, hibah atau sumber dana yang lain. Verifikasi Artikel Artikel yang diajukan ke Jurnal Farmasi Udayana belum pernah dipublikasikan sebelumnya (kecuali dalam bentuk abstrak atau sebagai bagian dari skripsi), tidak dalam posisi akan diterbitkan pada jurnal lain, artikel telah mendapat persetujuan semua penulis yang tercantum di dalam artikel yang bersangkutan dan secara eksplisit telah mendapat persetujuan dari tempat dimana penulis melakukan penelitian dan jika diterima, artikel tidak dipublikasikan di tempat lain dalam bentuk yang sama dalam bahasa Indonesia atau bahasa lainnya untuk menghindari plagiarisme Konstribusi Semua penulis harus berpartisipasi di dalam penelitian dan atau penyipan naskah, sehingga fungsi dari masing-masing penulis harus didefinisikan. INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 ii

4 Kepemilikan artikel Semua penulis harus memiliki peran penting pada setiap tahap pengajuan artikel yang meliputi: (1) konsep dan desain penelitian, pengolahan data atau menganalisis atau menginterpretasi data, (2) memperbaiki naskah, (3) menyetujui draf akhir yang akan dipublikasikan Perubahan penulis Pada jurnal ini dimungkingkan untuk menambahkan, pengurangi, mengubah urutan penulis untuk naskah yang diterima. Hal-hal yang perlu dilakukan antara lain: membuat permintaan untuk dapat menambahkan, mengurangi atau mengubah urutan penulis kepada pengelola jurnal yang diajukan oleh corresponding author yang dicantumkan di dalam naskah yang diajukan dan meliputi: (a) alasan mengapa nama penulis harus ditambahkan, dikurangi atau diubah susunannya (b) konfirmasi tertulis ( , fax, surat) dari semua penulis yang menyatakan persetujuan dengan perubahan tersebut di atas Bahasa Penulisan menggunakan bahasa Indonesia sesuai ejaan yang disempurnakan. PERSIAPAN Penggunaan program miscrosoft word. File dibuat dalam format asli menggunakan program miscrosoft word. Teks harus dibuat dalam format satu kolom, huruf font Times new roman 11, 1 spasi, ditulis dalam kertas ukuran A4. Struktur Artikel Sub pokok bahasan-penomoran Artikel dibagi menjadi pokok bahasan dengan penomoran yang jelas. Sub pokok bahasan harus diberi nomor 1.1 (kemudian 1.1.1, 1.1.2,...), 1.2 dan seterusnya. Abstrak tidak dimasukkan dalam sistem penomoran. Pendahuluan Nyatakan tujuan dan landasan penelitian, hindari tinjauan pustaka yang terperinci atau kesimpulan dari hasil penelitian Bahan dan metode Ungkapkan bahan dan metode secara terperinci untuk kemungkinan keterulangan penelitian. Metode yang umum digunakan cukup menunjukkan sumber pustaka, hanya modifikasi yang relevan yang harus dideskripsikan Hasil Pengungkapan hasil harus jelas dan ringkas Pembahasan Bagian ini harus merupakan kajian mendalam dari hasil penelitian, jangan mengulang pengungkapan hasil. Hindari kutipan dan pembahasan yang berlebihan dari penelitian sebelumnya INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 iii

5 Kesimpulan Kesimpulan utama dari penelitian sebaiknya ditampilkan dalam kalimat yang singkat dan jelas, yang dapat menjadi bagian tersendiri di dalam pokok bahasan kesimpulan atau menjadi bagian dari pembahasan atau hasil Appendik Jika apendik lebih dari satu maka harus dibuat sebagai A, B dan seterusnya. Persamaan matematika harus diberi nomor terpisah: Pers. (A.1), Pers. (A.2) dan seterusnya. Hal yang sama juga berlaku untuk tabel dan gambar: Tabel A.1; Gambar. A.1 Informasi penting dalam struktur artikel Judul Ringkas, jelas dan informatif. Jika dimungkinkan hindari pencantuman persamaan matematika dan singkatan Nama penulis dan institusi Ungkapkan institusi tempat bekerja (tempat dimana penelitian dilakukan) di bawah nama penulis. Tunjukkan institusi penulis dengan supercript di belakang nama penulis dan didepan nama institusi. Tuliskan alamat lengkap termasuk kode pos dan nama kota, jika perlu disertakan alamat masing-masing penulis Alamat korespondensi Tunjukkan dengan jelas siapa yang bertanggung jawab terhadap korespondensi semua tahap dari pengajuan, revisi, publikasi maupun sampai pasca publikasi. Cantumkan nomor telepon disamping alamat , kode pos. Kontak terperinci harus tetap diperbaharui oleh korespondensi penulis Alamat penulis Jika alamat penulis berbeda dibandingkan dengan tempat penelitian semula, maka alamat terbaru atau tetap penulis sebagai catatan kaki dari nama penulis. Alamat dimana penelitian semula dilakukan oleh penulis tetap digunakan sebagai alamat utama. Penulisan catatan kaki untuk alamat terbaru maupun alamat tetap menggunakan supercrip dengan penomoran Arabic Abstrak Dibutuhkan abstrak yang jelas, ringkas dan sesuai fakta penelitian. Abstrak harus menunjukan tujuan penelitian secara tegas, hasil yang penting dan kesimpulan umum. Untuk memenuhi persyaratan abstrak ini, disarankan untuk tidak menyertakan tinjauan pustaka, tetapi jika sangat diperlukan wajib mengutip nama penulis dan tahun. Disamping itu dihindari pencantuman singkatan yang tidak umum tetapi jika sangat diperlukan maka harus dijelaskan pada awal abstrak itu sendiri Gambar Gambar harus dibuat untuk menyimpulkan isi dari artikel secara jelas untuk dapat menarik perhatian pembaca yang berasal dari berbagai bidang yang berhubungan INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 iv

