Lampiran 2. Gambar 1. Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina Linn.) merah Gambar 2. Serbuk simplisia bunga pacar air (Impatiens balsaminae Flos) merah
Lampiran 3 1 2 3 4 5 6 6 3 3 Gambar 4: Mikroskop serbuk simplisia bunga pacar air merah (Impatiens balsaminae Flos) pada perbesaran 10 x 40 1. Serbuk sari 2. Rambut penutup 3. Kristal kalsium oksalat bentuk rapida 4. Berkas pengangkut 5. Sel epidermis 6. Papila
Lampiran 4 Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia bunga pacar air merah(impatiens balsaminae flos) No. Pemeriksaan Karakteristik Hasil simplisia 1 Penetapan kadar air 9,31% 2 Penetapan kadar sari yang 19,62% Larut dalam air 3 Penetapan kadar sari yang 12,80% Larut etenol 4 Penetapan kadar abu total 1,14% 5 Penetapan kadar abu yang Dalam asam 0,25% Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia serbuk simplisia bunga pacar air merah (Impatiens balsaminae Flos) No. Golongan senyawa yangdiperiksa Hasil 1 Alkaloida _ 2 Flavonoida + 3 Saponin _ 4 Tanin _ 5 Glikosida + 6 Glikosida Antrakuinon _ 7 Steroida/Triterpenoida _ Keterangan: + = memberikan hasil - = tidak memberikan hasil
Lampiran 4 (Lanjutan). Penetapan Kadar Air Volume II Volume I Kadar Air = x 100% Berat sampel Sampel I Volume I = 1,7 ml Volume II = 2,1 ml Berat sampel = 5,008 g Kadar air 2,1 1,7 = x 100% 5,008 = 7,98% Sampel II Volume I = 2,1 ml Volume II = 2,6 ml Berat sampel = 5,010 g Kadar air 2,6 2,1 = x 100% 5,010 = 9,98% Sampel III Volume I = 2,6 ml Volume II = 3,1 ml Berat sampel = 5,009 g 3,1 2,6 Kadar air = x 100% 5,009 = 9,98 % Kadar air rata rata = 7,98% + 9,98% + 9,98% 3 = 9,31%
Lampiran 4 (Lanjutan). Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air Berat sari 100 Kadar sari larut dalam air = x x 100% Berat sampel 20 Sampel I Berat sampel = 5,012 g Berat sari = 0,115g 0,213g 100 Kadar sari larut air = x x 100% 5,012 g 20 = 21,24% Sampel II Berat sampel Berat sari = 5,015 g = 0,211 g 0,211g 100 Kadar sari larut air = x x 100% 5,000 g 20 = 21,03% Sampel III Berat sampel Berat sari = 5,013 g = 0,192 g 0,192 g 100 Kadar sari larut air = x x 100% 5,013 g 20 = 19,15% Kadar rata rata = 21,24% + 21,03% + 1915% 3 = 20,47%
Lampiran 4 (Lanjutan). Kadar Sari Larut dalam Etanol Berat sari 100 Kadar sari larut dalam etanol = x x 100% Berat sampel 20 Sampel I Berat sampel Berat sari = 5,011 g = 0,163 g 0,163 g 100 Kadar sari larut etanol = x x 100% 5,011 g 20 = 16, 25% Sampel II Berat sampel = 5,008g Berat sari = 0,120 g 0,12 g 100 Kadar sari larut etanol = x x 100% 5,008 g 20 = 11,98% Sampel III Berat sampel Berat sari = 5,007 g = 0,102 g 0,102 g 100 Kadar sari larut etanol = x x 100% 5,007 g 20 = 10,18% Kadar rata rata = 16,25% + 11,98% + 10,18% 3 = 12,80 %
Lampiran 4 (Lanjutan). Penetapan Kadar Abu Total Berat abu Kadar abu = x 100% Berat sampel Sampel I Berat sampel = 2,000 g Berat abu = 0,0233 g 0,0233 Kadar abu = x 100% 2,000 = 1,17% Sampel II Berat sampel = 2,00 g Berat abu = 0,0239 g 0,0239 Kadar abu = x 100% 2,000 = 1,20% Sampel III Berat sampel = 2,000 g Berat abu = 0,0215 g 0,0215 Kadar abu = x 100% 2,000 = 1,07% Kadar abu total rata rata = 1,17% + 1,20% + 1,07% 3 = 1,14%
