UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS

Transkripsi

1 UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Oleh: ANISA WIDYARATNA K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2016

2 UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: ANISA WIDYARATNA K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2016 i

3 ii

4

5 KATA PENGANTAR Assalamu alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-nya penulis mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.), CIPLUKAN (Physalis angulata L.), DAN KENIKIR (Cosmos caudatus Kunth.) TERHADAP SEL T47D Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada: 1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt yang terhormat, selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, pembimbing akademik dan dosen penguji I. 2. Ibu Maryati, Ph.D., Apt selaku pembimbing utama dan penguji III. 3. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku dosen penguji II 4. Bapak/ibu dosen serta seluruh staf Fakultas Farmasi yang telah membantu jalannya penelitian ini. 5. Ibu dan adikku tercinta serta seluruh keluarga besar yang senantiasa membimbing, mendoakan dan memberikan semangat, dukungan yang tak terhingga selama proses penulisan skripsi ini 6. Sahabat-sahabat tercinta, terima kasih untuk semuanya, atas semangat, dukungan, doa dan kekompakannya. 7. Semua pihak yang telah membantu penulis dalam penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Wasalamu alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh Surakarta, 29 November 2016 Penulis iv

6 DAFTAR ISI Halaman PENGESAHAN SKRIPSI... ii DEKLARASI... iii KATA PENGANTAR... iv DAFTAR ISI... v DAFTAR GAMBAR... vii DAFTAR TABEL... viii DAFTAR LAMPIRAN... ix DAFTAR SINGKATAN... x ABSTRAK... xi ABSTRACT... xii BAB I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang... 1 B. Rumusan Masalah... 2 C. Tujuan Penelitian... 2 D. Tinjauan Pustaka Tanaman beluntas (Pluchea indica l.)... 3 a. Klasifikasi... 3 b. Kandungan Kimia... 3 c. Aktivitas Farmakologi Tanaman Ciplukan (Physalis angulata L.)... 4 a. Klasifikasi... 4 b. Kandungan Kimia... 4 c. Aktivitas Farmakologi Tanaman Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.)... 5 a. Klasifikasi... 5 b. Kandungan Kimia... 5 c. Aktivitas Farmakologi Kanker... 6 E. Landasan Teori... 7 F. Hipotesis... 8 BAB II METODE PENELITIAN... 9 A. Kategori Penelitian... 9 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasionalnya... 9 C. Alat dan Bahan Alat penelitian Bahan penelitian v

7 D. Tempat Penelitian E. Rencana Penelitian Penyiapan Bahan Ekstraksi Uji Kandungan Senyawa dengan KLT Uji Sitotoksik a. Pemanenan Sel b. Pembuatan larutan uji c. Uji Sitotoksik F. Analisis Data BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan B. Saran DAFTAR PUSTAKA vi

8 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Struktur senyawa dari ekstrak beluntas Gambar 2. Struktur senyawa dari ekstrak ciplukan... 4 Gambar 3. Struktur senyawa dari ekstrak kenikir... 5 Gambar 4. Uji Sitotoksik Gambar 5. Reaksi reduksi garam MTT membentuk formazan Gambar 6. Morfologi sel T47D Gambar 7. Grafik hubungan konsentrasi versus %sel hidup Gambar 8. Profil KLT ekstrak etanol daun beluntas Gambar 9. Profil KLT ekstrak etanol daun ciplukan Gambar 10. Profil KLT ekstrak etanol daun kenikir vii

9 DAFTAR TABEL Tabel 1. Regimen kemoterapi kanker payudara dengan HER2 (-)... 7 Tabel 2. Definisi Operasional... 9 Tabel 3. Hasil ekstraksi tanaman Tabel 4. Seri konsentrasi sampel uji dan % sel hidup setelah perlakuan Tabel 5. Persamaan regresi linier masing-masing sampel dan IC Tabel 6. Deteksi golongan senyawa dengan berbagai pereaksi semprot viii

10 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Gambar Tanaman Beluntas, Ciplukan dan Kenikir Lampiran 2. Perhitungan sel dan larutan seri konsentrasi ekstrak Lampiran 3. Perhitungan hasil IC ix

11 DAFTAR SINGKATAN DMSO : Dimethyl Sulfoxide ELISA : Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay ER : Estrogen Receptor FBS : Foetal Bovine Serum IC 50 : Inhibitory Concentration 50 KLT : Kromatografi Lapis Tipis LAF : Laminar Air Flow MK : Media Kultur MTT :3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide PBS : Phospate Buffered Saline PR : Progesteron Receptor Rf : retardation factor RPMI : Roswell Park Memorial Institute SDS : Sodium Dodecyl Sulfate UV : Ultraviolet x

12 ABSTRAK Kanker payudara merupakan salah satu kanker penyebab kematian terbesar pada wanita. Saat ini penemuan agen-agen sitotoksik dari bahan alam terus dikembangkan. Beluntas (Pluchea indica L.), Ciplukan (Physalis angulata L.) dan Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) merupakan tanaman-tanaman yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai agen sitotoksik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir terhadap sel kanker payudara T47D serta mengetahui golongan senyawa yang terkandung didalamnya. Ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir diuji efek sitotoksik nya pada sel T47D dengan menggunakan metode MTT. Metode MTT didasarkan pada pembentukan kristal formazan karena reduksi dari garam MTT oleh enzim dehidrogenase suksinat. Proses nya terjadi di jalur respirasi mitokondria sel hidup. Dari hasil penelitian diperoleh IC 50 pada ekstrak etanolik daun ciplukan yaitu 176,6 µg/ml dan pada ekstrak etanolik daun beluntas dan kenikir masingmasing memiliki IC 50 >200 µg/ml. Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan ekstrak etanolik daun beluntas, ciplukan dan kenikir memiliki efek sitotoksik yang lemah terhadap sel T47D. Hasil uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun beluntas, ciplukan dan kenikir mengandung tanin dan flavonoid. Kata kunci: Pluchea indica L., Physalis angulata L., Cosmos caudatus Kunth., sitotoksik, IC 50, T47D xi

13 ABSTRACT Breast cancer is one of leading cause of cancer death in women around the world. One of the strategy to prevent breast cancer based on cytotoxic agent by natural products are now being developed. Beluntas (Pluchea indica L.), Ciplukan (Physalis angulata L.) and Kenikir (Cosmos caudatus Kunth.) are the potential plants for being developed as cytotoxic agent. This study aimed to know cytotoxic effect of beluntas, ciplukan and kenikir leaves ethanolic extract on T47D breast cancer cell and to know classes of the compound that contain in extracts. The extracts are tested its cytotoxic effect on T47D cancer cells using MTT assay.mtt assay is based on the formation of formazan crystal because the reduction of salt MTT by enzyme succinate dehydrogenase. Its occurs in respiration pathway of mitochondrial living cell. This research shows that ciplukan leaves ethanolic extract had cytotoxic effect on T47D cancer cell with IC ,6 µg/ml and beluntas and kenikir leaves ethanolic extract had cytotoxic effect on T47D cancer cell with IC 50 >200 µg/ml. From this research can be concluded that beluntas, ciplukan and kenikir leaves ethanolic extract had less potential effect on T47D cells. The result shows that beluntas leaves ethanolic extract, ciplukan leaves ethanolic extract and kenikir leaves ethanolic extract contain of tanin and flavonoid. Keywords: Pluchea indica L., Physalis angulata L., Cosmos caudatus Kunth., cytotoxic, IC 50, T47D xii