6 dengan farmasi. Gambar harus dibuat dalam bagian terpisah dari artikel. Ukuran gambar: sediakan gambar dengan minimal setara 531x1328 pixel atau lebih, tetapi dapat tetap terbaca pada layar 200x500 pixel (pada 91 dpi yang sama dengan 5 x13 cm). Program yang digunakan dapat berupa pdfatau MS Word Kata kunci Kata kunci maksimal 6 kata diletakkan langsung di bawah abstrak, hindari penggunaan frase dan penghubung (dan, dari dan sebagainya) Singkatan Deskripsikan singkatan yang tidak umum sebagai catatan kaki pada halaman pertama artikel. Singkatan yang menjadi keharusan untuk diungkapkan pada abstrak diwajibkan didefinisikan pada bagian sebelum singkatan tersebut ditulis. Penulisan singkatan harus konsisten pada seluruh artikel. Ucapan terima kasih Cantumkan ucapan terima kasih pada bagian terpisah di bagian akhir artikel sebelum daftar pustaka, hindari penyertaan ucapan terima kasih pada judul, sebagai catatan kaki judul atau bagian artikel lainnya. Buatlah rincian orang yang berkontribusi di dalam penelitian (penerjemah, pengetik atau pembaca dan lain sebagainya) Unit Gunakan satuan internasional (SI). Jika satuan diungkapkan dalam unit yang berbeda, sebaikknya diungkapkan kesetaraan dengan SI Tabel Penomoran tabel diurut berdasarkan urutan munculnya di dalam artikel. Tabel dibuat dengan tiga garis horisontal, hindari penggunaan garis vertikal dan data yang diungkapkan di dalam tabel tidak diungkapkan berulang pada bagian lain dari artikel Daftar pustaka Pastikan daftar pustaka tercantum di dalam artikel. Hasil yang belum dipublikasikan dan personal communication tidak direkomendasikan dimasukkan di dalam daftar pustaka. Pustaka yang ditandai dengan In Press menunjukan bahwa artikel tersebut telah disetujui untuk dipublikasikan dan dapat digunakan sebagai sumber pustaka. Penulisan pustaka mengikuti aturan penulisan pustakan jurnal ini. Aturan penulisan pustaka Daftar pustaka harus diurut berdasarkan alfabetis dan kronologi. Jika terdapat lebih dari satu sumber yang berasal dari penulis yang sama pada tahun yang sama, maka harus ditambahkan a, b, c dan seterusnya di belakang tahun terbit. Penulisan buku Penulis, A.A., Penulis, B.B., & Penulis, C.C. (tahun terbit). judul buku: sub judul. (Edisi [jika bukan edisi pertama}). tempat terbit: penerbit INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 v

7 Contoh: Buku dengan satu penulis Nama penulis (tanpa singkatan). (tahun terbit). judul buku. Tempat terbit: penerbit Reynords Hadi. (2000). Black pioners. Ringwood,Vic: Penguin Buku dengan banyak penulis Dua-enam penulis Dua penulis: kedua penulis. (tahun terbit). judul buku. Tempat terbit: penerbit Gilbert, R., & Gilbert, P. (1998). Maculinity goes to school. St. Leonards, N.S.W.: Allen & Unwin Lebih dari 6 penulis Setelah nama dan singkatan nama penulis ke-enam gunakan dkk Buku yang memiliki editor Broinowski, A. (Ed.) (1990). ASEAN into 1990s. London: Macmillan Nugent, S.L., Shore, C. (Eds.). (1997). Anthropologyband cultural study. London: Pluto Press Buku yang memiliki penulis dan editor Valery, P. (1957). Oeuvres (J. Hytier, Ed). Paris: Gallimard Bab yang terdapat di dalam buku Penulis, singkatan nama penulis. (tahun terbit). judul bab:sub judul. editor. judul buku. (hal. x-y). tempat terbit: penerbit Artikel jurnal Penulis, singkatan nama penulis. (tahun terbit). judul artikel. singkatan jurnal, volume (issue), halaman Skipsi/Tesis/Disertasi Nama penulis, singkatan nama penulis. (tahun terbit). judul. skrispi/tesis/disertasi. Universitas, kota Sumber penulisan singkatan jurnal Index Medicus journal abbreviations: http// List of titlle word abbreviations: http// CAS (Chemical Abstract Service): http// Submission checklist Daftar isian di bawah ini dapat digunakan untuk memudahkan pemeriksaan akhir sebelum artikel dikaji oleh editor. Satu orang penulis ditunjuk sebagai corresponding author: alamat kode pos nomor telepon atau fax Semua file yang dibutuhkan telah diupload Kata kunci Gambar INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 vi