Lampiran 4 (Lanjutan). Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam Berat abu Kadar abu yang tidak larut dalam asam = x 100% Berat sampel Sampel I Berat sampel = 2,000 g Berat abu = 0,0058 g 0,0058 Kadar abu = x 100% 2,000 = 0,29 % Sampel II Berat sampel = 2,000 g Berat abu = 0,0051 g 0,0051 Kadar abu = x 100% 2,000 = 0,26 % Sampel III Berat sampel = 2,000 g Berat abu = 0,0020 g 0,0020 Kadar abu = x 100% 2,000 = 0,20% Kadar abu total rata rata = 0,29% + 0,26% + 0,20% 3 = 0,25%
Lampiran 5 Bunga Pacar Air (Impatiens balsamina Linn) merah Disortasi basah Dicuci, ditiriskan Berat Basah Ditimbang Dikeringkan pada lemari pengering Disortasi kering Ditimbang Simplisia Diserbuk Ditimbang Serbuk simplisia Skrining fitokimia - Alkaloid - Tripterpenoida/steroida - Flavonoida - Glikosida - Glikosida antrakinon - Saponin - Tanin Karakteristik Simplisia - Makroskopik - MikroskopikS - Kadar air - Kadar sari yg larut dalam air - Kadar sari yang larut dalam etanol - Kadar abu total - Kadar abu yang tidak larut dlm asam Ekstraksi asam Gambar 5. Bagan Metode Penelitian
Lampiran 6 100 g serbuk Simplisia (Impatiens balsaminae Flos) diekstraksi dengan cairan penyari etanol (96%) dan ditambahkan HCl pekat 1% Filtrat Ampas Diuapkan dengan penguap vakum putar pada suhu 50 0 C dipekatkan Ekstrak Kental etanol Gambar 6. Bagan ekstraksi senyawa antosianin
Lampiran 7 Ekstrak Etanol Kental Di kkt dengan pengembang Forestal BAA Asam Asetat 30 % Kromatogram BAA Kromatogram As.Asetat 30 % Di kkt Preparatif Kromatogram BAA Pita I digunting direndam disaring diuapkan Pita II digunting disaring direndam diuapkan Isolat FI (merah Rf= 0,6) Isolat FII (kuning kehijauan Rf=0,1) I. Isolat tidak murni di KKt dua arah di KKt preparatif Pita I digunting direndam disaring diuapkan Isolat PI (merah Rf= 0,6) di KKt dua arah Penentuan Struktur Dengan spektrofotometri uv pereaksi geser Pita II digunting direndam disaring diuapkan Isolat PII (merahjingga Rf=0,2) di KKt dua arah Penentuan Struktur dengan spektrofotometri uv pereaksi geser Gambar 7. Bagan isolasi senyawa antosianin dari ekstrak etanol
Lampiran 8 bp kk m m mj m kk kk kk 1 2 3 tp Gambar 8. Kromatogram ekstrak etanol secara KKt. Fase gerak1. pengembang BAA; 2. pengembang forestal; 3. pengembang asam asetat 30%, fase diam : kertas Whatman no 1; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi; m = merah, kk = kuning kehijauan, mj= merah jingga.
Lampiran 9 bp FI (m) FII (kk) tp Gambar 9. Kromatogram KKt preparatif dari ekstrak etanol Fase gerak: pengembang asam asetat 30%, fase diam : kertas Whatman no 3; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; FI= pita 1, m= merah, FII= pita 2, kk=kuning kehijauan.
Lampiran 10 bp m m m m m 1a 1b 1c 1d 1e tp Gambar 10. KKt isolat FI Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase diam : kertas Whatman no 1; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi; Ia, Ib, Ic, Id, Ie. (m) = merah.
Lampiran 11 bp kk kk kk kk kk 1a 1b 1c 1d 1e tp Gambar 11. KKt isolat FII Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase diam : kertas Whatman no 1; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi; IIa, IIb, IIc, IId, IIe. (kk) = kuning kehijauan.
Lampiran 12 bp PI (m) PII (mj) tp Gambar 12. Kromatogram KKt preparatif isolat ekstrak etanol Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase diam : kertas Whatman no 3; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; PI= pita I, m= merah; PII= pita II, mj= merah jingga.