8 Tabel (termasuk judul, deskrispi, catatan kaki) Hal selanjutnya yang harus diperhatikan Gunakan penomoran baris (tiap 5 baris) untuk memudahkan pengkajian naskah Naskah telah dicek tata bahasa dan pengucapannya Pustaka telah ditulis sesuao format di dalam jurnal ini Semua pustaka yang ditulis di dalam daftar pustaka disinggung di dalam teks Izin telah didapat dari untuk materi yang memiliki hak cipta yang berasal dari sumber lain (termasuk web) SETELAH ARTIKEL DITERIMA Perbaikan Naskah yang telah dikoreksi akan dikirimkan kembali dalam bentuk pdf kepada corresponding author (melalui alamat ) sehingga penulis dapat mengunduh untuk keperluan pribadi. Gunakan perbaikan ini untuk mengecek urutan penulisan, mengedit, menyempurnakan dan memperbaiki tulisan, tabel dan gambar. Pengiriman naskah yang telah diperbaiki menyertakan koreksi pertama dari editor ini. Perubahan signifikan dari artikel yang disetujui untuk dipublikasikan dalam jurnal ini harus mendapat persetujuan dari penerbit. Kami akan berusaha untuk mempublikasikan artikel anda akurat dan cepat sehingga diharapkan kami menerima hasil koreksi anda paling lambat 5 hari kerja. Sangat penting koreksi artikel dilakukan dalam satu kali komunikasi sehingga cermati hal-hal yang harus dikoreksi sebelum dikirimkan kembali ke editor jurnal. Naskah yang dipublikasikan Artikel akan diberikan kepada corresponding author dalam bentuk pdf melalui . Penulis akan menerima artikel sesuai format yang terbit di dalam jurnal dan disertai dengan cover jurnal. INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 vii

9 DAFTAR ISI Halaman Judul... Informasi Bagi Penulis di Jurnal Farmasi Udayana... Petunjuk Penulisan... Daftar Isi... Hal i ii viii 1 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C 1 2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kedondong Hutan Terhadap Volume Organ Hati Mencit Betina Pengaruh Kombinasi Asam Oleat dan Minyak Atsiri Daun Cengkeh (Syzygium aromaticum L.) Sebagai Permeation Enhancer Terhadap Karakter Fisik dan Pelepasan Ketoprofen dari Matriks Patch Transdermal Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol 80% Daun Spondias pinnata Terhadap Volume Organ Ginjal Mencit Betina Validasi Metode Analisis Penetapan Kadar α-mangostin pada Gel Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) dengan KLT-Spektrofotodensitometri Uji Eritema dan Edema Secara In Vivo pada Natrium Lauril Sulfat 10% 25 7 Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi dan Refluks terhadap Rendemen Andrografolid dari Herba Sambiloto Efek Pemberian Ekstrak Etanol Daun Spondias pinnata Terhadap Berat Organ Ginjal Mencit Betina Optimasi Formula Matriks Patch Ketoprofen Transdermal Menggunakan Kombinasi Asam Oleat dan Minyak Atsiri Bunga Cempaka Putih (Michelia alba) sebagai Permeation Enhancer Pemisahan Fraksi Terpenoid dari Ekstrak Etanol 90% Daun Katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr) Menggunakan Kromatografi Kolom Uji Sifat Fisik Cold Cream Kombinasi Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.), Daun Binahong (Anredera cordifolia), dan Herba Pegagan (Centella asiatica) sebagai Antiluka Bakar Pemberian Ekstrak Etanol Spondias pinnata Terhadap Volume Organ Hati Mencit Jantan Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Daun Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C Pengaruh Penggunaan Propilenglikol dan Mentol Terhadap Matrik Patch Transdermal Ekstrak Air Herba Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm. f) Nees Pengaruh Pemberian Fraksi Terpenoid Daun Katuk (Sauropus Androgynus (L.) Merr) Terhadap Profil Lipid Tikus Putih (Rattus Novergicus, L.) Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Pakan Kaya Lemak Rendemen VCO (Virgin Coconut Oil) yang Diperoleh dengan Penambahan Enzim Papain dan Bromealin Stabilitas Formalin Terhadap Pengaruh Suhu dan Lama Pemanasan Pengembangan Metode Refluks untuk Ekstraksi Andrografolid dari Herba Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanol Limbah Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus polyrhizus) pada Sel Kanker Payudara Secara In Vitro dan In Silico Pemberian Ekstrak Etanol Spondias pinnata Terhadap Volume Organ Ginjal Mencit Jantan INFORMASI UNTUK PENULIS DESEMBER 2015 viii