Lampiran 13 bp m m 1a 1b tp Gambar 13. KKt isolat PI Keterangan: Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase diam : kertas Whatman no 1; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = Berfluoresensi; Ia, Ib. (m) = merah.
Lampiran 14 bp mj mj 1a 1b tp Gambar 14. KKt isolat PII Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase diam : kertas Whatman no 3; tp= tempat penotolan; bp= batas pengembang; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi; IIa, IIb. (mj) = merah jingga.
Lampiran 15 bp 2 bp 1 m tp Gambar 15. Kromatografi KKt dua arah dari isolat PI Keterangan: Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase gerak 2= BAA; fase diam : kertas Whatman no 3; tp= tempat penotolan; bp 1 = batas pengembang 1; bp 2 = batas pengembang 2; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi mj= merah jingga.
Lampiran 16 bp 2 bp 1 mj tp Gambar 16. Kromatografi KKt dua arah dari isolat PII Fase gerak: pengembang asam asetat 30% ; fase gerak 2= BAA; fase diam : kertas Whatman no 3; tp= tempat penotolan; bp 1 = batas pengembang 1; bp 2 = batas pengembang 2; penampak bercak AlCl 3 5% dalam etanol; = berfluoresensi mj= merah jingga
Lampiran 17 A b s o r b a n s i Gambar 17. Spektrum uv isolat PI dalam metanol : Larutan Isolat dalam Metanol Panjang Gelombang (nm) Panjang gelombang Absorbansi maksimum spektrum uv isolat PI dalam metanol λ ( nm ) Abs 506 0.0679 266 0.5573
Lampiran 18 A b s o r b a n s i Gambar 18. Spektrum uv isolat PI dalam penambahan NaOH dibandingkan dengan spektrum uv Isolat PI dalam Metanol : Isolat PI dalam metanol : Isolat PI dalam metanol setelah penambahan NaOH Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan NaOH Panjang Gelombang (nm) Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dalam metanol λ ( nm ) Abs λ ( nm ) Abs - - 506 0.0679 268 0.5029 266 0.5573
Lampiran 19 A b s o r b a n s i Panjang Gelombang (nm) Gambar 19. Spektrum uv isolat PI dalam penambahan NaOH dibandingkan dengan spektrum uv yang diukur setelah 5 menit : Isolat PI dalam metanol setelah penambahan NaOH : Isolat PI dalam metanol setelah penambahan NaOH didiamkan selama 5 menit Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PIdengan penambahan NaOH 5 menit Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan NaOH λ ( nm ) Abs λ ( nm ) Abs 503 0.0337 - - 267 0.5189 268 0.5029
Lampiran 20 A b s o r b a n s i Panjang Gelombang (nm) Gambar 20. Spektrum isolat PI dengan penambahan AlCl 3 dibandingkan dengan spektrum isolat dalam metanol : Isolat PI dalam metanol dengan penambahan AlCl 3 : Isolat PI dalam metanol Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan AlCl 3 Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dalam metanol λ ( nm ) Abs λ ( nm ) Abs 510 0.0754 506 0.0929 266 0.6019 266 0.6688
Lampiran 21 A b s o r b a n s i Gambar 21. Spektrum uv isolat PI dengan penambahan AlCl 3 /HCl dibandingkan dengan Spektrum uv isolat PI dengan penambahan AlCl 3 : Isolat PI dengan penambahan AlCl 3 : Isolat PI dalam AlCl 3 setelah penambahan AlCl 3 /HCl Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan AlCl 3 /HCl Panjang Gelombang (nm) Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan AlCl 3 λ ( nm ) Abs λ ( nm ) Abs 504 0.0681 510 0.0754 265 0.4738 266 0.6019
Lampiran 22 A b s o r b a n s i Gambar 22. Spektrum uv isolat PI dengan penambahan natrium asetat dibandingkan dengan Spektrum uv Isolat PI dalam metanol : Isolat PI dalam Metanol : Isolat PI dalam Natrium Asetat Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dengan penambahan Natrium Asetat Panjang Gelombang (nm) Panjang gelombang Absorbsi maksimum spektrum uv isolat PI dalam metanol λ ( nm ) Abs λ ( nm ) Abs 506 0.0929 510 0.0465 266 0.6688 266 0.3169