10 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) UJI AKTIVITAS ADAPTOGENIK EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG BIDARA (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) DENGAN METODE SWIMMING ENDURANCE TEST PADA MENCIT GALUR BALB/C Samirana, P. O. 1, Putra, P. A. S. 1, Leliqia, N. P. E. 1 1 Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Korespondensi: Putu Ari Setyadi Putra Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Jalam Kampus Unud-Jimbaran, Jimbaran-Bali, Indonesia Telp/Fax: putuarisetyadiputra@gmail.com ABSTRAK Ziziphus mauritiana atau bidara telah diketahui memiliki aktivitas antioksidan. Adanya teori yang menyatakan keterkaitan antara aktivitas antioksidan dengan adaptogenik membuat tumbuhan ini diduga memiliki potensi sebagai adaptogen. Tujuan dari penelitiaan ini adalah untuk mengetahui aktivitas adaptogenik dari kulit batang Z. mauritiana. Uji aktivitas adaptogenik dilakukan dengan metode swimming endurance test. Hewan uji yang digunakan dibagi dalam 6 kelompok perlakuan dan diuji kemampuan renangnya. Waktu renang hewan uji sampai tenggelam diukur dan selanjutnya dianalisis secara statistik. Ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana dikatakan memiliki aktivitas adaptogenik bila waktu renang kelompok yang diberikan ekstrak lebih lama jika dibandingkan dengan kelompok kontrolnegatif (p< 0,05). Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana mampu meningkatkan kemampuan renang mencit pada dosis 200, 400, dan 800 mg/kg BB dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif. Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana memiliki aktivitas adaptogenik. Aktivitas ini tidak terlepas dari peran beberapa golongan senyawa dan beberapa diantaranya diduga merupakan senyawa golongan triterpenoid dan flavonoid. Kata kunci : Ziziphus mauritiana, swimming endurance test, antioksidan, adaptogenik, kulit batang 1. Pendahuluan Stres merupakan suatu respon yang timbul akibat ketidakmampuan individu untuk menerima beban fisik dan psikologik yang melebihi batas kemampuannya (Riley, 1981). Stres dapat dialami setiap individu yang apabila tidak ditangani dalam jangka panjang dapat memicu timbulnya berbagai penyakit seperti hipertensi, penyakit jantung, kecemasan, depresi, gangguan kognitif dan sindrom kelelahan kronis (Vinod and Shivakumar, 2012). Selama kondisi stres, terjadi peningkatan kebutuhan energi di dalam tubuh organisme yang menyebabkan peningkatan produksi radikal bebas (Kenjale et al., 2007). Radikal bebas berlebih dapat memicu ketidakseimbangan dengan antioksidan di dalam tubuh yang mana kondisi ini disebut dengan stres oksidatif. Stres oksidatif dapat menggangu keseimbangan homeostasis dan allostasis yang berdampak pada terganggunya seluruh sistem di dalam tubuh, termasuk sistem pertahanan tubuh untuk melawan stres itu sendiri. Kondisi ini dapat menyebabkan kelelahan fisik berlebih yang berakibat pada terjadinya penurunan kinerja fisik dan mental individu yang mengalami stres. Individu yang mengalami 1

11 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) stres dapat mengalami kesulitan dalam beradaptasi. Beberapa upaya dapat dilakukan untuk menangani kondisi ini salah satunya dengan penambahan asupan mikronutrien berupa adaptogen (Vinod and Shivakumar, 2012). Adaptogen merupakan istilah untuk suatu bahan yang dapat membantu tubuh beradaptasi terhadap stres. Secara empiris adaptogen banyak digunakan dalam bentuk tonik yang diberikan untuk meningkatkan vitalitas tubuh selama atau setelah masa pemulihan penyakit dan ketika terjadi perubahan kondisi lingkungan hidup. Terdapat satu teori dari Dardymov dan Kirkorian yang menyatakan bahwa aktivitas adaptogenik dari suatu senyawa berkaitan erat dengan adanya aktivitas antioksidan dari senyawa tersebut (Vinod and Shivakumar, 2012). Hal ini dikarenakan aktivitas antioksidan dapat menangkal radikal bebas seperti radikal anion superoksida, radikal hidroksil dan hidrogen peroksida yang dihasilkan selama stres terjadi (Mehta et al., 2012). Ziziphus mauritiana atau di Indonesia umumnya dikenal dengan bidara, merupakan tumbuhan yang memiliki khasiat pengobatan. Tumbuhan initelah dilaporkan memiliki beberapa aktivitas diantaranya sebagai antikanker, antiobesitas, dan antioksidan (Mishra et al., 2011; Bhatia et al., 2010; Perumal et al., 2012). Aktivitas antioksidan dari Z.mauritiana telah dibuktikan melalui beberapa penelitian (Abalaka et al,2011; Perumal et al, 2012; Rahman, 2012). Aktivitas antioksidan yang dimiliki Z. mauritiana membuat tumbuhan ini diduga memiliki potensi sebagai adaptogenik. Selain itu, secara empiris tumbuhan Z. mauritiana diketahui dapat digunakan sebagai tonik (Gaur and Sharma, 2013). Tujuan penelitian adalah pada untuk mengujiaktivitas adaptogenikdari ekstrak etanol 96% kulit batang Ziziphus mauritianadengan metode swimming endurance test secara in vivo pada mencit galur Balb/C. 2. Bahan dan Metode 2.1 Bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian meliputi kulit batang Z. mauritiana, etanol 96%, Vitamin C, aquadest, dan CMC-Na 0,5%. 2.2 Hewan Uji Hewan uji yang digunakan berupa mencit galur Balb/C berjenis kelamin jantan, sehat (tidak cacat), yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan antara 25 sampai 30 gram. Evaluasi kelayakan etik (ethical clearance) terhadap perlakuan hewan uji dilakukan oleh Komisi Etik Penggunaan Hewan untuk Pendidikan dan Penelitian, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana 2.3 Preparasi Sampel Kulit batang Z. mauritiana didapatkan dari lingkungan Kampus Farmasi, Universitas Udayana, Bukit Jimbaran, Bali. Sampel kulit batang yang didapatkan selanjutnya dikeringkan terhindar dari sinar matahari langsung. Pembuatan serbuk simplisia dilakukan dengan menggunakan blender dan pengayak. 2.4 Ekstraksi Proses ekstraksi kulit batang Z. mauritianadilakukan dengan metode maserasi. Serbuk kulit batang Z. mauritiana kering ditimbang sebanyak 1kg, kemudian dimaserasi dengan pelarut etanol 96% selama ± 24 jam yang diikuti dengan pengadukan. Proses penyaringan dilakukan setelah proses ekstraksi selesai. Residu yang ada selanjutnya dimaserasi kembali dengan cara yang sama dengan pengulangan sebanyak dua kali. Filtrat dari masing-masing proses selanjutnya ditampung dalam satu wadah dan diuapkan dengan menggunakan alat rotary evaporator pada suhu o C. Rendemen ekstrak kemudian dihitung dengan persamaan 1. 2

12 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/ /C ( Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) %Rendemen = A x 100%......(1) A0 Keterangan: A1 = Bobot ekstrak yang didapatkan A0 = Bobot serbuk simplisia yang dimaserasi 2.5 Uji Aktivitas Adaptogenik dengan Swimming Endurance Test Metode yang digunakan dalam uji Aktivitas Adaptogenik diadaptasi dari penelitian yang dilakukan Duraisami et al. (2010) dan Habbu et al. (2010). Hewan uji dibagi ke dalam 6 kelompok (masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor mencit) yang terdiri dari kelompok kontrol normal (tidak diberi perlakuan), kontrol positif (diberikan vitamin C 100 mg/kg BB), kontrol negatif (diberikan CMC-Na 0,5% %), dan sisanya diberikan ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana dengan dosis 200, 400, dan 800 mg/kg BB. Pemberian perlakuan dilakukan selama 7 hari dan satu jam setelah pemberian terakhir dilakukan swimming endurance test pada keseluruhan kelompok dalam tabung silinder gelas dengan tinggi 31 cm dan berdiameter 9,5 cm yang berisi air padaa suhu ruangan sampai ketinggian 20 cm. Mencit dibiarkan berenang sampai mencit tenggelam. Waktu renang mencit hingga mencit tenggelam selanjutnya diukur. 2.6 Analisis Data Dataa yang diperoleh berupa waktu renang mencit hingga tenggelam. Dataa dianalisis secara statistik dengan uji ANOVA one way dan analisis LSD dengan taraf kepercayaan 95%. Dataa dinyatakan berbeda bermakna jika memiliki nilai signikansi lebih kecil dari 0,05 (p< 0,05). 3. Hasil 3.1 Ekstraksi A1 Berdasarkan hasil proses maserasi didapatkan maserat sebanyak 13,742 L yang selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator. Ekstrak kering yang didapat dari hasil proses penguapan sebanyak 76,2098 g. Berdasarkan hasil ini diketahui persen rendemen yang didapat dari hasil proses maserasi kulit batang Z.mauritianaa sebesar 7,6%. 3.2 Uji Aktivitas Adaptogenik dengan Swimming Endurance Test Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan didapatkan data rata-rata waktu renang mencit masing-masin ng kelompok perlakuan seperti yang ertera pada gambar 1. Gambar 1. Rata-rata waktu renang mencit 4. Pembahasan Proses ekstraksi dengan metode maserasi dari serbuk kulit batang Z. mauritiana menghasilkan persentase rendemen ekstrak sebesar 7,6% %. Berdasarkan hasil studi pustaka diketahui rentang rendemenn hasil proses ekstraksi kulit batang Z. mauritiana menggunaka an pelarut metanol dan etanolberkisar antara 2,69% %-24,29% (Talmale et al., 2014; Rahman, 2012: Siddhart et al., 2010; Samirana, 2014). Sementara untuk ekstrak kulit batang Z. mauritiana yang diekstraksi dengan pelarut etanol berkisar antara 2,69% %-12,5% (Talmale et al., 2014; Rahman, 2012). Jika dibandingkan dengan hasil proses ekstraksi yang dilakukan, rendemen hasil proses ekstraksi kulit 3

13 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) batang Z. mauritiana yang diperoleh berada dalam rentang. Variasi rendemen hasil proses ekstraksi ini dapat dipengaruhi oleh banyak parameter diantaranya seperti metode ekstraksi, pelarut yang digunakan untuk ekstraksi, ukuran partikel serbuk simplisia, suhu ekstraksi dan lama proses ekstraksi (Talmale et al., 2014; Baccarin et al., 2014; Lawson et al., 2010). Sehingga proses optimasi parameter-parameter yang berpengaruh terhadap ekstraksi perlu dilakukan untuk mendapatkan rendemen hasil yang lebih optimal. Hasil analisis LSD menunjukkan tidak terdapat perbedaan waktu renang yang bermakna antara kelompok kontrol normal dengan kelompok kontrol negatif (p>0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa pembawa yang digunakan (CMC-Na) tidak memberikan efek pada hewan uji. Kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana dosis 200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB, dan 800 mg/kg BB menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<0,05) dengan kelompok kontrol negatif. Hal ini menunjukkan bahwa vitamin C dan ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana yang diberikan memiliki aktivitas adaptogenik. Kelompok perlakukan yang diberikan ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana dengan dosis 200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB dan 800 mg/kg BB memiliki waktu renang yang lebih besardan berbedabermakna (p<0,05) dibandingkan dengan kelompok kontrol positif. Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana dengan dosis 200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB dan 800 mg/kg BB memiliki aktivitas adaptogenik yang lebih besar dibandingkan dengan vitamin C.Selain itu, terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05) dari waktu renang mencit pada kelompok yang diberikan ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana antara dosis 200 mg/kg BB, 400 mg/kg BB dan 800 mg/kg BB yang mana terjadi peningkatan waktu renang mencit seiring bertambahnya dosis yang diberikan. Hasil ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana pada dosis 800 mg/kg BB lebih baik dalam memberikan aktivitas adaptogenik dibandingkan dengan dosis 200 mg/kg BB dan 400 mg/kg BB. Vitamin C yang merupakan senyawa antioksidan berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan memiliki aktivitas adaptogenik. Berdasarkan hal ini aktivitas antioksidan diduga berkontribusi terhadap aktivitas adaptogenik. Rahman (2012), melaporkan ekstrak etanol kulit batang Ziziphus mauritianamemiliki aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH dengan nilai IC 50 sebesar 27,47 μg/ml dibandingkan dengan standar asam askorbat yang memiliki nilai IC 50 sebesar 18,63 ± 0,19 μg/ml. Berdasarkan nilai IC 50, vitamin C memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak etanol kulit batangz. mauritiana.akan tetapi dari hasil uji SET vitamin C memiliki aktivitas adaptogenik lebih rendah secara bermakna dibandingkan dengan ekstrak dosis 200, 400 dan 800 mg/kg BB. Hal ini menandakan bahwa aktivitas adaptogenik dari kulit batangz. mauritiana tidak hanya disebabkan oleh aktivitas antioksidan melalui mekanisme penangkapan radikal bebas melainkan juga mekanisme lainnya yang didukung oleh senyawa-senyawa lain yang terkandung di dalamnya. Gaur and Sharma (2013) melaporkan kulit batang Z. mauritiana mengandung beberapa golongan senyawa antara lain alkaloid, saponin, flavonoid, terpenoid dan fenolik. Beberapa kandungan senyawa tersebut yang diduga memiliki aktivitas adaptogenik adalah golongan senyawa flavonoid dan triterpenoid. Flavonoid yang merupakan senyawa antioksidan diduga mampu berkontribusi terhadap aktivitas adaptogenik dengan mekanismeregulasi molekul NO (Nitric Oxide) ketika stres terjadi. Selama kondisi stres terjadi, enzim JNK (enzim pemicu stres) meningkatkan 4

14 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) pembentuk kan radikal bebas yang salah satunya adalah NO yang mampu menghambat respirasi mitokondira. Terhambatnya respirasi mitokondria ini menyebabkan terjadinya penurunan produksi ATP yang berakibat kurangnya asupan energi sel. Rendahnya ATP di dalam sel menyebabkan sel mengalami stres oksidatif dan tidak berfungsinya protein Hsp (Heat shock protein) yang berperan dalam menghasilkan respon pertahanan terhadap stres (Panossian and Wikman, 2010). Senyawa flavonoid dari ekstrak 96% kulit batang Z. mauritiana yang berperan sebagai antioksidan diduga mampu mengurangi radikal bebas yang ada melalui pendonoran elektron dan mengembalikan fungsi normal mitokondria sehingga protein Hsp dapat berperan kembali dalam memberikan respon pertahanan terhadap stres. Panossian and Wikman (2010) menyatakan bahwa senyawa golongan triterpenoid dalam suatu tanaman dapat memiliki aktivitas adaptogenik. Golongan senyawa triterpenoid yang terdapat pada kulit batang Z. mauritiana diduga hampir sama dengan senyawa triterpenoid pada beberapa tanaman yang memiliki aktivitas adaptogenik lainnya seperti P. gingseng (ginsenosida), Bryonia alba (cucurbitasin R glukosida), dan E. senticosus (eleuterosida E) yang secara struktural mirip dengan kortikosteroid.mekanisme kerja senyawa golongan triterpenoid yang ada pada ekstrak kulit batang Z. mauritiana diduga terkait dengan regulasi mediasi aksis HPA melalui perantara reseptor glukokortikoid (GR) yang berperan dalam mengatur sekresi dari kortisol (Panossian and Wikman, 2010; Vinod and Shivakumar, 2012). Ketika kondisi stres terjadi, tubuh merespon stresor yang ada dan mengaktifkan beberapa enzim salah satunya adalah enzim JNK (enzim pemicu stres). Enzim ini akan menekan reseptor glukokortikoid di sitosol yang berakibat pada terhentinya fungsi penghambatan sekresi kortisol dan menyebabkan peningkatan kortisol dalam sistem sirkulasi. Kadar kostisol yang tinggi mampu membuat individu mengalami aktivasi respon stres yang berlebihan seperti depresi, kelelahan, penurunan konsentrasi, dan pengurangan daya kognitif. Senyawa golongan triterpenoid yang berperan sebagai adaptogen diduga mampu mengembalikan fungsi normal reseptor glukokortikoid sehingga sekresi kortisol kembali normal dan memberikan efek proteksi terhadap reaksi stres berlebih (Panossian and Wikman, 2010). 5. Kesimpulan Ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritiana memiliki aktivitas adaptogenik pada dosis 200, 400, dan 800 mg/kg BB yang mana dosis 800 mg/kg BB diketahui memiliki potensi adaptogenik yang lebih besar secara bermaknadibandingkan dengan dosis 200 mg/kg BB dan 400 mg/kg BB. Aktivitas adaptogenik dari ekstrak etanol 96% kulit batang Z. mauritianadiduga berasal dari peran beberapa golongan senyawa dan beberapa diantaranya diduga merupakan senyawa golongan triterpenoid dan flavonoid. Pustaka Abalaka, M.E.,A.Mann and S.O.Adeyomo Studies on In-Vitro Antioxidant and Free Radical Scavenging Potential and PhytochemicalScreening of Leaves of Ziziphus mauritiana L. and Ziziphus spinachristi L. Compared with Ascorbic Acid. J.Med.Gener.Genomics., 3(2): Alexander, P., M. Hambardzumyan and A. Hovhanissyan The Adaptogens Rhodiola and Schizandra Modify the Response to Immobilization Stress in Rabbits by Suppressing the Increase of Phosphorylated Stress Activated Protein Kinase, Nitric Oxide and Cortisol. Drug Target Insights.1: Baccarin, T., R. Ferreira, V. F. Gazoni. R. A. Yunes, A. Malheiros and M. L. Silva Influence of Extraction 5

15 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) Parameters on Hydroalcohol Extract of the Stem Bark of Rapanea ferruginea Mez Using Myrsinoic Acid B as Marker. Trop. J.Pharm.Res. 13(7): Bhatia A. andm. Tulica Hypoglycemic Activity of Ziziphus mauritianaaqueous Ethanol Seed Extract in Alloxan-induced Diabetic Mice. Pharmaceutical Biology.48(6): Deepak, R., G. Bhatia, T. Sen and G. Palit Antistress Effects of Ginkgo biloba and Panax ginseng: a comparative study. J Pharmacol Sci. 93: Di Hu, Y. C., R. He, N. Han, Z. Liu, L. Miao and J. Yin Schizandrin, an Antioxidant Lignan from Schisandra chinensis, Ameliorates Aβ1 42-Induced Memory Impairment in Mice. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, Article ID Page 7. Duraisami, R., M. Vijay, K. Amit Antistress, Adaptogenic Activity of Standardized Dried Extract of Aegle marmelos Against Diverse Stressors. Asian J Pharmaceutical and Clinical Research. 3(4): 1-3. Gaur A. and G. N. Sharma Ziziphus mauritiana Lam-an Overview. Indo American Journal of Pharm Research. 3(6): Habbu, P.V., K.M. Mahadevan, P.V. Kulkarni, C. Daulatsingh, V.P. Veerapur, and R.A. Shastry Adaptogenic and In Vitro Antioxidant Activity of Flavonoids and other Fraction of Argyreia speciosa (Burm.f) Boj. In Acute and Chronic Stress Paradigms in Rodents. Indian Journal of Experimental Biology, 48: Ji Bak, M., M. Jun and W.S. Jeong Antioxidant and Hepatoprotective Effects of the Red Ginseng Essential Oil in H 2 O 2 -Treated HepG2 Cells and CCl4-Treated Mice. Int. J. Mol. Sci. ISSN : Kenjale, R. D., R. K. Shah, and S. S. Sathaye Anti-stress and Antioxidant Effect of Root of Chlorophytum borivilianum. Indian Journal of Experimental Biology, 45: Lawson, O. S., A. Oyewumi, F. O. Ologunagba and A. O. Ojomo Evaluation of the Parameters Affecting The Solvent Extraction of Soybean Oil. ARPN Journal of Engineering and Applied Sciences. 5(10): Mehta, S.K., B.J. Prakash and N. Nayeem Comparative Evaluation of Adaptogenic and Antioxidant Activities of Traditionally Used Indian Drugs. Asian Journal of Plant Science and Research. 2(4): Mishra T, M. Khullar, and A. Bhatia Anticancer Potential of Aqueous Ethanol Seed Extract of Ziziphus mauritiana against Cancer Cell Lines and Ehrlich Ascites Carcinoma.Evidence- BasedComplementary and Alternative Medicine. doi: /2011/ Panossian, A. and G. Wikman ReviewEffects of Adaptogens on the Central Nervous System and themolecular Mechanisms Associated with TheirStress-Protective Activity. Pharmaceuticals.3: Perumal, S., R.Mahmud, S.P. Piaru, L.W. Cai and S. Ramanathan Potential Antiradical Activity and Cytotoxycity Assesment of Ziziphusmauritiana andsyzygium polyanthum. Int.J.Pharmacol. 8(6): Rahman, S Antioxidant, Analgesic, Cytotoxic and Anthidiarrheal Activities of Ethanolic Zizyphus mauritiana Bark Extract. Orient Pharm Exp Med, 12: Riley Psychoneuriendrocrinology on immunocompethence and neoplasia. Science. 212: Samirana, Oka Isolasi dan Identifikasi Senyawa Penangkap Radikal 2,2-Difenil-1-Pikrihidrazil dari 6

16 Uji Aktivitas Adaptogenik Ekstrak Etanol Kulit Batang Bidara (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) dengan Metode Swimming Endurance Test pada Mencit Galur Balb/C (Samirana, P. O., Putra, P. A. S., Leliqia, N. P. E.) Kulit Batang Bidara (Zizyphus mauritiana Auct non Lamk.) (Tesis). Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada. Siddharth, P., P. Kailash, V. Niraj, M. Karuna, P. Vimal, P. Bharadia and K. Pundarikakshudu Antiulcer Activity of Methanolic Extract of Ziziphus mauritiana Stem Bark. IJPPR. 2(3): Talmale, S. A., A. M. Bhujade and M. B. Patil Phytochemical Analysis of Stem Bark and Root Bark of Ziziphus mauritiana. IJISET. 1(4): Vinod, S. P. and H. Shivakumar A Current Status of Adaptogens: Natural Remedy to Stress. Asian Pacific Journal of Tropical Disease. Page

17 UJI AKTIVITAS ADAPTOGENIK EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG BIDARA (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) DENGAN METODE SWIMMING ENDURANCE TEST PADA MENCIT GALUR BALB/C by Putu Oka Samirana FILE T IME SUBMIT T ED SUBMISSION ID JI_AKT IVIT AS_ADAPT OGENIK_EKST RAK_ET ANOL_KULIT_BAT ANG_BI DARA.DOCX (52.59K) 05-AUG :09PM WORD COUNT 2776 CHARACT ER COUNT 19004

18

19

20

21

22

23

24

25 UJI AKTIVITAS ADAPTOGENIK EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG BIDARA (Ziziphus mauritiana Auct. non Lamk.) DENGAN METODE SWIMMING ENDURANCE TEST PADA MENCIT GALUR BALB/C ORIGINALITY REPORT 18% SIMILARIT Y INDEX 15% INT ERNET SOURCES 10% PUBLICAT IONS 11% ST UDENT PAPERS PRIMARY SOURCES Submitted to Universitas Muhammadiyah 1 3% Surakarta St udent Paper isharonline.org 2 1% 3 1% 4 1% 5 Kim, Eun-A, A Reum Han, Jiyoung Choi, Jee- Yin Ahn, Soo Young Choi, and Sung-Woo 1% Cho. "Anti-inflammatory mechanisms of N- adamantyl-4-methylthiazol-2-amine in lipopolysaccharide-stimulated BV-2 microglial cells", International Immunopharmacology, Publicat ion bahan-alam.fa.itb.ac.id 6 1%

26 7 Sulaiman, Sarina, A.R. Abdul Aziz, and Mohamed Kheireddine Aroua. "Optimization 1% and modeling of extraction of solid coconut waste oil", Journal of Food Engineering, Publicat ion online-journal.unja.ac.id 8 1% Submitted to Coventry University 9 1% St udent Paper 10 Sun, Yi-Xue, Yan-Long Cong, Yang Liu, Bo Jin, Lu Si, Ai-Bing Wang, Huan Cai, Guan-Yu 1% Che, Bo Tang, Chun-Feng Wang, Zi-Yi Li, and Xue-Ming Zhang. "Schisandrin A and B affect subventricular zone neurogenesis in mouse", European Journal of Pharmacology, Publicat ion Submitted to Amity University 11 1% St udent Paper % repository.ugm.ac.id 13 1% 14 Baccarin, Thaisa; Ferreira, Rene A.; Gazoni, Vanessa F.; Yunes, Rosendo A.; Malheiros, 1% Ângela and Lucinda-Silva, Ruth M..

27 "Influence of Extraction Parameters on Hydroalcohol Extracts of the Stem Bark of Rapanea ferruginea Mez Using Myrsinoic Acid B as Marker", Tropical Journal of Pharmaceutical Research, Publicat ion apjtcm.com 15 1% 16 Liu, Y.L.. "The effect of compound nutrients on stress-induced changes in serum IL-2, IL-6 1% and TNF-@a levels in rats", Cytokine, Publicat ion 17 Apurba Sarker Apu; Faruq Hossain; Farhana Rizwan; Shakhawat Hossan Bhuyan; Maima 1% Matin and A.T.M Jamaluddin. "Study of pharmacological activities of methanol extract of Jatropha gossypifolia fruits", Journal of Basic & Clinical Pharmacy, Publicat ion Submitted to University of Westminster 18 1% St udent Paper 19 Talmale, Suhas, Arti Bhujade, and Mandakini Patil. "Anti-allergic and anti-inflammatory <1% properties of Zizyphus mauritiana root bark", Food & Function, Publicat ion ijprba.com 20 <1%

28 21 <1% 22 <1% gaharugreengold.com 23 <1% elibrary.ub.ac.id 24 <1% mot.farmasi.ugm.ac.id 25 <1% ojs.polinpdg.ac.id 26 <1% EXCLUDE QUOT ES OFF EXCLUDE MAT CHES OFF EXCLUDE BIBLIOGRAPHY OFF